专利名称：大黄素、大黄多糖在抗人类免疫缺陷病素(hiv)中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及大黄素、大黄多糖的用途，尤其涉及大黄素和大黄多糖在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)中的新用途。
背景技术：
自人类1981年发现第一例艾滋病(AIDS)以来世界范围内AIDS的流行迅速漫延，以中国为例(截止2004年10止)全国HIV感染者84万人AIDS病人8万人，已死亡16万人。因此一个以研究抗HIV和治疗AIDS药物的高潮在全世界铺开。但是至今为止还是没有找到一个既无毒无副作用，又有较好治疗效果的药问世。
目前治疗AIDS的方法有三，一是抗AIDS；二是免疫；三是抗机会性感染。第一种是抗病源(HIV)治疗；第二种是提高患者自身免疫的辅助治疗；第三是切断传染途径的治疗。抗HIV的化学药(如齐夫拉定)虽有较好效果，但副作用大，病人难以耐受和HIV出现抗药性，停药后病人马上出现反弹等问题，目前无法解决。后两者只是辅助治疗和一种防疫措施对已发病患者是无能为力的。因此，寄希望于找到一种既无毒副作用又有效的抑制HIV是致关重要的。那么中药就成了一个唯一的亮点。从我们目前所查找到公开资料看还没有一种抗HIV和抗AIDS的中药问世。但据文献看有报导甘草甜素有抗HIV的作用和大黄有抗HIV作用。前者没有深入研究，后者没有找出抗HIV的具体物质，所以该研究不彻底和只是发现苗头而已。
发明内容
本发明的目的在于，提供大黄素和大黄多糖在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)中的新用途，为治疗AIDS提供更好的抗病毒制药原料。
本发明提供的技术方案如下提供大黄素、大黄多糖在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)的应用；用CO2超临界萃取法从中药大黄中提取大黄素、大黄多糖，然后用大黄素、大黄多糖分别或混合作抑制HIV病毒的试验。
本发明的内容是用大黄素和大黄多糖在体外(细胞内)去抑制HIV并证明上述二者有抗HIV的作用。其具体做法是1、先制备不同浓度的大黄素和大黄多糖溶液(大黄素浓度为70-98％，大黄多糖的浓度为80％-95％)。
2、取单层细胞100微升，在37℃，5％CO2培养箱培养24小时，使细胞长成单层备用。
3、药物对细胞的毒性试验将大黄素提取物加到已长满单层细胞的培养基上。在37℃、50％CO2环境中培养72小时后，观察细胞活性。用不同浓度的大黄素和大黄素多糖，每种浓度重复四次，观察药物对细胞的影响，选择对细胞生长没有影响的大黄素、大黄多糖和二者混合液的浓度，作为下一步实验的标准浓度，其中大黄素的浓度为70-98％，大黄多糖的浓度为80％-95％。
4、大黄素和大黄多糖抗HIV在已经成功培养细胞并加了大黄素和大黄多糖的培养板上再加上一定浓度的HIV液。加过HIV后观察细胞生长情况与对照组比较。
本发明具有如下特征试验(1)对照组在无大黄素和多糖的培养板上加上HIV。
(2)试验组A、在有大黄素和大黄多糖二者混合液的培养板上加HIV；B、在有大黄素细胞生长良好的培养板上加上HIV；C、在有大黄多糖的细胞生长良好的培养板上加上HIV。
(3)对照组A、在无大黄素和大黄多糖二者混合液的培养板上加HIV；B、在无大黄素细胞生长良好的培养板上加上HIV；C、在无大黄多糖的细胞生长良好的培养板上加上HIV。
结果对照组的细胞死亡，病毒量增加；试验组的A组(大黄素和大黄多糖混合组)，细胞生长良好，病毒量下降。说明试验组中的A组对HIV有明显的抑制作用，试验重复四次结果相同，可将上述从中药大黄中提取的大黄素和大黄多糖作为有效成分用于制备治疗AIDS的下列药物胶囊、片剂、颗粒剂和注射剂。
具体实施例方式
1、材料细胞TC740，培养液RPMI-1640加上小牛血清(浓度10％)，100U/ML(青霉素)100μg/ML(链霉素)和常规细胞培养液。
病毒是经TC740细胞活化增殖，细胞病变达75％以上的HIV，浓度为104-8CID50/0.1ML。大黄素和大黄多糖采用中药大黄为原料，经CO2超临萃的方式取提得到大黄素和大黄多糖。
2、方法细胞制备，在细胞培养板上加2×103-5/ML浓度TC740细胞100μL，在37℃，50％CO2培养12-24小时。
3、细胞毒性试验在细胞培养板上加大黄素和大黄多糖混合物，浓度在1600μg/ML-25μg/ML之间。在50％CO2环境下培养72小后观察。
4、试验(1)对照组在无大黄素和大黄多糖的培养板上加上HIV。
(2)试验组在有大黄素和大黄多糖混合液的培养板上加HIV。
(3)结果对照组细胞死亡，病毒量增加；试验组细胞无变化，病毒量明显减少，试验重复四次结果相同。
可将上述大黄素和大黄多糖作为有效成分用于制备治疗AIDS的下列药物胶囊、片剂、颗粒剂和注射剂。
上述大黄素和大黄多糖除了可以从中药大黄中提取外，还可从其它含有大黄素和大黄多糖的中药中提取，因此，凡是将大黄素和大黄多糖应用在治疗AIDS领域都是本发明的保护范围。
权利要求
1.大黄素、大黄多糖在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)中的应用。
2.根据权利要求1所述的大黄素、大黄多糖在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)中的应用，其特征在于，将所述大黄素和大黄多糖作为有效成分用于制备胶囊、片剂、颗粒剂和注射剂。
全文摘要
本发明公开了大黄素、大黄多糖在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)中的应用；提供大黄素、大黄多糖在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)的应用；用CO
文档编号A61K31/122GK1778310SQ20041005235
公开日2006年5月31日 申请日期2004年11月18日 优先权日2004年11月18日
发明者杨占秋, 孙慧, 肖红 申请人:深圳市武大金球中药现代化工程技术研究中心