专利名称：用多菌种混合发酵生产土壤修复菌剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及微生物液体深层发酵技术，具体的说是采用多菌种混 合发酵生产土壤修复型菌剂及制备方法。
技术背景我国是一个农业大国，长期的石化农业造成了土壤板结、农药、 化肥污染，特别是土壤中生物肥力下降明显，要想恢复地力最好的方 法是向土壤中增施有机质，特别是增施土壤中有益菌，尤其是功能性 菌群，如固氮、解磷、解钾菌等。液体菌剂具有菌夜活性高、易于施 用等特点，是改良土壤、提高土壤生物肥力最有效的改良剂之一。但 以往的液体菌剂多是单菌的复合，复合后的菌种比例不易控制。发明内容本发明的目的是通过选用土壤中的功能性菌，进行混合发酵，使 功能菌在混合发酵中更稳定的发挥其功能，并在混合发酵中生产大量 的磷酸酶、蛋白酶、多肽氨基等类物质，促进了肥料的利用率，同时 促进了植物根的生长，使其吸收更多的养分，由于根部发育良好，生 长的植物通过根反馈给土壤大量的养料，又促进了土壤微生物的繁 殖，这种良性循环，促进了土壤改良，达到了修复土壤的目的。本发明所采用的技术方案是用多菌体混合液发酵生产土壤修复 菌剂，选用固氮菌、解磷菌、硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、 青霉菌、乳酸菌和光合菌为原菌种，将原菌种分组混合后加水制成 原菌液，再将原菌液按4%的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10%的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，所述的各原菌种分组混合与水的加入比例是第一组固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，固氮菌、解磷 菌和硅酸盐细菌与水的加入比例是固氮菌10-15%、解磷菌10-15 %、硅酸盐细菌10-15%、余量为水；第二组生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，生防菌、 酵母菌、木霉菌和青霉菌与水的加入比例是生防菌20-30%、酵母菌10-15%、木霉菌10-15%、青霉菌10-15%、余量为水；第三组乳酸菌与水混合，乳酸菌与水的加入比例是乳酸菌 10-15%、余量为水；第四组光合菌与水混合，光合菌与水的加入比例是光合菌 10-15%、余量为水。本发明，所述种子罐的培养基为红糖5~8%、玉米蛋白2-5。乂、 磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.15%、轻质碳酸钙0.6%，余量为水，并 将初始PH值调至7.0。本发明，所述生产罐的培养基为蜂蜜8-12%、玉米蛋白2~5%、 磷酸二氢钾0,2%、氯化钠0.15%、轻质碳酸钙0.6%,余量为水，并 将初始PH値调至7.0。本发明，用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂的制备方法是(1) 、将上述所述的第一组，从斜面接入三角瓶中，温度控制 37°C，振荡培养24小时，制成原菌液；(2) 、将上述所述的第二组，在摇床上培养48-72小时，培养温度控制在31-33。C，转速180r/min，好氧发酵，通气比1: 0.8，好 氧发酵时间16小时，制成原菌液；(3) 、将上述所述的第三组，接入克氏瓶中，在37。C的恒温中 培养24小时，制成原菌液；(4) 、将上述所述的第四组，接入克氏瓶，在60—80瓦的白炽 灯下培养3~5天，制成原菌液；(5) 、将上述(1一4)制成的原菌夜混合，按总量的4%的接种 量，接入种子罐与所述种子罐的培养基混合，进行厌氧培养48 60 小时，制成种子液；(6) 、将上述(5)所述的种子液，按10%的比例接入生产罐， 与所述生产罐的培养基混合发酵，温度控制在31-33i:，转速 180r/min，厌氧培养48 60小时，当PH值降至5.0时，即达到发 酵终点，制成土壤修复菌剂。本发明，所述的各种原菌种均从中国普通微生物菌种保藏管理 中心(CGMCC)或农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)引进， 确保了各菌种的存活和质量。本发明的微生物土壤修复菌剂在我国的部分地区进行了试 验，使用效果良好，列举如下试用结果试用实例1: 2007年一2008年，试用于河南省平顶山市叶县邓李乡徐庄村，农作物为小麦；面积2亩；试验效果在减少化肥用量30%的情况下仍可增产16.4%。试用实例2: 2008年，试用于河南省平顶山市潘阳镇西溃村，农作物为玉米；面积10亩；试验效果在减少化肥用量30 %的情况下仍可增产9.1%。试用实例3: 2007年一2008年，试用于河南省平顶山市湛南区曹镇，农作物为水稻；面积15亩；试验效果在减少化肥用量30%的情况下仍可增产20%。本发明的有益效果是选用土壤中的功能性菌混合发酵，使功能菌在混合发酵中更稳定的发挥其功能，并在混合发酵中生产大量的磷 酸酶、蛋白酶、多肽氨基等类物质，促迸了肥料的利用率，同时促进 了植物根的生长，使其吸收更多的养分，由于根部发育良好，生长的 植物通过根反馈给七壤大量的养料，又促进了十.壤微生物的繁殖，这 种良性循环，促进了土壤改良，达到了修复土壤的作用，生产工艺简单，成本低，便于推广应用。
具体实施方式
用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，选用固氮菌、解磷菌、 硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、青霉菌、乳酸菌和光合菌为原菌种，将原菌种分组混合后加水制成原菌液，再将原菌液按4% 的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10%的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，所述的各原菌种分组混合与水的加入比例是 第一组固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌与水的加入比例是固氮菌10-15%、解磷菌10-15%、硅酸盐细菌10-15%、余量为水；第二组生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水的加入比例是生防菌20-30%、酵母 菌10-15%、木霉菌10-15%、青霉菌10-15%、余量为水；第三组乳酸菌与水混合，乳酸菌与水的加入比例是乳酸菌 10-15%、余量为水；第四组光合菌与水混合，光合菌与水的加入比例是光合菌 10-15%、余量为水。本发明，所述种子罐的培养基为红糖5~8%、玉米蛋白2~5%、 磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.15%、轻质碳酸钙0.6%，余量为水，并 将初始PH值调至7.0。本发明，所述生产罐的培养基为蜂蜜8~12%、玉米蛋白2~5%、 磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.15%、轻质碳酸钙0.6%，余量为水，并 将初始PH値调至7.0。本发明，用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂的制备方法是(1) 、将上述所述的第一组，从斜面接入三角瓶中，温度控制 37°C，振荡培养24小时，制成原菌液；(2) 、将上述所述的第二组，在摇床上培养48-72小时，培养温 度控制在31-33。C，转速180r/min，好氧发酵，通气比1: 0.8，好 氧发酵时间16小时，制成原菌液；(3) 、将上述所述的第三组，接入克氏瓶中，在37。C的恒温中 培养24小时，制成原菌液；(4) 、将上述所述的第四组，接入克氏瓶，在60—80瓦的白炽 灯下培养3~5天，制成原菌液；(5) 、将上述(1一4)制成的原菌夜混合，按总量的4%的接种 量，接入种子罐与所述种子罐的培养基混合，进行厌氧培养48 60 小时，制成种子液；(6) 、将上述(5)所述的种子液，按10%的比例接入生产罐， 与所述生产罐的培养基混合发酵，温度控制在31-33"C，转速 180r/min，厌氧培养48 60小时，当PH值降至5.0时，即达到发 酵终点，制成土壤修复菌剂。本发明的微生物土壤修复菌剂在我国的部分地区进行了试 验，使用效果良好，列举如下试用结果试用实例1: 2007年一2008年，试用于河南省平顶山市叶县邓李乡徐庄村，农作物为小麦；面积.* 2亩；试验效果在减少化肥用量30%的情况下仍可增产16.4%。试用实例2:2008年，试用于河南省平顶山市潘阳镇西潘村， 农作物为玉米；面积10亩；试验效果在减少化肥用量30 %的情况下仍可增产9.1%。试用实例3: 2007年一2008年，试用于河南省平顶山市湛南区曹镇，农作物为水稻；面积15亩；试验效果在减少化肥用量30%的情况下仍可增产20% 。
权利要求
1、用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，其特征是选用固氮菌、解磷菌、硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、青霉菌、乳酸菌和光合菌为原菌种，将原菌种分组混合后加水制成原菌液，再将原菌液按4％的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10％的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，所述的各原菌种分组混合与水的加入比例是第一组固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌与水的加入比例是固氮菌10～15％、解磷菌10～15％、硅酸盐细菌10～15％、余量为水；第二组生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水的加入比例是生防菌20～30％、酵母菌10～15％、木霉菌10～15％、青霉菌10～15％、余量为水；第三组乳酸菌与水混合，乳酸菌与水的加入比例是乳酸菌10～15％、余量为水；第四组光合菌与水混合，光合菌与水的加入比例是光合菌10～15％、余量为水。
2、 如权利要求1所述的用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，其特征是所述种子罐的培养基为红糖5~8%、玉米蛋白2~5%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.15%、轻质碳酸钙0.6%，余量为水，并将 初始PH值调至7.0。
3、 如权利要求1所述的用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂， 其特征是所述生产罐的培养基为蜂蜜8~12%、玉米蛋白2~5%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.15%、轻质碳酸钙0.6%，余量为水，并 将初始PH値调至7.0。
4、如权利要求1所述的用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂 的制备方法，其特征是(1) 、将权利要求1所述的第一组，从斜面接入三角瓶中，温度 控制37'C，振荡培养24小时，制成原菌液；(2) 、将权利要求1所述的第二组，在摇床上培养48-72小时， 培养温度控制在31~33°C，转速180r/min，好氧发酵，通气比1: 0.8， 好氧发酵时间16小时，制成原菌液；(3) 、将权利要求1所述的第三组，接入克氏瓶中，在37。C的 恒温中培养24小时，制成原菌液；(4) 、将权利要求1所述的第四组，接入克氏瓶，在60—80瓦 的白炽灯下培养3-5天，制成原菌液；(5) 、将上述(1_4)制成的原菌夜混合，按总量的4%的接种 量，接入种子罐与权利要求2所述种子罐的培养基混合，进行厌氧培 养48 60小时，制成种子液；(6) 、将上述(5)所述的种子液，按10%的比例接入生产罐， 与权利要求3所述生产罐的培养基混合发酵，温度控制在31-33°C， 转速l80r/min，厌氧培养48 60小时，当PH值降至5.0时，即达 到发酵终点，制成土壤修复菌剂。
全文摘要
用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂及制备方法，选用固氮菌、解磷菌、硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、青霉菌、乳酸菌和光合菌的原菌种加水混合制成原菌液，将原菌液按4％的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10％的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，方法将固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，接入三角瓶中，温度控制37℃，振荡培养24小时；将生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，在摇床上培养48～72小时，好氧发酵16小时；将乳酸菌与水混合，接入克氏瓶中，在37℃的恒温中培养24小时；将光合菌与水混合，接入克氏瓶，在60-80瓦的白炽灯下培养3～5天。优点是能促进土壤微生物的繁殖，实行良性循环，改良土壤，生产工艺简单，成本低。
文档编号C12N1/20GK101402933SQ20081023064
公开日2009年4月8日 申请日期2008年10月30日 优先权日2008年10月30日
发明者张培举, 汪松林 申请人:河南省龙腾高科实业有限公司