专利名称：用作雌激素药物的n－取代的苯甲酰基吲哚类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用作雌激素药物的新N-取代的苯甲酰基吲哚化合物，以及药物组合物、使用这些化合物的治疗方法和制备它们的方法。
背景技术：
雌激素替代治疗已建立用作妇女中防止骨质疏松的治疗选择[C.Christiansen，R.Lindsay，Estrogen，Bone Loss andPreservation，Osteoporosis International，1，15-21(1990)]。该治疗的缺点(downside)是当雌激素单独给药时，即没有孕激素的相对作用，会发生子宫的增生作用，使患者具有子宫内膜癌的风险。尽管不太清楚，但激素替代治疗与乳腺肿瘤形成的发病率的增加有关。非甾族抗雌激素药物，例如他莫昔芬已用于治疗乳腺癌。该药物还已知保持骨质量，用作骨贫乏雌激素激动剂，然而，它还是子宫组织的激动剂。更近年的抗雌激素药物，Lilly’s雷洛昔芬，是非甾族抗雌激素药物，它显示进一步的组织选择性。在具有节约骨骼的理想性质的同时，在动物模型中已证明它比他莫昔芬以较少的程度刺激子宫生长。此外，近年的临床数据证实无子宫内膜增生。近年已出现对雌激素类似物的组织选择作用的综述[G.L.Evans和R.T.Turner，Tissue Selective Actions of Estrogen Analogs，Bone，17，no.4，1815-1905(1995)]。
吲哚类作为雌激素拮抗药的应用已由Von Angerer，ChemicalAbstracts，99卷，No.7(1983)，Abstract No.53886u报导。还参见J.Med.Chem.1990，33，2635-2640；J.Med.Chem.1987，30，131-136。还参见Ger.Offen.，DE3821148A1 891228和WO96/03375。这些现有技术的化合物与本发明的化合物具有某些结构类似的地方，但功能不同。对于含有碱性胺的化合物，不存在苯基以稳定侧链，用于这些化合物的报导的数据显示它们比本发明化合物与雌激素受体具有较弱的结合，含有碱性侧链的化合物在大鼠子宫中显示某些向子宫作用。
WOA95 17383(Kar Bio AB)显示带有长直链的吲哚抗雌激素药，另一相关专利WOA93 10741描述了具有类似描述的加入其它侧链的5-羟基吲哚。
US5496844(Inai等)教导具有潜在抗雌激素活性的取代的N-吲哚化合物，它用于治疗雌激素依赖的疾病，例如不排卵不育症、前列腺肥大、骨质疏松、乳腺癌、子宫内膜癌和黑素瘤。
Jones等人在其文章Antiestrogens.2.1Structure-ActivityStudies in a Series of 3-Aroy1-2-arylbenzo[b]thiopheneDerivatives Leading to [6-Hydroxy-2-(4-hydroxy phenyl)benzo[b]thien-3-yl][4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenyl]metha none Hydrochloride(LY156758)，a Remarkably EffectiveEstrogen Antagonist with Only Minimal Intrinsic Estrogenicity，J.Med.Chem.1984，27，1057-1066描述一系列用作非甾族抗雌激素剂的3-芳酰基-2-芳基苯并[b]噻吩衍生物。
本发明描述的化合物是混合的雌激素激动剂/拮抗药，在治疗骨质疏松、子宫内膜异位、前列腺肥大、乳腺癌和子宫内膜癌方面具有潜在用途。
发明描述本发明提供式(I)的N-取代的吲哚类化合物 其中
R1、R2和R3分别选自H、卤素、C1-C12烷氧基(直链或支链或环状)、-CF3、-NO2、氰基、C1-C6烷基(直链或支链)、三氟甲基、-OH或它们的C1-C12酯(直链或支链)，或C1-C6卤化醚，优选C1-C3卤化醚，包括三氟甲基醚和三氯甲基醚；R4和R5分别选自H或苄基，苄基选择性地被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3、或卤素取代；X是H、C1-C6烷基或CF3；Z是O或S；n是2或3；Y选自a)下式的基团 其中R’是相同或不同的C1-C6低级烷基，或b)选自如下的基团 或其可药用的盐。
如果是酯，则R1、R2和R3的实例是C2-C12烷基酯，例如-OC(＝O)(C1-C6烷基)酯。
烷基的实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基和正丁基。
烷氧基的实例是甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基和正丁氧基。
R1和R2的实例是H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3、和NO2。R3和R4的实例是H，X的实例是甲基。
本发明的优选组是其中R1、R2和R3分别选自H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3和-NO2；和R4、R5、X、Z、n和Y是如上定义的式I化合物或其可药用的盐。
本发明化合物的另一优选组是其中Z是O和R1、R2、R3和R4是H的化合物或其可药用的盐。优选R5是H。在这些一般和亚一般组中最优选的化合物是其中Y是哌啶环的化合物。
本发明包括由与无机或有机酸的附加反应形成的可接受盐形式。无机酸，例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸、硝酸以及有机酸，例如乙酸、丙酸、柠檬酸、马来酸、苹果酸、酒石酸、邻苯二甲酸、琥珀酸、甲磺酸、甲苯磺酸、萘磺酸、樟脑磺酸、苯磺酸是有用的。本发明化合物的优选盐是盐酸、氢溴酸和乙酸盐。
本发明的化合物是部分雌激素激动剂，显示高的雌激素受体亲和力，然而，不同于许多雌激素，许多这些化合物不导致一般与天然或合成雌激素有关的子宫湿重量的增加。这些化合物在子宫中是抗雌激素的，能够完全抵抗在子宫组织中的雌激素激动剂的营养作用。此外，化合物可在骨组织中用作雌激素激动剂。由于这些化合物的组织选择性性质，它们用于治疗或预防哺乳动物由雌激素缺乏或雌激素过量引起或相关的疾病或综合症。
本发明通过降低胆固醇和防止骨损失具有类似于雌激素激动剂的能力。这些化合物用于治疗许多由雌激素过量或缺乏引起的疾病，包括骨质疏松、前列腺肥大、男性秃发、卵巢癌、不育症、乳腺癌、子宫内膜癌、心血管疾病、避孕、早老性痴呆、认识衰退和其它CNS疾病以及某些癌症，包括黑素瘤、前列腺癌症、结肠癌、CNS癌等。此外，这些化合物可用于在经绝后的妇女的激素替代治疗或其中雌激素补充将是有益的其它雌激素缺乏症状中的激素替代治疗。
本发明的化合物还可用于治疗骨损失的方法，所述骨损失可由新骨组织的个别形成和老组织的吸收作用的不平衡引起，导致骨的净损失产生。该骨损耗在如下范围的个体中产生，尤其是经绝后妇女、接受子宫摘除手术的妇女、正在接受或已接受长期皮质类固醇治疗的人、生殖腺发育不全的人和患有库欣病的人。用于骨骼恢复的特殊需要还可建议在患有骨折、缺损骨结构的人体和接受与骨相关的手术和/或移植假枝的人中使用这些化合物。除了上述这些问题外，这些化合物可用于治疗骨关节炎、血钙过少、血钙过多、佩吉特氏病、骨软化、骨质缺乏、多发性骨髓瘤和具有对骨组织有害作用的癌的其它形式。治疗上述疾病的方法应理解为包括向需要该治疗的个体给药药物有效量的一种或多种本发明的化合物或其可药用的盐。本发明还包括药物组合物，它包括一种或多种本发明的化合物和/或其可药用的盐与一种或多种可药用的载体、赋形剂等。
还理解这些化合物的剂量、治疗方案和给药方式将根据所治疗的疾病和个体变化，将由所涉及的医师判断。优选本发明的一种或多种化合物的给药以低剂量开始，并增加直至获得所需的效果。
这些化合物的有效给药可以约0.1mg/天一约1000mg/天的有效剂量给出，优选给药将是以单独剂量或两个或多个分开剂量的约10mg/天-约600mg/天。该剂量可以用将本发明活性化合物以任何方式导向治疗者的血液给药，包括口服、肠胃外(包括静脉内、腹膜内和皮下注射)和经皮。用于该披露，经皮给药应理解为包括所有穿过人体表面和身体通道的内衬，包括上皮和粘膜组织的给药。该给药可用本发明的化合物或其可药用的盐以洗液、霜剂、泡沫剂、贴剂、悬浮剂、溶液和栓剂(直肠和阴道)进行。
含有本发明的活性化合物的口服制剂可包含任何常规使用的口服形式，包括片剂、胶囊、颊形式、锭剂、糖锭和口服液体、悬浮剂或溶液。胶囊可含有活性化合物与惰性填料和/或稀释剂，例如可药用的淀粉(例如玉米、马铃薯或木薯淀粉)、蔗糖、人工增甜剂、粉末纤维素，例如结晶和微晶纤维素、面粉、明胶、树胶等的混合物。有用的片剂制剂可通过常规的压制方法、湿造粒或干造粒方法制备和使用可药用的的稀释剂、粘结剂、润滑剂、崩解剂、悬浮或增溶剂，包括但不限于，硬脂酸镁、硬脂酸、滑石、月桂基硫酸钠、微晶纤维素、羧甲基纤维素钙、聚乙烯基吡咯烷酮、明胶、海藻酸、阿拉伯胶、黄原胶、柠檬酸钠、复合硅酸盐、碳酸钙、甘氨酸、糊精、蔗糖、山梨糖醇、磷酸二钙、硫酸钙、乳糖、高岭土、甘露糖醇、氯化钠、滑石、干淀粉和糖粉。本发明口服制剂可采用标准延迟或延时释放制剂以改变活性化合物的吸收。栓剂可由传统材料制备，包括可可脂，含有或不含附加的蜡以改变栓剂的熔点，和甘油。还可以使用水溶性栓剂基质，例如不同分子量的聚乙二醇类。
本发明还提供了制备式I化合物的方法，其包含如下之一a)用下式的化合物 或其活性衍生物，例如酰卤，其中n、R1、R2、Z和Y是如上定义的，酰基化下式的化合物 其中R3、R4、R5和X是如上定义的，得到式I化合物；或b)使下式的化合物 其中X、Z、R1、R2、R3、R4和R5是如上定义的，hal表示卤素，例如氯或溴，与下式的胺反应H-Y (V)其中Y是如上定义的，得到式I化合物，或c)脱苄基其中R4和/或R5是选择性地取代的苄基的式I化合物，得到其中R4和/或R5是氢的式I化合物，或e)酯化其中R1、R2或R3的至少一个是羟基的式I化合物为其酯衍生物。
用于进行上述方法a)→e)的方法是现有技术中已知的和/或在如下方案中说明。
本发明的化合物可通过现有技术中已知的方法制备，例如起始或核心吲哚可通过如下方案1的一般方法制备。
方案1 5-苄氧基-2-(4-苄氧基-苯基)-3-甲基-1H-吲哚的最初吲哚合成通过在DMF中加热合适取代的α-溴酮(b)与所需的苯胺(a)以形成吲哚(c)。本发明的(氨基乙氧基)苯甲酸侧链可通过Jones等，J.Med.Chem.，1984，27卷，No.8 1057-1066中的教导的一般方法或如方案2中所示制备，并经方案3的方法偶合到核心吲哚类化合物上。
方案2 方案3
实施例1[5-苄氧基-2-(4-苄氧基-苯基)-3-甲基-吲哚-1-基]-[4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯基]-酮(methanone)向2.42g(0.00577mol)起始吲哚(c)，(5-苄氧基-2-(4-苄氧基-苯基)-3-甲基-1H-吲哚)在60ml无水THF的深冷(-78℃)溶液中在N2下加入2.6g(0.00866mol)酰氯(h)，(4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)苯甲酰基氯，盐酸盐)，在-78℃下搅拌20分钟。向反应混合物中滴加22ml(0.0216mol)双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(在THF中的1.0M溶液)，在-78℃下搅拌30分钟。使反应混合物达到0℃4小时，随后在室温下1小时。在粗反应混合物加入100ml乙酸乙酯，用含水碳酸氢钠(2×50ml)洗涤。收集有机相，用水(2×50ml)、饱和盐水洗涤，除去、用硫酸镁干燥，过滤和在旋转蒸发器中蒸发至干。粗产物经HPLC得到1.25g黄色固体。
Mp＝48-51℃；1H NMR(DMSO)7.55-7.30(m，11H)，7.24-7.16(m，5H)，6.94-6.88(m，5H)，5.18(s，2H)，5.05(s，2H)，4.09(t，2H，J＝5.8Hz)，2.19(t，2H，J＝5.8Hz)，2.41-2.38(m，4H)，2.21(s，3H)，1.51-1.35(m，6H)；IR 3440，2900，1610cm-1；MS eI m/z 651(M+)；CHN，对C43H42N2O4·0.25H2O的计算值。
实施例2[5-羟基-2-(4-羟基-苯基)-3-甲基-吲哚-1-基]-[4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯基]-酮向0.78g(0.00120mol)[-5-苄氧基-2-(4-苄氧基-苯基)-3-甲基-吲哚-1-基]-[4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯基]-酮(如上所述)在5ml无水THF和5ml精密乙醇中的溶液中在N2下加入1.4ml(0.0120mol)环己二烯和0.39g(苄氧基起始物质质量的一半)的10％Pd/C，在室温下搅拌过夜。过滤反应混合物，在旋转蒸发器中蒸发至干。在粗产物中加入100ml乙酸乙酯，有机相用水(2×50ml)、饱和盐水洗涤，除去、用硫酸镁干燥，过滤和在旋转蒸发器中蒸发至干。粗产物经HPLC得到0.30g浅黄色固体。Mp＝127-130℃；1H NMR(DMSO)9.47(s，1H)，9.17(s，1H)，7.48(d，2H，J＝8.6Hz)，7.21(d，1H，J＝8.8Hz)，7.03(d，2H，J＝8.4Hz)，6.90-6.85(m，3H)，6.69-6.62(m，3H)，4.07(q，2H，J＝5.8Hz)，2.62(t，2H，J＝5.8Hz)，2.40-2.39(m，4H)，2.15(s，3H)，1.52-1.47(m，6H)；IR 3440，2900，1610cm-1；MS eI m/z 471(M+)；CHN，对C29H30N2O4·0.5H2O的计算值。
实施例34-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯甲酰氯盐酸盐标题化合物如Jones，Charles D.，Journal of MedicinalChemistry，1984，27卷，No.8，1057-1066页所述制备。 向酸盐酸盐1(1.0g，3.7mmol)在50ml氯仿中的溶液中在室温下加入亚硫酰氯(0.3ml，4.4mmol)在10ml氯仿中的溶液。得到的溶液在60℃下保持6小时。反应混合物冷却到室温，用己烷稀释。随后使反应混合物冷却到0℃，通过过滤、干燥分离得到的酰氯盐酸盐，2，它无需纯化用于酰基化步骤。
雌激素受体结合/竞争试验目的用于确定在雌激素受体(ER)结合中与17β-雌二醇竞争的化合物。用于雌激素作用的广泛接受的方式是经其高亲和力受体蛋白质。显示结合ER能力的化合物因此可调节与雌激素作用有关的生理过程。
方法受体制剂过表达雌激素受体的CHO细胞在150mm2碟中在DMEM+10％葡聚糖涂覆的炭，剥离的胎牛血清中生长。板用PBS洗涤两次，用10mM Tris-HCl，pH7.4，1mM EDTA洗涤1次。细胞通过刮表面收获，随后将细胞悬浮液放置在冰上。细胞用手提式机械组织粉碎机用两次10秒触发粉碎，粗制剂在12000xg离心20分钟，然后在100000xg旋转60分钟得到无核蛋白体的胞液，将胞液冻干，在-80℃下贮存。胞液的蛋白质浓度用BCA试验使用BSA作为参比标准蛋白质确定。结合试验条件竞争试验在结合＜2.0％的总输入[3H]-17β-雌二醇的96孔板(聚苯乙烯*)中进行，收集每个数据点一式三份。将100μg/100μl的受体制剂等分在每个孔中，在评价100x和500x竞争剂浓度时，在预竞争过程中加入50μl体积的2.5nM[3H]17β-雌二醇+竞争剂(或缓冲剂)的饱和剂量。为测定IC50，当评价12个浓度的竞争剂时，仅使用0.8nM[3H]17β-雌二醇。板在室温下培养2.5小时，在培养过程结束时，每个孔加入150μl冰冷却的葡聚糖涂覆的炭(5％涂覆0.05％69K葡聚糖的活性炭)，板立即以900xg在4℃下离心5分钟，取出200μl上清液用于闪烁计数，无论那一个首先发生，样品计数到2％或10分钟。
由于聚苯乙烯吸收少量[3H]17β-雌二醇，含有放射性和胞液，但没用炭处理的孔被包括在内以定量可获得的同位素。此外，含有放射性但不含胞液的孔加入炭处理以确定[3H]17β-雌二醇的不可除去的DPM。使用Corning#25880-96 96孔板，因为在这些试验中它们显示结合最少量的雌二醇。结果分析用Beckman LS7500闪烁计数器用一组猝灭标准将放射性的每分钟计数(CPM)自动转化为每分钟蜕变(DPM)以得到每个样品的H#。为计算在100或500倍竞争剂存在下雌二醇结合％，使用如下公式((DPM样品-未用炭除去的DPM)/(DPM雌二醇-未用炭除去的DPM))×100％＝雌二醇结合％为得到IC50曲线，结合％相对于[化合物]画曲线，IC50由在最高达500x竞争剂浓度下显示＞10％竞争的化合物产生。参比化合物对不同参比化合物进行评价，测定它们的IC50浓度。置换50％的[3H]17β-雌二醇所需的这些化合物的浓度是雌二醇0.08μM他莫昔芬4.50μM
雷洛昔芬0.04μM17α-二-氢马烯雌酮0.15μM试验结果为说明本发明的化合物应用性，实施例2的化合物相对于标准他莫昔芬，即(Z)-2-[4-(1，2-二苯基-1-丁烯基)-苯氧基]-N，N-二甲基乙胺，和雷洛昔芬，即[6-羟基-2-(4-羟基-苯基)-苯并[b]噻吩-3-基]-[4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯基]-酮进行试验。应理解作为标准的17β-雌二醇在受体结合试验中具有100％的结合。
化合物 受体结合试验-IC50转染试验实施例2 2.0×10-7M浓度 对照％1×10-6M01×10-6M+1nM雌二醇13他莫昔芬4.5×10-6M浓度 对照％1×10-6M01×10-6M+1nM雌二醇10雷洛昔芬4×10-8M 浓度 对照％1×10-6M01×10-6M+1nM雌二醇0
权利要求
1.下式的化合物或其可药用的盐 其中R1、R2和R3分别选自H、卤素、C1-C6烷氧基、-CF3、-NO2、氰基、C1-C6烷基(直链或支链)、三氟甲基、-OH或它们的C1-C12酯(直链或支链)或C1-C12烷基醚(直链或支链或环状)，或C1-C6卤化醚；R4和R5分别选自H或苄基，苄基选择性地被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3、或卤素取代；X是H、C1-C6烷基或CF3；Z是O或S；n是2或3；Y选自a)下式的基团 其中R’是相同或不同的C1-C6低级烷基，或b)选自如下的基团
2.权利要求1的化合物，其中R1和R2分别选自H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3和-NO2或其可药用的盐。
3.权利要求1或2的化合物，其中Z是O。
4.权利要求1-3的任何之一的化合物，其中R3和R4是H。
5.权利要求1-4的任何之一的化合物，其中R1和R2是H。
6.权利要求1-5的任何之一的化合物，其中n是2。
7.权利要求1-6的任何之一的化合物，其中Y是哌啶环或其可药用的盐。
8.权利要求1的化合物，它是[5-苄氧基-2-(4-苄氧基苯基)-3-甲基吲哚-1-基]-[4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯基]-酮。
9.权利要求1的化合物，它是[5-羟基-2-(4-羟基-苯基)-3-甲基吲哚-1-基]-[4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)苯基]-酮，或其可药用的盐。
10.在哺乳动物中治疗或预防骨损失的方法，该方法包含向需要的哺乳动物给药有效量的权利要求1的化合物或其可药用的盐。
11.在哺乳动物中治疗或预防由雌激素缺乏引起或与其相关的疾病状态或综合症的方法，该方法包含向需要的哺乳动物给药有效量的权利要求1的化合物或其可药用的盐。
12.在哺乳动物中治疗或预防心血管疾病的方法，该方法包含向需要的哺乳动物给药有效量的权利要求1的化合物或其可药用的盐。
13.制备权利要求1的式I化合物或其可药用的盐的方法，其包含如下之一a)用下式的化合物 或其活性衍生物，例如酰卤，其中n、R1、R2、Z和Y如权利要求1所定义，酰基化下式的化合物 其中R3、R4、R5和X定义如上，得到式I化合物；或b)使下式的化合物 其中X、Z、R1、R2、R3、R4和R5如权利要求1所定义，hal表示卤素，例如氯或溴，与下式的胺反应H-Y (V)其中Y如权利要求1所定义，得到式I化合物，或c)脱苄基其中R4和/或R5选择性地被取代的权利要求1定义的式I化合物，得到其中R4和/或R5是氢的式I化合物，或e)酯化其中R1、R2或R3的至少一个是羟基的权利要求1定义的式I化合物为其酯衍生物。
14.药物组合物，它含有权利要求1-9的任何之一的化合物或其可药用的盐和可药用的载体。
全文摘要
本发明提供式(A)化合物,其中R
文档编号A61P19/10GK1342144SQ00804545
公开日2002年3月27日 申请日期2000年2月22日 优先权日1999年3月4日
发明者M·C·科科, J·W·乌尔里奇, A·A·桑蒂利 申请人:美国家用产品公司