专利名称：9－取代次黄嘌呤衍生物的新晶形的制作方法
技术领域：
本发明涉及9-取代次黄嘌呤化合物的新晶形和改进的合成方法，特别是涉及9-取代次黄嘌呤衍生物4-[[3-(1，6-二氢-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)-1-氧丙基]氨基]苯甲酸一钾盐(AIT-082)、也称为N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的新晶形和改进的合成方法。
背景技术：
需要可与不同类型细胞表面上的多种受体相互作用的双团能化合物。也特别需要下述化合物该化合物绕过血-脑屏障从而该化合物的活性可在中枢神经系统得到发挥，如用于治疗疾病如早老性痴呆、肌萎缩性(脊髓)侧索硬化(Lou Gehrig’s disease)和其它神经变性疾病。
授权给Glasky的美国专利5,091,432中公开了许多这样的化合物和用于合成它们的方法，将该文结合在此以作参考。这包括许多穿过血-脑屏障的双官能化合物。示例性的多官能化合物是由具有免疫活性的第一生物学活性化学部分和具有神经学活性的第二生物学活性化学部分形成的。示例性的免疫活性化学部分有次黄嘌呤或嘌呤-6(1H)-酮。利用次黄嘌呤的另一个好处在于其与肌苷的结构关系，已知只有嘌呤穿过血-脑屏障。次黄嘌呤可通过化学桥基如丙酸或丁酸与各种神经学上的活性化学部分连接，以产生各种化合物，包括4-[[3-(1，6-二氢-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)-1-氧丙基]氨基]苯甲酸、也命名为N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺。
虽然在授权给Glasky的美国专利5,091,432中描述了用于这些双官能化合物，包括4-[[3-(1，6-二氢-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)-1-氧丙基]氨基]苯甲酸或N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺盐酸盐的合成方法，但是仍然需要得到改进的用于这些化合物的合成方法。特别需要可提供更高收率的更有效的合成法和可提供更少副反应以及纯且稳定的产物的更可靠的合成法。
化合物合成期间，可能产生同一药物的各种不同晶形(同质多晶)。所述同质多晶的存在明显是因为不同晶形在水中可能具有不同的溶解度，因而造成在化合物的药代学(溶解度)和药效学方面的不同程度的生物利用度。因此，必须仔细检查化合物同质多晶，因为各自独有的结晶结构可导致生物利用度的差异。因而特别需要对化合物产物的多晶型物及其互变过程进行分析。还特别需要用于生产化合物如4-[[3-(1，6-二氢-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)-1-氧丙基]氨基]苯甲酸一钾盐或N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的最稳定形态的方法以及用于将所述化合物的其它结晶和稳定形态转化为最稳定形态的方法。该化合物的所有稳定形态都是药学上可接受的。
简述本发明的一个方面在于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的一种晶形，它在25℃水中的溶解度为约5％(w/v)，经傅里叶变换红外光谱法测定具有从1674.1cm-1至约1675.7cm-1的红外光谱峰，其X射线粉末花样不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的任何其它晶形的X射线粉末花样，该晶形被命名为I型。
本发明的另一个方面在于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的一种晶形，它在25℃水中的溶解度为约10％(w/v)，经傅里叶变换红外光谱法测定具有约1693.4cm-1的红外光谱峰，其X射线粉末花样不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的任何其它晶形的X射线粉末花样，该晶形被命名为II型。
本发明的再一个方面在于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的基本上无水的晶形，它经卡尔·费歇尔滴定法测定具有少于约1.0％的水，具有约1687.8cm-1的红外光谱峰，其X射线粉末花样不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的任何其它晶形的X射线粉末花样，该晶形被命名为III型。
本发明的另一方面在于用于合成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的一种方法，该方法包括下述步骤(1)使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的游离酸与氢氧化钾在水中反应；和(2)用乙醇沉淀步骤(1)的产物，得到I型晶形。
本发明的还一方面在于用于合成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的另一方法，该方法包括下述步骤(1)使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺乙酯单乙酸盐与氢氧化钾反应，生成不同于I型晶形的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺；和(2)使步骤(1)的产物与含有低浓度氢氧化钾的乙醇和水的混合物反应，得到N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形。
本发明的还一方面在于将命名为II型的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的独特晶形转化成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的方法，该方法包括下述步骤即在约60℃-约80℃的温度下，用水蒸气使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的命名为II型的晶形平衡约36小时-约60小时，得到N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形。
在该方法中，优选温度为约70℃，时间为约48小时。
本发明的再一方面在于将命名为III型的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的独特晶形转化成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的方法，该方法包括下述步骤即在约25℃的温度下，用水蒸气使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的命名为III型的晶形平衡，以得到N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形。
附图简述通过参考说明书、所附的权利要求书和附图，后面的发明将变得更易理解，在附图中
图1为表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的I型、II型和III型结晶结构的互变的图；图2为表示作为升高温度的函数的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的II型晶形的溶解度的图；图3表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的各种晶形的X射线衍射粉末花样(a)II型(命名为Am 927/a)和I型(命名为DD-477-21-5)；(b)I型(命名为DD-477-21-5)；(c)(a)的II型在25℃培养后的II型(命名为Am 927/a RT)；(a)的I型在25℃培养后的I型(命名为DD-477-21-5)；(d)(a)的II型在70℃培养后的I型(命名为Am 927/a 70℃)；I型在70℃培养后的I型(命名为DD-477-21-5 70℃)；(e)含有二钾盐的混合物的I型(命名为Am 964/b)；(f)I型(命名为NTA-107/B)；(g)II型(命名为NTA-107/A)；(h)如(f)中的I型(命名为NTA 107-B)；通过在140℃、真空下加热I型产生的III型(命名为NTA-107-B/2)；图4表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的各种晶形的傅立叶变换红外光谱(a)I型(命名为DD-477-21-5)；(b)I型，第二种制备(命名为NTA-107-B)；(c)有二钾盐的混合物的I型(命名为Am 964/b)；(d)II型(命名为Am 972/a)；(e)II型，第二种制备(命名为NTA-107-A)；图5表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的各种晶形的差示扫描量热(DSC)测量值(a)I型(命名为NTA-107-B)；(b)I型，第二种制备(命名为DD-477-21-5)；(c)II型(命名为NTA-107-A)；图6表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的各种晶形的质量相对于温度的热解重量(TG)图(a)I型(命名为NTA-107-B)；(b)I型，第二种制备(命名为DD-477-21-5)；(c)II型(命名为NTA-107-A)；(d)有二钾盐的混合物的I型(命名为AM 964/b)；图7表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的各种晶形的X射线衍射粉末花样(a)III型(命名为NTA-107-B/a)；(b)I型(命名为NTA-107-B)；图8表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的III型晶形(样品命名为NTA-107-B/a)的傅立叶变换红外光谱；图9表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的III型晶形(样品命名为NTA-107-B/a)的DSC测定值；图10表示N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的III型晶形(样品命名为NTA-107-B/a)的TG测定值。
详述化合物N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐以许多不同的晶形存在。这些形态反映出不同的水合程度。如下面的详细描述，存在三种这些化合物的晶形，命名为I型、II型和III型。这些形态如下所述可以互变。
I型为其中羧基处于钾盐形式的一水合物。从稳定性的观点来看，I型是最理想的晶形。因此，开发生产I型或是将其它晶形转化为I型的制造方法是很重要的。优选在抑制分子中嘧啶环上羟基的脱质子化(作为氧代基的互变体)的条件下制备I型。如果在大于约8.5的pH值下制备I型，则嘧啶的羟基开始脱质子，并且结晶含有稍微过量的作为抗衡离子的钾。这导致产生I型的变体，该变体具有可辨别的有附加线的X射线粉末花样。
II型也处于一钾盐的形式，但是水合的水没有如I型那样有力地结合在晶格中，可以认为是“附着的”水。
III型也处于一钾盐的形式，但是既没有“附着的”水又没有结晶水。III型事实上是无水的。
这些晶形可以互变。可以通过在70℃的湿室中平衡II型或者通过在70℃的水和乙醇的溶液中加热来将II型转变为I型。可以通过强干燥条件如在真空、140℃下加热来将I型转变成III型。在25℃通过增湿可以将III型转化回I型。I型在湿室中无论25℃还是70℃的处理下都是稳定的。
因此，本发明的一个方面在于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的一种独特晶形。所述晶形被命名为I型。该晶形在25℃水中的溶解度约为5％(w/v)。该晶形还具有经傅立叶变换红外光谱测定为约1674.1cm-1至约1675.7cm-1的红外光谱峰。该晶形还具有不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的任何其它晶形的X射线衍射粉末花样的X射线衍射粉末花样。该X射线衍射粉末花样显示在图3(b)、图3(c)、图3(d)、图3(f)和图3(h)中。
本发明的另一方面在于用于合成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的一种方法。通常，该方法包括(1)使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的游离酸与氢氧化钾在水中反应；和(2)用乙醇沉淀步骤(1)的产物，得到N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形。
优选该反应在0℃-80℃下发生。
本发明的还一方面在于用于合成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的另一方法，通常，该方法包括下述步骤(1)使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺乙酯单乙酸盐与氢氧化钾在水中反应，然后与氯化氢反应，生成不同于I型晶形的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐；和(2)使步骤(1)的产物与含有少量氢氧化钾的乙醇-水混合物反应，得到N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形。
优选乙醇-水混合物中氢氧化钾的浓度为约0.1％。
在该步骤中，N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的晶形最初不同于I型。该晶形被命名为II型。在II型中，如上所述，分子不是一水合物的形式，不包含结晶水。可以如上所述以及如实施例所述将I型和II型互变。
本发明的还一方面在于将N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的II型晶形转化成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的方法。该方法包括在约60℃-约80℃的温度，在水蒸气的存在下，将II型晶形加热约36小时-约60小时。优选所述温度为约70℃，所述互变时间为约48小时。该转化使结晶水进入到晶格中。
本发明的另一方面在于II型晶形。II型晶形在25℃水中的溶解度约为10％(w/v)，具有经傅立叶变换红外光谱测定为约1693.4cm-1的红外光谱峰，具有不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的任何其它晶形的X射线粉末花样的X射线粉末花样。
II型的X射线衍射粉末花样显示在图3(a)、图3(c)和图3(g)中。
还有另一种N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的晶形，该晶形被命名为III型。III型基本上是无水的，经卡尔·费歇尔滴定法或者经热解重量分析法测定具有少于约1.0％的水含量。其X射线 射粉末花样不同于I型或II型。III型具有经傅立叶变换红外光谱法测定为约1687.8cm-1的红外光谱峰。可通过在约25℃、水蒸气的存在下培养将III型转变成I型，而I型可仅仅通过在约140℃、真空烘箱中干燥而转变成III型。可通过在25℃湿室中培养容易地将III型转变回I型。
III型的X射线衍射粉末花样显示在图3(h)和图7(a)中。
因此，本发明的再一方面在于通过在水蒸气的存在下，在约25℃下培养I型结晶将N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的III型晶形转化成N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形的方法。
I型、II型和III型晶体结构的互换图如图1所示。
通过下面的实施例对本发明进行举例说明。这些实施例仅用于例证，而不是用于限制本发明。
实施例N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐晶体的多晶型物材料和方法多晶型物的出现可通过各种物理化学研究技术进行检测。在规定条件下测定的溶解度可提供关于存在不同晶体结构的信息。但是，用于研究N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的同质多晶的优选技术为X射线衍射粉末图分析，它可通过不同晶形的特征粉末花样明显区分不同的晶体结构。粉末花样、位置、强度和谱带的锐度(sharpness)都取决于晶体结构和晶格中原子的精密排布，而这两者又都受结晶水含量的影响。对于该研究来说，使用来自N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的不同批次的材料，可以是初始状态或干态或湿态(表1)。
通过卡尔·费歇尔(KF)滴定法(Titroprocessor Metrohn 682 andKarl-Fischer Titrator Metrohm 701 Titrino)或者热解重量(TG)分析法(Mettler TG 50 Thermobalance)测定水含量。
通过配备有11号CuKαGuinier-de Wolff照相机(Enraf-Nonius)的γ-发生器Philips PW 1120/90测定X射线粉末花样。
通过差示扫描量热(DSC)测量(Mettler DSC 821)描述不同多晶型物的热稳定性(水的损失、熔点)，通过傅立叶变换(FT)红外光谱仪(Perkin Elmer FT-IR Spectrometer Paragon 1000)记录红外光谱(IR)。A.经游离酸 C15H13N5O4C15H12KN5O4xH2O分子量327.30 分子量383.41[138117-50-7] [192564-13-9]AIT-082游离酸 AIT-082一水合物(I型)对N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的研究显示I型晶体结构可以通过上述合成途径获得。I型与参考化合物批号DD-477-21-5的晶体结构相同。B.经乙基酯单乙酸盐 C17H17N5O4xC2H4O2C15H12KN5O4分子量415.41 分子量365.39[无CAS号，无AcOH138117-79-0] [192564-13-9]AIT-082 基酯单乙酸盐AIT-082(II型) C15H12KN5O4C15H12KN5O4xH2O分子量365.39 分子量383.41[192564-13-9] [192564-13-9]AIT-082(II型) AIT-082一水合物(I型)N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺乙酯的水解和后来的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的分离提供II型晶体结构，它必须在高温(70℃)、乙醇/水的溶剂混合物中被转变成I型变体，以得到N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐一水合物(I型)。不加入水，则观察不到晶体结构II型与I型的互变。优选将上述合成途径用于制备方法，并且优选在最后的步骤包括少量KOH以满足活性药物成分的溶解度需要。结果同质多晶由不同的晶体结构开始，对其水合和脱水进行研究(图1，表2)。命名为I型(批号NTA-107-B)的晶体结构是通过在湿室中用水蒸气平衡II型(批号NTA-107-A)得到的，而III型是通过在高温、真空干燥箱中对I型脱水而得到的(表1和2)。I型和II型晶体结构的X射线粉末花样对水含量的微小变化不灵敏，各批之间看来是相同的。由I型开始，增湿使I型无变化，而在强干燥条件下(温度和真空度)获得III型。后一方法是完全可逆的，在25℃经增湿，III型可完全转换为I型。
I型和II型晶体结构在湿室(水蒸气)中、25℃和70℃培养48小时导致II型仅在高温下转变成I型晶体结构，而I型保持不变。在含水和乙醇的溶液中将AIT-082 II型加热至70℃将导致II型转变成I型晶体结构。这两种晶形的良好解析的粉末图显示出良好排列的晶格结构(图3)。I型晶体结构包含约5.8％(w/w)水，并且仅稍微吸湿。所述制备方法导致N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的水溶性(5％w/v)结晶产物I型(活性药物成分)。如迄今为止已知的那样，N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐根据水含量的不同以三种不同的晶体结构(I-III型)存在。对应的粉末图显示对于相对的低背景具有较大峰强度的良好解析图。这些粉末图如图3所示。
如果在大于8.5的pH值下形成钾盐，则嘧啶环的氧代基(羟基)也倾向于成盐。在这些反应条件下制备的试样包含稍微过量的钾(N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺游离酸的二钾盐)，并且在粉末图中显示出其它的谱带(表1和图3(e))。
除X射线粉末衍射外，还可以使用IR-光谱区别I型和II型晶体结构同质多晶(图4)。I型(与参考化合物批号DD-477-21-5和批号1024.D.96.2一样)显示出中心在约1674.1cm-1到约1675.7cm-1的特征IR光谱，而II型晶体结构的对应谱带移至1692cm-1。II型晶体结构在湿室(水)中、25℃和70℃培养48小时导致II型仅在高温下转变成I型晶体结构。这些发现可以由水结合进晶格得到解释，这是一个需要相对高能量输入的过程。有趣的是注意到通过两种不同分析方法(KF和TG)测定I型和II型水含量仅显示出I型具有不同的水含量(表1)。I型晶格中紧密结合的(结构)结晶水大概是这一现象的可能解释。I型和II型的DSC光谱不同，显示出I型中紧密结合的结晶水的低蒸发(图5)。相反地，II型结构可能仅包含“附着的”水，这些水可在常规TG条件下蒸发(图6)。两种样品的残余有机溶剂(乙醇)含量在两种结构中都相当低。
结晶N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐具有介于5-12％(w/w)之间的相对宽范围的水含量，这取决于晶体结构的类型。N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的I型晶形经KF和TG测定水含量，发现了相当于1当量结晶水的差别。这一结果表明结构上结合的水与N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的1∶1化学计量混合物需要相对强的干燥条件(温度和真空度)以除去水，因为水分子处于结构上的紧密结合状态。不知道N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的两种多晶型物I型和II型是否在含水溶液中显示出溶解度的不同。
在受控的制备条件下(例如N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺乙酯的水解，干燥步骤)，仅得到具有特征粉末花样的一种单一一致I型晶体结构。用水蒸气将N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐I型和II型在70℃培养不会显著改变任一样品的水含量。互变研究的结果表明用于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐一水合物的制备方法可生产具有均匀稳定晶体结构的产物。溶解度N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐一水合物I型表现出在水中的良好的溶解性(25℃时5％(w/v))。在用命名为“直接结晶”的途径合成的物质制备的含水溶液中，2-3分钟后形成了N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺游离酸的细小微晶沉淀。虽然钾的测定值为1.0当量，并且虽然直接结晶的钾盐是在等于或稍高于由N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺游离酸合成的钾盐的pH(pH8.7)下分离的，但是仅有后者完全溶解于水中。游离酸形态的沉淀可解释为是因为N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺游离酸的单钾盐和二钾盐(2单钾盐二钾盐+游离酸)之间产生了平衡以及游离酸在水中的极低的溶解度。游离酸沉淀并生成二钾盐直到其浓度足够高以保持游离酸的沉淀和溶解达成平衡。N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺II型(批号Am 960/a)在含水溶液中的溶解度测定为温度的函数(图2)。溶解度曲线在70℃达到稳定水平(17％w/w)。
如上述对于I型和II型那样描述III型晶形的其它特征。III型的X射线衍射粉末花样显示在图7(a)中；图7(b)显示I型的X射线衍射粉末花样用于对比。
III型晶体结构的傅立叶变换红外光谱显示在图8中。该红外光谱的峰在1687.8cm-1。
III型晶形的DSC图显示在图9中。
III型晶形的TG图显示在图10中。图10的数据分析表明，水的存在量为0.91％，接近于通过卡尔·费歇尔滴定法测定得到的III型晶体结构的值0.87％。结论N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的不同晶形(同质多晶)的存在可归因于物质的不同结晶水含量(表1)。命名为I、II和III型的不同晶体结构可通过它们的优质的特征X射线粉末图容易地区分。I型的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐一水合物不同批料的粉末图在峰位置和强度方面显示一致的花样。晶体结构的互变可以通过干燥和增湿来实现。由含1结晶水的I型全水合晶体结构的粉末花样可知，它不受总含水量(结合结晶水与“附着的”水)的微小变化的影响。
表1
表2
n.a.＝未得到本发明的优势本发明的合成方法可提供经济有效的合成9-取代次黄嘌呤衍生物，尤其是N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的方法，所述钾盐为一种可提供高度稳定性和纯度以及药学上可接受性的晶形。这些方法使用可得到的原料，需要最少的步骤，经最少的提纯提供具有高纯度和生物利用度以及一致晶体结构的产物。开发这些方法用以合成具有不同晶形的最终产物，并将其变换成最稳定的类型。所述过程避免了使最终产物的分离和纯化复杂化的副反应。
虽然已经参考某些优选的形式对本发明进行了相当详细的描述，但其它的形式和实施方案也是可能的。因此，本发明的范围由随后的权利要求书确定。
权利要求
1.一种N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形，该晶形在25℃水中的溶解度为约5％(w/v)，经傅里叶变换红外光谱法测定具有从约1674.1cm-1至约1675.7cm-1的红外光谱峰，其X射线粉末花样不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一钾盐的任何其它晶形的X射线粉末花样，该晶形被命名为I型。
2.一种用于合成权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形的方法，该方法包括下述步骤(a)使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的游离酸与氢氧化钾在水中反应；和(b)用乙醇沉淀步骤(a)的产物，得到权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的晶形。
3.一种用于合成权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形的方法，该方法包括下述步骤(a)使N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺乙酯单乙酸盐与氢氧化钾反应，生成不同于权利要求1的晶形的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺；和(b)用含有低浓度氢氧化钾的乙醇和水的混合物处理步骤(a)的产物，得到权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形。
4.一种用于将命名为II型的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的独特晶形转化成权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形的方法，该方法包括下述步骤即在水蒸汽的存在下，在约60℃-约80℃的温度下，用水蒸气使命名为II型的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的晶形平衡约36小时-约60小时，得到权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形。
5.权利要求4的方法，其中所述温度为约70℃。
6.权利要求4的方法，其中所述时间为约48小时。
7.权利要求5的方法，其中所述时间为约48小时。
8.一种用于将命名为III型的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的独特晶形转化成权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形的方法，该方法包括下述步骤即在约25℃的温度下，用水蒸气使命名为III型的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的晶形平衡，以得到权利要求1的N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形。
9.一种N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的晶形，它在25℃水中的溶解度为约10％(w/v)，经傅里叶变换红外光谱法测定具有约1693.4cm-1的红外光谱峰，其X射线粉末花样不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的任何其它晶形的X射线粉末花样，该晶形被命名为II型。
10.一种N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺一水合物的一钾盐的基本上无水的晶形，它经卡尔·费歇尔滴定法测定具有少于约1.0％的水，经傅里叶变换红外光谱法测定具有约1687.8cm-1的红外光谱峰，其X射线粉末花样不同于N-4-羧苯基-3-(6-氧代氢化嘌呤-9-基)丙酰胺的一钾盐的任何其它晶形的X射线粉末花样，该晶形被命名为III型。
全文摘要
双官能化合物N－4－羧苯基－3－(6－氧代氢化嘌呤－9－基)丙酰胺一钾盐存在许多稳定性不同的晶形。在这些晶形中，最稳定的被命名为I型，它是一钾盐一水合物，其中水作为结晶水被固定。其它被命名为II型和III型的晶形可转化为I型。公开了用于合成I型的方法以及用于将II型或III型转变成I型的方法。
文档编号A61P25/28GK1427841SQ01808138
公开日2003年7月2日 申请日期2001年2月21日 优先权日2001年2月21日
发明者A·格拉斯基, H·伯林格尔, H·R·米勒 申请人:新疗法公司