专利名称：治疗前列腺癌的中药组合物、其制备方法和它在制备治疗前列腺癌的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗前列腺癌的中药组合物，该组合物的制备方法，和该组合物在制备治疗前列腺癌的药物中的应用。
(2)背景技术前列腺癌是男性中因癌症死亡的主要病因之一，可分为性激素依赖性和非性激素依赖性两种类型。通常只能用激光从外部照射、放射性物质植入或进行冷冻手术。对有些病人而言，这些治疗只是“限制禁锢”疾病几年。大多数病人会同时接受化疗，它虽然能杀死癌细胞，但同时也严重伤害体内的正常细胞，其副作用很大。对于性激素依赖性前列腺癌给予性激素进行治疗，有效率尚不够理想；对于非性激素依赖性前列腺癌，目前尚无特效药进行治疗。当病人被诊断为癌症第三或第四期，或前列腺癌复发转移时，绝大部分患者只能等待死亡。因此，人们很需要副作用小，治疗方便的治疗方法，换言之，人们很需要副作用小、疗效高的新颖药物，经本发明者的长期研究发现，一种中药即可达到此治疗目的。
(3)发明内容本发明的一个目的是提供一种疗效好、副作用少的治疗前列腺癌的中药组合物；本发明的另一个目的是提供所述中药组合物的制备方法；本发明的再一个目的是提供所述的中药组合物在制备治疗前列腺癌的药物中的应用。
本发明的这些目的是通过下列构思实现的一种治疗前列腺癌的中药组合物，其特征在于，它是由下述重量配比的原料制成的药剂灵芝3-4
黄芩1-2冬凌草 1-2大青叶 1-2菊花0.5-1.5甘草0.5-1.5三七0.5-1.5最佳的原料重量配比为灵芝∶黄芩∶冬凌草∶大青叶∶菊花∶甘草∶三七＝3∶1.5∶1.2∶1.2∶0.9∶0.9∶0.9。
所述黄芩的最佳产地是四川，最佳采集时间是秋季；所述三七的最佳产地是云南，最佳采集时间是秋季(花开前)；所述大青叶的最佳产地是南方，最佳采集时间是秋季，所述菊花的最佳产地是浙江，最佳采集时间是秋季；所述冬凌草的最佳产地是河南，最佳采集时间是五月；灵芝是通过培育/发酵得到的，可采用上海农科所出品的灵芝多糖，所述的灵芝多糖含有所需的活性成分灵芝多肽和灵芝β-D-葡聚糖；甘草的最佳产地是甘肃，最佳采集时间是秋季。
本发明也涉及所述中药组合物的制备方法，包括混合提取制备方法或目的物提取制备方法，所述的混合提取制备方法包括1)准备原料将灵芝黄芩、冬凌草、大青叶、菊花、甘草、三七以重量比为3-4∶1-2∶1-2∶1-2∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的比例进行混合，优选地用进一步加工成中药粗粉或中药流浸膏，所述的加工方法是本技术领域公知的；所述的混合物分成六等份；2)提取生物碱i)将步骤1)得到的一份中药混合物用0.1％盐酸乙醇液渗滤或分次浸滤，得到酸性乙醇提取液；ii)减压浓缩得到浓缩物；iii)酸性水(pH＝4-5)洗涤，在一个实施方案中，优选地使该酸性水液冷冻过夜，过滤，得到残渣，残渣用酸性水(pH＝4-5)洗涤，得到酸性水液；iv)向步骤iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，过滤得到总生物碱沉淀；或者
a)向步骤iii)中得到的酸性水液中加稀酸至pH＝2，用氯仿萃取，得到氯仿层和水层；蒸发氯仿层中的氯仿，得到弱生物碱；b)所述的水层加碱至pH＝6-7，用氯仿提取，得到水层和氯仿层，蒸发氯仿层中的氯仿，得到强生物碱；c)上述b)得到的水层用碱调节到pH10，然后用丁醇提取，蒸发丁醇层中的丁醇，得到水溶性的生物碱；合并上述a)、b)和c)得到的生物碱，得到总生物碱。
所述的氯仿、丁醇优选地进行回收，供提取步骤循环使用。所述的生物碱残渣优选地进行低温干燥，结晶。
3)提取多糖将步骤1)得到的一份中药混合物用95-100℃的热水提取，优选的是提取2小时，弃去残渣，滤液放置12小时后，向上清液中加入浓度50％以上的乙醇，离心得到多糖沉淀；所述的多糖沉淀优选地用乙醚精制。
4)提取内酯将步骤1)得到的一份中药混合物用乙醚回流，除去色素，优选地通过聚酰胺柱除色素，回收乙醚，得到总内酯；5)提取皂甙将步骤1)得到的一份中药混合物与石油醚回流2-4次，蒸发石油醚得到脱脂粗粉，用95％乙醇提取，减压浓缩得到浓缩液；a)浓缩液依次用氯仿、乙醇提取，减压回收氯仿、乙醇，得到总甙粗品；或者b)浓缩液用丁醇提取，得到丁醇层，减压回收丁醇，得到总甙粗品。
6)提取香豆精将步骤1)得到的一份中药混合物加水煎煮1-2小时，浓缩水煎液，加浓盐酸(30％)，除去杂质不溶物，放置澄清液，得到香豆精的粗结晶；它优选地在干燥后用丙酮洗涤，干燥，加水重结晶，加热，过滤，脱色，得到水溶液，冷却后得到淡黄色膏状产物的香豆精。
7)提取黄酮
a)向步骤1)得到的一份中药混合物加70-80％乙醇浸渍，减压回收乙醇液中的乙醇，残留物用水溶解，过滤，得到水液；用乙酸乙酯提取水液，减压浓缩乙酸乙酯液，得到总黄酮。
将步骤2)-7)提取得到的生物碱、多糖、内酯、皂甙、香豆精、黄酮混合，得到本发明的治疗前列腺癌的中药组合物。
所述的目的物提取制备方法包括1)提取黄芩甙i)向上述黄芩组分中加入10倍(体积)量水煎煮1-2小时，过滤；ii)用酸将滤液调到pH1-2，在80-90℃下保持30-40分钟，离心沉淀；沉淀物加水搅拌均匀，加碱将pH调节到中性，再加入3-5倍(体积)量的乙醇，过滤；iii)向滤液中加酸将pH调节到1-2，搅拌，在80-90℃下保持30-40分钟，过滤；iv)所得的沉淀物分别用水、50％乙醇洗涤，再用95％乙醇洗涤或重结晶，得到黄芩甙。
2)提取三七皂甙i)用浓度在50％以下的甲醇提取三七根部粗粉中的可溶成分，减压浓缩甲醇提取液，向残留物中加入3-5倍(体积)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水层再用正丁醇萃取，减压蒸干，经硅胶柱层析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脱得到三七皂甙。
3)提取冬凌草甲素用乙醚提取冬凌草叶干粉，弃去残渣，回收乙醚液中的乙醚，得到绿褐色残留物；用甲醇溶解残留物，脱色得到澄明甲醇液，减压浓缩后室温放置过夜，过滤，甲醇母液蒸干，研细；优选地再用中性Al2O3吸附，用乙醚洗脱，结晶。
4)提取靛玉红大青叶经晒干加工制成干燥青黛，分次加入30％浓盐酸，直至不再产生泡沫，过滤，用水将沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流2-4次，得到甲醇提取液，过滤，回收甲醇液中的甲醇，残留物用石油醚提取，除去石油醚，残渣用3％NaOH溶液处理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉红。
5)提取菊花黄酮粉碎菊花，用50-70％乙醇提取，减压浓缩，加90-95％乙醇，沉淀，过滤，浓缩滤液至无乙醇，残留物用水溶解，过滤，滤液经过大孔吸附树脂(DM130)，用去离子水洗至柱无色，再用95％乙醇多次洗脱，收集黄酮，结晶。
6)提取甘草素、异甘草素甘草用3-4倍(体积)量的90-95％乙醇提取，乙醇液经石油醚萃取，水层拌入硅胶，用MeOH-H2O为7∶3洗脱，浓缩洗脱液，得到残留物；向残留物中加水至完全溶解，向水液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层用5％Na2CO3水液萃取，用稀酸将碳酸钠水液调节到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，经聚酰胺柱分离，经10-90％乙醇水溶液梯度洗脱得到甘草素和异甘草素。
7)使包含灵芝糖肽和灵芝β-D葡聚糖的灵芝多糖(有市售，上海农科所出品)与上述步骤1)-6)提取得到的活性成分混合得到本发明产品。
所述的灵芝糖肽和灵芝β-D葡聚糖也可用下述方法提取得到I.a)灵芝子实体去杂质后粉碎，加水8-10倍浸泡24小时，加热到95-100℃下搅拌8-10小时；b)过滤，优选的是离心或板框分离提取液与药渣，得到滤液和药渣；c)向药渣中加水3-4倍进行浸提，优选的是在95-100℃下搅拌8小时；重复步骤b)和c)II.a)将灵芝发酵液(含有菌球)加热到95-100℃，搅拌4小时；b)过滤，优选的是离心或板框分离提取液与菌球；c)向含菌球的药渣中加水3-4倍(体积)，提取2小时，过滤，分离提取液和药渣，d)合并I.b)，c)和II.c)中的滤液，浓缩至原体积的1/8-1/10，加入食用酒精(3-5倍)，至酒精达到70％左右，静置醇析24小时，用离心机分离沉淀物，回收酒精，干燥沉淀物。或者，对灵芝子实体进行索氏提取，用乙酸乙酯提取4小时，抽滤，得到的残渣再进行索氏提取，用丙酮提取4小时，抽滤，所得的残渣用90％乙醇浸泡24小时，离心，抽滤；残渣用0.2摩尔/升磷酸缓冲液(PBS，pH＝7.0)在80℃下提取三次，4小时/次，抽滤，弃去残渣，缓冲液去除蛋白质，离心，将所得的上层液透析，优选的是清水透析7天，蒸馏水透析3天；向非透析液中加入大量丙酮，出现沉淀，弃去上清液，沉淀用丙酮洗涤6次，得到所需产品的粉状固体。
本发明中药组合物的制备方法进一步还包括步骤8)a)将所述的步骤1)-7)得到的活性成分粉碎至≤200微米细粉；b)粉碎，干燥无漏籽/海枣籽(PHOENIX DACTYLIFERA L)或酸石榴籽/矮石榴籽(PUNICA GRANAT-UN L)，用8倍体积量的无水乙醇提取，优选的是提取三次，合并滤液，减压浓缩，用乙炔化钾处理，得到粉末，c)将a)、b)所得的物质以100-200∶1的重量比混合。
在本发明的一个实施方案中，将上述步骤c)得到的混合物装入胶囊。
一般来说，本发明的产品能根据需要配制成多种剂型供使用，优选的是配制成胶囊剂型进行口服，所述的赋形剂和配制技术是药剂学领域中公知的，本技术领域的技术人员可根据相应的文献和现有技术中的工艺配制得到上述制剂。
本发明的中药组合物具有下列特性1.抗氧化物作用，消除游离基；2.双向调节红血球的数量；3.双向调节白血球的数量；4.无毒性；5.有显著抗病毒作用；6.诱致癌细胞死亡；7.调节中枢神经系统。
为表明本发明中药组合物对前列腺癌的治疗作用，现选取6位病人服用本发明中药组合物，其效果见表1
表1六位病人服用本发明中药组合物后的效果
注PSA是标志前列腺癌的一个重要指标，PSA高说明患有前列腺癌。
从上述结果中可见，全部患有前列腺癌的病人在服用本发明中药组合物后，其PSA指标下降，即本发明的中药组合物对前列腺癌有治疗作用。全体病人的生活品质获得改善，食欲增加，精力旺盛。
在另一起临床试验中，36例性激素依赖性的前列腺癌服用本发明的中药组合物后全部有效。非性激素依赖性的前列腺癌服用本发明的中药组合物后有效率达60-70％。此临床结果表面，本发明产品的疗效明显胜过现有技术领域中常用的药物。
(4)具体实施方式
下面通过实施例进一步阐述本发明。
实施例1按下述配比称取原料(千克)灵芝 3黄芩 1 冬凌草 1大青叶 2菊花 1.5甘草 0.5三七 0.5混合上述原料，研磨成中药粗粉，将所述的粗粉分成六等份供下列1)-6)个提取步骤使用；1)提取生物碱i)将上述得到的一份中药粗粉用0.1％盐酸乙醇(95％)液渗滤或分次浸滤，得到酸性乙醇提取液；ii)减压浓缩得到浓缩物；iii)酸性水(pH＝4-5)洗涤，在一个实施方案中，优选地使该酸性水液冷冻过夜，过滤，得到残渣，残渣用酸性水(pH＝4-5)洗涤，得到酸性水液；iv)向步骤iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，过滤得到总生物碱沉淀；或者a)向步骤iii)中得到的酸性水液中加稀盐酸至pH＝2，用氯仿萃取，得到氯仿层和水层；蒸发氯仿层中的氯仿，得到弱生物碱的残渣；b)所述的水层加碱至pH＝6，用氯仿提取，得到水层和氯仿层，蒸发氯仿层中的氯仿，得到强生物碱的残渣；c)上述b)得到的水层用氢氧化钠溶液调节到pH10，然后用丁醇提取，蒸发丁醇层中的丁醇，得到水溶性的生物碱；合并上述a)、b)和c)得到的生物碱，得到总生物碱。
回收上述的氯仿、丁醇，供提取步骤循环使用。使所述的生物碱残渣低温干燥，结晶。
2)提取多糖用95℃的热水提取上述得到的中药粗粉达2小时，弃去残渣，滤液放置12小时后，向上清液中加入浓度60％的乙醇，离心得到多糖沉淀；所述的多糖沉淀用乙醚精制。
3)提取内酯将上述得到的中药粗粉用乙醚回流，通过聚酰胺柱除色素，回收乙醚，得到总内酯；4)提取皂甙将上述得到的中药粗粉用石油醚回流，蒸发石油醚得到脱脂粗粉，用95％乙醇提取，减压浓缩得到浓缩液；a)浓缩液依次用氯仿、乙醇提取，减压回收氯仿、乙醇，得到皂甙粗品；或者b)浓缩液用丁醇提取，得到丁醇层，减压回收丁醇，得到皂甙粗品。
5)提取香豆精将上述得到的中药粗粉加水煎煮1小时，向浓缩水煎液中加浓盐酸(30％)，除去杂质不溶物，放置澄清液，得到香豆精的粗结晶；干燥后用丙酮洗涤该结晶，干燥，加水重结晶，加热，过滤，脱色，得到水溶液，冷却后得到淡黄色膏状产物的香豆精。
6)提取黄酮a)向上述得到的一份中药粗粉中加70％乙醇浸渍，减压回收乙醇液中的乙醇，残留物用水溶解，过滤，得到水液；用乙酸乙酯提取水液，减压浓缩乙酸乙酯液，得到总黄酮。
将步骤1)-6)提取得到的生物碱、多糖、内酯、皂甙、香豆精和黄酮混合，得到本发明的治疗前列腺癌的中药组合物。
实施例21)提取黄芩甙i)向2千克黄芩中加入10倍(体积)量水煎煮1小时，过滤；ii)用酸将滤液调到pH2，在80℃下保持30分钟，离心沉淀；沉淀物加水搅拌均匀，加碱将pH调节到中性，再加入5倍(体积)量的乙醇，过滤；iii)向滤液中加盐酸，将pH调节到2，搅拌，在80℃下保持30分钟，过滤；iv)所得的沉淀物分别用水、50％乙醇洗涤，再用95％乙醇洗涤或重结晶，得到黄芩甙。
2)提取三七皂甙i)用40％的甲醇提取1.5千克三七根部粗粉中的可溶成分，减压浓缩甲醇提取液，向残留物中加入5倍(体积)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水层再用正丁醇萃取，减压蒸干，经硅胶柱层析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脱得到三七皂甙。
3)提取冬凌草甲素用乙醚提取2千克冬凌草叶干粉，弃去残渣，回收乙醚液中的乙醚，得到绿褐色残留物；甲醇溶解残留物，脱色得到澄明甲醇液，减压浓缩后室温放置过夜，过滤，甲醇母液蒸干，研细；再用中性Al2O3吸附，用乙醚洗脱，结晶。
4)提取靛玉红1.5千克大青叶经晒干加工制成干燥青黛，分次加入30％浓盐酸，直至不再产生泡沫，过滤，用水将沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流2-4次，得到甲醇提取液，过滤，回收甲醇液中的甲醇，残留物用石油醚提取，除去石油醚，残渣用3％NaOH溶液处理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉红。
5)提取菊花黄酮粉碎1.5千克菊花，用50％乙醇提取，减压浓缩，加乙醇，沉淀，过滤，浓缩滤液至无乙醇，残留物用水溶解，过滤，滤液经过DM 130大孔吸附树脂，用去离子水洗至柱无色，再用95％乙醇多次洗脱，收集黄酮，结晶。
6)提取甘草素、异甘草素1.5千克甘草用3倍(体积)量的95％乙醇提取，乙醇液经石油醚萃取，水层经硅胶柱洗脱，用MeOH-H2O为7∶3洗脱，浓缩洗脱液，得到残留物；向残留物中加水至完全溶解，向水液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层用5％Na2CO3水液萃取，用稀盐酸将碳酸钠水液调节到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，经60目聚酰胺柱分离，10-90％的乙醇水溶液梯度洗脱得到甘草素和异甘草素。
7)I.a)灵芝子实体去杂质后粉碎，加水8倍浸泡24小时，加热到95℃下搅拌8小时；b)离心分离提取液与药渣，得到滤液和药渣；c)向药渣中加水3倍进行浸提，在95℃下搅拌8小时；重复步骤b)和c)，II.a)将灵芝发酵液(含有菌球)加热到95℃，搅拌4小时；b离心分离提取液与菌球；c)向含菌球的药渣中加水3倍(体积)，提取2小时，过滤，分离提取液和药渣，d)合并I.b)，c)和II.c)中的滤液，浓缩至原体积的1/8，加入食用酒精(3-5倍)，至酒精达到70％左右，静置醇析24小时，用离心机分离沉淀物，回收酒精，干燥沉淀物。
将上述步骤1)-7)提取得到的活性成分混合得到本发明中药组合物(1)。
将中药组合物(1)粉碎至≤200微米细粉(2)；粉碎，干燥无漏籽/海枣籽(PHOENIX DACTYLIFERA L)，用8倍体积量的无水乙醇提取，优选的是提取三次，合并滤液，减压浓缩，用乙炔化钾处理，得到粉末(3)，将细粉(2)和粉末(3)以100-200∶1的重量比混合，然后装入胶囊，得到本发明的中药组合物的胶囊。
实施例31)提取黄芩甙i)向1.5千克黄芩中加入10倍(体积)量水煎煮1小时，过滤；ii)用稀盐酸将滤液调到pH2，在80℃下保持30分钟，离心沉淀；沉淀物加水搅拌均匀，加碱将pH调节到中性，再加入3倍(体积)量的乙醇，过滤；iii)向滤液中加盐酸，将pH调节到2，搅拌，在80℃下保持30分钟，过滤；iv)所得的沉淀物分别用水、50％乙醇洗涤，再用95％乙醇洗涤或重结晶，得到黄芩甙。
2)提取三七皂甙i)用40％的甲醇提取0.9千克三七根部粗粉中的可溶成分，减压浓缩甲醇提取液，向残留物中加入5倍(体积)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水层再用正丁醇萃取，减压蒸干，经硅胶柱层析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脱得到三七皂甙。
3)提取冬凌草甲素用乙醚提取1.2千克冬凌草叶干粉，弃去残渣，回收乙醚液中的乙醚，得到绿褐色残留物；甲醇溶解残留物，脱色得到澄明甲醇液，减压浓缩后室温放置过夜，过滤，甲醇母液蒸干，研细；再用中性Al2O3吸附，用乙醚洗脱，结晶。
4)提取靛玉红1.2千克大青叶经晒干加工制成干燥青黛，分次加入30％浓盐酸，直至不再产生泡沫，过滤，用水将沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流1小时，得到甲醇提取液，过滤，回收甲醇液中的甲醇，残留物用石油醚提取，除去石油醚，残渣用3％NaOH溶液处理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉红。
5)提取菊花黄酮粉碎0.9千克菊花，用50％乙醇提取，减压浓缩，加70％乙醇，沉淀，过滤，浓缩滤液至无乙醇，残留物用水溶解，过滤，滤液经过DM130大孔吸附树脂，用去离子水洗至柱无色，再用95％乙醇多次洗脱，收集黄酮，结晶。
6)提取甘草素、异甘草素0.9千克甘草用4倍(体积)量的95％乙醇提取，乙醇液经石油醚萃取，水层拌入硅胶，用MeOH-H2O为7∶3洗脱，浓缩洗脱液，得到残留物；向残留物中加水至完全溶解，向水液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层用5％Na2CO3水液萃取，用稀酸将碳酸钠水液调节到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，经聚酰胺柱分离，10-90％乙醇水溶液梯度洗脱得到甘草素和异甘草素。
7)从上海农科所购得灵芝多糖，其用量相当于灵芝原料量3千克，所述的使包含灵芝糖肽和灵芝β-D葡聚糖的灵芝多糖与上述步骤1)-6)提取得到的活性成分混合，将该混合物粉碎成细粉，装入胶囊供使用。
权利要求
1.一种治疗前列腺癌的中药组合物，其特征在于，它是由下述重量配比的原料制成的灵芝3-4黄芩1-2冬凌草 1-2大青叶 1-2菊花0.5-1.5甘草0.5-1.5三七0.5-1.5
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其中各原料的重量配比是灵芝∶黄芩∶冬凌草∶大青叶∶菊花∶甘草∶三七＝3∶1.5∶1.2∶1.2∶0.9∶0.9∶0.9
3.如权利要求1所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，它包括混合提取制备方法或目的物提取制备方法。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其中所述的混合提取制备方法包括1)准备原料将灵芝、黄芩、冬凌草、大青叶、菊花、甘草、三七以重量比为3-4∶1-2∶1-2∶1-2∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的比例进行粉碎混合，将所述的混合物分成六等份；2)提取生物碱i)将步骤1)得到的一份中药混合物用0.1％盐酸乙醇液渗滤或分次浸滤，得到酸性乙醇提取液；ii)减压浓缩得到浓缩物；iii)酸性水(pH＝4-5)洗涤，过滤，得到残渣，残渣用酸性水(pH＝4-5)洗涤，得到酸性水液；iv)向步骤iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，过滤得到总生物碱沉淀；或者a)向步骤iii)中得到的酸性水液中加稀酸至pH＝2，用氯仿萃取，得到氯仿层和水层；蒸发氯仿层中的氯仿，得到弱生物碱；b)所述的水层加碱至pH＝6-7，用氯仿提取，得到水层和氯仿层，蒸发氯仿层中的氯仿，得到强生物碱；c)上述b)得到的水层用碱调节到pH10，然后用丁醇提取，蒸发丁醇层中的丁醇，得到水溶性的生物碱；d)合并上述a)、b)和c)得到的生物碱，得到总生物碱；3)提取多糖将步骤1)得到的一份中药混合物用95-100℃的热水提取，弃去残渣，滤液放置12小时后，向上清液中加入浓度50％以上的乙醇，离心得到多糖沉淀；4)提取内酯将步骤1)得到的一份中药混合物用乙醚回流，除去色素，回收乙醚，得到总内酯；5)提取皂甙将步骤1)得到的一份中药混合物用石油醚回流，蒸发石油醚得到脱脂粗粉，用90-95％乙醇提取，减压浓缩得到浓缩液；a)浓缩液依次用氯仿、乙醇提取，减压回收氯仿、乙醇，得到总甙粗品；或者b)浓缩液用丁醇提取，减压回收丁醇，得到皂甙粗品；6)提取香豆精将步骤1)得到的一份中药混合物加水煎煮1-2小时，浓缩水煎液，加浓盐酸，除去杂质不溶物，放置澄清液，得到香豆精的粗结晶；7)提取黄酮向步骤1)得到的一份中药混合物加70-80％乙醇浸渍，减压回收乙醇液中的乙醇，残留物用水溶解，过滤，得到水液；用乙酸乙酯提取水液，减压浓缩乙酸乙酯液，得到总黄酮；将步骤2)-7)提取得到的生物碱、多糖、内酯、皂甙、香豆精、黄酮混合，得到所述的中药组合物。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其中所述的目的物提取制备方法包括1)提取黄芩甙i)向上述黄芩组分中加入10-15倍(体积)量水煎煮1-2小时，过滤；ii)用酸将滤液调到pH1-2，在80-90℃下保持30-40分钟，离心沉淀；沉淀物加水搅拌均匀，加碱将pH调节到中性，再加入3-5倍(体积)量的乙醇，过滤；iii)向滤液中加酸将pH调节到1-2，搅拌，在80-90℃下保持30-40分钟，过滤；iv)所得的沉淀物用分别用水、50％乙醇洗涤，再用95％乙醇洗涤或重结晶，得到黄芩甙；2)提取三七皂甙i)用浓度在50％以下的甲醇提取三七根部粗粉中的可溶成分，减压浓缩甲醇提取液，向残留物中加入3-5倍(体积)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水层再用正丁醇萃取，减压蒸干，经硅胶柱层析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脱得到三七皂甙；3)提取冬凌草甲素用乙醚提取冬凌草叶干粉，弃去残渣，回收乙醚液中的乙醚，得到绿褐色残留物；用甲醇溶解残留物，脱色得到澄明甲醇液，减压浓缩后室温放置过夜，过滤，甲醇母液蒸干，研细；用乙醚洗脱，结晶；4)提取靛玉红大青叶经晒干加工制成干燥青黛，分次加入30％浓盐酸，直至不再产生泡沫，过滤，用水将沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流2-4次，得到甲醇提取液，过滤，回收甲醇液中的甲醇，残留物用石油醚提取，除去石油醚，残渣用3％NaOH溶液处理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉红；5)提取菊花黄酮粉碎菊花，用50-70％乙醇提取，减压浓缩，加90-95％乙醇，沉淀，过滤，浓缩滤液至无乙醇，残留物用水溶解，过滤，滤液经过大孔吸附树脂，用去离子水洗至柱无色，再用95％乙醇多次洗脱，收集黄酮，结晶；6)提取甘草素、异甘草素甘草用3-4倍(体积)量的90-95％乙醇提取，乙醇液经石油醚萃取，水层拌入硅胶，用MeOH-H2O 7∶3洗脱，浓缩洗脱液，得到残留物；向残留物中加水至完全溶解，向水溶液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层用5％Na2CO3水液萃取，用稀酸将碳酸钠水液调节到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，经聚酰胺柱分离，用10-90％乙醇水溶液梯度洗脱得到甘草素和异甘草素；7)使包含灵芝糖肽和灵芝β-D葡聚糖的灵芝多糖与上述步骤1)-6)提取得到的活性成分混合得到所述的中药组合物。
6.根据权利要求5所述的方法，它还包括步骤8)a)将所述的步骤1)-7)得到的活性成分粉碎至≤200微米细粉；b)粉碎，干燥无漏籽/海枣籽或酸石榴籽/矮石榴籽，用8倍体积量的无水乙醇提取，减压浓缩，用乙炔化钾处理，得到粉末，c)将a)、b)所得的物质以100-200∶1的重量比混合。
7.根据权利要求6所述的方法，它还包括步骤d)将c)中得到的混合物装入胶囊。
8.如权利要求1所述的中药组合物在制备治疗前列腺癌的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种中药组合物，它是以灵芝、黄芩、冬凌草、大青叶、菊花、甘草和三七为原料制成的。其制备方法包括混合提取和目的物提取，以多糖、内酯、生物碱、黄酮、香豆精和皂甙，或以灵芝糖肽、黄芩甙、冬凌草甲素、靛玉红、菊花黄酮、甘草素、异甘草素和三七皂甙为提取的有效成分。该中药组合物能有效地治疗前列腺癌，具有副作用小，有效率高的特点。
文档编号A61P13/00GK1478538SQ0213665
公开日2004年3月3日 申请日期2002年8月26日 优先权日2002年8月26日
发明者杨亿泓 申请人:上海中耀生物科技有限公司