丝氨酸蛋白酶抑制剂的制作方法

专利名称：丝氨酸蛋白酶抑制剂的制作方法
背景说明发明领域一方面，本发明涉及新颖的化合物，其为组织因子(TF)/因子VIIa，因子VIIa，因子Xa，凝血酶和/或激肽释放酶抑制剂，还涉及含此类化合物的组合物。该类化合物可用来抑制这些因子并用来治疗由这些因子为介导的疾病。例如，该类化合物可以通过抑制TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶和/或激肽释放酶来预防哺乳动物的血栓形成或者治疗异常血栓形成。
背景技术：
正常止血是凝血块开始、形成和凝血块溶解过程之间复杂平衡的结果。血细胞、特定的血浆蛋白和血管表面之间的复杂相互作用维持血液的流动性，除非受伤或发生血液损失。
很多重大的疾病状态与异常的止血有关。例如，因动脉粥样硬化斑块破裂而形成的局部血栓是急性心肌梗死和不稳定绞痛的主要原因。通过溶解血栓治疗法或经皮血管成形术治疗闭塞性冠状血栓时，可能伴有损伤血管的急性溶解血栓再闭合。而且，高百分比的手术病人会在静脉血管系统，特别是在较低的末端形成血栓，这导致流到受侵袭区域的血液减少。
一直需要安全并有效的抗凝血剂，以限制或预防血栓的形成。
血液凝结对组织受伤时体液的保持至关重要，并且是宿主防御机制的重要组成部分。凝结或结块是多种酶原连续激活的过程，该过程导致凝血酶的产生和纤维蛋白原转为不能渗透的交联纤维蛋白凝块。凝血酶产生是血液凝结级联的结果，对血液凝结级联已经进行了深入的研究，并且日益具特色。例如见Lawson，J.H.，et al.(1994)J.Biol.Chem.26923357。这种级联的凝结反应包括开始、放大和增殖阶段。另外，该级联还被分为外在途径和内在途径。内在途径包括因子XII，XI和IX，并导致因子IXa与其辅助因子，即因子VIIIa一起形成复合体。该复合体将因子X转化成Xa。因子Xa是与其辅助因子，即因子Va一起形成复合体的酶，并迅速地将凝血素转化成凝血酶。凝血酶将纤维蛋白原转化成纤维蛋白单体，该纤维蛋白单体聚合成凝块。外在途径包括因子VIIa和组织因子，其形成复合体(TF/因子VIIa)，并将因子X转化成Xa。象在内在途径中一样，因子Xa将凝血素转化成凝血酶。
上面提到的凝血酶(因子IIa)通过将纤维蛋白原转化成纤维蛋白而占据凝结级联的中心位置。因此，基本的合成努力方向是开发凝血酶抑制剂。例如见US 5,656,600；US 5,656,645；US 5,670,479；US 5,646,165；US5,658,939；US 5,658,930和WO 97/30073。已经制备的作为合成的凝血酶抑制剂的其它化合物是N-芳基亚磺酰化的苯基丙氨酸酰胺。
已知的Xa因子抑制剂包括双脒化合物(Katakura，S.(1993)Biochem.Biophys.Res.Commun.，197965)和基于精氨酸结构的化合物(WO93/15756；WO 94/13693)。也表明，苯基和萘基磺酰胺是因子Xa的抑制剂(WO 96/10022；WO 96/16940；WO 96/40679)。
TF/因子VIIa是丝氨酸蛋白酶复合体，该复合体通过激活因子X和/因子IX而参与血液凝结。因子VIIa产生于它的前体，即因子VII，其是在肝脏中合成并分泌到血液中的，它在血液中以单链的糖肽循环。现已表示出因子VII的cDNA序列特征(Hagen et al.，1986，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，832412-2416)。
很多天然和合成的TF/因子VIIa抑制剂是已知的，并且具有不同的功效和选择性。组织因子途径抑制剂(TFPI；Broze，1995，Thromb.Haemostas.，7490)和线虫抗凝血肽c2(NAPc2；Stanssens et al.，1996，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，932149)在与TF/因子VIIa复合物形成季铵抑制复合体之前束缚住因子Xa。小蛋白直接抑制剂(Dennis et al，1994，J.Biol.Chem.，3522137)和非活性的TF/因子VIIa也是已知的(Kirchhofer et al，1995，Arteriosclerosis，Thrombosis and Vascular Biol.，151098；Jang et al，1995，Circulation，923041)。另外，已经制备了合成肽和可溶性的TF突变体，该突变体保留着束缚亲和力，但对辅助因子的活性降低了(Roenning et al，1996，Thromb.Res.，8273；Kelley et al，1997，Blood，893219)。US 5,679,639描述了抑制丝氨酸蛋白酶活性的多肽和抗体。US 5,580,560描述了半衰期提高了的因子VIIa突变体。US 5,504,067和US 5,504,064描述了治疗出血的截短的TF。同时又指出了作为双功能抗凝血剂的Kunitz功能区组织因子融合蛋白(Lee et al，1997，Biochemistry，365607-5611)。已经指出，TF/因子VIIa复合物是抑制剂开发中引人注目的目标，所述抑制剂开发的基础是外科手术出血和预防血管内血栓形成之间的解离(Harker et al，1995，Thromb.Haemostas.，74464)。
从治疗学来看，在凝结级联中阻断或抑制酶的化合物，可用于治疗或预防怀哺乳动物的血栓形成，该哺乳动物被怀疑具有异常的血栓形成特征。例如，对于动脉血管系统来说，因已确立的动脉粥样硬化斑的恶化而异常的血栓形成是急性心肌梗死和不稳定绞痛的主要原因。通过溶解血栓治疗法或经皮腔内冠状动脉血管成形术(PTCA)治疗闭塞性冠状动脉血栓时，可能伴有血管的再闭合。在静脉血管系统中，很多手术病人，特别是在腹部或下体部分进行手术的病人都体验过血栓的形成，这种血栓的形成降低了血流并可能导致肺部栓塞。静脉和动脉系统中的弥散性血管内凝血病常发生于败血病休克、某些病毒引起的感染和癌症期间，并且可能导致迅速分布广泛的血栓形成和器官故障。
PTCA和再通术是治疗血管堵塞的有利方法。但是，在这些方法之后的动脉血栓形成仍然是其失败的首要原因。肝素，使用最广泛的抗凝血剂，还没有显示出对急性动脉血栓形成或再血栓形成(rethrombosis)的治疗和预防一概有效。
根据已知的蛋白质三维结构合成和开发小分子抑制剂，是对现代药物开发的挑战。很多凝血酶抑制剂被设计成具有水蛭素型的结构。Stubbs和Bode，Current Opinion in Structural Biology 1994，4823-832。报导了新合成的凝血酶抑制剂以及因子Xa和TF/因子VIIa抑制剂。参见，例如AnnualReports inMedicinal Chemistry，1995-1997，Academic Press，San Diego，CA。
US 5,589,173描述了组织因子拮抗剂和溶血栓剂治疗心肌梗死的用途。
US 5,399,487描述了萘磺酰胺，其可用于蛋白水解酶活性的测定或用作酶抑制剂。
现在依然需要化合物，该化合物为凝结级联中酶的有效抑制剂，并具有提高了的抑制活性和/或对级联中所选择的酶的选择性。
发明概述因此，本发明的一个目的是提供新颖的化合物，该化合物在凝结级联中抑制因子/酶，并可用于预防或治疗动脉血管或静脉血管中血栓的形成。这些化合物可用作凝结因子抑制剂和一般意义上的抗凝血剂。
在一个实施方案中，本发明的目的是提供抑制剂，该抑制剂相对于因子Xa、凝血酶或激肽释放酶选择性地抑制因子VIIa、TF/因子VIIa。该实施方案的化合物对TF/因子VIIa的抑制比对Xa因子、凝血酶和/或激肽释放酶的抑制好优选约1个数量级(10X)，更优选约2个数量级(100X)，甚至更优选约3个数量级(1000X)。
在另一实施方案中，本发明的目的是提供相对于因子VIIa、TF/因子VIIa、凝血酶或激肽释放酶而专门抑制因子Xa的化合物。该实施方案的化合物对因子Xa的抑制比对TF/因子VIIa、凝血酶和/或激肽释放酶的抑制好优选约1个数量级(10X)，更优选约2个数量级(100X)，甚至更优选约3个数量级(1000X)。
在又一实施方案中，本发明的目的是提供化合物，该化合物相对于对因子VIIa、TF/因子VIIa、Xa或激肽释放酶的抑制，抑制凝血酶。该实施方案的化合物对凝血酶的抑制比对TF/因子VIIa、因子Xa和/或激肽释放酶的抑制好优选约1个数量级(10X)，更优选约2个数量级(100X)，甚至更优选约3个数量级(1000X)。
本发明的进一步目的是提供抑制TF/因子VIIa、Xa或凝血酶活性的方法，通过使这些酶与本发明有效抑制量的新颖抑制剂或含这些化合物的组合物接触。再进一步的目的是提供一种治疗以TF/因子VIIa、Xa或凝血酶介导的疾病的方法，通过将有效量的本发明的化合物之一或含该化合物的组合物给药于需要这种治疗的哺乳动物。另外一个目的是提供一种预防血栓形成或治疗异常血栓形成的方法，通过将有效量的本发明的化合物之一或含该化合物和载体或赋形剂的组合物给药于需要这种治疗的哺乳动物。
这些目的以及将在下面的描述中明确的其它目的，均可通过本发明的具有如下所示结构式的化合物及其酸加成盐和碱加成盐和前药来实现 其中A和B独立地为CH，CR3或N；X为C＝O或(CR4aR4b)m其中m＝1或2；Y为S(O)n-R1其中n＝1或2，S(O)n-NR2R2其中n＝1或2，S(O)n-OR2其中n＝1或2，C(O)R1，C(S)R1，C(O)-OR1，C(O)-NR2R2；N1和N2为氮原子；Q和R1独立地为(1)任选取代的具有1至约10个碳原子的烷基；(2)任选取代的芳基烷基，其中包含具有6至约10个环碳原子的芳基部分，该芳基部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(3)任选取代的杂芳基烷基，其中包含具有5至约10个环原子的杂芳基部分，该杂芳基部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(4)任选取代的碳环烷基，其中包含具有3至约10个环碳原子的碳环部分，该碳环部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(5)任选取代的杂环烷基，其中包含具有3至约10个环原子的杂环基部分，该杂环基部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(6)任选取代的具有2至约10个碳原子的链烯基；(7)任选取代的芳基链烯基，其中包含具有5至约10个环原子的芳基部分，该芳基部分与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(8)任选取代的杂芳基链烯基，其中包含具有5至约10个环原子的杂芳基部分，该杂芳基部分与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(9)任选取代的碳环链烯基，其中包含具有3至约10个环碳原子的碳环部分，该碳环部分与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(10)任选取代的杂环链烯基，其中包含具有3至约10个环原子的杂环部分，该杂环与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(11)任选取代的具有6至约10个环碳原子的芳基；(12)任选取代的杂芳基，其具有5至约10个选自碳原子和杂原子的环原子，其中所述的杂原子为氮、氧或硫；(13)任选取代的具有3至约10环碳原子的碳环基；(14)任选取代的杂环基，其具有3至约10个选自碳原子和杂原子的环原子，其中所述的杂原子为氮、氧或硫；每个R2独立地为H，烷基，取代烷基，C(O)R7或C(NH)R7，或者N1R2和N2R2一起形成基团N1-CO-N2；R3为H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤素或OH；R4a和R5独立地为选自下列基团之一H，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烷氧基烷基，未取代或取代的卤烷基，未取代或取代的芳基，烷基-OR7，烷基-NR7R8，烷基-OC(O)R7，烷基-C(O)OR7，烷基-C(O)R7，OC(O)R7，C(O)OR7，C(O)R7，以及其中的烷基、R7或R8被1-3个F、Cl、Br、I取代的基团，OR7，SR7，NR7R8，OC(OR7)，C(O)OR7，C(O)R7，C(O)NR7R8，NHC(NH)NH2，PO3，未取代或取代的吲哚基或者未取代或取代的咪唑基；R4b为H，烷基或取代烷基；每个R6独立地选自H，C1-C6烷基，C1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，C1-C6卤代烷基，卤素，氰基，OR7，SR7，NR7R8，OC(O)OR7，C(O)R7和OC(O)R7；R7和R8独立地为H或C1-C6烷基。
另外，本发明的目的是通过含这些化合物的组合物以及下面所描述的方法实现的。
优选实施方案详述定义术语″因子VIIa，TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽释放酶介导的疾病″是指与血液凝结有关的疾病或生理状况，其中抑制这些酶中的一种或多种可减轻或消除至少一种该疾病或状况的生理症状。
术语″血栓形成″是指在哺乳动物血管或人造容器，如塑料或玻璃管或瓶中，血液凝块或血栓的形成或发展。离开原始位置并在另一位置发现的血栓称作血栓形成的栓子。
术语″异常血栓形成″是指发生于与健康状况良好的哺乳动物不同的哺乳动物中的血栓形成。
术语″烷基″，单独或作为其它术语的一部分使用，是指支链或非支链的饱和脂肪族烃基，其具有规定的碳原子数目，或者如果未规定碳原子数目时，具有最多和包括12个碳原子。烷基的实例包括甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，2-甲基丁基，2，2-二甲基丙基，正己基，2-甲基戊基，2，2-二甲基丁基，正庚基，3-庚基，2-甲基己基，等等。术语″低级烷基″、″C1-C6烷基″和″1-6个碳原子的烷基″是同义的，而且可以交替使用。优选的″C1-C6烷基″是甲基，乙基，1-丙基，异丙基，1-丁基或仲丁基。
术语“取代烷基”或″取代的Cn-Cm烷基″其中m和n是确定烷基中所包含的碳原子范围的整数，是指上述的烷基，该烷基被1个、2个或3个卤素(F，Cl，Br，I)，三氟甲基，羟基，未取代或取代的C1-C7烷氧基，受保护的羟基，氨基(包括烷基和二烷基氨基)，受保护的氨基，未取代或取代的C1-C7酰氧基，未取代或取代的C3-C7杂环基，未取代或取代的苯氧基，硝基，羧基，受保护的羧基，未取代或取代的烷氧羰基，未取代或取代的酰基，氨基甲酰基，氨基甲酰氧基，氰基，甲基磺酰氨基，未取代或取代的卞氧基，未取代或取代的C3-C6碳环基或C1-C4烷氧基所取代。所述取代烷基可以被相同或不同的取代基取代一次(优选)、两次或三次。
上述取代烷基的实例包括但不限于氰基甲基，硝基甲基，羟基甲基，三苯甲氧基甲基，丙酰氧基甲基，氨基甲基，羧基甲基，羧基乙基，三氟乙基，三氟丙基，羧基丙基，2-氨基丙基，烷氧基羰基甲基，烷氧基羰基氨基甲基，氨基甲酰氧基甲基，甲氧基甲基，乙氧基甲基，叔丁氧基甲基，乙酰氧基甲基，氯甲基，溴甲基，碘甲基，三氟甲基，6-羟基己基，2，4-二氯(正丁基)，2-氨基(异丙基)，2-氨基甲酰氧基乙基等。所述烷基还可以被碳环基取代。其实例包括环丙基甲基，环丁基甲基，环戊基甲基，和环己基甲基，还包括相应碳环基的-乙基，-丙基，-丁基，-戊基，-己基等。在上述基团内，优选的基团实例包括取代的甲基，如被与″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的甲基。取代甲基的实例包括如羟基甲基，受保护的羟基甲基(如四氢吡喃氧基甲基)，乙酰氧基甲基，氨基甲酰氧基甲基，三氟甲基，氯甲基，羧基甲基，溴甲基和碘甲基。
术语″烷氧基″是指具有规定碳原子数的基团，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等。术语″取代的烷氧基″是指那些被与″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的烷氧基，如2，2，2-三氟乙氧基，2，2，2-三氟丙氧基等。
本文中，术语″酰氧基″是指具有规定碳原子数的碳酰氧基，如甲酰氧基，乙酰氧基，丙酰氧基，丁酰氧基，戊酰氧基，己酰氧基，庚酰氧基等。术语″取代的酰氧基″是指那些被与″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的酰氧基。
在本文中，术语″烷基羰基″、″烷酰基″和″酰基″可以交替使用，并包括具有规定碳原子数的基团，如甲酰基，乙酰基，丙酰基，丁酰基，戊酰基，己酰基，庚酰基，苯甲酰基等。
术语″碳环基(carbocyclyl)″，″碳环的(carbyclylic)″和″碳环(carbocyclo)″单独使用或作为复合基团如碳环烷基的一部分使用时，是指1个、2个或3个环的脂族环，具有3-14个碳原子，并优选具有3-7个碳原子。优选的碳环基包括环丙基，环丁基，环戊基和环己基。术语″取代的碳环基″和″碳环″是指那些被与″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的基团。
“碳环烷基”是上面定义的碳环基通过共价键与上面定义的烷基连接。
术语″链烯基″是指支链或非支链的烃基，该烃基具有指定的碳原子数，并且包含一个或多个碳-碳双键，每个双键独立地为顺式、反式或非几何异构体。术语″取代的链烯基″是指那些被与″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的链烯基。
术语″炔基″是指支链或非支链的烃基，该烃基具有指定的碳原子数，并且包含一个或多个碳-碳三键。术语″取代的炔基″是指那些被与″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的炔基。
术语″烷硫基″和″C1-C12取代的烷硫基″分别是指附有硫原子的C1-C12烷基和C1-C12取代烷基，而该硫原子又是该烷硫基或取代烷硫基连接指定基团或取代基的连接点。
术语″芳基″单独使用或作为另一术语的一部分时，是指同素环的芳香性基团，不论稠合与否，均具有指定的碳原子数，或如果未指定碳原子数，最高为14个碳原子。优选的芳基包括苯基，萘基，联苯基，菲基，并四苯基等(参见例如Lang′s Handbook of Chemistry(Dean，J.A.，ed)13thed.Table 7-2)。
术语″取代苯基″或″取代芳基″是指被1、2、3、4或5个，优选1-2、1-3或1-4个取代基取代的苯基或芳基，所述的取代基选自卤素(F，Cl，Br，I)，羟基，受保护的羟基，氰基，硝基，烷基(优选C1-C6烷基)，烷氧基(优选C1-C6烷氧基)，卞氧基，羧基，受保护的羧基，羧基甲基，受保护的羧基甲基，羟基甲基，受保护的羟基甲基，氨基甲基，受保护的氨基甲基，三氟甲基，烷基磺酰氨基，芳基磺酰氨基，杂环基磺酰氨基，杂环基，芳基或规定的其它基团。而这些取代基之一或其中的次甲基(CH)和/或亚甲基(CH2)，又可以被与上面所指出的基团相同的基团所取代。术语″取代苯基″的实例包括但不限于一或二(卤代)苯基如4-氯苯基，2，6-二氯苯基，2，5-二氯苯基，3，4-二氯苯基，3-氯苯基，3-溴苯基，4-溴苯基，3，4-二溴苯基，3-氯-4-氟苯基，2-氟苯基等；一或二(羟基)苯基如4-羟基苯基，3-羟基苯基，2，4-二羟基苯基，及其羟基受保护的衍生物等；硝基苯基如3-或4-硝基苯基；氰基苯基如4-氰基苯基；一或二(低级烷基)苯基如4-甲基苯基，2，4-二甲基苯基，2-甲基苯基，4-(异丙基)苯基，4-乙基苯基，3-(正丙基)苯基等；一或二(烷氧基)苯基如3，4-二甲氧基苯基，3，4-二乙氧基苯基，3-乙氧基-4-异丙氧基苯基，3-乙氧基-S-丁氧基苯基，3-甲氧基-4-卞氧基苯基，3-甲氧基-4-(1-氯甲基)卞氧基-苯基，3-乙氧基苯基，4-(异丙氧基)苯基，4-(叔丁氧基)苯基，3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；3-或4-三氟甲基苯基；一或二羧基苯基或(受保护的羧基)苯基如4-羧基苯基；一或二(羟基甲基)苯基或(受保护的羟基甲基)苯基如3-(受保护的羟基甲基)苯基或3，4-二(羟基甲基)苯基；一或二(氨基甲基)苯基或(受保护的氨基甲基)苯基如2-(氨基甲基)苯基或2，4-二(受保护的氨基甲基)苯基；或一或二(N-(甲基磺酰氨基))苯基如3-(N-甲基磺酰氨基))苯基。同时，术语″取代苯基″也代表其中的取代基不同的二取代苯基，如3-甲基-4-羟基苯基，3-氯-4-羟基苯基，2-甲氧基-4-溴苯基，4-乙基-2-羟基苯基，3-羟基-4-硝基苯基，2-羟基-4-氯苯基等，和其中的1个、2个或3个取代基不同的三取代苯基，如3-甲氧基-4-卞氧基-6-甲基磺酰氨基，3-甲氧基-4-卞氧基-6-苯基磺酰氨基，以及其中的取代基不同的四取代苯基，如3-甲氧基-4-卞氧基-5-甲基-6-苯基磺酰氨基。优选的取代苯基包括3-甲氧基苯基，3-乙氧基-苯基，4-卞氧基苯基，4-甲氧基苯基，3-乙氧基-4-卞氧基苯基，3，4-二乙氧基苯基，3-甲氧基-4-卞氧基苯基，3-甲氧基-4-(1-氯甲基)卞氧基-苯基，3-甲氧基-4-(1-氯甲基)卞氧基-6-甲基磺酰基氨基苯基。同样，术语″取代苯基″还代表其中稠合了芳基、苯基或杂芳基的苯基。所述的稠环也可以被任意，优选1个、2个或3个取代基所取代，该取代基为上文中为″取代烷基″确定的取代基。
术语″芳烷基″是指具有指定碳原子数的1个、2个或3个芳基连接在一个具有指定碳原子数的烷基上，包括但不限于苯甲基，萘甲基，苯乙基，二苯基甲基，三苯甲基等。优选的芳基烷基是苯甲基。
术语″取代芳烷基″是指烷基，优选C1-C8烷基在任意碳上被芳基，优选C6-C10芳基取代，该芳基通过芳环的任意位置连接到烷基上并在烷基部分被1个、2个或3个基团所取代，所述的基团选自卤素(F，Cl，Br，I)，羟基，受保护的羟基，氨基，受保护的氨基，C1-C7酰氧基，硝基，羧基，受保护的羧基，氨基甲酰基，氨基甲酰氧基，氰基，C1-C6烷硫基，N-(甲基磺酰氨基)或C1-C4烷氧基。任选该芳基可以被1个、2个、3个或4个基团所取代，所述的基团选自卤素，羟基，受保护的羟基，硝基，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，羧基，受保护的羧基，羧基甲基，受保护的羧基甲基，羟基甲基，受保护的羟基甲基，氨基甲基，受保护的氨基甲基或N-(甲基磺酰氨基)。如前所述，当C1-C8烷基部分或芳基部分或二者均被二取代时，所述的取代基可以相同或相异。该基团也可以作为取代的芳烷氧基的取代的芳烷基出现。
术语″取代的芳烷基″及其出现在″取代的芳烷氧基″中的该基团的实例包括2-苯基-1-氯乙基，1-苯基-1-氯甲基，1-苯基-1-溴甲基，2-(4-甲氧基苯基)乙基，2，6-二羟基-4-苯基(正己基)，5-氰基-3-甲氧基-2-苯基(正戊基)，3-(2，6-二甲基苯基)正丙基，4-氯-3-氨基苯甲基，6-(4-甲氧基苯基)-3-羧基(正己基)，5-(4-氨基甲基苯基)-3-(氨基甲基)(正戊基)等。
本文中所使用的术语″羧基保护基团″是指羧酸基团的一种酯衍生物，常用来在化合物的其它基团进行反应时阻断或保护羧酸基团。这种羧基保护基团的实例包括4-硝基苯甲基，4-甲氧基苯甲基，3，4-二甲氧基苯甲基，2，4-二甲氧基苯甲基，2，4，6-三甲氧基苯甲基，2，4，6-三甲基苯甲基，五甲基苯甲基，3，4-亚甲基二氧基苯甲基，二苯甲基，4，4′-二甲氧基二苯甲基，2，2′，4，4′-四甲氧基二苯甲基，烷基如甲基、乙基、异丙基、叔丁基或叔戊基，三苯甲基，4-甲氧基三苯甲基，4，4′-二甲氧基三苯甲基，4，4′，4″-三甲氧基三苯甲基，2-苯基丙-2-基，三甲基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，苯甲酰甲基，2，2，2-三氯乙基，β-(三甲基甲硅烷基)乙基，β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基，对甲苯磺酰基乙基，4-硝基苯磺酰基乙基，烯丙基，肉桂基，1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等部分。所采用的羧基保护基团的种类没有严格的限制，只要所衍生的羧基在分子其它位置上进行的后续反应条件是稳定的，且能在适宜的时候脱除该羧基保护基团而不破坏分子的其余部分。特别重要的是，不要使羧基保护的分子接触强亲核性的碱或使用高活性金属催化剂如阮内镍的还原条件(这种苛刻的脱除条件在脱除下面讨论的氨基保护基团和羟基保护基团时也应避免)。优选的羧基保护基团是烯丙基和对硝基苯甲基。也可以用类似于头孢菌素、青霉素和肽技术中所用的羧基保护基团来保护羧基取代基。这些基团的进一步实例可参见E.Haslam，″Protective Groups in OrganicChemistry″，J.G.W. McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，Chapter 5，and T.W.Greene，″Protective Groups in Organic Synthesis″，JohnWiley and Sons，New York，NY，1981，Chapter 5。术语″受保护的羧基″是指被上述羧基保护基团取代的羧基。
本文中所使用的术语″氨基保护基团″是指肽技术中为保护肽氮原子不发生不合乎需要的副反应而常常使用的任何基团。这种基团包括对甲氧基苯基，3，4-而甲氧基苯甲基，苄基，邻-硝基苯甲基，二(对甲氧基苯基)甲基，三苯基甲基，(对甲氧基苯基)联苯基甲基，联苯基-4-吡啶基甲基，m-2-(吡啶甲基)-N′-氧化物，5-二苯并环庚基，三甲基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基等。对这些保护基团的进一步描述，可参见″Protective Groups in OrganicSynthesis″，by Theodora W.Greene，1981，John Wiley and Sohs，New York。
术语″杂环基″、″杂环的″、“杂环基(heterocyclyl)”或“杂环(heterocyclo)”单独以及用作复合基团如杂环基烷基的一部分使用时，可交替使用并且是指任何饱和的单环、双环或三环或非芳香性的不饱和环，其具有规定的碳原子数，一般具有3至约10个环原子，其中该环原子为碳和1、2、3或4个氮、硫或氧原子。通常，5元环具有0-2个双键，而6元或7元环具有0-3个双键，且氮或硫杂原子可任选地被氧化，此外任何氮杂原子还可以被季铵化。实例包括吡咯烷基，环氧乙烷基，氧杂环丁烷基，四氢呋喃基，2，3-二氢呋喃基，2H-吡喃基，四氢吡喃基，硫杂环丙基，硫杂环丁基(thietanyl)，四氢硫杂环丁基，氮杂环丙烯基，氮杂环丁烷基，1-甲基-2-吡咯基，哌啶基和3，4，5，6-四氢哌啶基。
“杂环烷基”或“杂环链烯基”是上面定义的杂环基通过共价键与上面定义的烷基或链烯基相连接的基团。
除非另外说明，″杂芳基″本身以及用作复合基团如杂芳基烷基的一部分时，均是指1个、2个或3个环的芳环体系，该芳环体系具有指定的碳原子数，其中至少1个环为5、6或7元环，并含有1-4个选自氮、氧和硫的杂原子，而且优选至少一个杂原子为氮(Lang′s Handbood of Chemistry，supra)。该定义中包括上述任何杂芳环与苯环稠合成的任何双环基团。杂原子为氮和氧的杂芳基优选。
下面的环系是术语″杂芳基″所表示的杂芳基(取代或未取代的)的实例噻吩基，呋喃基，咪唑基，吡唑基，噻唑基，异噻唑基，噁唑基，异噁唑基，三唑基，噻二唑基，噁二唑基，四唑基，噻三唑基，噁三唑基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，噻嗪基，噁嗪基，三嗪基，噻二嗪基，噁二嗪基，二噻嗪基，二噁嗪基，噁噻嗪基，四嗪基，噻三嗪基，噁三嗪基，二噻二嗪基，咪唑啉基，二氢嘧啶基，四氢嘧啶基，四唑并[1，5-b]哒嗪基和嘌呤基，以及苯并稠环衍生物，如苯并噁唑基，苯并呋喃基，苯并噻唑基，苯并噻二唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基和吲哚基。
含硫原子或氧原子以及1-3个氮原子的杂5元环体系也适用于本发明。这种基团的优选实例包括噻唑基，特别是噻唑-2-基和噻唑-2-基N-氧化物，噻二唑基，特别是1，3，4-噻二唑-5-基和1，2，4-噻二唑-5-基，噁唑基，优选噁唑-2-基和噁二唑基，如1，3，4-噁二唑-5-基和1，2，4-噁二唑-5-基。进一步优选的具有2-4个氮原子的5元环系的实例包括咪唑基，优选咪唑-2-基；三唑基，优选1，3，4-三唑-5-基；1，2，3-三唑-5-基，1，2，4-三唑-5-基和四唑基，优选1H-四唑-5-基。优选的苯并稠环衍生物的实例为苯并噁唑-2-基，苯并噻唑-2-基和苯并咪唑-2-基。
上述杂环体系的其他适宜的特例是含有1-3个氮原子的6元环系。这种实例包括吡啶基，如吡啶-2-基，吡啶-3-基和吡啶-4-基；嘧啶基，优选嘧啶-2-基和嘧啶-4-基；噻嗪基，优选1，3，4-噻嗪-2-基和1，3，5-噻嗪-4-基；哒嗪基，特别是哒嗪-3-基和吡嗪基。吡啶N-氧化物和哒嗪N-氧化物，以及吡啶基，嘧啶-2-基，嘧啶-4-基，哒嗪基和1，3，4-三嗪-2-基是优选的基团。
任选取代的杂环体系的取代基以及上述5元和6元环系的其他实例，可参见W.Druckheimer等人的美国专利4,278,793。
特别优选的杂芳基包括1，3-噻唑-2-基，4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基，4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基钠盐，1，2，4-噻二唑-5-基，3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基，1，3，4-三唑-5-基，2-甲基-1，3，4-三唑-5-基，2-羟基-1，3，4-三唑-5-基，2-羧基-4-甲基-1，3，4-三唑-5-基钠盐，2-羧基-4-甲基-1，3，4-三唑-5-基，1，3-噁唑-2-基，1，3，4-噁二唑-5-基，2-甲基-1，3，4-噁二唑-5-基，2-(羟基甲基)-1，3，4-噁二唑-5-基，1，2，4-噁二唑-5-基，1，3，4-噻二唑-5-基，2-硫羟-1，3，4-噻二唑-5-基，2-(甲硫基)-1，3，4-噻二唑-5-基，2-氨基-1，3，4-噻二唑-5-基，1H-四唑-5-基，1-甲基-1H-四唑-5-基，1-(1-(二甲基氨基)乙-2-基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基钠盐，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基钠盐，2-甲基-1H-四唑-5-基，1，2，3-三唑-5-基，1-甲基-1，2，3-三唑-5-基，2-甲基-1，2，3-三唑-5-基，4-甲基-1，2，3-三唑-5-基，吡啶-2-基N-氧化物，6-甲氧基-2-(N-氧化物)-哒嗪-3-基，6-羟基哒嗪-3-基，1-甲基吡啶-2-基，1-甲基吡啶-4-基，2-羟基嘧啶-4-基，1，4，5，6-四氢-5，6-二氧代-4-甲基-as-三嗪-3-基，1，4，5，6-四氢-4-(甲酰基甲基)-5，6-二氧代-as-三嗪-3-基，2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-as三嗪-3-基钠盐，2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基钠盐，2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氢-5-氧代-6-甲氧基-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氢-5-氧代-as-三嗪-3-基，2，5-二氢-5-氧代-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氢-5-氧代-2，6-二甲基-as-三嗪-3-基，四唑并[1，5-b]哒嗪-6-基和8-氨基四唑并[1，5-b]-哒嗪-6-基。
其他的″杂芳基″包括4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基，4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基钠盐，1，3，4-三唑-5-基，2-甲基-1，3，4-三唑-5-基，1H-四唑-5-基，1-甲基-1H-四唑-5-基，1-(1-(二甲基氨基)乙-2-基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基钠盐，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基钠盐，1，2，3-三唑-5-基，1，4，5，6-四氢-5，6-二氧代-4-甲基-as-三嗪-3-基，1，4，5，6-四氢-4-(2-甲酰基甲基)-5，6-二氧代-as-噻嗪-3-基，2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基钠盐，2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基，四唑并[1，5-b]哒嗪-6-基和8-氨基四唑并[1，5-b]哒嗪-6-基。
“杂芳基烷基”或“杂芳基链烯基”是上面定义的杂芳基通过共价键与上面定义的烷基或链烯基相连接的基团。
″可药用的盐″既包括酸加成盐又包括碱加成盐。″可药用的酸加成盐″是指那些保持游离碱的生物效力和性质的盐，否则在生物学上就不合乎需要，该盐是与无机酸或有机酸形成的，所述无机酸有如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，碳酸，磷酸等，所述的有机酸可以选自脂肪族，环脂肪族，芳香族，芳脂肪族，杂环羧酸和磺酸类的有机酸，如甲酸，乙酸，丙酸，羟基乙酸，葡糖酸，乳酸，丙酮酸，草酸，苹果酸，马来酸，丙二酸，琥珀酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，天冬氨酸，抗坏血酸，谷氨酸，氨茴酸，苯甲酸，肉桂酸，苦杏仁酸，embonic acid，苯乙酸，甲磺酸，乙磺酸，对甲苯磺酸，水杨酸等。
″可药用的碱加成盐″包括那些衍生于无机碱的盐，如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。特别优选铵、钾、钠、钙和锰盐。衍生于可药用的有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺及叔胺，取代胺包括天然存在的取代胺，环胺和碱性离子交换树脂，如异丙胺，三甲胺，二乙胺，三乙胺，三丙胺，乙醇胺，2-二乙基氨基乙醇，三甲胺(trimethamine)，二环己胺，赖氨酸，精氨酸，组氨酸，咖啡因，普鲁卡因，哈胺青霉素，胆碱，甜菜碱，乙二胺，葡糖胺，甲基葡糖胺，可可碱，嘌呤，哌嗪，哌啶，N-乙基哌啶，聚胺树脂等的盐。特别优选的有机无毒碱是异丙胺，二乙胺，乙醇胺，三甲胺，二环己基胺，胆碱和咖啡因。
本文中所使用的术语″前药″是指母体药分子的衍生物，该衍生物加强药学上所需的特征或性能(如输运，生物可利用性，药物动力学等)，并且需要在生物体内进行自发的或酶的生物转化，以释放活性的母体药。
实施方案本发明一般是指具有下列结构的化合物 在该结构中，R2，R5，R6，A，B，N1，N2，Q，X以及Y的定义同上。在这些定义中，烷基优选未取代或取代的C1-C6烷基；链烯基优选未取代或取代的C2-C6链烯基；炔基优选未取代或取代的C2-C6炔基；芳基优选未取代或取代的萘基或苯基，更优选苯基；芳烷基优选未取代或取代的苄基。所述的变量m优选为1。
基团Y优选为S(O)n-R1其中n＝1或2，或者为基团S(O)n-NR2R2其中n＝1或2，更优选为S(O)n-R1。
在一优选的实施方案中，R1，例如当Y为S(O)n-R1时，选自C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基，C3-C6环烷基，苯基，萘基，苄基和具有5-6个选自碳原子和1-2个杂原子的环原子的杂芳基，其中所述的的杂原子为N，S或O，而且R1任选地被1-3个选自卤素，硝基，C1-C6烷基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-OR7，C1-C6卤代烷基，C1-C6烷基-NR7R8，C(O)OR7，OC(O)R7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7和NHC(O)NR7R8的取代基所取代，其中的R7和R8独立地为H或C1-C6烷基。在该实施方案中，其余的每个基团R2，R5，R6，A，B，Q，X和Y可以独立地选自上面各自定义中的任何基团。
在第二个优选的实施方案中，Q为苯基，该苯基任选地被1-5个、优选2-4个、更优选2-3个取代基所取代，所述的取代基选自卤素，硝基，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，OC1-C6烷基-NR7R8，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，OC1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6烷基-C(O)R7，OC1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6卤代烷基，O-芳烷基(如卞氧基)，C(O)OR7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7，NHC(O)NR7R8，NR7S(O)nR1，NR7S(O)nR7，S(O)nR7，S(O)nNR7，其中R7和R8独立地为H或C1-C6烷基。在该实施方案中，其余的每个基团R2，R5，R6，A，B，X和Y(以及R1)可以独立地选自上面各自定义中的任何基团。同时，每个烷基、链烯基和炔基部分还可以按上述的定义被取代。
在第三个优选的实施方案中，Q具有如下结构 其中R9为H，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基，C1-C6烷氧基，羟基，NR7R8，SR7或OR7，其中R7和R8独立地为H或未取代或取代的C1-C6烷基；R10，R11和Z2独立地选自H，卤素，硝基，氰基，C1-C6烷基，C6-C10芳基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-OC(O)R7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-C(O)R7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-OC(O)R7，O-C1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6卤代烷基，OR12，C1-C6烷基-R12，O-C1-C6烷基-R12，C(O)OR7，C(O)OR12，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NR7C(O)R7，NR7C(O)R12，NR7C(O)-NR7R8，NR7C(O)OR7，NR7C(O)OR12，NR7S(O)n-R1，NR7S(O)n-R7和NR7S(O)n-R12，其中R7和R8独立地为H或未取代或取代的C1-C6烷基，R12为未取代或取代的C6-C10芳基或上面定义的杂芳基且n为1或2；Z1为H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤素或硝基。在该实施方案中，其余的每个基团R2，R5，R6，A，B，X和Y可以独立地选自上面各自定义中的任何基团。每个烷基、链烯基和炔基部分还可以按上面的定义被取代。
在本发明的各种情况下，Z1和Z2可以为氢；Z1，Z2和R11可以为氢；或者Z1，R10和R11可以为氢；而其余的环取代基的定义同上。
在另一实施方案中，当Q为取代苯基时，位于该环的4-位和5-位或者位于5-位和6-位的取代基，可以结合在一起形成未取代或取代的碳环或杂环。这类化合物的实例示于下面，其中符号 优选为5元或6元碳环或杂环，该碳环或杂环按如下位置与苯环稠合。 适宜的可与苯环稠合的5元或6元碳环或杂环的实例包括如下所示的环系，其中R6的定义同上。 在另一优选的实施方案中，Y为S(O)n-R1其中n为1或2，优选为2。在该实施方案中，R1的定义可以同上，而且其余的每个基团可以独立地选择具有任何上述的定义。
也优选这样的化合物，其中的Q为取代的苯基而R10选自C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6氨基烷基，C1-C6卤代烷基，C1-C6羟基烷基，苯基，苯氧基，苄基，卞氧基，以及被下列基团取代的苯氧基和卞氧基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤素，C1-C6卤代烷基，C1-C6羟基烷基，C1-C6氨基烷基，C(O)-C1-C6烷基，C(O)O-C1-C6烷基合C(O)OH，其中剩余的每个基团可以独立地选择具有任何上述的定义。
这样的化合物也是重要的，这些化合物中的R11为NR7C1-C6烷基-C(O)NR7R8，NR7S(O)n-R7或N R7S(O)n-R12，n为1或2和/或其中的Z1＝Z2＝H和/或其中的R10为OR7，OR12，OC7-C10-芳烷基，OC1-C6烷基-OR7或OC1-C6烷基-OR12其中R7和R12为未取代或取代的上面定义的基团。适宜的取代的R7和R12包括如上所述的那些取代基团，例如具有1或2个C1-C6烷氧基，C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基，卤素，C1-C6卤代烷基，C1-C6羟基烷基，C1-C6氨基烷基，OC(O)-C1-C6烷基，C(O)O-C1-C6烷基，C1-C6烷基C(O)OR7，C1-C6烷基OC(O)R7或C(O)OH的基团。在这些化合物中，其余的每个基团可以独立地选择具有任何上述的定义。当Y为S(O)n-R1且n为1或2时，即为二磺酰胺化合物时，这些化合物也是重要的。
在另一实施方案中，A和B独立地为CH或CR3，其中R3为H、C1-6烷基或OH，其中剩余的基团可以独立地选择具有任何上述的定义。
在另一实施方案中，R6为H或者R3为CH，其中剩余的基团可以独立地选择具有任何上述的定义。
在另一优选的实施方案中，X为羰基(C＝O)，其中剩余的基团可以独立地选择具有任何上述的定义。在该实施方案中，优选m＝1。
在下面示出的表1中，给出了本发明的某些化合物在各个位置的某些优选基团的实例。该表中公开了一组特定的化合物，这组化合物是通过选择取代基的的全部独特的组合而得到的，即对每个基团从该表的每列中选择一个取代基，并将这些基团与下表1所公开的结构相结合。
表1
制备方法本发明的化合物可以通过使用标准教科书中所描述的标准化学方法来制备(如March，J.″Advanced Organic Chemistry″McGraw-Hill，New York，1977；Collman，J.P.，Hegedus，L.S.，Norton，J.R.，Finke，R.G.″Principles andApplications of Organotransition Metal Chemistry″University Science，MillValley，1987；Larock，R.C.″Comprehensive Organic Transformations″Verlag，New York，1989)。
合成本发明化合物的关键中间体具有下式的结构 在该式中，A，B，R2，R4a，R4b，R5，R6，m和Q具有并且优选具有上述含义。可以用若干可供选择的合成途径制备该化合物。制备之后，可以将氰基转化成脒基(C(NH)NH2)，例如，使用诸如Pinner反应等已知的方法。具有上式所示的氰基化合物可以与羟胺反应，优选在乙醇溶剂中反应，然后用阮内镍还原，优选在乙醇溶剂中还原，或者先与乙醇HCl反应，然后与醇氨反应，生成相应的脒基化合物。作为选择，改进的Pinner反应，即先使用吡啶/二乙胺(1/1)/硫化氢，紧接着使用碘甲烷/乙腈，然后使用乙酸铵/乙醇，也会提供合乎需要的脒基产物。
合成上式所示化合物的途径之一是使用适宜的取代前体而进行的缩合反应，所述的前体如下面的方案所示。
该缩合反应是在存在催化剂和烷醇(ROH)的情况下进行的，所述的催化剂优选路易斯酸催化剂，所述烷醇优选低级烷醇，如甲醇，乙醇，异丙醇等，然后通过中间体水解，优选使用过量的水，通常使用相当于约10当量的水。合适的路易斯酸包括BF3乙醚合物，AlCl3等。W-NC是一种异腈，其中W可以是任何适宜的烃基，通常为烷基，碳环烷基或芳烷基，优选具有不超过约12个碳原子。特别优选的异腈是苄基异腈。酯产物可以通过标准技术，包括高压液相色谱(HPLC)，柱色谱，重结晶等进行纯化。
可以使用任何已知的还原剂([H])将所生成的酯还原成醇，所述的还原剂优选在腈之前还原酯。适宜的还原剂和还原方法是本领域技术人员所熟知的。参见，例如，Modem Synthetic Reactions，H.O.House，W.A.Benjami，Inc.，Second Ed.，1972。一种有用的还原剂是硼氢化锂。然后用已知的化学反应将醇转化成胺。适宜的条件包括先使醇与叠氮化氢，DEAD，以及三苯基磷(PPh3)反应，然后与PPh3和水反应，或者先与邻苯二甲酰亚胺，DEAD和PPh3反应，然后再与肼反应。这些反应示于下面的方案中。作为选择，也可以使酯与具有亲核碳原子的试剂反应，以引入适宜的R4a基团。这种试剂可以包括活化的亚甲基碳，例如，与一个或多个吸电子更强的基团如硝基(NO2)、烷氧羰基(COOR4a)等相邻的亚甲基，Grignard试剂(R4aMgHal，其中Hal为卤素)等，然后转化成醇再转化成胺。 氨基官能团向磺酰胺的转化以及腈官能团向脒的转化可以按任何所需的顺序来进行。优选的反应方案示于下列方案之中。 用已知的化学反应、纯化和分离方法来完成这些转化。可以通过在碱的存在下与适宜的取代磺酰氯(ClSO2R1)反应，将胺转化成磺酰胺。腈可以先在醇溶剂中与羟胺反应，然后还原，如用阮内镍和氢还原，或者与HCl/醇反应，然后再与氨/醇反应。
适宜的反应顺序的实例如下所示。 在该顺序中，a＝BF3OEt2/EtOH，b＝LiBH4/DME，c＝邻苯二甲酰亚胺，DIAD/PPh3/THF，d＝H2NNH2/EtOH，e＝R1SO2Cl，f＝H2/Pt/C/EtOH，而g＝R7SO2Cl/NEt3，NH2OH-HCl/NEt3，H2/Ra-Ni/MeOH。
可以按如下所示，用有关类似的合成方案来制备其中的X为羰基的化合物。 其中m＝2的化合物可以根据下面的方案来制备，该方案提供一种醇，所述的醇与上述方案所示中的醇是同系的，并且可以按相似的方式转化成胺(将进一步详述的化合物)。在下面的方案中，(a)为碱而(b)为还原剂，如LiBH4。
其中的Y为C(O)-R1；C(O)-OR1；C(O)-NR1R2的化合物，用如上所述的相应酰卤(优选酰氯)，卤代甲酸烷基酯(优选氯代甲酸酯)或异氰酸酯，按如下所示的方案来制备 适宜反应顺序的实例如下所示
由上面所示的缩合反应得到酯，也可以作为合成其中的X为羰基的化合物的中间体。酯向羧酸的转化可以容易地通过用碱金属氢氧化物，如锂、钠或钾的氢氧化物的皂化反应来进行。磺酰胺与该羧酸的偶联可以通过先用例如羰基二咪唑对该羧酸盐进行偶联的活化来实现，或者通过肽合成中所使用的活化剂而进行活化的其他途径来实现。可以通过将烷基或芳基磺酰胺与强碱，如DBU或氢化钠，优选在无水溶剂，例如烃溶剂或醚溶剂，如四氢呋喃中混合来完成偶联的第二步。可通过已经描述过的方法将腈转化成脒。 在本实施方案的更优选的变化中，Q为具有如下所述的Z1，Z2和R9-R11取代基的取代苯基。
用来制备本发明化合物的中间体化合物的另一制备方法如下所示，其中包括由易得的醛和酮合成亚胺化合物，然后与含亲核碳原子的试剂，即一般为″Nu-″的试剂进行亲核加成。″Nu″可以是如CHR4aNO2，CHR4aCOOR，CH(NO2)(COOR)等的一部分，由著名的Grignard反应来产生，在反应中，用碱去掉与吸电子基团(CO，COO，NO2等)相邻的碳原子上的质子。 ″Nu″可以通过如下所示的已知的还原反应转化成如CHR4aNH2或CHR4aCH2OH或CHR4aNH2CH2OH的基团。在这些中间体中，氨基可以按上面所描述的那样进一步磺化，或者酰基化。适宜的反应顺序的实例如下所示。 可以使用另一种合成方法，来制备如上所述的醇中间体。如下面的方案所示，初始的苯乙烯衍生物与过酸的反应通常得到产物的混合物，该产物包含如下所示的非氢R4a和/或R5取代基，而且无须分离就可以通过与氰基苯胺或相应的氰基吡啶反应而转化成醇。 然后可以按如上所述的那样用该醇来制备本发明的化合物。
当所需要的化合物为相应于其中的A和B为氮的化合物时，用相应的氨基吡啶或取代的氨基吡啶化合物代替上述反应中所使用的苯胺或取代的苯胺。
根据已知的方法，可以用熟知的反应，如用硫酸二烷基酯、卤代烷等的烷基化，通过常规的氮原子烷基化来制备磺酰胺氮上具有取代基的化合物。
在一优选的实施方案中，O为取代的芳基，更优选取代的苯基，并且具有如下所示的结构。 在该结构中，Z1，Z2，R9-R11的定义通常情况下和在优选的实施方案中均与上面的相同。本实施方案的化合物按上面方案1中所描述的方法用适当取代的具有Q-CHO(R5为H)结构的苯甲醛来制备。这些取代的苯甲醛可以很容易地从商业来源得到，也可容易用熟知的合成化学方法由已知的苯甲醛来制备。
在一个实施方案中，O被硝基所取代。所述硝基的优选位置是位于R11(其中Z1，Z2，R9和R10的定义通常情况下和在优选的实施方案中均与上面的相同)，该硝基可用适宜的还原剂进一步还原成氨基。一般地，方案3中示出的氰基-胺化合物或氰基-磺酰胺化合物将与一还原剂反应，以优选还原氰基对面的R11的硝基。可以使用具有这些性质的任何还原剂，如氢和Pt/C催化剂。然后可以使还原得到的苯胺与磺酰氯(ClSO2W，其中W的定义同上)反应，以生成二磺酰胺化合物。
其中N1-R2和N2-R2一起形成脲联接，即N1-C(O)-N2的环脲衍生物的制备，提供了本发明的另外的化合物，并且提供了制备对映异构体纯的本发明化合物的另外的方法。例如，可用该环脲化合物制备二烷氧基二磺酰胺和本发明的其他化合物，如下面的方案所示。
作为选择，在下面方案中可以用硫酸代替硝酸，以得到磺酸衍生物，该磺酸衍生物可以通过已知的反应进一步转化成磺酰胺和砜。 由可用于上述合成方案中的简单的原料，容易地制备本发明的其他化合物，包括杂环化合物。例如，以简单的硝基和羟基取代的醛开始，经上述的缩合，得到相应的可直接转化成环尿烷或噁唑化合物的酯，然后再按已描述过的方法进一步制备所述的环尿烷或噁唑化合物，以得到本发明的化合物。这些于5-位和6-位稠合成环的反应图解如下。 在苯环的4-位和5-位稠合成环的化合物，是通过类似的方法以如下所示的适当取代的醛为原料来制备的。 其他的稠合杂环化合物是用常规的合成化学反应和化学合成领域中熟知的适当取代的原料制备的，进而提供本发明的其他化合物。例如，可以由相应的卤素和羟基取代的醛，按如下所示的方法制备稠合的呋喃环。 本发明还包括上述化合物的前药。适宜的前药包含公知的氨基保护基和羧基保护基，该保护基在生理条件下，如通过水解释放，得到母体化合物。优选的一类前药是这样的化合物，在该化合物中，氨基，脒基，氨基亚烷基氨基，亚氨基亚烷基氨基或胍基中的氮原子被羟基(OH)，烷基羰基(-CO-W)，烷氧基羰基(-CO-OW)，酰氧基烷基-烷氧基羰基(-CO-O-W-O-CO-W)所取代，其中W如上面定义的那样为一价或二价的基团，或者具有式-C(O)-O-CP1P2-卤代烷基的基团，其中P1和P2相同或相异，并且为氢，低级烷基，低级烷氧基，氰基，卤代低级烷基或芳基。优选该氮原子为本发明化合物的脒基的氮原子之一。这些前药化合物是这样制备的，即使上述本发明的化合物与活性的酰基化合物发生反应，使本发明化合物中的氮原子与活性酰基化合物的羰基结合。适宜的活性羰基化合物含有良好的连接于羰基碳上的离去基团，并且包括酰基卤，酰基胺，酰基吡啶翁盐，酰基烷氧化物，特别是酰基苯氧化物，如对硝基苯氧基酰基，二硝基苯氧基酰基，氟苯氧基酰基和二氟苯氧基酰基。该反应通常是放热的，而且在惰性溶剂中和降低温度如-78℃-约50℃的条件下进行。该反应也常在诸如碳酸钾或碳酸氢钠等无机碱或者包括吡啶、三乙胺等胺的有机碱的存在下进行。制备前药的一种方法描述于1998年10月22日公布的WO98/46576中。
用上述合成方法，可以制备下面表2中所示的本发明的示例性化合物(m＝1)。对于该表中的每个条目，X可以为羰基或(CR4aR4b)m其中m＝1或2；而卞脒环可以带有卤素、羟基或烷基取代基。
表2
本发明的化合物含有一个或多个不对称碳原子。因此，该化合物可以是非对映异构体、对映异构体或它们的混合物。上述的合成方法可以使用外消旋体、非对映异构体或对映异构体作为原料或中间体。非对映异构化合物可以通过色谱或结晶法拆分。类似地，对映异构体的混合物也可以通过相同的技术或本领域已知的其它技术进行拆分。每个不对称碳原子均可以为R或S构型，这两种构型均包括在本发明的范围之内。
实用性已经发现按本文所公开的方法制备和选择的本发明的化合物，是丝氨酸蛋白酶，例如因子VIIa，TF/因子VIIa，因子Xa，激肽释放酶和/或凝血酶抑制剂。这些化合物能够抑制这些酶的催化活性，同样具有抑制凝结级联并预防或限制凝结和/或血管中血栓或栓塞形成和/或增加血液凝结时间的作用。因此，本发明的化合物具有抑制TF/因子VIIa将因子X转化成因子Xa的活性，抑制因子Xa将凝血酶原转化成凝血酶(因子IIa)的活性；和/或凝血酶将纤维蛋白原转化成纤维蛋白单体的活性。
作为这些酶的抑制剂，本发明化合物的选择性可以用下面实施例中所描述的Ki值来确定。典型的选择性如下表所示。
本发明化合物的抗凝血剂活性，可以用试验来测试。可以在混合的正常血浆(人或各种动物的)中，进行凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血激酶时间(APTT)凝结时间试验，然后向该血浆中加入增加浓度的抑制剂。用ACL 300自动凝结分析仪(CoulterCorp.，Miami，FL)和如下可商购的试剂，测定凝结时间。
PT试验将不同浓度的抑制剂水溶液按1份抑制剂对9份血浆的比例加到混合的正常血浆中。然后将这些混合物加到分析仪的样品杯中。将Innovin(Dade International Inc.，Miami，FL)，重新脂质化的(relipidated)人类组织因子与Ca++离子的混合物，加到试剂杯中。将精确体积的样品和Innovin自动地转移至丙烯酸转子池中，该转子池预先平衡至37℃。培养2分钟之后，将这两个组分通过离心作用混合在一起凝结就开始了。通过视觉监视凝结，并按秒来记录凝结时间。与Janson等人(Janson，T.L.，et al.，1984，Haemostasis 14440-444)相一致，重新脂质化的人类组织因子是全部凝结试验种类的有效抑制剂。在该体系中，对照血浆(血浆加抑制剂稀释剂)的凝结时间通常为8-10秒。测定适合每个抑制剂的凝结时间对抑制剂浓度数据以及PT为对照血浆两倍处的浓度的曲线。
APTT试验将抑制剂和血浆混合在一起并转移至上述ACL 300样品杯中。将Actin FS和CaCl2(Dade InternationalInc.，Miami，FL)分别加到试剂杯1和2中。精确体积的样品和活化剂(Actin FS)自动地转移至预平衡的转子池(37℃)中，并通过离心作用混合。活化2分钟之后，通过加入CaCl2开始凝结。监视凝结，并按PT方法中所描述的那样，计算数据。对照血浆的APTT通常为12-32秒，取决于试验中所使用的血浆种类。
代表性的PT和APTT试验结果如下面的表3所示。
表3
本发明的化合物可用作体外诊断试剂，用来抑制抽血试管中的凝结。其中作为抽血手段的具有真空的带塞试管的用途是众所周知的。Kasten，B.L.，“Specimen Collection”，Laboratory Test Handbook，2nd Ed.，Lexi-CompInc.，Cleveland，PP 16-17，Eds.Jacobs，D.S.et al，1990。这种真空试管可以不含抑制凝结的添加剂，在这种情况下，它们可用来从血液中分离出哺乳动物血清。它们也可以包含抑制凝结的添加剂，如肝素盐，柠檬酸盐，草酸盐，这种情况下，它们可用来从血液中分离出哺乳动物血浆。本发明的化合物可以加到收集血液的试管中，以抑制TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶和/或激肽释放酶并防止抽到试管中的哺乳动物的血液凝结。
当用于收集血液的试管中时，本发明的化合物可以作为混合物单独使用，或者与该领域中已知的其它抑制凝结的化合物结合起来使用。本发明化合物的用量应当为足以防止或抑制血液抽到试管中时发生凝结的量。这些化合物可以按与已知的凝结抑制化合物如肝素盐相同的方式引入试管中。液体常用已知的方法冻干。有代表性地，试管会含约2-10毫升哺乳动物血液，而所述化合物是按足以防止该数量血液凝结的量加入的。适宜的浓度为约10-1000nM。
这些化合物还抑制哺乳动物循环系统中栓塞和血栓的形成，因此可用于体内。已经表明，血栓栓塞病与哺乳动物对栓塞和血栓的形成的敏感度直接相关。例如，静脉血管中血栓的形成导致血栓性静脉炎，通常通过休息和给药抗凝血剂来治疗。可以通过本发明的抗凝血剂化合物治疗的其它疾病包括血栓性淋巴管炎，血栓性硬膜窦炎，血栓性心内膜炎，血栓性脉管炎和血栓性动脉炎。
接触医学处理方法如血管成形术和溶解血栓疗法的哺乳动物特别容易形成血栓。本发明的化合物可用来抑制血管成形术之后的血栓形成。它们也可以与抗血栓剂，如组织血纤维蛋白溶酶原活化剂及其衍生物(US4,752,603；4,766,075；4,777,043；EP 199 574；EP 238 304；EP 228 862；EP 297 860；PCT WO89/04368；PCT WO89/00197)，链激酶及其衍生物或尿激酶及其衍生物结合起来使用，以防止溶解血栓疗法之后动脉的再次堵塞。当与上述溶血栓剂组合使用时，本发明的化合物可以先于、同时或后于抗血栓剂给药。
接受肾透析，血充氧，心导管插入法及类似医学处理方法的哺乳动物，以及安装某种假体装置的哺乳动物也容易患有血栓栓塞病。因已知或未知原因引起的生理性疾病同样可以导致血栓栓塞症。
因此，本文所描述的化合物可用于治疗哺乳动物的血栓栓塞病。本文所描述的化合物还可用作抗凝血疗法附属剂，如与阿司匹林，肝素或苄丙酮羟香豆素以及其它抗凝血剂组合起来使用。上述各种凝血疾病是用本发明的化合物以防止该疾病导致的出血的方式来治疗的。将本文所述的化合物应用于这些以及有关的疾病，这对本领域的技术人员来说是显而易见的。
一般地，本发明的化合物也可以用作中间体或凝结丝氨酸蛋白酶抑制剂的前体，因此，除了可以治疗心血管疾病之外，这些化合物还可用于治疗新陈代谢疾病或需要抑制凝血的任何疾病。
通常，在本发明的方法中所使用的抑制剂是这样配制的，即将该抑制剂在环境温度和适当的pH下，并以所需的纯度与生理上可接受的载体混合，所述的载体即那些在使用剂量和浓度下对收受者无毒的载体。制剂的pH主要取决于特定的用途和化合物的浓度，但无论何处均优选约3至约8。适宜的实例是pH为5的乙酸盐缓冲液制剂。
这里所使用的抑制化合物优选为无菌的。该化合物平常以固体组合物储存，尽管合用的是冻干制剂或水溶液。
本发明的组合物将按时下流行的优秀医学实践进行配制、下药和给药。本文所考虑的因素包括要治疗的特定疾病，要治疗的特定哺乳动物，单个病人的临床状态，病因，药剂的递送部位，给药方法，给药日程，以及医疗从业者已知的其它因素。要给药的化合物的″治疗有效量″受这些考虑支配，并且为预防、改善或治疗以凝结因子介导的疾病所需的最小量。这种量优选低于对宿主有毒或致使宿主显著地更易出血的量。
作为一般性的建议，每剂量不经胃肠给药的抑制剂的最初药学有效量为每天约0.01-100mg/kg，优选约0.1-20mg/kg病人体重，所使用的化合物的一般最初范围为0.3-15mg/kg/天。
本发明的化合物可按任何适宜的方式给药，包括口服，局部给药，经皮给药，不经胃肠给药，皮下给药，腹膜内给药，肺内给药和鼻内给药，而且如果局部免疫抑制治疗需要，则还包括内伤处给药(包括灌注或相反在移植前使移植物接触该抑制剂)。不经胃肠的灌注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。
参照下面的实施例，可以更全面地理解本发明。但是，不能将所述的实施例当作是对本发明的范围的限制。所引用的所有专利和文献全部引作本发明的参考文献。
实施例本发明的化合物一般可以通过如下所示的反应方案来制备。除了所示的特定产物外，这些化合物均可按上面所描述的方法用相应的原料来制备。例如，其他的化合物可以用不同的起始苯乙烯化合物来制备，所述的苯乙烯化合物容易由商业上得到的起始化合物和本领域中熟知的反应来制备。 实施例1 将4-卞氧基-3-甲氧基-苯乙烯(10g，42mmole)溶解于二氯甲烷(400ml)。加入固体碳酸氢钾(11g，110mmole)，并将反应物冷却至0℃。加入间氯过苯甲酸(12g，约42mmole)，将反应物温热至室温并搅拌16小时。通过薄层色谱监测反应。加入额外量的间氯过苯甲酸(4g)，并且再搅拌4小时，以完全消耗掉初始材料。将反应物倒入分液漏斗，并先用水洗涤，然后用碳酸氢钠、最后用NaOH洗涤。分出有机层并用无水硫酸钠干燥。过滤该溶液，并在真空中脱出溶剂，得到约11g的粗产物。
然后将该粗产物溶解于乙腈(60ml)，并加入高氯酸锂(8.5g，80mmole)。搅拌该悬浮液5分钟，这时反应物变成均相的。加入4-氨基-卞腈(9.5g，80mmole)，并将反应物在60℃加热12小时。薄层色谱表明在低Rf处出现了新产物。在真空中脱出溶剂，溶解于乙酸乙酯中的剩余物用水洗涤并用用无水硫酸钠干燥。然后用快速色谱(己烷∶乙酸乙酯1∶1)处理该粗产物，得到6克4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-卞腈A。1HNMR(CDCl3)7.3-7.45，(m，7H)，6.8(m，3H)，6.5(d，2H)，5.18(s，2H)，4.42(m，1H)，3.95(dd，1H)，3.85(s，3H)，3.8(dd，1H). 将4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-卞腈A(470mg，1.25mmole)，邻苯二甲酰亚胺(1.47g，10mmole)和三苯基磷(787mg，3mmole)加到40ml的四氢呋喃中。搅拌该混合物10分钟，然后冷却至0℃。然后慢慢地加入偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD，0.6ml，3mmole)。搅拌反应物1小时。TLC(薄层色谱)显示有新产物产生。在真空中脱出溶剂，并将剩余物溶解于50ml的乙酸乙酯中。该溶液用2N的氢氧化钠洗涤3次并用水洗涤2次。分出有机层，用无水硫酸钠干燥并过滤。在真空中脱出溶剂，剩余物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)处理，得到478 mg的4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈B(76％产率)产物。1HNMR(CDCl3)7.85(m，2H，)，7.75(m，2H)，7.23-7.45(m，9H)，6.9(m，3H)，6.42(d，2H)，5.45(d，1H)，5.15(s，2H)，4.62(m，1H)，4.0(m，2H)，3.83(s，3H)。 然后将4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈B溶解于乙醇(60ml)，并加入水合肼(2 g)。将该溶液在60-70℃加热1.5小时。TLC表明反应完成了。过滤该悬浮液以除去副产物，并在真空中脱出乙醇。剩余物经硅胶快速色谱(乙酸乙酯2N的NH3甲醇溶液，9∶1)，得到372mg的4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈D(100％)。1HNMR(CDCl3)7.3-7.45(m，7H)，6.32(m，3H)，6.5(d，2H)，5.52(d，1H)，4.3(q，1H)，3.83(s，3H)，3.08(m，2H)，1.95(s，2H)。 将4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈D(300mg，0.8mmole)溶解于乙醇(3ml)，并加入盐酸羟胺(350mg，5mmole)和三乙胺(1ml，5.7mmole)。将反应物在65-70℃加热2小时。剩余物溶解于乙酸乙酯和水中。分出有机层，用无水硫酸钠干燥并过滤。在真空中脱出溶剂，并替换成带有0.5ml乙酸的4ml甲醇。加入阮内镍(约300ul于氢氧化钠中的混悬体，Aldrich)，并将反应物置于氢气氛下。剧烈搅拌反应物3小时，滤出催化剂，并在真空中脱出溶剂。用硅胶快速色谱(乙酸乙酯∶丙酮∶甲醇∶氨，2∶1∶1∶0.05)纯化粗产物，得到160mg的4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒E。MS(M+H)＝391。 将4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒E(20mg，0.03mmole)溶解于乙腈(2m1)，所述乙腈含三乙胺(17ul，0.12mmole)和水(0.3ml)。向其中加入所需的具有式ClSO2R的磺酰氯(0.03mmole)，并搅拌反应物4小时。在真空中脱出溶剂，并通过逆相制备HPLC(含有0.1％三氟乙酸的梯度乙腈/水)纯化该化合物，在冻干的基础上得到最终产物。
实施例2a-2dd用类似的方法制备本发明的其它化合物，这些化合物包括a)4-[苯磺酰氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝531，b)N-{4-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基(carbamimidoyl)-苯基氨基)-乙基氨磺酰基]-苯基}-乙酰胺MS(M+H)＝588，c)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-硝基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝576，d)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-氟-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝549，e)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-氟-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝565，f)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3-硝基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝576，g)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，5-二氯-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝599，h)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2-溴-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝609，611，i)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-溴-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝609，j)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-异丙基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝573，k)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-苯基甲磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝545，1)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-羧基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝575，m)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3-羧基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝575，n)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，4-二硝基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝621，o)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，3，5，6-四甲基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝587，p)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3，5-二氯-2-羟基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝615，q)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3，4-二甲氧基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝591，r)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(噻吩-2-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝537，s)N-{5-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基氨磺酰基]-4-甲基-噻唑-2-基}-乙酰胺MS(M+H)＝595，t)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(萘-2-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝581，u)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(萘-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝581，v)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2-苯基-乙烯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝557，w)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝599，x)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，3，4，5，6-五氟-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝521，y)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝469，z)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-乙磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝483，aa)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-丙磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝497，bb)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-丁磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒MS(M+H)＝511，cc)[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基氨磺酰基]-乙酸乙酯MS(M+H)＝541，dd)[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基氨磺酰基]-乙酸.
实施例3 将4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈B(1.8g)溶解于乙醇(50ml)，乙酸(3ml)，甲醇(5ml)和乙酸乙酯(5ml)的混合物。将该溶液加到含10％Pd/C(500mg)的Parr烧瓶中，并在35psi下氢化16小时。通过塞力特硅藻土过滤除去催化剂，并在真空中脱出溶剂，得到1g的4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-1-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(68％)产物。
将4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-1-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(1g，2.43mmole)溶解于四氢呋喃(30ml)，并加入三苯基磷(1.27g，4.84mmole)，(S)-2-氯-1-苯基-乙醇(1.13g，7.26mmole)。将反应混合物冷却至0℃，并加入偶氮二羧酸二乙酯(0.842g，4.8mmole)。将反应温度达到室温并搅拌2.5小时。在真空中脱出溶剂，并将剩余物溶解于乙酸乙酯中，用0.5N的氢氧化钠洗涤若干次，用盐水洗涤1次并用无水硫酸钠干燥。粗产物通过硅胶快速色谱(30％的乙酸乙酯己烷溶液)纯化，得到1.1g的4-[1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(82％)。 将4-[1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(0.5g)溶解于乙醇(40ml)，并加入水合肼(0.14g)。将反应物在65℃下加热2小时。脱出溶剂并代之以乙酸乙酯。该溶液用水洗涤2次并用盐水洗涤1次。该溶液用无水硫酸钠干燥，并在真空中脱出溶剂，得到318mg所需的胺4-{2-氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-卞腈(83％)。 将4-{2-氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-卞腈(0.1g，0.237mmole)溶解于二氯甲烷(6ml)，并加入三乙胺(34ul，0.3mmole)。加入苯磺酰氯(46ul，0.26mmole)并搅拌反应物90分钟。反应混合物用二氯甲烷稀释，并用饱和的碳酸氢钠洗涤1次、用水洗涤1次。该溶液用硫酸钠干燥并于真空中脱出溶剂。产物经硅胶纯化，得到100mg所需的产物N-[2-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-苯磺酰胺。 将N-[2-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-苯磺酰胺(100mg 0.18mmole)溶解于乙醇(3ml)，并加入盐酸羟胺(62mg，0.89mmole)。向其中加入三乙胺(90mg，0.89mmole)，稍后加入碳酸钾(62mg)。将反应物在80℃下加热48小时。冷却反应物并于真空中脱出溶剂。溶解于乙酸乙酯中的剩余物用水洗涤2次并用盐水洗涤1次。该溶液用硫酸钠干燥并脱出溶剂。将粗中间体溶解于甲醇(4ml)并加入几滴乙酸。加入大约50-100mg混悬 于氢氧化钠中的阮内镍(Aldrich)，并将反应物置于氢气氛下。剧烈搅拌该悬浮液8小时，滤出催化剂并于真空中脱出溶剂。粗产物通过逆相色谱纯化，得到4-{2-苯磺酰氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-苯甲脒(32mg)。MS(M+H)＝579。
实施例4类似于实施例2，制备4-{2丙磺酰氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-苯甲脒，只是在与4-{2-氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-卞腈的反应中用苯磺酰氯代替丙磺酰氯。MS(M+H)＝545。
实施例5 将4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基苯甲醛(12.2g 42mmole)和4-氨基卞腈(5g，42mmole)溶解于甲醇(165ml)并搅拌2小时，然后在60℃下加热30分钟。将反应物冷却至室温并加入苄基异腈(5g.42mmole)。将反应物冷却至0℃并在5分钟内滴加三氟化硼醚合物(16ml，126mmole)。在0℃下搅拌反应物20分钟，然后使之达到室温并于环境温度下搅拌2小时。加水(4ml)并使混合物于室温下搅拌过夜。第二天早晨黄色沉淀清晰可见，将所述的固体滤出。该固体用甲醇洗涤并空气干燥，得到8克所需的产物。在真空中中从滤出液中脱出溶剂，并代之以乙酸乙酯。该溶液用水和饱和的碳酸氢钠洗涤，用无水硫酸镁干燥，并脱出溶剂。粗产物经快速色谱(己烷乙酸乙酯，1∶1)处理，得到另外7g的所需产物(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯。1HNMR(CDCl3)7.68(s，1H)，7.4(m，7H)，7.0(s，1H)，6.61(d，2H)，6.2(s，1H)，5.2(s，2H)，3.87(s，3H)，3.75(s，3H)。 将(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯(4.5g，10mmole)溶解于二甲氧基乙烷，并加入硼氢化锂(0.210g，10mmole)。将反应物加热回流3小时并冷却至室温。将该反应用含乙酸的水淬灭，并用乙酸乙酯稀释。转移至分液漏斗之后，用水洗涤有机层若干次。该有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并脱出溶剂。然后用快速色谱处理所得的粗产物，得到3.1g的4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-卞腈(74％)。1HNMR(CDCl3)7.77(s，1H)，7.3-7.5(m，7H)，7.15(s，1H)，6.42(d，2H)，5.4(bs，1H)，5.18(dd AB syst.，2H)，4.15(dd，1H)，3.83(s，3H)，3.79-3.86(dd，1H)。 将4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-卞腈(3.1g，7.4mmole)溶解于四氢呋喃(120ml)并加入三苯基磷(5.9g，22mmole)和邻苯二甲酰亚胺(5.4g，37mmole)。将反应物冷却至0℃并滴加偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD，4.6g)。使反应物达到室温并搅拌过夜。在真空中脱出溶剂，并代之以乙酸乙酯。该溶液用1N的NaOH洗涤若干次并用无水硫酸钠干燥。经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)处理，得到所需的产物，该产物中还存在一些DIAD。该固体用乙醇洗涤几次，得到3.2g所需的邻苯二甲酰亚胺4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(3.2g)。1HNMR(CDCl3)7.83(m，2H)，7.75(m，2H)，7.37(m，7H)，6.91(s，1H)，6.41(d，2H)，6.17(d，1H)，5.65(m，1H)，5.18(s，2H)，4.27(m，2H)，3.61(s，3H)。 将4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(2.7g，5mmole)溶解于乙醇(100ml)并加入水合肼(0.65ml，20mmole)。将反应物在60℃加热3小时，然后在室温下48小时。滤出沉淀的固体，剩余物经快速色谱处理，得到4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(1.5g)。1HNMR(CDCl3)7.75(s，1H)，7.3-7.5(m，7H)，7.05(s，1H)，6.45(d，2H)，5.80(bs，1H)，5.32(m，1H)，5.19(s，2H)，3.81(s，3H)，3.25(dd，1H)，3.0(dd，1H)，1.65(bs，2H)。 将4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(0.227g，0.66mmole)溶解于二氯甲烷(4ml)和三乙胺(0.14ml，1mmole)。将反应物冷却至0℃并加入1-丙磺酰氯(0.085ml，0.75mmole)。搅拌反应物20分钟，产物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)纯化，得到260mg所需的产物-丙烷-1-磺酸[2-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺。1HNMR(CDCl3)7.77(s，1H)，7.3-7.5(m，7H)，7.12(s，1H)，6.41(d，2H)，6.0(d，1H)，5.3(m，1H)，5.17(dd，A-B，2H)，4.75(t，1H)，3.85(s，3H)，3.65(m，1H)，3.5(m，1H)，3.04(m，2H)，1.83(m，2H)，1.05(t，3H)。 将丙烷-1-磺酸[2-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺(0.250g)溶解于乙醇(10ml)并加入Pt/C(5％)。将反应物置于氢气氛下并剧烈搅拌3小时。滤出催化剂，产物经色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶2)处理，得到133mg的丙烷-1-磺酸[2-(2-氨基-4-卞氧基-5-甲氧基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺。1HNMR(CDCl3)7.3-7.45(m，7H)，6.71(s，1H)，6.52(d，2H)，6.3(s，1H)，5.33(2，1H)，5.08(s，2H)，5.0(t，1H)，4.42(q，1H)，3.75(s，3H)，3.70(bs，2H)，3.45(t，2H)，2.97(m，2H)，1.80(m，2H)，1.03(t，3H)。 将丙烷-1-磺酸[2-(2-氨基-4-卞氧基-5-甲氧基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺(133mg，0.27mmole)溶解于二氯甲烷并加入三乙胺(0.05ml，0.35mmole)。将反应物冷却至0℃并滴加甲磺酰氯(0.023ml，0.3mmole)。将反应物搅拌2小时，并用快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)纯化产物。然后将产物溶解于乙醇中并加入盐酸羟胺(35mg，0.5mmole)。加入乙醇钠(48mg，0.7mmole)并加热反应物48小时。脱出乙醇并加水(4ml)。滤出固体并用水洗涤。然后将粗产物溶解于含有0.5ml乙酸的4ml甲醇中。加入阮内镍(约50 mg，在氢氧化钠中的混悬体，Aldrich)并将其置于氢气氛下。将反应物剧烈搅拌3小时，然后滤出催化剂。粗产物经逆相制备色谱处理，得到最终的产物4-[1-(4-卞氧基-2-甲磺酰氨基-5-甲氧基-苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒(12mg)MS(M+H)＝590。
实施例6a-6g用类似于实施例5的方法制备下列化合物a)4-[2-苯磺酰氨基-1-(2-苯磺酰氨基-4-卞氧基-5-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法同上，只是用苯磺酰氯代替丙磺酰氯和甲磺酰氯。MS(M+H)＝686。b)4-[2-苯磺酰氨基-1-(2-苯磺酰氨基-4-卞氧基-5-乙氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法同上，只是原料为3-乙氧基-4-卞氧基-6-硝基-苯甲醛。MS(M+H)＝700。c)4-[1-(4-卞氧基-5-乙氧基-2-甲磺酰氨基-苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法同上，只是原料为3-乙氧基-4-卞氧基-6-硝基-苯甲醛。MS(M+H)＝604。d)4-[1-(4，5-二乙氧基-2-甲磺酰氨基-苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法相同，只是原料为3，4-二乙氧基-6-硝基苯甲醛。MS(M+H)＝542。e){5-卞氧基-2-[1-(4-脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4-甲氧基-苯基氨磺酰基}-乙酸乙酯。方法相同，只是用氯磺酰基乙酸乙酯代替甲磺酰氯。MS(M+H)＝676。f){5-卞氧基-2-[1-(4-脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4-甲氧基-苯基氨磺酰基}-乙酸。将{5-卞氧基-2-[1-(4-脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4-甲氧基-苯基氨磺酰基}-乙酸乙酯(10mg)溶解于水(2ml)并加入四氢呋喃(2ml)和LiOH(3mg)。使之搅拌过夜。经逆相制备HPLC纯化，得到3mg产物。MS(M+H)＝648。g)4-[1-(3，4-二甲氧基-2-甲磺酰氨基苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒。该化合物用类似于上述的方法制备，只是用2-溴-3，4-二甲氧基苯甲醛大体4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基苯甲醛。MS(M+H)＝499。
实施例7a-7g化合物7a-7g通常制备如下。将化合物E(20mg，0.03mmole)溶解于乙腈(2ml)，该乙腈中含三乙胺(17ul，0.12mmole)和水(0.3ml)。向其中分别加入酰氯，氯甲酸烷基酯或异氰酸酯(0.03mmole)，并将反应物搅拌4小时。在真空中脱出溶剂，并通过逆相制备HPLC(乙腈/水，含有0.1％三氟乙酸)纯化该化合物，在冻干后得到最终产物。7aN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-2，2，2-三氟-乙酰胺，MS(M+H)＝487。7bN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-乙酰胺，MS(M+H)＝433。7cN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-丁酰胺，MS(M+H)＝461。7dN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-2-氯-乙酰胺，MS(M+H)＝467。7e[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-碳酸甲酯，MS(M+H)＝449。7f[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-碳酸异丁酯，MS(M+H)＝491。7g[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-碳酸2，2，2-三氯-乙基酯，MS(M+H)＝565。
实施例8 将如上所示的酸的甲酯(920mg 2.85mmole)悬浮于3/1的THF/水(40ml)中并冷却至0℃。该溶液用1N的LiOH(7.1ml，7.1mmole)处理，并搅拌过夜。将反应物用三氟乙酸酸化，直至pH＝4.0。在真空中脱出溶剂，粗产物经快速色谱(乙酸乙酯，含有0.5％乙酸)纯化，得到1g的羧酸。 将羰基二咪唑(131mg，0.8mmole)溶解于无水THF(1.6ml)，并滴加上面所制备的羧酸(251mg，0.8mmole)的THF(1.6ml)溶液。室温下搅拌反应物30分钟、回流30分钟，然后再次冷却至室温。加入正丙基磺酰胺(100mg)并搅拌10分钟。加入DBU(123mg)的THF(1.6ml)溶液。反应混合物酸化和萃取到乙酸乙酯中。脱出溶剂，并通过快速色谱(SiO2，乙酸乙酯)纯化粗产物，得到195mg上述的酰基磺酰胺。 将上面制备的腈(90mg，0.2mmole)溶解于乙醇(2.5ml)。加入二异丙基乙基胺(202mg，1.56mmole)，之后加入盐酸羟胺(83mg，1.2mmole)。将反应物在70℃加热21小时。将反应物冷却并在真空中脱出溶剂。将剩余物溶解于30％乙腈/水(4ml)中，并通过制备逆相色谱(水/乙腈梯度，有0.1％TFA)纯化，得到14mg如上所示的羟基脒。 将该羟基脒产物溶解于乙醇(2ml)和乙酸(8滴)中。加入阮内镍(约100mg)并在氢气氛下剧烈搅拌反应物2小时45分钟。通过塞力特硅藻土过滤出产物，并用含0.1％TFA的30％乙腈/水冲洗该塞力特硅藻土，然后用乙腈冲洗该塞力特硅藻土。在真空中脱出溶剂，粗产物经制备逆相色谱(水/乙腈梯度，含有0.1％TFA)纯化，得到所需的产物(6mg)。M+H＝435。
实施例9.对映体纯的6-烷基磺酰氨基磺酰胺的合成 将3-乙氧基-4-羟基苯甲醛(40g)加到二甲基甲酰胺(600mL)中，然后加入碳酸钾(40g，1.2当量)。加入碘乙烷(28.87mL，1.5当量)并将该溶液在60℃加热6小时。将得到的溶液冷却至室温并在减压下脱出溶剂。该溶液用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发，得到粗产物3，4-二乙氧基苯甲醛(49g，104％)。将该3，4-乙氧基苯甲醛(45g)溶解于乙醇(300mL)，并将溶液冷却至0℃。在单独的烧瓶中，将氢氧化钾(19.5g，1.5当量)加到乙醇(300mL)中，然后加入硝基甲烷(26g，1.5当量)，将溶液在室温下搅拌10分钟并冷却至0℃。将该溶液加到3，4-二乙氧基苯甲醛中并搅拌20分钟，然后倒入0℃的浓盐酸(200mL)中。减压脱出乙醇并用水(300mL)稀释该溶液，反应混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用硫酸镁干燥并脱出溶剂得到粗产物。该粗产物经乙酸乙酯(47g，87％)重结晶进行纯化。MS(M+H)＝238。 将1-硝基-2-(3，4-二乙氧基苯基)乙烯(16.64g)和4-氨基卞腈(9.12g，1.1当量)加到四氢呋喃(350mL)中，并冷却至0℃。慢慢加入二异丙基氨基锂(47.8mL，1.02当量)直至形成持久不变的紫色。加入一份锌(50g)，然后加入乙酸(35mL)。将该溶液加热至室温并搅拌2小时，然后加入乙酸(35mL)和锌(10g)。又过2小时之后，加入乙酸(25mL)并将反应混合物搅拌1小时。加入浓盐酸(15mL)并将该溶液再搅拌1小时。将该溶液通过塞力特硅藻土填料进行过滤并加水(250mL)。将溶液减压浓缩至300mL，并加到柠檬酸(0.5M，500mL)和乙酸乙酯/己烷(500mL)中。收集柠檬酸层并加入氢氧化铵直至溶液成碱性为止。该溶液用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，并用硫酸镁干燥合并后的有机层，减压蒸发，得到粗产物。将该粗产物用二氯甲烷稀释(350mL)稀释并冷却至0℃。加入碳酰氯(40.88mL 20％的甲苯溶液，1.1当量)，然后加入Hunigs碱(24.46mL，2当量)。搅拌该溶液10分钟并加水(200mL)。收集二氯甲烷，用硫酸镁干燥，并通过快速硅胶色谱(80％乙酸乙酯/20％己烷)纯化，得到白色的固体产物(9.76g，40％)。MS(M+H)＝352。 将4-[5-(3，4-二乙氧基苯基)-2-氧代-咪唑烷-1-基-卞腈(2.10g)加到四氢呋喃(200mL)中并冷却至-78℃。滴加正丁基锂(3.74mL，1当量)，并搅拌溶液10分钟。加入一份固体(S)-(+)-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酰氯(1.49g，1当量)并搅拌反应物1小时。将反应混合物温热至室温，并减压蒸发至50mL。该溶液用乙酸乙酯(300mL)稀释，用柠檬酸(0.5M)、水、盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。将该溶液在减压下蒸发并通过硅胶快速色谱(50％乙酸乙酯/50％己烷)纯化，得到产物4-{5-(3，4-二乙氧基苯基)-3-[2-(6-甲氧基萘-2-基)-丙酰基]-2-氧代-咪唑啉-1-基}-卞腈，其为非对映异构体(1.20g，71％)。将该产物加到甲醇(200mL)中，然后加入氢氧化锂(1mL 10％的水溶液)并搅拌15分钟。加入乙酸(10滴)，减压脱出甲醇，产物经硅胶快速色谱(80％乙酸乙酯/20％己烷)纯化，得到白色的固体产物(0.71g，95％)。[α]Na-55.0(c 2.20，丙酮)。MS(M+H)＝352。 将(R)-(-)-4-[5-(3，4-二乙氧基苯基)-2-氧代-咪唑烷-1-基-卞腈(0.710g)加到四氢呋喃(20mL)中并冷却至-78℃。滴加正丁基锂(1.27mL 1.6M的己烷溶液，1当量)并搅拌该溶液10分钟。加入1-丙基磺酰氯(0.275mL，1.2当量)并搅拌该溶液15分钟，然后加热至室温。加入乙酸(10滴)，减压脱出溶剂，产物经硅胶快速色谱(50％乙酸乙酯/50％己烷)纯化，得到产物(0.740g，80％)。该产物(0.300g)用二氯乙烷(10mL)稀释并冷却至0℃。滴加硝酸(0.137mL，5当量)并搅拌该溶液1小时。溶液用二氯乙烷(100mL)稀释，用水、饱和的碳酸氢钠洗涤，用硫酸镁干燥，并减压蒸发溶剂。该物质用甲醇(50mL)和乙酸(1mL)稀释，并加入铂(0.050g，5％，载于碳上)。将该溶液氢化1小时，通过塞力特硅藻土填料过滤，并减压蒸发溶剂。将该物质溶解于二氯甲烷(5mL)，并加入Hunigs碱(0.177mL，1.5当量)和氯磺酰基乙酸乙酯(0.189g，1.5当量)，然后搅拌该溶液2小时。该溶液通过直接硅胶快速色谱(50％乙酸乙酯/50％己烷)纯化，得到产物(0.160g)(R)-{2-[3-(4-氰基苯基)-2-氧代-1-(丙烷-1-磺酰基)-咪唑烷-4-基]-4，5-二乙氧基苯基氨磺酰基}-乙酸乙酯。MS(M+H)＝624。 将(R)-{2-[3-(4-氰基苯基)-2-氧代-1-(丙烷-1-磺酰基)-咪唑烷-4-基]-4，5-二乙氧基苯基氨磺酰基}-乙酸乙酯(0.160g)用乙醇(5mL)、然后用氢氧化锂(1mL 10％的水溶液，10当量)稀释，然后搅拌该溶液48小时。该溶液通过直接硅胶快速色谱(20％甲醇/80％二氯甲烷)纯化，得到产物。该产物用乙醇(1mL)稀释，并加入羟胺(0.035g，10当量)和Hunigs碱(0.088mL，10当量)，然后将溶液在60℃加热6小时。将反应混合物冷却至室温并搅拌12小时。加入乙醇(3mL)、乙酸(0.5mL)和阮内镍(0.025g)，并将该溶液氢化1小时。通过塞力特硅藻土填料过滤反应混合物，并减压脱出溶剂。产物经逆相制备色谱纯化，得到{2-[1-(4-脒基苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基苯基氨磺酰基}乙酸(52mg)。[α]Na-42.1(c1.01，甲醇)，MS(M+H)＝587。
实施例10.6-烷氧基取代的磺酰胺 将氨基乙腈(14.25g，92.5mmole)溶解于1，2-二氯乙烷(150ml)，并将反应物置于N2下。加入三乙胺(32.76g，324mmole)，并将反应物冷却至0℃。滴加丙烷-1-磺酰氯(13.19g，92.5mmole)的1，2-二氯乙烷(20ml)溶液，将反应物加热至室温并搅拌16小时。薄层色谱表明出现了Rf较高的新产物。在真空中脱出溶剂，粗产物经快速色谱(二氯甲烷∶乙酸乙酯，9∶1)处理，得到10.56g的丙烷-1-磺酸氰基甲基-酰胺。1HNMR(CDCl3)5.40(s，1H)，4.11(s，2H)，3.15(m，2H)，1.89(q，2H)，1.10(t，3H)。 3-乙氧基-4-羟基苯甲醛(Aldrich，100g，0.602mole)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(1L)，将反应物置于N2下。加入固体碳酸钾(103g，0.662moles)并将反应物搅拌10分钟。加入碘乙烷(175g，1.26moles)并将反应物在室温下搅拌16小时。该反应通过薄层色谱监测，所述的薄层色谱表明苯酚的耗尽以形成新产物。过滤反应混合物以除去碳酸钾，并于真空中脱出溶剂。将剩余物溶解于二氯甲烷并过滤。加入硅胶(200g)并于真空中脱出二氯甲烷。吸附于硅胶上的粗产物经快速色谱(己烷，100％，2L，然后乙酸乙酯∶己烷，1∶3，2L，然后乙酸乙酯∶己烷，1∶1)处理，得到109.36g的3，4-二乙氧基苯甲醛。1HNMR(CDCl3)9.83(s，1H)，7.41(m，2H)，6.96(d，1H)，4.17(m，4H)，1.50(t，3H)1.47(t，3H)。 将3，4-二乙氧基苯甲醛(31.45g，0.162moles)溶解于二氯甲烷(500ml)。加入3-氯过苯甲酸，并将反应物加热回流4小时。薄层色谱指示醛的消耗。将反应物冷却至室温，用二氯甲烷稀释，并用饱和的碳酸钾使该反应淬灭。分层并用二氯甲烷萃取水溶液。合并二氯甲烷萃取物，用水、盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中脱出溶剂，得到粗的油状产物。
将该粗的油状产物溶解于甲醇(300ml)并加入10％的KOH水溶液(60ml)。将反应物在室温下搅拌16小时。薄层色谱指示已经生成的中间体的消耗。真空中脱出甲醇，并用1.2NHCl酸化该水溶液。该溶液用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空中脱出溶剂。剩余物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，3∶1)处理，得到22.08g的3，4-二乙氧基-苯酚。1HNMR(CDCl3)6.56(d，1H)，6.25(d，1H)，6.10(dd，1H)，3.82(m，4H)，1.22(t，3H)，1.20(t，3H)。 将硝基苯(100ml)冷却至0℃并用HCl气体饱和。向该溶液加入3，4-二乙氧基苯酚(11.64g，64mmole)，丙烷-1-磺酸氰基甲基酰胺(10.36g，64mmole)和氯化锌(17.45g，128mmole)。在0℃下搅拌反应物1小时，然后使之温热至室温。继续搅拌2小时。薄层色谱指示3，4-二乙氧基苯酚的消耗。小心地加水(100ml)并将反应物在100℃加热1小时。将反应物冷却，并用二氯甲烷萃取。萃取物用水、盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空中脱出溶剂。剩余物经快速色谱(2.5-5％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液)。纯化过产物用醚研制，过滤并空气干燥，得到17.3g的丙烷-1-磺酸[2-(4，5-二乙氧基-2-羟基-苯基)-2-氧代-乙基]酰胺。1HNMR(CDCl3)11.86(s，1H)，6.93(s，1H)，6.46(s，1H)，5.26(t，1H)，4.55(d，2H)，4.14(q，2H)，4.03(q，2H)，3.05(m，2H)，1.90(m，2H)，1.45(m，6H)，1.07(t，3H)。 将丙烷-1-磺酸[2-(4，5-二乙氧基-2-羟基-苯基)-2-氧代-乙基]-酰胺(200mg，0.579mmole)溶解于四氢呋喃(5ml)，置于N2下，并冷却至0℃。滴加硼烷THF复合物(1.74ml，1.0M于THF中，1.74mmole)。将反应物搅拌15分钟并使之在2小时内温热至室温。薄层色谱指示原料的消耗和较低Rf的新产物的生成。反应用1.2N的HCl(2.5ml)水溶液淬灭，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。萃取物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空中脱出溶剂，得到190mg油状的粗产物。
将该油状的粗产物溶解于乙腈(5ml)。加入4-氨基卞腈(194mg，1.64mmole)和高氯酸锂(233mg，2.19mmole)。将反应物在90℃加热3.5小时，然后在室温下搅拌18小时。薄层色谱表明有较高Rf的新产物出现，对应于还原产物。将反应用水淬灭，并用乙酸乙酯萃取。该乙酸乙酯萃取物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空中脱出溶剂。剩余物经快速色谱(乙酸乙酯∶二氯甲烷，1∶9)处理，得到134mg的丙烷-1-磺酸[2-(4-氰基-苯基氨基)-2-(4，5-二乙氧基-2-羟基-苯基)-乙基]-酰胺。1HNMR(CDCl3)7.34(d，2H)，6.71(s，1H)，6.61(d，2H)，6.41(s，1H)，5.58(d，1H)，4.79(m，1H)，4.57(m，1H)，3.99(m，4H)，3.48(t，2H)，3.00(m，2H)，1.80(q，2H)，1.41(t，3H)，1.34(t，3H)，1.03(t，3H)。
将丙烷-1-磺酸[2-(4-氰基-苯基氨基)-2-(4，5-二乙氧基-2-羟基-苯基)-乙基]-酰胺(100mg，0.223mmole)溶解于二甲基甲酰胺(1.5ml)并用固体碳酸氢钾(22mg，0.223mmole)处理，然后用溴乙酸乙酯(0.37ml，0.223mmole)处理。反应物在N2下搅拌67小时。薄层色谱显示出现了Rf较高的新产物。将反应用水淬灭，并用乙酸乙酯萃取。该乙酸乙酯萃取物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空中脱出溶剂。剩余物经快速色谱(乙酸乙酯∶二氯甲烷，1∶9)，得到78mg的{2-[1-(4-氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸乙酯。1HNMR(CHCl3)7.35(d，2H)，6.81(s，1H)，6.57(d，2H)，6.43(s，1H)，4.81(t，1H)，4.68(ABq，2H)，4.56(t，1H)，4.26(q，2H)，4.05(q，2H)，3.95(m，2H)，3.54(t，2H)，2.98(m，2H)1.80(m，2H)1.42(t，3H)，1.32(t，6H)，1.02(t，3H)。MS(M+H)534。 将{2-[1-(氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸乙酯(76mg，0.142mmole)溶解于四氢呋喃(3ml)。加水(1ml)并将反应物冷却至0℃。将LiOH水溶液(1.0M，0.42ml，0.42mmol)加到反应物中。搅拌5分钟之后，使反应物温热至室温，并在室温下搅拌16小时。借助于分析高压液相色谱监视酯的消失。加入另外的LiOH(1.0M.0.14ml)。室温下搅拌反应物8小时。酯没有消耗完，则再加入新制备的LiOH(1.0M，0.14ml)并搅拌反应物24小时。67小时之后再加入LiOH(1.0M，0.28ml)，用分析的RP HPLC指示酯的消耗(总计1.0 M的LiOH＝0.98mL，6.9当量)。反应物用乙酸酸化，并使THF在N2气流下蒸发。该溶液通过加入乙腈澄清，然后通过制备逆相HPLC(含有0.1％三氟乙酸的梯度乙腈/水)纯化，经冷冻干燥后得到44mg的{2-[1-(氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸的单-TFA盐。1NMR(CD3OD)7.15(d，2H)，6.70(s，1H)，6.48(d，2H)，6.45(s，1H)，4.76(t，1H)，4.60(s，2H)，3.85(q，2H)，3.73(m，2H)，3.43(dd，1H)，3.26(dd，1H部分模糊，原因是CH3OH溶剂峰)，2.76(m，2H)，1.52(m，2H)，1.18(t，3H)，1.07(t，3H)，0.77(t，3H)。MS(M+H)506。 将{2-[1-(氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸单-TFA盐(44mg，0.071mmole)溶解于乙醇(1ml)，并用二异丙基乙基胺(0.89ml，0.515mmole)和固体盐酸羟胺(25mg，0.355mmole)处理。将反应物置于N2下并在60℃加热3小时。3小时之后，分析高压液相色谱显示反应还没有完成。将反应混合物冷却至室温并在室温下搅拌16小时，通过HPLC评价该转化过程。将反应混合物在60℃下加热8小时，在室温下搅拌16小时，在70℃下加热8小时并在室温下搅拌16小时。用HPLC指示原料的消耗。将反应物用乙酸酸化，加入阮内镍使反应物在约1atm的氢气球下氢化3小时。用分析HPLC指示羟基脒中间体的消耗。滤出阮内镍催化剂并在真空中脱出溶剂。剩余物经制备逆相HPLC(含有0.1％三氟乙酸的梯度乙腈/水)纯化，经冷冻干燥后得到5.6mg双-TFA盐形式的{2-[1-(脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸。MS(M+H)523。
实施例11.6-烷基磺酰基-烷基-氨基取代的酰基磺酰胺的合成
将4，5-二乙氧基-2-硝基苯甲醛(55.5g 206mmole)和4-氨基卞腈(23g，195mmole)溶解于甲醇(700ml)并在60℃下搅拌2小时。将反应物冷却至0℃并加入甲苯磺酰甲基异腈(45g，230mmole)。在10分钟内滴加三氟化硼醚合物(78ml，620mmole)。将反应物在0℃搅拌30分钟，并使之达到室温，然后在环境温度下搅拌1.5小时。加水(18ml)并使反应物在室温下搅拌过夜。第二天于真空中脱出甲醇并将剩余物溶解于乙酸乙酯中。有机层用水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。滤出硫酸钠并在真空中脱出乙酸乙酯。粗产物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，2∶1然后1∶1)处理，得到46g所需的产物(4-乙氧基-5-乙氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯。 将(4-乙氧基-5-乙氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯(11g，27.5mmole)溶解于乙酸乙酯(300m)并加到氮气氛下含5％Pt/C(3g)的烧瓶中。除去氮气代之以氢气(气瓶)，并剧烈搅拌反应物6小时。滤出催化剂并于真空中脱出溶剂。剩余物溶解于二氯甲烷(约300ml)中并加入吡啶(5.6ml，70mmole)。将反应物冷却至0℃并滴加甲磺酰氯(2.5ml，33mmole)。将反应物搅拌过夜。该溶液用水洗涤并在真空中脱出溶剂。粗产物经硅胶快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)处理，得到5g所需的产物(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺酰氨基)-苯基]-乙酸甲酯。
将(4-氰基-苯基氨基)-4，5-二乙氧基-2-甲磺酰氨基-苯基)-乙酸甲酯(5g，10.7mmole)产物溶解于干燥的DMF(100ml)并加入碳酸铯(7.25g，22mmole)和碘甲烷(1ml，16mmole)。将反应物在室温下搅拌3小时并于真空中脱出溶剂。剩余物溶解于乙酸乙酯中，用1N的盐酸酸化，并用水洗涤有机层1次。产物用无水硫酸钠干燥并于真空中脱出溶剂。剩余物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)处理，得到2.6g所需的产物(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺酰基-甲基-氨基)-苯基]-乙酸甲酯。 将上面得到的(4-氰基-苯基氨基)-4，5-二乙氧基-2-甲磺酰基-甲基-氨基-苯基)-乙酸甲酯(2.6g，5mmole)溶解于甲醇。加入1N的LiOH(25ml)并将反应物在室温下搅拌5小时。真空下脱出甲醇并用1N的盐酸使反应物酸化。将产物萃取于乙酸乙酯中并用水洗涤。快速色谱(含有5％乙酸的乙酸乙酯)给出1.9g所需的酸(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺酰基-甲基-氨基)-苯基]-乙酸。
将上面得到的(4-氰基-苯基氨基)-4，5-二乙氧基-2-甲磺酰基-甲基-氨基-苯基)-乙酸(350mg，0.75mmole)与羰基二咪唑(610mg，3.77mmole)在干燥的THF(6ml)中化合。将反应物在60℃加热1小时并冷却至室温。向该溶液加入苯磺酰胺(650mg，4.14mmole)和DBU(5mmole)在5ml THF中的溶液。搅拌反应物3小时并在真空中脱出THF。将剩余物溶解于乙酸乙酯中并用1N的盐酸酸化。分出的有机层用水洗涤并用无水硫酸钠干燥。粗产物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1；然后为含有5％乙酸的乙酸乙酯)纯化，得到302mg所需的产物N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺酰基-甲基-氨基)-苯基]-乙酰基}苯磺酰胺。 将上面得到的N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺酰基-甲基-氨基)-苯基]-乙酰基}苯磺酰胺(126mg，0.21mmole)溶解于乙醇(1.8ml)并加热至60℃。加入二异丙基乙基胺(DIPEA-260ul，1.5mmole)，其后加入盐酸羟胺(74mg，1.04mmole)。将反应物于60℃在氮气氛下搅拌6小时。然后使反应物冷却至室温。用甲醇(5ml)和乙酸(2ml)稀释该溶液，并加入阮内镍RaneyNickel 2800(约50mg)混悬体。然后将反应物在氢气氛下剧烈搅拌1小时。滤出催化剂并除去溶剂。粗产物经制备逆相HPLC纯化，用水-乙腈(含有0.1％TFA)梯度洗脱剂，得到40mg所需的4-{2-苯磺酰氨基-1-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺酰基-甲基-氨基)-苯基]-2-氧代-乙基氨基}苯甲酰胺的三氟乙酸盐。MS(M+H)＝604.
实施例12 将4-异丙氧基-5-乙氧基苯甲醛(10.6g 50mmole)和4-氨基卞腈(5.9g，50mmole)溶解于甲醇(150ml)，并于60℃搅拌1.6小时。使反应物冷却至0℃并加入甲苯磺酰甲基异腈(9.75g.50mmole)。在10分钟内滴加三氟化硼醚合物(19ml，150mmole)。将反应物在0℃搅拌30分钟，使之达到室温并在环境温度下搅拌1.5小时。加水(4.5ml)并在室温下搅拌该混合物2天。在真空中脱出甲醇，并将剩余物溶解于乙酸乙酯中。有机层用水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。滤出硫酸钠并于真空中脱出乙酸乙酯。粗产物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)处理，得到12.5g所需的产物(4-异丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯。
在THF(约150ml)中，用1N的LiOH(约50ml)处理上面得到的产物(4-异丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯(6g，16.3mmole)。将反应物在室温下搅拌6小时，并用1N的盐酸酸化。真空脱出THF，并将产物萃取于乙酸乙酯中。粗产物经逆相色谱(乙酸乙酯，3％乙酸)纯化。得到4.85g所需的酸(4-异丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸。 将上面得到的(4-异丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸(200mg，0.57mmole)与羰基二咪唑(200mg，1.2mmole)在干燥的THF(4ml)中混合。将反应物在室温下搅拌1小时。向该溶液加入相应的烷基或芳基磺酰胺(2.2mmole)与DBU(2.2mmole)在3ml THF中的溶液。将反应物搅拌过夜，并在真空中脱出THF。剩余物溶解于乙酸乙酯中，并用乙酸酸化。分出的有机层用水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。粗产物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，1∶2)纯化，得到所需的产物N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4-异丙氧基-5-乙氧基-苯基]-乙酰基}(烷基或芳基)磺酰胺。
将上面得到的N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4-异丙氧基-5-乙氧基-苯基]-乙酰基}(烷基或芳基)磺酰胺(约0.24mmole)溶解于乙醇(1-3ml)并加热至60℃。加入二异丙基乙基胺(DIPEA-260ul，1.5mmole，6当量)，其后加入盐酸羟胺(84mg，1.25mmole，5当量)。将反应物于60℃和氮气氛下搅拌约6小时。然后使反应物冷却至室温。用甲醇(5ml)和乙酸(2ml)稀释该溶液，并加入阮内镍Raney Nickel2800(约50mg)混悬体。然后将反应物在氢气氛下剧烈搅拌1-6小时。滤出催化剂并除去溶剂。粗产物经以水-乙腈(0.1％TFA)为洗脱剂的制备逆相HPLC纯化，或经快速色谱(乙酸乙酯∶丙酮∶水∶乙酸，6∶2∶1∶1)纯化，得到所需的4-{2-(烷基或芳基)磺酰氨基-1-[4-异丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲酰胺的三氟乙酸或乙酸盐。
用类似的方法制备下列具有不同R1基团的化合物R1＝乙基4-{2-乙基磺酰氨基-1-[4-异丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝463。
R1＝正丙基4-{2-丙基磺酰氨基-1-[4-异丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝477。
R1＝正丁基4-{2-丁基磺酰氨基-1-[4-异丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝491。
R1＝CH2CH2CO2Me3-[(4-脒基-苯基氨基)-(3-乙氧基-4-异丙氧基-苯基)-乙酰基氨磺酰基]-丙酸甲酯，MS(M+H)＝521。
R1＝苯基4-{2-苯磺酰氨基-1-[4-异丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝511。
实施例13.氨基苯甲酰胺环被取代的酰基磺酰胺 将2-羟基-4-硝基-卞腈(11.2g，68mmole)溶解于DMF(200ml)。加入碳酸钾(11g.80 mmole)和溴化苄(9ml，75mmole)。将反应物在室温下搅拌过夜。真空脱出DMF并将剩余物溶解于乙酸乙酯和水中。分出的有机层用1N的NaOH洗涤，然后用水洗涤，并通过硫酸钠干燥。将粗产物(5g)溶解于乙酸乙酯(75ml)并加到含5％Pt/C(500mg)的烧瓶中。将反应物置于氢气氛下(气瓶)并剧烈搅拌几小时，直至反应完成为止(TLC)。滤出催化剂并除去溶剂。产物经快速色谱纯化，得到4.12g的4-氨基-2-卞氧基卞腈。 将4，5-二乙氧基苯甲醛(3.6g，17.8mmole)和4-氨基-2-卞氧基卞腈(3.7g，17.8mmole)溶解于甲醇(40ml)并搅拌2小时。加入甲苯磺酰甲基异腈(3.48g.17.8mmole)。将反应物冷却至0℃并滴加三氟化硼醚合物(6.7ml，54mmole)。将反应物在0℃搅拌30分钟，使之达到室温并在环境温度下搅拌3.5小时。加水(1.6ml)并在室温下搅拌该混合物2天。真空脱出甲醇并将剩余物溶解于乙酸乙酯中。有机层用水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。滤出硫酸钠并在真空中脱出乙酸乙酯。粗产物经快速色谱(己烷∶乙酸乙酯，4∶1)处理，得到4.2g所需的产物(3-卞氧基-4-氰基-苯基氨基)-3，4-二乙氧基-苯基)-乙酸甲酯。
在水(50ml)、甲醇(100m)和THF(50ml)中，用LiOH(1.96g)处理上面得到的产物。将反应物在室温下搅拌3小时并用乙酸酸化。在真空中脱出溶剂并将产物萃取于乙酸乙酯中。粗产物经逆相色谱(乙酸乙酯，3％乙酸)纯化，得到5g所需的酸产物(3-卞氧基-4-氰基-苯基氨基)-3，4-二乙氧基-苯基)-乙酸。 将(3-卞氧基-4-氰基-苯基氨基)-3，4-二乙氧基-苯基)-乙酸(750mg，1.68mmole)溶解于干燥的THF(3ml)并加入羰基二咪唑(CDI-545mg，3.36mmole)。将反应物在40℃加热1小时，然后冷却至室温。向此中加入苯磺酰胺(1.05g，6.7mmole)和DBU(1.02g 6.72mmole)的THF(3ml)溶液。将反应物搅拌过夜，然后加入1N的盐酸。在真空中脱出THF，产物经快速色谱(乙酸乙酯，2％乙酸)纯化得到所需的产物。将该产物(215mg)溶解于含有乙酸(1滴)的乙醇(5ml)并加入5％Pd/C(100mg)。将反应物置于氢气氛下剧烈搅拌，直到反应完成为止。滤出催化剂，然后真空脱出溶剂。粗产物经快速色谱纯化，得到150mg所需的产物N-[(3-羟基-4-氰基-苯基氨基)-(3，4-二乙氧基-苯基-乙酰基)苯磺酰胺。
将上面得到的N-[(3-羟基-4-氰基-苯基氨基)-(3，4-二乙氧基-苯基-乙酰基)苯磺酰胺(75mg，0.15mmole)溶解于乙醇(2ml)并加热至60℃。加入二异丙基乙基胺(DIPEA-185ul，1mmole)，其后加入盐酸羟胺(53mg，0.75mmole)。将反应物于60℃和氮气氛下搅拌约6小时。然后使反应物冷却至室温过夜。用乙酸(1ml)和甲醇(1ml)稀释该溶液。加入阮内镍RaneyNickel 2800混悬体(约50mg)。然后在氢气氛下剧烈搅拌反应物0.5小时。滤出催化剂并除去溶剂。粗产物经制备逆相HPLC纯化，以水-乙腈(0.1％TFA)为洗脱剂，得到所需的脒产物4-[2-苯磺酰氨基-1-(3，4-二乙氧基-苯基)-2-氧代-乙基氨基]-2-羟基苯甲脒。MS(M+H)＝513。
用类似的方法，可以由2-氯-4-硝基-卞腈和2-溴-4-硝基-卞腈制备相应的含卤素的化合物。
实施例14.组织因子/因子VIIa对抗试验可用下述法测定本发明的样品化合物的抑制常数(Ki)。
材料试验缓冲液100mM Hepes pH7.8，140mM NaCl，0.1％PEG-8000，0.02％Tween-80，5mM CaCl2凝结因子重组人类因子VIIa(NB#25942-16)辅因子可溶解的组织因子(1-219)基质Chromozym-tPA(Boehringer Mannheim，Cat.#1093 037)在H2O中以20mM重组。用前于含有CaCl2的试验缓冲液中稀释至4mM。
样品在试验缓冲液中(乏CaCl2)，将样品稀释至3％DMSO。
方法1.在含有CaCl2的试验缓冲液中，制备2μg/mL(90nM)组织因子和1.5μg/mL(30nM)因子VIIa的溶液。
2.在室温下培养15分钟。
3.每孔加入50μL样品。
4.向每孔中加入50μL组织因子/因子VIIa的溶液。
5.在室温和温和的搅拌下培养15分钟。
6.每孔加入50μL基质。
7.搅拌多孔板20-25秒。
8.室温下，每10秒监测一次在405nM处的吸光度，共监测5分钟。
9.计算超过10个点的Vmax。实施例15.因子Xa、凝血酶和血浆激肽释放酶试验可用这些方法测定本发明的样品化合物的抑制常数(Ki)。材料试验缓冲液100mM Hepes pH7.8，140mM NaCl，0.1％PEG-8000，0.02％Tween-80。
凝结因子人类因子Xa、凝血酶或血浆激肽释放酶(HematologicTechnologies)在试验缓冲液中稀释至0.45μg/mL(9.8nM)。
基质S-2222，S2366或S2302(见下面-Chromogenix Inc.)以5mM在H2O中重组。使用前于试验缓冲液中稀释至1.5mM。
样品在试验缓冲液中将样品稀释至3％DMSO。方法1.每孔加入50μL样品。
2.向每孔加入50μL适当稀释的凝结因子。
3.在室温和温和的搅拌下培养5分钟。
4.向每孔加入50μL适当稀释的基质。
5.搅拌多孔板20-25秒。
6.室温下，每10秒监测一次在405nM处的吸光度，共监测5分钟。
7.计算超过10个点的Vmax。
试验-酶、基质和最终浓度
权利要求
1.具有下面结构的化合物及其酸加成盐、碱加成盐和前药 其中A和B独立地为CH，CR3或N；X为C＝O或(CR4aR4b)m其中m＝1或2；Y为S(O)n-R1其中n＝1或2，S(O)n-NR2R2其中n＝1或2，S(O)n-OR2其中n＝1或2，C(O)R1，C(S)R1，C(O)-OR1，C(O)-NR2R2；N1和N2为氮原子；Q和R1独立地为(1)任选取代的具有1至约10个碳原子的烷基；(2)任选取代的芳基烷基，其中包含具有6至约10个环碳原子的芳基部分，该芳基部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(3)任选取代的杂芳基烷基，其中包含具有5至约10个环原子的杂芳基部分，该杂芳基部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(4)任选取代的碳环烷基，其中包含具有3至约10个环碳原子的碳环部分，该碳环部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(5)任选取代的杂环烷基，其中包含具有3至约10个环原子的杂环基部分，该杂环部分与含有1至约10个碳原子的烷基部分相连；(6)任选取代的具有2至约10个碳原子的链烯基；(7)任选取代的芳基链烯基，其中包含具有5至约10个环原子的芳基部分，该芳基部分与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(8)任选取代的杂芳基链烯基，其中包含具有5至约10个环原子的杂芳基部分，该杂芳基部分与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(9)任选取代的碳环链烯基，其中包含具有3至约10个环碳原子的碳环部分，该碳环部分与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(10)任选取代的杂环链烯基，其中包含具有3至约10个环原子的杂环部分，该杂环与含有2至约10个碳原子的链烯基部分相连；(11)任选取代的具有6至约10个环碳原子的芳基；(12)任选取代的杂芳基，其具有5至约10个选自碳原子和杂原子的环原子，其中所述的杂原子为氮、氧或硫；(13)任选取代的具有3至约10环碳原子的碳环基；(14)任选取代的杂环基，其具有3至约10个选自碳原子和杂原子的环原子，其中所述的杂原子为氮、氧或硫；每个R2独立地为H，烷基，取代烷基，C(O)R7或C(NH)R7，或者N1R2和N2R2一起形成基团N1-CO-N2；R3为H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤素或OH；R4a和R5独立地为选自下列基团之一H，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烷氧基烷基，未取代或取代的卤烷基，未取代或取代的芳基，烷基-OR7，烷基-NR7R8，烷基-OC(O)R7，烷基-C(O)OR7，烷基-C(O)R7，OC(O)R7，C(O)OR7，C(O)R7，以及其中的烷基、R7或R8被1-3个F、Cl、Br、I取代的基团，OR7，SR7，NR7R8，OC(OR7)，C(O)OR7，C(O)R7，C(O)NR7R8，NHC(NH)NH2，PO3，未取代或取代的吲哚基或者未取代或取代的咪唑基；R4b为H，烷基或取代烷基；R6选自H，C1-C6烷基，C1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，C1-C6卤代烷基，卤素，氰基，OR7，SR7，NR7R8，OC(O)OR7，C(O)R7和OC(O)R7；R7和R8独立地为H或C1-C6烷基。
2.权利要求1的化合物，其中Q为苯基，该苯基任选地被1-5个，优选2-4个，更优选2-3取代基所取代，所述的取代基选自卤素，硝基，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，OC1-C6烷基-NR7R8，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，OC1-C6烷基-C(O)NR7R8，OC1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6卤代烷基，O-芳基烷基(例如苯甲氧基)，C(O)OR7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7，NHC(O)NR7R8，NR7S(O)nR1，NR7S(O)nR7，S(O)nR7，S(O)nNR7，其中R7和R8独立地为H或C1-C6烷基。
3.权利要求1-2中任一项的化合物，其中Q具有如下的结构 其中R9为H，C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基，C1-C6烷氧基，羟基，NR7R8，SR7或OR7，这里R7和R8独立地为H或未取代或取代的C1-C6烷基；R10，R11和Z2每个均独立地选自H，卤素，硝基，氰基，C1-C6烷基，C6-C10芳基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-C(O)R7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-C(O)R7，O-C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6卤代烷基，OR12，C1-C6烷基-R12，O-C1-C6烷基-R12，C(O)OR7，C(O)OR12，C(O)NR7R8，C(O)NR7R8，NR7C(O)R7，NR7C(O)R12，NR7C(O)-NR7R8，NR7C(O)OR7，NR7C(O)OR12，NR7S(O)n-R1，NR7S(O)n-R7和NR7S(O)n-R12，这里R7和R8独立地为H或未取代或取代的C1-C6烷基，R12为定义同上的未取代或取代的C6-C10芳基或杂环基和n为1或2；Z1为H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤素或硝基。
4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R10选自C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6氨基烷基，C1-C6卤代烷基，C1-C6羟基烷基，苯基，苯氧基，苄基，卞氧基，以及被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟基烷基、C1-C6氨基烷基、C(O)-C1-C6烷基、C(O)O-C1-C6烷基和C(O)OH取代的苯氧基和卞氧基。
5.权利要求3-4中任一项的化合物，其中R11为NR7C1-C6烷基-C(O)NR7R8，NR7S(O)n-R7或NR7S(O)n-R12，n为1或2和/或其中Z1＝Z2＝H和/或其中R10为OR7，OR12，OC7-C10-芳基烷基，OC1-C6烷基-OR7或OC1-C6烷基-OR12。
6.权利要求3-5中任一项的化合物，其中Z1和Z2为氢；Z1，Z2和R11为氢；或者Z1，R10和R11为氢。
7.权利要求3-6中任一项的化合物，其中Z1或Z2为C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤素或硝基。
8.权利要求3-7中任一项的化合物，其中R10为OR7，OR12，C1-C6烷基-OR7或C1-C6烷基-OR12。
9.权利要求3-8中任一项的化合物，其中Y为S(O)nR1，这里n＝1或2和R11为NR7S(O)n-R7或NR7S(O)n-R12，n为1或2。
10.权利要求3-9中任一项的化合物，其中R10和Z2或Z2和R11连接在一起形成稠合的未取代或取代的碳环或杂环。
11.权利要求1-10中任一项的化合物，其中X为羰基。
12.权利要求1-11中任一项的化合物，其中R1选自C1-C6烷基，C2-C6链烯基，C2-C6炔基，C3-C6环烷基，苯基，萘基，苄基和具有5-6个选自碳原子和1-2个杂原子的杂芳基，其中所述的杂原子为N，S或O，而R1任选地被1-3个选自卤素，硝基，C1-C6烷基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-OR7，C1-C6卤代烷基，C1-C6烷基-NR7R8，C(O)OR7，OC(O)R7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7和NHC(O)NR7R8的取代基所取代，这里R7和R8独立地为H或C1-C6烷基。
13.权利要求1-12中任一项的化合物，其中A和B为CH。
14.权利要求1-13中任一项的化合物，其中R6为H。
15.权利要求1-14中任一项的化合物，其中Y为S(O)nR1，这里n＝1或2。
16.一种组合物，其中包含权利要求1-15中任一项的化合物以及载体或赋形剂。
17.一种抑制TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽释放酶活性的方法，包括使TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽释放酶与有效量的权利要求16的组合物接触。
18.一种治疗以TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽释放酶介导的疾病的方法，包括将有效量的权利要求16的组合物给药于需要治疗的哺乳动物。
19.一种预防血栓形成或治疗异常血栓形成的方法，包括将有效量的权利要求16的组合物给药于需要预防和治疗的哺乳动物。
全文摘要
具有结构(A)的化合物,其可用于抑制丝氨酸蛋白酶,如TF/因子VIIa、因子Xa、凝血酶和激肽释放酶。这些化合物可用于预防和/或治疗凝血性疾病的方法中。
文档编号A61K31/216GK1342139SQ00804422
公开日2002年3月27日 申请日期2000年1月11日 优先权日1999年1月13日
发明者伊格内西奥·阿利亚加斯-马丁, 迪安·R·阿蒂斯, 迈克尔·S·迪纳, 约翰·A·弗莱加里, 理查德·A·戈德史密斯, 里贾纳·A·芒罗, 艾伦·G·奥利弗罗, 理查德·帕斯特, 托马斯·E·罗森, 柯克·D·罗巴格, 丹尼尔·P·萨瑟林, 肯尼思·J·威斯, 周爱河, 朱延 申请人:杰南技术公司