专利名称：人参皂甙单体Rb的制作方法
技术领域：
本发明属于生物制品在制药中的应用。
背景技术：
内皮素-1是近年来新被发现的生物活性物质，在体内若过量的分泌可导致各种疾病的发生。在心肌缺血和心衰的一些患者中发现血浆中内皮素-1含量明显高于正常人，说明内皮素与心肌缺血和心衰发病密切相关。目前主要通过(1)抑制神经-体液因素的过度活动，(2)逆转心肌细胞凋亡，(3)对抗TNFα，(4)生长素或生长素释肽，(5)促进钾通道的表达和功能，(6)抑制ANP及BNP的降解，(7)细胞移植来治疗和心衰。临床上用于治疗心肌缺血的药物，大致可分为硝酸酯类、钙拮抗剂、β受体阻滞剂等几大类西药。虽然这些药物都已经在临床应用，但都存在不同程度的毒副作用而不同程度损伤人体各器官，特别是这些药物还没有用于由内皮素-1导致心衰和心肌缺血。因此，迫切需要开发新的一类高效、无毒及无反弹现象的中药新药。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗心肌缺血和心衰的药物，即提供治疗由内皮素-1及异丙肾上腺素导致的心肌缺血、心衰的药物。
将Rb1(C54H92O23·H2O)作为有效成分制成一种中药新药，通过静脉注入体内即可达到上述的目的。将Rb1通过静脉注入由内皮素-1及异丙肾上腺素制备的心肌缺血和心衰的动物模型中，其治疗效果明显的高于临床应用的其它药物，药效稳定且无毒副作用。
下面通过实例详细说明本发明的效果。
例1 Rb1改善内皮素-1诱发的豚鼠在体心衰设若干个实验剂量组，每组10只成年健康豚鼠(300-350g)进行麻醉，开胸，人工呼吸，向心室插入聚乙烯导管(内径1.5mm)，用多导型记录仪同步记录心电图(ECG)，左室收缩压(LVSP)左室舒张末期压(LVEDP)，室内最大升降速率(±dp/dt)根据ECG的R波计算心率(HR)以及血流动力学指标(AF，SV，CBF)。首先记录上述正常各项指标，稳定10分钟之后，从静脉注入内皮素-1(37.5μg/kg)制成心衰模型，并比较于正常的上述各项指标。心衰状态稳持续5分钟后再从静脉注入Rb1285μg/kg，结果表明Rb1明显的改善了由内皮素-1导致的心衰。结果列于表-1。
表-1Rb1改善由内皮素-1导致豚鼠在体心衰HR AP LVSPLVEDP +dp/dt -dp/dt(bpm) (kPa) (kPa) (kPa) (kPa·S-1) (kPa·S-1)Control 365±50 11.99±2.5 5.985±0.8 0.1729±0.1 199.5±19.2 146±43.6ET-1 550±68 0 0.33±0.5 0.665±0.814106±0.1819.9±2.137.5 *** ** * ** ** **μg/kgRb1 384±14.5 8.5±1.5 4.655±0.01 0.3325±0.1 172.9±0.4 129±14.27285ug/kg ** ** ** ***n＝10，X±S*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001例2 Rb1改善内皮素-1诱发豚鼠离体心衰设若干实验组，每组8只成年健康豚鼠(300-350g)，将动物断髓处死，迅速取出心脏，立即作动脉插管进行逆向灌流，用Langenderff离体灌流方法，向左心室插管，记录左室内压，在心尖部放置电极引导心电图，逆向灌流10分钟，待心脏活动稳定后，改为顺向灌流，将通入95％O2+5％CO2混合气体pH7.4-7.5，离体心脏在前负荷15cm水标，后负荷70cm水标的条件下工作。其指标与实施例1相同，待稳定后记录各项正常指标作为对照，10分钟之后灌入内皮素-1(100pmol/L)出现心衰，并记录上述各项指标，心衰持续稳定5分钟后，再灌入Rb1(300μM)记录观察Rb1改善内皮素-1诱发的心衰效果。结果列于表-2表-2 Rb1改善内皮素-1诱发豚鼠离体心衰HR LVSP LVEDP +dp/dt -dp/dt(bpm) (kPa) (kPa) (kPa·S-1)(kPa·S-1)Control230±18.3 6.5±0.51 0.6±0.03 605±33.58 405±15.23ET-1 105±8.5 2.0±0.45 1.4±0.15 25±1.125.5±0.23(100pmol/L)***** ********Rb1(300μM) 210±16.7 4.0±0.16 0.1±0.01 560±12.28 420±14.25
************n＝8，X±S**P＜0.01***P＜0.001例3 Rb1改善内皮素-1诱发大白鼠导致心肌缺血设若干实验剂量组，每组10只大白鼠(400-450g)。麻醉后用心电图II导联记录心电图指标，正常指标稳定10分钟，以ST段下移为参照。
尾静脉注入ET-1(10μg/kg)，以ST段下移0.2mv为明显的心肌缺血指标，稳定持续心肌缺血10分钟之后再注入Rb1(40mg/kg)，结果表明Rb1明显的改善了内皮素-1引起的心肌缺血的现象。结果列于表-3。
表-3Rb1改善内皮素-1诱发大白鼠导致心肌缺血HR ST位移R(mv) QRS(ms) T(mv) QT(ms)(次)(mv)46.09±0.2Control211±33 1.68±0.1100.1±0.1130±389202±27 1.39±0.2046.09±0.9 0.2±0.05ET-1(10μg/kg) 0.2±0.1* 137±12** * 8 *159±34 1.62±0.4046.09±0.8 -0.1±0.1Rb1(40mg/kg) 0* 134±14** * 9*n＝10，X±S， *P＜0.01例4 Rb1改善异丙肾上腺素诱发大白鼠心肌缺血设若干实验剂量组，每组10只大白鼠(400-450g)。麻醉后用心电图II导入记录心电图指标，正常指标稳定10分钟，以ST段下移为参照。
腹腔注入异丙肾上腺素(0.3ml/100g)，通过ST段下移0.2mv以及心肌力学指标的降低20％为明显的心肌缺血指标，稳定持续心肌缺血10分钟之后再注入Rb1(40mg/kg，80mg/kg)，结果表明Rb1明显的改善了异丙肾上腺素引起的心肌缺血的现象。结果列于表-4表-4Rb1改善异丙肾上腺素诱发大白鼠心肌缺血HR ST LVSP LVDP +dp/dt -dp/dt LVED APDP(kPa)(beat/min) (move) (kPa) (kPa) max max P(kPa) (kPa)
Contro594±-0.4± 16.7±281±28 0 20.9±1.2 -0.2±0.1 937±20 3.7±1.51 28 0.1 2.3异丙肾598±-0.4± 17.9±(3ml/ 330±39*2±0.05*26.5±2.3*-0.9±0.3*984±42*1.2±4.2*37 0.1 1.9*kg)Rb1588±0.1± 16.5±40mg/ 281±51*0*18.5±2.4*-1.1±1.1 957±31*1.8±0.6*35*0.1*1.5*kgRb1438± -0.4±16.9±80mg/ 204±26*0 18±6.5-1.3±0.5*772±44*6.8±0.8*21*0.1*1.9kgn＝10，X±S，*p＜0.01例5 在由1.5％巴比妥钠5ml静脉注入鼠所致心力衰竭动物模型中，Rb1(25mg/kg)组呈现正性肌力作用和降压作用。而Rb1(50mg/kg)则呈现正性肌力作用及升压作用。这表明Rb1的低剂量是对心力衰竭的动物模型中动力学指标作用明显，能够有效的改善心肌收缩力，对心肌细胞有兴奋作用，从而缓解心力衰竭的负作用。此外Rb1舒张血管的功能也起到一定的作用。
权利要求
1.人参皂甙单体Rb1在制备治疗由内皮素-1及异丙肾上腺素导致的心肌缺血和心衰疾病的药物中的应用。
全文摘要
人参皂甙单体Rb
文档编号A61P9/04GK1569013SQ20041001083
公开日2005年1月26日 申请日期2004年4月30日 优先权日2004年4月30日
发明者曾庆华, 马越, 刘俊 申请人:东北师范大学