一种固氮、解磷、解钾、生根复合菌制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物工程微生物发酵技术领域，尤其设及一种固氮、解磯、解钟、生根 复合菌制剂及其制备技术。
【背景技术】
[0002] 近年来，由于偏重施氮、磯肥，使得±壤中的营养供应不再平衡，抑制了其他元素 的吸收，导致作物抗病能力下降，病害虫害逐年加重，因此，不得不加大用药剂量和不断更 新农药品种来对付日益严重的病虫害。随着粮食单产的不断提高，氮、磯肥的用量也在不断 增加，由此造成的恶性循环的农业问题日益突出。因此，改变传统施肥观念，打造一个健康、 绿色、高效的生态农业迫在眉睫。
[0003] 由于作物生长发育需要多种营养元素，单一菌种、单一功能的微生物肥料已经不 能满足现代农业发展的需求，现代微生物肥料不能仅由一种单一的菌种构成，而是趋向于 复合微生物肥料。只有将多种微生物有机的组合在一起，才能化解±壤板结现象，修复和调 理±壤，改进农产品质量，均衡供应作物生长所需的速效氮、磯、钟及多种微量元素，强化± 壤微生物体系，持久的发挥作用，且具有显著地增产效果，并能提高作物的抗逆性，提高化 学肥料利用率，减少江河污染，减少病虫害发生。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的第一个技术问题是针对现有技术存在的不足，提供一种生物、 环保、同时兼具固氮、解磯、解钟、生根功能的复合菌制剂，从而消除上述【背景技术】中缺陷。
[0005] 本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种生物、环保、同时兼具固氮、解磯、 解钟、生根功能的复合菌制剂的制备方法，其制备得到的复合菌制剂可增强植株抗逆性，提 高作物品质，节约能源，减少化肥、农药的使用，降低污染，从而消除上述【背景技术】中缺陷。
[0006] 为解决上述第一个技术问题，本发明的技术方案是；
[0007] 一种固氮、解磯、解钟、生根复合菌制剂，主要由W下重量份数的原料混合制备而 成：
[000引 掠色固氣菌 5~20份， E大芽抱杆菌 10-30份， 胶质芽抱杆菌 10-30份， 圆褐固氮菌 5 ~ 15份， 根内球囊霉 10-15份， 摩西球囊霉 10-25份。
[0009] 为解决上述第二个技术问题，本发明的技术方案是：
[0010] 一种固氮、解磯、解钟、生根复合菌制剂的制备方法，包括W下步骤：
[0011] 分别将栋色固氮菌、巨大芽抱杆菌、胶质芽抱杆菌、圆褐固氮菌、根内球囊霉和摩 西球囊霉的菌种进行高密度培养，首先接种至装有体积比为15~30%的培养基的摇瓶 中活化培养，将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到的各种 单菌脱水干燥，制备成休眠体微生物干粉，然后按照栋色固氮菌5~20份，巨大芽抱杆菌 10~30份，胶质芽抱杆菌10~30份，圆褐固氮菌5~15份，根内球囊霉10~15份和摩 西球囊霉10~25份的重量比，混合得到所述固氮、解磯、解钟、生根复合菌制剂。
[0012] 作为一种优选的技术方案，所述栋色固氮菌的休眠体微生物干粉的制备包括W下 步骤：
[0013] 将纯化培养的斜面培养基上的栋色固氮菌菌种接种至装有体积比为15~30%的 活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为甘露醇10~30g/L、磯酸二氨钟0. 1~Ig/ U磯酸氨二钟0. 1~2g/L、硫酸儀0. 1~Ig/L、碳酸巧2~lOg/L和酵母膏0. 1~Ig/l，在 培养温度为26~30°C，摇瓶转速120~16化pm培养20~30h。
[0014] 将活化培养好的栋色固氮菌菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的发 酵罐内，体积接种量为1~3%，所述发酵培养基的配方为葡萄糖5~30g/L、磯酸二氨钟 0. 1~Ig/L、磯酸氨二钟0. 1~2g/L、硫酸儀0. 1~Ig/L、碳酸巧2~lOg/L和酵母膏0. 1~ Ig/L，在培养温度为28~30°C，发酵罐揽拌转速180~22化pm培养32~42h，至发酵罐 中栋色固氮菌含量>1〇 8个/ml,然后将发酵得到的栋色固氮菌单菌经冷冻干燥制备成休眠 体微生物干粉。
[0015] 作为一种优选的技术方案，所述巨大芽抱杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括W 下步骤：
[0016] 将纯化培养的斜面培养基上的巨大芽抱杆菌菌种接种至装有体积比为15~30% 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白腺8~12g/L、牛肉膏1~5g/L和氯 化钢3~7g/l，在培养温度为36~40°C，摇瓶转速180~22化pm培养20~32h。
[0017] 将活化培养好的巨大芽抱杆菌菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基 的发酵罐内，体积接种量为1~3%，所述发酵培养基的配方为豆饼粉20~26g/L、玉米粉 12~20g/L、磯酸氨二钟0. 05~0. 15g/L、磯酸二氨钟0. 05~0. 15g/L和氯化巧2~6g/ 以在培养温度为36~40°C，发酵罐揽拌转速200~22化pm培养20~32h，至发酵罐中巨 大芽抱杆菌含量> 1〇9个/ml，然后将发酵得到的巨大芽抱杆菌单菌经沸腾干燥制备成休眠 体微生物干粉。
[0018] 作为一种优选的技术方案，所述胶质芽抱杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括W 下步骤：
[0019] 将纯化培养的斜面培养基上的胶质芽抱杆菌菌种接种至装有体积比为15~30% 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖10~30g/L、磯酸氨二钟0. 1~ 2g/L、硫酸儀0. 1~Ig/L、碳酸巧0. 5~5g/L和酵母膏0. 1~Ig/L在培养温度为28~ 32°C，摇瓶转速140~160巧m培养20~30h。
[0020] 将活化培养好的胶质芽抱杆菌菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的 发酵罐内，体积接种量为1~3 %，所述发酵培养基的配方为玉米粉5~30g/L、磯酸二氨钟 0. 1~Ig/L、磯酸氨二钟0. 1~2g/L、硫酸儀0. 1~Ig/L、硫酸铺0. 1~Ig/L、碳酸巧2~ lOg/L和酵母膏0. 1~Ig/l，在培养温度为28~32°C，发酵罐揽拌转速180~22化pm培 养40~50h，发酵罐中胶质芽抱杆菌含量> 1〇8个/ml,然后将发酵得到的胶质芽抱杆菌单 菌经沸腾干燥制备成休眠体微生物干粉。
[0021] 作为一种优选的技术方案，所述圆褐固氮菌的休眠体微生物干粉的制备包括W下 步骤：
[0022] 将纯化培养的斜面培养基上的栋色固氮菌菌种接种至装有体积比为15~30%的 活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为甘露醇10~30g/L、磯酸二氨钟0. 1~Ig/ U磯酸氨二钟0. 1~2g/L、硫酸儀0. 1~Ig/L、碳酸巧2~lOg/L和酵母膏0. 1~Ig/l，在 培养温度为26~30°C，摇瓶转速120~16化pm培养20~30h。
[0023] 将活化培养好的圆褐固氮菌菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的发 酵罐内，体积接种量为1~3%，所述发酵培养基的配方为葡萄糖5~30g/L、甘露醇5~ 15g/L、磯酸二氨钟0. 1~Ig/L、磯酸氨二钟0. 1~2g/L、硫酸儀0. 1~Ig/L、碳酸巧2~ lOg/L和酵母膏0. 1~Ig/l，在培养温度为28~30°C，发酵罐揽拌转速180~22化pm培 养32~42h，至发酵罐中圆褐固氮菌含量> 108个/ml,然后将发酵得到的圆褐固氮菌单菌 经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
[0024] 作为一种优选的技术方案，所述根内球囊霉的休眠体微生物干粉的制备包括W下 步骤：
[0025] 将灭菌的沙培基质装至培养盆的2/3至3/4处，然后将根内球囊霉菌种均匀平铺 在所述沙培基质上一薄层，再覆盖灭菌的沙培基质1~2cm，诱水至所述沙培基质诱透，播 种高梁种子，再次覆盖0. 4~0. 9cm灭菌的沙培基质，然后移至温室培养3~6个月，基质 中根内球囊霉含量> 1〇7个/g，培养结束，将高梁根部W上去除。然后将盆中培养物倒在温 度（25度）和湿度（30% )稳定的房间内进行惊干，即可得到根内球囊霉休眠体干粉。
[0026] 作为一种优选的技术方案，所述摩西球囊霉的休眠体微生物干粉的制备包括W下 步骤：
[0027] 将灭菌的沙培基质装至培养盆的2/3至3/4处，然后将摩西球囊霉菌种均匀平铺 在所述沙培基质上一薄层，再覆盖灭菌的沙培基质1~2cm，诱水至所述沙培基质诱透，播 种高梁种子，再次覆盖0. 4~0. 9cm灭菌的沙培基质，然后移至温室培养3~6个月，