专利名称：适用于眼科疾病治疗的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及适用于眼科疾病治疗的药物组合物。
背景技术：
历史上，对眼睛的治疗处理基本上涉及对眼组织和眼睛前部的体液直接给药。只在最近进行了涉及对眼后部(眼色素层区、玻璃体液、脉络膜和视网膜)给药的研究。
眼睛是孤立的和高度受保护的器官。
具体的，视网膜色素化的上皮和视网膜毛细管的接合复合体构成了血-视网膜屏障，因此药物的系统给药在眼的后部不能达到足够的水平。
另一方面，即使是局部给药，也只有少量药物到达视网膜，这是因为透过眼外壁的渗透是极低的。尽管这样，存在许多眼后部的疾病需要药物的治疗，例如细菌性的或真菌性的眼内炎、病毒性视网膜炎、玻璃体视网膜病、弓形体病、眼色素层炎、肿瘤、血管疾病、糖尿病性视网膜病、老年性斑退化、青光眼等等。为了克服这些困难，已经研究了各种给药方法。
有的作者用静脉内注射热敏脂质体，用微波产生的的脉冲使脂质体在视网膜血管中溶解(Khoobehi B.et al.0phthalmology 1988 Jul，95(7)950-5)。
也已经叙述了将药物注射到玻璃体液中(Martidis A.et al.0phthalmology2002，195(5)920-7)。
然而，这样的注射常常要反复进行，而且会对眼结构带来危险的并发症。
最后，有人提出用缓释眼植入物，例如Vitrasert，这是一种手术植入的眼内的植入物，它在六个月内释放更息洛韦(Morley MG Et al 0phthalmology 1996；103(10)1517)。
从上述的报告中清楚地看到，只有通过非常复杂的、费时和昂贵的方法，才可能把药物输送到眼的后部。
发明内容
现在，已经发现了能够克服现有技术困难的适用于眼科疾病的治疗的药物组合物。所述的组合物包含固体脂质的纳米颗粒(SLN)，其平均直径在50-400nm之间，优选在100-200nm之间，其中在所述的纳米颗粒中结合了用于特定的眼科治疗的药物活性的物质。
所述的组合物被制备成两种形式，一种形式适合于静脉内给药，一种适合于局部眼部应用。
现已发现，本发明的固体脂质纳米颗粒能够将药物输送到玻璃体液和输送到视网膜，通过上述的给药途径克服了现有技术的困难。
具体实施例方式
本发明涉及使用固体脂质纳米颗粒(SLN)来制备适用于眼科疾病治疗的药物组合物。将用于特定的眼科治疗的药理学活性物质结合在所述的纳米颗粒中。含有药理学活性物质的纳米颗粒基本上按照欧洲专利No.0526666的方法制备的，该方法包含以下的步骤a)将含有药物或其复合物的溶化的脂质物质与包含并优选由水、表面活性剂、辅助表面活性剂、任选地该药物的抗衡离子构成的混合物一起混合，预热到至少等于所述的脂质物质的熔融温度的温度，这样得到具有至少等于所述的脂质物质的熔融温度的温度的微乳剂；b)将在步骤a)得到的微乳剂分散在冷却到2-5℃之间的水或水性介质中，这样得到结合了药物的固体脂质物质的分散体；c)将在步骤b)中得到的分散体用水或用水性介质通过渗滤法来洗涤，以便实际上完全除去表面活性剂和辅助表面活性剂；d)将在步骤c)中得到的分散体通过冷冻干燥或喷雾干燥或蒸发，以便得到结合了药物的固体脂质纳米颗粒(SLN)。
步骤a)的微乳剂可用灭菌过滤器过滤灭菌。在步骤c)中得到的分散体可在高压锅中灭菌或用灭菌过滤器过滤灭菌。
按照另一个实施方案，将在步骤a)中得到的微乳剂加入包含，优选由水、表面活性剂、辅助表面活性剂和脂质构成的混合物中，加热到至少等于所述的脂质物质的熔融温度的温度，将这样得到的混合物分散在冷却到2-5℃之间的水或水性介质中。
按照另一个实施方案，在步骤a)结束时，加入一种适合于在体积上使该脂质纳米颗粒稳定化的物质。
用于本发明方法的脂质物质选自-甘油三酯，特别是三月桂精、三己精、三硬脂精、三棕榈精、癸酸/辛酸甘油三酯(Mygliol，Captex，和Labrafac)；-甘油二酯，特别是二棕榈精和二硬脂精；-甘油单酯，特别是甘油硬脂酸酯(Myvapex 600)和甘油棕榈硬脂酸酯(Precirol)；-脂肪醇，特别是鲸蜡醇和硬脂醇；-具有C10-C22链的脂肪酸，癸酸、亚油酸和它们的多元醇酯；-胆固醇和它的酯，特别是胆固醇半琥珀酸酯、胆固醇丁酸酯和胆固醇棕榈酸酯。
表面活性剂选自-卵磷脂，如Lipoid 75和Epicuron 200，磷脂和它们的氢化形式，以及它们的合成和半合成衍生物；-胆盐，特别是甘胆酸钠、牛磺胆酸钠、和牛磺脱氧胆酸钠；-Tween 20，Tween 40，Tween 80，Span 20，Span 40和Span 60；-乳化剂，特别是明胶。
辅助表面活性剂选自-低分子量的醇或二醇，特别是丁醇、己醇和己二醇；-低分子量的脂肪酸，特别是丁酸和辛酸；-磷酸酯、苄醇和胆盐。
适合于在体积上使脂质纳米颗粒稳定化的物质选自二棕榈酰基磷脂酰基乙醇胺-PEG、二酰基磷脂酰基乙醇胺-PEG(PEGM.W.750-2000)和用PEG-甲基醚PEG化的脂肪酸(PEG M.W.750-2000)。
本发明适用于眼科疾病治疗的药理学活性物质可以是亲水性类型的或疏水性类型的，可包含抗生素、抗真菌剂、抗病毒剂、抗肿瘤剂、用于糖尿病性视网膜病的药物、固醇或非固醇抗炎剂、和抗青光眼药。优选地，所述的药理学活性物质选自两性霉素、咪康唑、更昔洛韦、沙奎那韦、阿昔洛韦、泛昔韦、阿糖腺苷、碘苷、β-干扰素、紫杉醇、甲氨蝶呤、阿霉素、促血管生成素1、双氯高灭酸、吲哚美辛、ketorolac、吡罗昔康、氟比洛芬、地塞米松、曲安西龙、氢可的松、氟米龙、利美索龙、噻吗洛尔、倍他洛尔、和乙酰唑胺。
本发明固体脂质纳米颗粒(SLN)的平均直径在50-400nm之间，优选在100-200nm之间，多分散性在0.06-0.30之间，优选在0.10-0.20之间。
所述的SLN的药理学活性物质含量在0.1-7.0％之间。
它们可用来制备用于静脉内给药或局部眼部应用的药物组合物。
用于静脉内给要的组合物这样制备将SLN分散在等渗水性溶液中，所用的SLN的量为能得到10-250mg/mlSLN的浓度。
优选的所述水性溶液通过加入甘油达到等渗。
用于局部眼部给药的组合物以同样的方法制备，再加入0.1-0.4％增拈物质，例如聚乙烯醇或羟基丙基纤维素，并含1.0-25％w/v的SLN。
本发明还涉及眼科疾病的治疗方法，包含，优选由治疗有效量的如上定义的药物组合物的静脉内或局部眼部给药构成。
用于静脉内给药的剂量为0.01-5.0mg活性物质/千克体重的组合物的量。用于局部眼部给药的剂量为0.01-5.0mg活性物质/眼的组合物的量。
本发明组合物与现有技术比较有着重要的优点，表现在制备和应用的简单性和活性物质的药效上。
在许同给药和局部眼部给药之后，它们确实能使SLN传输到眼的后部。
在任何情况下，血-视网膜屏障都容易克服，结合在SLN中的活性物质可达到玻璃体液和视网膜。
应该注意的是，即使活性物质是实际上不溶解在水性介质中的，所述的组合物也能跨越血-视网膜屏障而传输。
最后，用于静脉内给药的组合物可通过如上所述的体积上稳定化的SLN来构建，其优点是可使得它们被巨噬细胞的吞吸最小化。
为了说明固体脂质纳米颗粒的制备方法以及所得到的产物和它的眼科给药的效果，报告以下的实施例。
实施例1(制备SLN)含有1∶2庆大霉素-十六烷基磷酸酯的200mg熔融的硬脂酸(在70℃)(28.25mg，相当于12mg庆大霉素)复合物加入由过滤水(2ml)、Epikuron200(150mg)和牛磺胆酸钠(285ng)构成的混合物中，加热到70℃。得到的微乳剂(温度为70℃)用机械搅拌器分散在2-3℃的水中，体积比为1/5，得到固体脂质纳米颗粒(SLN)。
得到的分散体通过渗滤用水洗涤两次，用于注射。
SLN的平均直径为75nm，多分散性为0.2，冻干产品的庆大霉素含量为3.3％。
实施例2(静脉内给药)用实施例1制备的固体脂质纳米颗粒SLN)制备了等渗水性分散体，所具有的SLN浓度相当于6mg/ml庆大霉素。
将分散体注射入三只雄性新西兰白兔(体重2.8-3.5kg)的耳缘静脉。庆大霉素的注射剂量为1.5mg/kg。
将购得的Gentomil，含相同剂量的庆大霉素，注射入另外三只体征相同的兔子作为对照。
给药后1小时，得到以下结果，代表在各个眼区域中的庆大霉素浓度的平均值。
(a)SLN的分布-在水性体液中庆大霉素的浓度右眼＝300ng/100μl左眼＝326ng/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度右眼＝499ng/100μl左眼＝531ng/100μl-在视网膜中庆大霉素的浓度右眼＝1225ng/100μl左眼＝1365ng/100μl(b)Gentomil组合物-在水性体液中庆大霉素的浓度右眼＝50ng/100μl左眼＝56ng/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度
右眼＝3.5ng/100μl左眼＝2.5ng/100μl-在视网膜中庆大霉素的浓度无法检出。
实施例3(静脉内给药)重复实施例2，但不同处在于注射剂量为2mg/kg。
给药后三小时，得到以下结果。
(a)SLN的分布-在水性体液中庆大霉素的浓度右眼＝244ng/100μl左眼＝120ng/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度右眼＝126ng/100μl左眼＝157ng/100μl-在视网膜中庆大霉素的浓度右眼＝99.5ng/100μl左眼＝84ng/100μl(b)Gentomil组合物-在水性体液中庆大霉素的浓度右眼＝40ng/100μl左眼＝36ng/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度无法检出-在视网膜中庆大霉素的浓度无法检出。
实施例4(局部外用眼部给药)用实施例1制备的固体脂质纳米颗粒(SLN)制备等渗水性分散体，所具有的SLN的浓度相当于2mg/ml庆大霉素。
将聚乙烯醇(M.W.20000)加入该分散体作为增粘剂，其量为分散体的0.2％。用三只具有实施例2所述的体征的兔子做实验。
将50μl SLN分散体局部外用到每只兔子的一个眼睛的下结膜袋内，进行给药。
作为对照，以相同方式通过购得的称为Genticol的组合物将相同剂量的庆大霉素给予三只具有相同体征的兔子。
给药后1小时，得到以下结果，代表庆大霉素在眼内的浓度的平均值。
(a)SLN的分布-在水性体液中庆大霉素的浓度＝10ng/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度＝2.76ng/100μ-在视网膜中庆大霉素的浓度＝890ng/100μl(b)Gentomil组合物-在水性体液中庆大霉素的浓度＝5ng/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度无法检出-在视网膜中庆大霉素的浓度无法检出实施例4(局部外用眼部给药)重复实施例4，但不同之处在于给药剂量为200μl。
给药后1小时，得到以下结果，代表庆大霉素在眼内的浓度的平均值。
(a)SLN的分布-在水性体液中庆大霉素的浓度＝35μg/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度＝7.84μg/100μ-在视网膜中庆大霉素的浓度＝5.4μg/100μl(c)Gentomil组合物-在水性体液中庆大霉素的浓度＝16μg/100μl-在玻璃体液中庆大霉素的浓度痕量-在视网膜中庆大霉素的浓度痕量
权利要求
1.固体脂质纳米颗粒(SLN)在制备适用于通过静脉给药或局部外用眼部给药的眼科疾病的治疗的药物组合物中的用途，其中所述SLN与用于治疗所述疾病的药理学活性的物质结合。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的SLN的平均直径在50-400nm之间，多分散性在0.06-0.30之间。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的SLN的平均直径在100-200nm之间，多分散性在0.10-0.20之间。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的SLN具有的药理学活性物质的含量在0.1-7.0％之间。
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的适用于通过静脉内给药治疗眼科疾病的药物组合物基本上由所述的SLN在等渗水性溶液中的分散体构成，该分散体所具有的SLN的浓度在10-250mg/ml之间。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的适用于通过局部外用眼部给药治疗眼科疾病的药物组合物基本上由所述的SLN在等渗水性溶液中的分散体构成，该分散体所具有的SLN的浓度在1.0-25％w/v之间，并还含有0.1-0.4％的增粘物质。
7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药理学活性的物质选自两性霉素、咪康唑、更昔洛韦、沙奎那韦、阿昔洛韦、泛昔韦、阿糖腺苷、碘苷、β-干扰素、紫杉醇、甲氨蝶呤、阿霉素、促血管生成素1、双氯高灭酸、吲哚美辛、ketorolac、吡罗昔康、氟比洛芬、地塞米松、曲安西龙、氢可的松、氟米龙、利美索龙、噻吗洛尔、倍他洛尔、和乙酰唑胺。
8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的SLN通过以下方法制备，其中a)将含有药物或其复合物的熔融的脂质物质与包含水、表面活性剂、辅助表面活性剂、和任选地该药物的一种抗衡离子的混合物一起混合，预热到至少等于所述脂质物质的熔融温度的温度，由此得到微乳剂，其温度至少等于所述的脂质物质的熔融温度；b)将在步骤a)中得到的微乳剂分散在冷却到2-5℃之间的水或水性介质中，由此得到结合了药物的固体脂质纳米颗粒的分散体；c)将在步骤b)中得到的分散体用水或水性介质通过渗滤进行洗涤，基本上完全除去表面活性剂和辅助表面活性剂；d)将在步骤c)中得到的分散体通过冷冻干燥或喷雾干燥或蒸发，由此得到结合了药物的固体脂质纳米颗粒(SLN)。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，在步骤a)中得到的微乳剂加入包含水、表面活性剂、辅助表面活性剂、和脂质的混合物中，加热到至少等于脂质的熔融温度的温度，将这样得到的混合物分散在冷却到2-5℃的水或水性介质中。
10.如权利要求8所述的用途，其特征在于，在步骤a)结束时，加入适合于使SLN稳定化的物质，所述的物质选自二棕榈酰基磷脂酰基乙醇胺-PEG、二酰基磷脂酰基乙醇胺-PEG(PEG M.W.750-2000)和用PEG-甲基醚PEG-化的脂肪酸(PEG M.W.750-2000)。
11.治疗眼科疾病的方法，包含治疗有效量的药物组合物的静脉内或局部外用眼部给药，所述药物组合物包含含有用于治疗所述眼科疾病的药理学活性的物质的固体脂质纳米颗粒。
12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，用于静脉内给药的剂量是含有每千克体重0.01-5.0mg活性物质的所述组合物的量。
13.如权利要求11所述的方法，其特征在于，用于局部外用眼部给药的剂量是含有对每只眼睛0.01-5.0mg活性物质的所述组合物的量。
14.适用于通过静脉内或局部外用眼部给药的治疗眼科疾病的药物组合物，基本上由固体脂质纳米颗粒(SLN)的等渗水性分散体构成，该纳米颗粒的平均直径在50-400nm之间，多分散性在0.06-0.30之间，用于治疗所述疾病的药理学活性物质结合在所述的SLN中。
15.如权利要求14所述的药物组合物，其特征在于，所述的水性分散体含有增粘物质。
16.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述的SLN的平均直径在100-200nm之间，多分散性在0.10-0.20之间。
17.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，为了用于静脉内给药，所述的等渗水性分散体所具有的SLN的浓度在10-250mg/ml之间。
18.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，为了用于局部外用眼部给药，所述的等渗水性分散体所具有的SLN的浓度在1-25％w/v之间，并含有0.1-0.4％的增粘物质。
19.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述的SLN含有的药理学活性物质的含量在0.1-7.0％之间。
20.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述的药理学活性的物质选自两性霉素、咪康唑、更昔洛韦、沙奎那韦、阿昔洛韦、泛昔韦、阿糖腺苷、碘苷、β-干扰素、紫杉醇、甲氨蝶呤、阿霉素、促血管生成素1、双氯高灭酸、吲哚美辛、ketorolac、吡罗昔康、氟比洛芬、地塞米松、曲安西龙、氢可的松、氟米龙、利美索龙、噻吗洛尔、倍他洛尔、和乙酰唑胺。
21.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述的SLN的脂质选自三月桂精、三己精(tricapriloin)、三硬脂精、三棕榈精、癸酸/己酸甘油三酯、二棕榈精、二硬脂精、甘油单硬脂酸酯、甘油棕榈硬脂酸酯、鲸蜡醇、硬脂醇、有C10-C22链的脂肪酸、胆固醇半琥珀酸酯、胆固醇丁酸酯和胆固醇棕榈酸酯。
全文摘要
固体脂质纳米颗粒(SLN)在制备适用于通过静脉给药或局部外用眼部给药的眼科疾病的治疗的药物组合物中的用途，所述的SLN的平均直径在50－400nm之间，其中所述SLN与用于治疗所述疾病的药理学活性的物质结合。
文档编号A61K9/107GK1756529SQ200380109872
公开日2006年4月5日 申请日期2003年10月31日 优先权日2002年10月31日
发明者玛瑞亚·罗莎·加斯库, 简·帕罗·查亚, 玛可·珐巴兹奥·萨彤 申请人:玛瑞亚·罗莎·加斯库, 简·帕罗·查亚