专利名称：一种用于戒毒、镇痛的药剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种戒毒、镇痛用的药剂，特别是一种含有河豚毒素的戒毒镇痛药剂，本发明还涉及该药剂的制备方法。
背景技术：
药物滥用，尤其是吸毒，严重危害着人们的身心健康，其吸食的毒品主要是海洛因，海洛因是吗啡精制品，由吗啡酰化而成，毒性比吗啡大两倍，而且成瘾性极快。传统的对阿片类依赖者的药物治疗是为了消除患者的机体依赖而进行的一个逐步撤药计划，其中以依赖性小的阿片类药物代替依赖性强的，即所谓的替代递减法。美沙酮是一个较好的替代药，它是阿片受体激动剂，由于它维持时间长，戒断症状轻且时间短，能完全解除吗啡类药物引起的戒断症状，但由于美沙酮本身即可产生依赖性毒副作用，仍然不是理想的戒毒药物。其他药物如路托菲、纳曲酮等药物作用较差。20世纪初就有人将河豚毒素(TTX)用于治疗戒毒，经过治疗后的患者大部分人都有舌、嘴唇的钝麻感和四肢钝麻感，经过治疗后的患有焦虑不安、失眠症状，这些都是由TTX诱发的中毒症状。作为镇痛剂用于临床，大部分病人都有轻度中毒症状和局部刺激感觉。
河豚毒素(TTX)，又称豚毒素，因来源不同可分为东方豚毒素、圆豚毒素、斑章毒、虎鱼毒素、螈毒素等。河豚毒素的分子式为C11H17N3O8，分子量为m/z319.27，属全氢化氨基喹唑类化合物。是从海洋动物河豚鱼体提取而得，纯品为无臭、无味、白色结晶。大量研究表明TTX可能既通过神经中枢又通过外周神经发挥与杜冷丁和阿斯匹林不同的强镇痛作用，是一种钠离子通道阻断剂，有明显的桔抗阿片类药物所致的戒断综合症。是一种本身无成瘾性、无毒副作用、具有戒毒作用的理想药物。
TTX的分离、纯制的报导较多，如专利96119454.5中记载了TTX的分离提取方法，该方法中使用了活性炭柱处理工艺，由于活性炭的吸附力强，毒素损耗量大，收率低，而且经其处理后，只能得到河豚毒素同系物的混合物即粗提产品，直接影响由其制成的药物的疗效。
本发明药剂及其制法，克服了现有技术的不足，进一步纯化了TTX制品并由其制得了没有成瘾性和毒副作用的戒毒、镇痛药剂。
发明内容
本发明所述的戒毒镇痛用药剂，其特征是其由河豚毒素、枸橼酸和蒸馏水组成，其中含有0.1-20.0μg/mL的河豚毒素和0.5-100μg/mL的枸橼酸。此药剂的PH值为4-6，适于注射用。
如上所述的药剂，是通过如下方法和步骤制成的定量称取TTX制品，先溶于枸橼酸的蒸馏水溶液中，然后用蒸馏水稀释，混合均匀，再经钴照射消毒后，装瓶封口即制成本发明的戒毒镇痛药剂。消毒以10分钟为佳。
如上所述的河豚毒素可以通过如下方法和步骤制得1.取河豚鱼的卵巢、内脏、皮肤，破碎搅拌成浆，然后进行离心分离，取其上清液；2.对步骤1中的上清液进行减压蒸馏，直至蒸干为止，得固体物，减压蒸馏的真空度不低于0.1Pa；3.将步骤2中得到的固体物溶于30％(W％)醋酸水溶液中，两者的重量体积比为1∶5g/mL，再加入乙醇，使其醇度达到75％，然后过滤处理；4.对步骤3中得到的滤液进行减压蒸馏，直至蒸干为止，得到河豚毒素粗制品，减压蒸馏的真空度不低于0.1Pa；5.将步骤4中得到的河豚毒素粗制品溶于10％(W％)的醋酸水溶液中，两者的重量体积比为1∶1μg/mL；6.对步骤5中得到的河豚毒素液进行层析分离，层析柱的填料是C-18硅胶，用体积比为100∶0-0∶100的甲醇—水混合液做流动相进行梯度洗脱，即先用纯水、然后逐步增加甲醇含量改变流动相中甲醇和水的比例、在60分钟内将甲醇量增到100％、即纯甲醇，控制洗脱液流出速度为20mL/min，收集保留时间在10-11分钟信号峰馏分，然后对收集到的馏分再用100∶0-0∶100的水—乙腈混合液做流动相进行梯度洗脱，即先用纯水、然后逐步增加乙腈含量、在60分钟内将乙腈量增至100％，控制洗脱液流出速度为20mL/min，收集保留时间在8-9分钟信号峰馏分；7.将步骤6中收集到的馏分进行减压蒸馏，除去酸水溶液，收集固体部分即得河豚毒素制品，减压蒸馏的真空度不低于0.1Pa。
本发明的药剂具有高效、不产生药物依赖性、停药后不反复、用药时病人痛苦小、易接受、镇痛时间长、不产生毒副作用、适用人群广泛等优点，本发明涉及的TTX纯化工艺具有成本低、收率多、操作简化等优点，且纯化产品更适于注射用药，疗效好。
具体实施例方式
下面通过实施例进一步说明本发明。
实施例1本实施例是河豚毒素纯化实例。
按下列方法和步骤分离提取和纯化河豚毒素1.取河豚鱼内脏和卵巢10kg，置于50升不锈钢自动匀浆机中搅拌匀浆，匀浆物于离心机中进行离心分离，转速为2000转/分，取上清液；2.将步骤1中得到的上清液置于蒸馏容器中，控制真空度不低于0.1Pa，进行减压蒸馏，蒸馏至蒸干为止，得固体物；3.将步骤2得到的固体物100g，溶于500mL 30％(W％)的醋酸水溶液中，再加95％的乙醇稀释至醇度达75％，然后过滤，收集滤液；4.将步骤3中的滤液于蒸馏容器中进行减压蒸馏，控制真空度不低于0.1Pa，蒸馏至蒸干为止，得固体物；5.将步骤4中得到的全部固体物溶于10％(W％)醋酸水溶液中，制成每mL溶液中含有1μg固体物的溶液；6.对步骤5中制得的溶液进行层析法提纯，提纯在中压层析仪上进行，中压层析柱长100cm，直径6cm，检测波长为210nm，每次进样量为500mL，以反相硅胶C-18为填料，用体积比为100∶0-0∶100的甲醇—水混合液做流动相进行梯度洗脱，即先用纯水、然后逐步增加甲醇含量改变流动相中甲醇和水的比例、60分钟将甲醇量增到100％、即纯甲醇，控制洗脱液流出速度为20mL/min，收集保留时间在10-11分钟信号峰馏分，然后对收集到的馏分再用100∶0-0∶100的水—乙腈混合液做流动相进行梯度洗脱，即先用纯水、然后逐步增加乙腈含量、60分钟将乙腈量增至100％，控制洗脱液流出速度为20mL/min，收集保留时间在8-9分钟信号峰馏分，即河豚毒素峰；7.将步骤6收集到的河豚毒素峰馏分在真空度不低于0.1Pa条件下进行减压蒸馏，除尽酸水溶液，收集固体部分即为河豚毒素纯品，约2mg，纯度＞96％。
实施例2本实施例为本发明药剂的实例。
精确称取实例1中的河豚毒素纯品1mg，溶于500mL 1％的枸橼酸水溶液中，加蒸馏水稀释到10000mL，混合均匀。此时药物的PH值为6.0，其中含河豚毒素0.1μg/mL、含枸橼酸0.5μg/mL。
将上述药物在钴照射下消毒灭菌10分钟，然后装瓶封口制得针剂。
实施例3本实施例为本发明药剂的另一实例。
精确称取实例1中的河豚毒素纯品1mg，溶于50mL10％的枸橼酸水溶液中，混合均匀。此时药物的PH值为4.5，其中含河豚毒素20μg/mL含枸橼酸100μg/mL。
将上述药物在钴照射下消毒灭菌10分钟，然后装瓶封口制得针剂。
实施例4本实施例是本发明药剂的应用实例。
病例选择62例均为住院病人。符合CCMD-2，DSM-R精神活动物质所致精神障碍—阿片依赖诊数标准的自愿戒毒者。其中男性45人，女性17人。年龄在16-28岁，患者46人，28-38岁患者16人。使用方法烫吸者55人，烫吸加肌肉注射或静脉注射者7人。瘾量多在0.5-1.0mg。吸毒时间半年以上，一年以内者45人，一年以上者17人，首次戒毒者36人，第二次复吸戒毒者26人。
用药方法根据瘾量的大小，吸毒时间的长短及戒毒反应的轻重，采取不同方法治疗。一般5-6天为一疗程。用本发明的TTX针剂治疗后(量0.1-20.0μg/ml)均在3天后脱瘾。经纳洛酮试验呈阴性。患者身体脱瘾基本完成，一般患者能安静入睡，大小便正常。对吸毒病人在戒断治疗中出现的骨痛、肌肉痛、头痛、血管肿痛有明显的镇痛作用，而且作用比较持久。对伴随疼痛而出现的情绪反应，如烦燥、焦虑、紧张、失眠等有较好的作用。对其他症状如畏寒、发热、肌震颤、出汗、咳嗽、胸闷、乏力、食欲不振等及其他临床的症状如鸡皮疹、瞳孔散大、心率增快等症状的改善有一定的作用。这些症状常常随着病人疼痛的减轻及情绪反应的缓解而减轻。观察结果还表明。TTX用于戒毒病人的脱瘾治疗，能有效的控制毒瘾发作。消除戒断反应，有较好的治疗效果。停药以后不再出现戒断反应。在治疗中病人痛苦较小，无明显的副作用。不产生依赖性。病人易接受。脱瘾率达95％。
实施例5本实施例是本发明药剂的应用实例。
动物实验表明采用热刺激法测定TTX的镇痛效应与消炎止痛药阿司匹林和麻醉镇痛药哌替啶、吗啡等阳性对照。实验结果表明本发明TTX注射液镇痛效果明显，其小鼠扭体法和热板法的镇痛强度均大大超过阿司匹林和哌替啶，大鼠甲醛法的镇痛强度大于吗啡，实验数据见表1。
表1
以小鼠扭体法测定本发明TTX注射液的镇痛作用时效关系，结果表明S.C给本发明TTX注射液后15min开始起效，起效后1h达高峰，镇痛作用持续约5h，其镇痛作用时间明显比阿匹林长。
实施例6本实施列是本发明药剂的应用实例。
对癌症晚期的镇痛作用收治住院癌症病人50例，男35，女15，年龄15-80。患有各种癌症，均为晚期并出现剧烈疼痛，部分已用杜冷丁。使用本发明的TTX注射液每日注射1次，每次1只(含量0.3μg/mL)，用药5-15天，最长3个月，有效率达95％。
权利要求
1.一种戒毒镇痛药剂，其为注射针剂，其特征是其由河豚毒素、枸橼酸和蒸馏水组成，其中含有0.1-20.0μg/mL的河豚毒素和0.5-100μg/mL的枸橼酸。
2.一种戒毒镇痛药剂的制备方法，该药剂由河豚毒素、枸橼酸和蒸馏水组成，其中含有0.1-20.0μg/mL的河豚毒素和0.5-100μg/mL的枸橼酸，其特征在于其是通过如下方法和步骤制成的称取TTX溶于枸橼酸的水溶液中，然后用水稀释，混合均匀，再经钴照射消毒、灭菌、装瓶封口而得。
3.如权利要求2所述的药剂制备方法，其特征在于所述的河豚毒素通过如下方法和步骤制得(1)取河豚鱼的卵巢、内脏、皮肤，破碎搅拌成浆，然后进行离心分离，取其上清液；(2)对步骤(1)中的上清液进行减压蒸馏，直至蒸干为止，得固体物，减压蒸馏的真空度不低于0.1Pa；(3)将步骤(2)中得到的固体物溶于30％(W％)醋酸水溶液中，两者的重量体积比为1∶5g/mL，再加入乙醇，使其醇度达到75％，然后过滤处理；(4)对步骤(3)中得到的滤液进行减压蒸馏，直至蒸干为止，得到河豚毒素粗制品，减压蒸馏的真空度不低于0.1Pa；(5)将步骤(4)中得到的河豚毒素粗制品溶于10％(W％)的醋酸水溶液中，两者的重量体积比为1∶1μg/mL；(6)对步骤(5)中得到的河豚毒素液进行层析分离，层析柱的填料是C-18硅胶，用体积比为100∶0-0∶100的甲醇—水混合液做流动相进行梯度洗脱，即先用纯水、然后逐步增加甲醇含量改变流动相中甲醇和水的比例、在60分钟内将甲醇量增到100％、即纯甲醇，控制洗脱液流出速度为20mL/min，收集保留时间在10-11分钟信号峰馏分，然后对收集到的馏分再用100∶0-0∶100的水—乙腈混合液做流动相进行梯度洗脱，即先用纯水、然后逐步增加乙腈含量、在60分钟内将乙腈量增至100％，控制洗脱液流出速度为20mL/min，收集保留时间在8-9分钟信号峰馏分；(7)将步骤(6)中收集到的馏分进行减压蒸馏，除去酸水溶液，收集固体部分即得河豚毒素制品，减压蒸馏的真空度不低于0.1Pa。
全文摘要
本发明涉及一种戒毒镇痛药剂及其制备方法，该药剂由河豚毒素、枸橼酸和蒸馏水组成，具有高效、不产生药物依赖性、停药后不反复、适用人群广泛等特点，其中采用层析法纯化的河豚毒素更适合制备注射用药，而且成本低，收率高，工艺简便。
文档编号A61P25/00GK1485039SQ02131020
公开日2004年3月31日 申请日期2002年9月24日 优先权日2002年9月24日
发明者林文翰 申请人:王开业