共生菌群酵素及其应用、用其制成的食品的制作方法
【专利摘要】本发明涉及食品酵素技术领域，公开了一种共生菌群酵素，含有对幽门螺旋杆菌具有预防、抗衡、抑制功效的共生菌群。共生菌群包含旨在增强菌群功效、增大菌群数量的主力菌群和辅助菌群。其中，主力菌群包括嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、干酪乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌、唾液乳杆菌、短乳杆菌、乳酸链球菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌。本发明提供的共生菌群酵素，饮用后，其中所含强大丰富的共生菌群可以自然存在于人体的消化系统，在生态环境中，取得生存空间的优势，达到消除幽门螺旋杆菌的功效。
【专利说明】
共生菌群酵素及其应用、用其制成的食品
技术领域
[0001] 本发明涉及食品酵素技术领域，特别涉及一种能够消除、消减幽门螺旋杆菌生长 的共生菌群酵素及其应用、用其制成的食品。
【背景技术】
[0002] 幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，HP)是一种螺旋形、革兰阴性的微需氧菌。 幽门螺旋杆菌的传染力很强，可通过手、不洁食物、粪便、唾液、共餐、生食等途径传染。幽门 螺旋杆菌在大气中不能生长繁殖，人类是幽门螺旋杆菌唯一的自然宿主，主要存在于口腔 和胃肠道内，借助菌体一侧的鞭毛，提供动力穿过黏液层，在粘稠的环境下具备极强的运动 能力，而强动力正是幽门螺旋杆菌致病的重要原因。幽门螺旋杆菌的粘附素使其牢牢地与 胃部上皮细胞连接在一起，避免随食物一起被胃排空。
[0003] 幽门螺旋杆菌分泌诸多有害毒素和酶，所引起的致病症状是反酸、烧心、胃炎、胃 溃疡、胃癌和口臭。目前检测人体受到幽门螺旋杆菌感染的方法是采取碳13呼气试验:检测 必须在空腹状态或者餐后两小时后进行，患者近一月内未服用抗生素、铋制剂、质子栗抑制 剂等幽门螺旋杆菌敏感药物，否则会造成检测结果假阴性。
[0004] 现有技术中，三联疗法即"胶体铋剂或者质子栗抑制剂（Proton pump inhibitors，PPIs)+两种抗生素"疗法是杀灭幽门螺旋杆菌最有效的治疗方法，但此疗法在 体内用药并不理想，治愈率较低，且容易产生耐药性，目前还不能达到完全根治的效果。现 有的药物治疗方法虽然能够有效抑制幽门螺旋杆菌的感染，但也存在人体很容易产生耐药 性的问题，导致无法根治，终生感染。
[0005]而传统制备的酵素，益生菌群含量稀少，甚至完全不存在，其酶含量亦是少之又 少，对人体功效甚为微小，对幽门螺旋杆菌更无功效可言。针对此种情况，制备一种含有强 大丰富共生菌群、产生丰富多样酶群的共生菌群酵素，是势在必行的事实需求。
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题是提供一种消除、消减幽门螺旋杆菌的共生菌群酵素， 用于预防和/或治疗人体内由幽门螺旋杆菌引起的疾病，本发明还提供了一种共生菌群酵 素食品。
[0007] 为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：
[0008] -种共生菌群酵素，含有对幽门螺旋杆菌具有预防、抗衡、抑制功效的共生菌群。 共生菌群包含可以增强菌种功效、增大菌群数量的主力菌群。主力菌群包括嗜酸乳杆菌、保 加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、干酪乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏 乳杆菌、唾液乳杆菌、短乳杆菌、乳酸链球菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌、 婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌。
[0009] 作为进一步的技术方案，共生菌群还包括辅助主力菌群生长的辅助菌群，辅助菌 群包括纹膜醋杆菌、木葡糖醋酸杆菌、啤酒片球菌、酿酒酵母、嗜热链球菌、米曲霉菌、安卡 红曲霉和乳酸乳球菌中的一种或几种。
[0010]作为进一步的技术方案，主力菌群和辅助菌群的质量百分比为主力菌群70%~ 60%、辅助菌群30%~40%。
[0011] 作为进一步的技术方案，含有食品添加剂和辅料，食品添加剂为木糖醇和麦芽糖 醇，辅料为山楂汁和青梅汁。
[0012] 本发明制备的共生菌群酵素用于预防和/或治疗人体内由幽门螺旋杆菌引起的疾 病，疾病包括胃溃疡、十二指肠溃疡、胃炎、胃癌和消化不良。
[0013] 本发明的一种共生菌群酵素食品，由共生菌群酵素液制备而成，用于预防和/或治 疗人体内由幽门螺旋杆菌引起的疾病。
[0014] 作为进一步的技术方案，包括酵素液产品、酵素膏产品和酵素粉产品。
[0015] 作为进一步的技术方案，酵素液产品的制备方法是将共生菌群酵素液再次进行灌 装前过滤，灌装后包装，即得到酵素液产品；
[0016] 酵素膏产品的制备方法是将共生菌群酵素液真空低温浓缩，得到酵素膏产品；
[0017] 酵素粉产品的制备方法是将共生菌群酵素液经真空冷冻干燥，对干燥后的固体进 行粉碎并搅拌，得到酵素粉，可直接包装或低温储藏再包装，即为酵素粉产品。
[0018] 采用上述技术方案的共生菌群酵素，饮用后，其中所含强大丰富的共生菌群可以 自然存在于人体的胃部，在生态环境中，取得生存空间的优势，达到消除幽门螺旋杆菌的功 效。进一步说明，这种共生菌群的酵素含有各种各样共生菌群所产生的丰富多彩的酶群，达 到消除、消灭幽门螺旋杆菌的功效。
[0019] 本发明提供的共生菌群酵素具有肠道黏着率高、定植能力强的特性，能够高效降 胆固醇，促进细胞分裂，并可起到调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、排除毒素、预防龋齿、提 高机体免疫力及抗癌等重要的生理保健功能；具有良好的耐酸及胆汁抗性，可降低血浆胆 固醇，增强宿主对幽门螺旋杆菌和微生物病原体的非特异性抵抗力，加快清除肠道内病原 体，治疗肠道菌群紊乱和增强肠道透性，从而防止食物过敏和急性腹泻;还可使抗低密度氧 化脂抗体和淋巴细胞增加，使粒细胞的噬菌作用明显增强，对宿主进行免疫调节，防止肿瘤 的产生;此外，由于能够在人体肠道内稳定存活并具有众多的医疗保健功能，可刺激免疫细 胞分泌抗过敏相关细胞激素浓度，用于抗过敏药物。
[0020] 本发明的共生菌群酵素，具有如下有益效果：
[0021] (1)在饮用共生菌群酵素后，其中所含共生益生菌群可以在消化系统取得生存空 间的优势，增强共生益生菌群在消化系统的力量，以占取幽门螺旋杆菌的生存空间，达到预 防和治疗幽门螺旋杆菌的功效。
[0022] (2)共生益生菌群在消化系统取得强大的定植，占取幽门螺旋杆菌的生存空间，将 幽门螺旋杆菌从人的消化系统排出，甚至在消化系统直接消灭。
[0023] (3)高含量的共生益生菌群以及其所分泌的高质量的共生益生菌群分泌物，可以 消除、消灭幽门螺旋杆菌的存在，并且进一步修复幽门螺旋杆菌在消化系统所造成的危害 和破坏，如胃炎、胃溃疡和胃癌。
[0024] (4)饮用共生菌群酵素可以增强、增大对幽门螺旋杆菌的免疫功能，以达到预防幽 门螺旋杆菌的功效。
[0025] 总之，由主力菌群和辅助菌群组成的共生益生菌群具有强大和多方面的功效，可 以对抗外界有害杂菌的侵入，可以消灭外界有害杂菌的生存，使其无法存在于发酵的过程 中，可以保护共生菌群的酵素产品。
[0026] 共生菌群酵素可以制成不同的产品形式，固态或液态均可;尤以含有活性共生菌 群及其所分泌酶群的粉状制剂最为方便使用。
【附图说明】
[0027] 图1为本发明的共生菌群酵素的食品加工工艺流程图；
【具体实施方式】
[0028] 下面结合附图对本发明的【具体实施方式】作进一步说明。在此需要说明的是，对于 这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述 的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
[0029] 本发明人发现一种共生菌群酵素，含有的共生菌群能够对幽门螺旋杆菌具有抗 衡、抑制的功效，如表1所示，共生菌群包括具有增强、增大菌群数量的主力菌群;主力菌群 包括嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、干酪乳杆 菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌、唾液乳杆菌、短乳杆菌、乳酸链球菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧 杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌。
[0030] 如表2所示，共生菌群还包括辅助主力菌群生长的辅助菌群，所述辅助菌群包括纹 膜醋杆菌、木葡糖醋酸杆菌、啤酒片球菌、酿酒酵母、嗜热链球菌、米曲霉菌、安卡红曲霉和 乳酸乳球菌中的一种或几种。
[0031] 表 1
[0032]
[0033]
[0034]
[0035]
[0036] 上述活的、有生机的微生物能够迅速定植，可快速执行其功能：
[0037] 1、共生菌群产生抑制幽门螺旋杆菌的化学物质
[0038] (1)产生有机酸:共生菌群及其代谢产物能够抑制或杀灭幽门螺旋杆菌。幽门螺旋 杆菌菌体表面有尿素酶(urase)，通过分解宿主体内的尿素转变成氨来中和胃酸，保护菌体 免受伤害，益生菌通过产生有机酸(例如乳酸、乙酸、过氧化氢），显著地抑制尿素酶的活性， 来杀灭幽门螺旋杆菌。
[0039] (2)产生抑菌素(bacteriocins):共生菌群产生的抑菌素可以杀灭幽门螺旋杆菌。 例如乳酸链球菌产生的乳酸链球菌肽(nisin)和枯草芽孢杆菌产生的amicoumacin A细菌 素，对所有的幽门螺旋杆菌菌株均具有杀灭作用。类似机制抗幽门螺旋杆菌的益生菌还有 嗜酸乳杆菌、约氏乳杆菌、双歧杆菌等。
[0040] 2、抑制幽门螺旋杆菌的定植
[0041 ]共生菌群能分泌蛋白作为介质，与胃肠道上皮细胞受体连接，从而定植于动物体 内，阻断病原菌与胃肠道上皮细胞的粘附。不同的益生菌对于胃上皮细胞的粘附能力的强 弱，与其抑制幽门螺旋杆菌定植的效果有关，唾液乳杆菌在体外粘附胃上皮细胞的能力强 于嗜酸乳杆菌等菌株，体内实验也同样表明其抑制幽门螺旋杆菌的能力优于其他的菌株。 例如罗伊氏乳杆菌通过与幽门螺旋杆菌竞争上皮细胞表面中相同的糖脂连接蛋白 (Glycolipids connection protein)，使得幽门螺旋杆菌失去黏附位点而被排出体外。
[0042] 3、抑制幽门螺旋杆菌感染后的炎症并提高细胞的免疫反应
[0043] 鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌除了可以抑制幽门螺旋杆菌的定植、减轻胃黏膜炎症， 平衡胃黏膜血流的分布、胃酸的分泌，还可以逆转幽门螺旋杆菌感染引起的胃黏膜中环氧 合酶(cyclooxygenase，C0X_2)的升高，抑制"细胞凋亡Bax蛋白"的表达，从而抑制胃上皮细 胞的凋亡。乳酸杆菌不仅可以抑制幽门螺旋杆菌与人胃上皮细胞的黏附，还可以抑制幽门 螺旋杆菌感染所致IL-8(interl eUkin 8)的分泌，降低胃黏膜的炎症反应。约氏乳杆菌显著 减少幽门螺旋杆菌诱导的GAS胃癌细胞IL-8的分泌，抑制胃上皮细胞中巨噬细胞炎性蛋白-2 (macrophage inf lammatoryprote in_2，MIP-2)的表达，同时伴有组织中中性粒细胞和淋巴 细胞减少，以及血清中抗幽门螺旋杆菌免疫球蛋白（IgG)下降，这是乳酸杆菌抗幽门螺旋杆 菌感染的重要机制。短乳杆菌(Lactobaci 1 lus brevis)可以减少胃内幽门螺旋杆菌数量， 其机制在于该菌种中精氨酸脱亚氨基酶(arginine desiminase)能催化精氨酸的分解代 谢，降低胃内鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase)的活性，从而抑制多胺的合成代 谢，降低多胺水平，最终减少幽门螺旋杆菌数量。
[0044] 4、共生菌群分泌酶抑制剂抑制幽门螺旋杆菌
[0045]共生菌群所分泌的酶抑制剂，是指特异性作用于Hp酶的某些基团，降低Hp酶的活 性，甚至使Hp酶完全丧失活性的物质。共生菌群制备的共生菌群酵素还含有大量的花青素 ANC和原花青素 PAC，能够抑制a-葡萄糖苷酶(a-glucosidase)和二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase-IV)的活性，其基本机制均是花青素和原花青素可以与这两种酶结合，是这两种 酶的抑制剂。
[0046] 实施例1
[0047]共生菌群酵素的制备
[0048]步骤1，发酵水果原料前处理
[0049] 原料质量百分比为菠萝70%、木瓜10%、苹果5%、葡萄5%、奇异果5%、杏鲍菇 3%、猴头菇2%，经过清洗，低温杀菌，然后打浆为果浆，以备发酵之用。
[0050] 步骤2,将共生菌群经过三代的驯化，驯化条件设置为PH值3-4、温度25 °C，培养于 改良式共生菌群培养基中。共生菌群的组成比例为主力菌群65%、辅助菌群35%。
[0051 ]主力菌群所包括的菌种见上述表1。
[0052]辅助菌群所包括的菌种见上述表2。
[0053]步骤3,将经过三代驯化的共生菌群接种于准备发酵的果浆中。控制接种后的共生 菌群浓度为l〇6CFU/ml，按照接种比例6 %左右植菌。
[0054]步骤4,设置发酵条件为PH值3-4、温度25°C ;发酵罐中设气曝管使用打气、"气曝" 两者轮流施行，通常有氧，厌氧偶尔施之，以"气曝"间隔时间为30分钟，以利厌氧菌群共生 繁殖生长，取得全部共生菌群平衡发展，达到完全发酵的过程。
[0055] 定时测量PH，定时监控温度和糖度的变化，控制发酵时间为20-30天，当共生菌群 所分泌的酶群达到最高峰(最高含量)时，发酵完全，得到初酵素液。
[0056] 步骤5,将所得到的初发酵液进行粗过滤和细过滤，在过滤后得到的液体中加入食 品添加剂和辅料，食品添加剂和辅料的质量百分比为木糖醇25%、麦芽糖醇65%、山楂汁 8%、青梅汁2%，搅拌均匀后静置，得到初酵素液;过滤后的固体为酵素渣料。
[0057]步骤6,将所得到的初酵素液温度维持在25°C，发酵熟成时间为1-2个月；得到共生 菌群酵素样品1。
[0058] 实施例2
[0059]共生菌群酵素的制备
[0060] 步骤1，原料质量百分比为菠萝65%、木瓜15%、苹果5%、葡萄5%、奇异果5%、杏 鲍菇3%、猴头菇2%，经过清洗，低温杀菌，然后打浆为果浆，以备发酵之用。
[0061]步骤2,将共生菌群经过三代的驯化，驯化条件设置为PH值3-4、温度30°C，培养于 改良式共生菌群培养基中。共生菌群的组成质量百分比为主力菌群70%，辅助菌群30%。 [0062]主力菌群所包括的菌种见上述表1。
[0063] 辅助菌群所包括的菌种见下述表3。
[0064] 表 3
[0065]
[0066]步骤3,将经过三代驯化的共生菌群接种于准备发酵的果浆中。控制接种后的共生 菌群浓度为l〇8CFU/ml，按照接种比例6 %左右植菌。
[0067]步骤4,设置发酵条件为PH值3-4,温度30°C ;其它内容同实施例1。
[0068]步骤5,内容同实施例1。
[0069]步骤6,将所得到的初酵素液温度维持在30°C，发酵熟成时间为1-2个月；得到共生 菌群酵素样品2。
[0070] 实施例3
[0071] 共生菌群酵素的制备
[0072] 步骤1，将质量百分比为菠萝60%，木瓜20%，苹果5%，葡萄5%，奇异果5%，杏鲍 菇3%，猴头菇2%作为原料，经过清洗，低温杀菌，然后打浆为果浆，以备发酵之用。
[0073]步骤2,将共生菌群经过三代的驯化，驯化条件设置为PH值3-4,温度28°C，培养于 改良式共生菌群培养基中。共生菌群的组成质量百分比为主力菌群60%、辅助菌群40%。 [0074]主力菌群的菌种包括见上述表1。
[0075]辅助菌群的菌种包括见下述表4。
[0076] 表 4
[0077]
[0078]
[0079]步骤3,将经过三代驯化的共生菌群接种于准备发酵的果浆中。控制接种后的共生 菌群浓度为l〇7CFU/ml，按照接种比例6 %左右植菌。
[0080] 步骤4,设置发酵条件为PH值3-4、温度28°C ;其它内容同实施例1。
[0081] 步骤5,内容同实施例1。
[0082]步骤6,将所得到的初酵素液温度维持在30°C，发酵熟成时间为1-2个月；得到共生 菌群酵素样品3。
[0083] 实施例4
[0084]共生菌群酵素的食品的制备
[0085] 图1出示了共生菌群酵素的食品加工工艺流程图，上述实施例得到的共生菌群酵 素液，可根据需要加工成不同形态的产品；尤以含有活性共生菌群及其所分泌酶群的粉状 制剂最为方便使用。
[0086] 如图1所示，将共生菌群酵素液进行灌装前过滤，灌装后包装，即得到酵素液产品； 将共生菌群酵素液真空低温浓缩，得到酵素膏产品;将共生菌群酵素液经真空冷冻干燥，将 干燥后的固体进行粉碎并搅拌，做成酵素粉，可直接包装或低温储藏再包装，即为酵素粉产 品。
[0087] 上述实施例得到的酵素渣料经低温干燥，将干燥后的固体进行粉碎并搅拌，做成 酵素粉，可直接包装或低温储藏再包装，即为酵素粉产品。
[0088] 实施例5
[0089]共生菌群酵素的临床功效
[0090] 共计12名受幽门螺旋杆菌感染的患者完成了临床研究;在后续检查期间进行尿素 13C呼气试验的D0B值的评估。
[0091] 临床试验过程:首先，在患者未曾服用共生菌群酵素的条件下，对其进行尿素 13C 呼气试验，检测幽门螺旋杆菌;记录治疗前的D0B值检测结果;检测的结果D0B值均大于4.0， 得出患者的幽门螺旋杆菌检测结果均呈阳性。
[0092]所有患者在每餐前1小时，服用上述实施例1制备出的共生菌群酵素样品100ml，服 用半小时后饮水至少200ml。按照此方式服用，每日3次;每2周进行尿素 13C呼气试验，记录 D0B值的变化，当检测到D0B值降至4以下，停止服用共生菌群酵素样品，记录中止后1个月的 D0B 值。
[0093] 本试验中采用的检测试剂为尿素 13C，纯度为99%。
[0094]得到的临床试验数据见下述表5。
[0095] 表 5
[0096]
[0097] 由以上数据表明，本次临床试验的幽门螺旋杆菌感染的患者D0B值较高，在服用本 发明的共生菌群酵素样品后检测到的DOB值呈明显降低趋势，表明本发明的共生菌群酵素 在服用后能够对幽门螺旋杆菌发生抑制作用；在接受治疗的2个月后，测得的DOB值〈4.0， 13C呼气试验幽门螺旋杆菌的检测结果呈阴性，并且，其在治疗中止后仍然得以维持(见表 6)。本发明的共生菌群酵素可用于抗幽门螺旋杆菌的治疗，治疗过程无刺激，药效高，治疗 周期短。
[0098] 表 6
[0099]
[0100]以上结合附图对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施 方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式 进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种共生菌群酵素，其特征在于，含有对幽门螺旋杆菌具有预防、抗衡、抑制功效的 共生菌群，所述共生菌群包含旨在增强菌种功效、增大菌群数量的主力菌群； 所述主力菌群包括嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏 乳杆菌、干酪乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌、唾液乳杆菌、短乳杆菌、乳酸链球菌、枯草芽 孢杆菌、两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌。2. 根据权利要求1所述的共生菌群酵素，其特征在于，所述共生菌群还包含辅助主力菌 群生长的辅助菌群，所述辅助菌群包括纹膜醋杆菌、木葡糖醋酸杆菌、啤酒片球菌、酿酒酵 母、嗜热链球菌、米曲霉菌、安卡红曲霉和乳酸乳球菌中的一种或几种。3. 根据权利要求2所述的共生菌群酵素，其特征在于，所述主力菌群和所述辅助菌群的 质量百分比为主力菌群70%~60%、辅助菌群30%~40%。4. 根据权利要求1所述的共生菌群酵素，其特征在于，还含有食品添加剂和辅料，所述 食品添加剂为木糖醇和麦芽糖醇，所述辅料为山楂汁和青梅汁。5. 根据权利要求1至4中任一项所述的共生菌群酵素用于预防和/或治疗人体内由幽门 螺旋杆菌引起的疾病，所述疾病包括胃溃疡、十二指肠溃疡、胃炎、胃癌和消化不良。6. -种用权利要求1至4中任一项所述的共生菌群酵素制成的共生菌群酵素食品，其特 征在于，由共生菌群酵素液制备而成，用于预防和/或治疗人体内由幽门螺旋杆菌引起的疾 病。7. 根据权利要求6所述的共生菌群酵素食品，其特征在于，所述食品为酵素液产品、酵 素膏产品和酵素粉产品。8. 根据权利要求7所述的共生菌群酵素食品，其特征在于， 所述酵素液产品的制备方法是将所述共生菌群酵素液再次进行灌装前过滤，灌装后包 装，即得到所述酵素液产品； 所述酵素膏产品的制备方法是将所述共生菌群酵素液真空低温浓缩，得到所述酵素膏 产品； 所述酵素粉产品的制备方法是将所述共生菌群酵素液经真空冷冻干燥，干燥后的固体 粉碎并搅拌，得到酵素粉，可直接包装或低温储藏再包装，得到所述酵素粉产品。
【文档编号】A61K36/06GK105995972SQ201610321514
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年5月13日
【发明人】汪健平, 许安邦
【申请人】晶叶（青岛）生物科技有限公司