促进骨形成和保持的方法

专利名称：促进骨形成和保持的方法
技术领域：
本发明总地涉及促进受试者中骨形成的方法。更特别地，本发明涉及诱导骨迅速形成然后保持如此生成的骨(如通过使骨的再吸收最小化)的方法。本发明以受试者的特定骨作为修复、增强、整形和/或成型目标。本发明另外涉及用于实施本发明方法的试剂盒。
背景技术：
骨是脊椎动物中发挥不同重要作用的多目的结构。它们提供骨架用于支撑躯体和赋予躯体以形状。骨在个体一生中经历连续的更新或重塑。骨由广泛散布在被称为基质的非生命物质中的活细胞组成。两种主要类型的细胞负责骨重塑参与骨形成的成骨细胞和参与骨吸收的破骨细胞。基质通过成骨细胞的作用形成，成骨细胞制造并分泌骨基质蛋白如胶原蛋白(其提供弹性)以及由钙和磷形成的无机盐(其赋予骨以硬度)。当骨组织成熟时，一些成骨细胞保留在骨基质中并分化形成骨细胞，它们是进行正常细胞行为的成熟骨细胞。这些骨细胞通过骨基质与其它骨细胞联络并且可感知骨的压力或破裂。因此，它们在骨修复和/或再生期间帮助定向破骨细胞会发挥作用以溶解骨的位置。
破骨细胞是溶解现有骨的细胞，因此促进骨生长、修复和再生。破骨细胞是起源于单核吞噬细胞融合的多核细胞。破骨细胞分泌质子降低位于破骨细胞和骨之间的细胞外间隔的pH。这种低pH促进骨结晶溶解并激活消解骨基质的溶酶体酶类。因此，破骨细胞是强有力的和有效的骨再吸收细胞，它们仅覆盖骨表面的0.5％。关于骨形成，成骨细胞生成被称作“类骨质”的结构，其由骨胶原蛋白和其它蛋白质形成。之后，成骨细胞控制钙沉积和其它矿物质进入类骨质，从而生成钙化骨组织。当骨形成完成时，成骨细胞变平并在骨表面上形成衬。这些变平的成骨细胞，被称作“衬细胞”，调节钙进出骨的通道。另外，它们在被激素活化时生成促进成骨细胞分化和活化的蛋白质。因此，新骨的生成是缓慢过程，其要求类骨质的形成、成熟和之后的钙化。与破骨细胞相比，成骨细胞覆盖骨表面的30％。
骨骼中的骨不完全都是固体。骨外侧即皮层骨基本上全部是固体，只有少数小管道。然而，从皮层骨向内是被称作松质骨的海绵状骨。松质骨由限定大量的填充骨髓液、干细胞和一些脂肪细胞的空间或腔的小梁骨的蜂房状网络组成。存在于这些骨髓腔内的物质特别是各种高度专一化的细胞，其帮助破坏现有的骨并相应地生成新骨以替换被破坏的骨或由于损伤或疾患如骨质疏松症而丧失的骨。
骨的物理结构可被各种因素(包括疾病和损伤)破坏。最常见的骨疾病之一是骨质疏松症，其特征在于骨量低和骨组织的结构损坏，导致骨脆性和对骨折的易感性增加，特别是髋、脊柱和腕。当骨吸收发生太迅速时、如果骨替换发生太慢时、或者由于二者的相互结合时，骨质疏松症进展。这部分地由于成骨细胞需要六个月来重建在三天内被破骨细胞破坏的骨量。另一方面，骨损伤包括对骨的局部化创伤。
本领域公知各种方法用于促进个体的骨形成，所述个体(1)患有由于例如疾病导致的骨量减少，(2)患有引起损伤如骨折的骨创伤，和(3)需要增强骨如脊椎骨。然而，这些用于治疗所述疾病的现有方法通常在本质上是全身性的，也就是说，他们将整个骨骼作为单个实体进行治疗。因此，这些方法通常不能针对一个或多个特定的骨，如髋、肩、脊柱和/或腕的骨，这些骨可能由于由骨质疏松症或诸如由于骨折所致的骨创伤所引起的疾病作用所致的骨丧失而需要更集中的治疗。另外，现有方法通常需要不希望的长期治疗方案，这伴随着患者的顺从性问题。
本领域的技术人员长期以来一直需要一种更快速和更具针对性的诱导骨量减少受试者中的骨形成的方法，特别是与增强如此生成的新骨的保留相结合的方法。除了上述的全身效应之外，本发明使得能特异性地以一个或多个最需要骨迅速形成的治疗的特定骨或骨区域为目标。如下所述，本发明的方法和试剂盒特别适于提供更有效的骨加速形成并同时保留如此生成的骨，因此极好地实现了所需功能。

发明内容
因此，本发明的一个目的是提供诱导受试者中的骨迅速形成的方法，从而可减少使用骨合成代谢药剂的治疗时程，由此提供安全和药物经济学优点。
本发明的另一个目的是提供诱导骨量减少受试者中的骨快速形成的方法，该方法使得受试者的特定骨能作为骨量增加目标，并同时另外对受试者的整个骨骼提供有益的骨形成作用。
本发明的另一个目的是提供能诱导受试者中的骨迅速形成从而预防和/或治疗骨折的方法。
本发明另外的目的是提供能诱导需要附加骨作为例如髋、膝和肩的假体和/或其它类型植入物如牙齿植入物的锚定机构的受试者中的骨迅速形成的方法。
本发明的另一目的是提供能诱导需要骨增强以减轻由诸如脊椎挤压的状况所致的慢性疼痛的受试者中的骨迅速形成的方法。
本发明的又一个目的是提供能减少根据本发明而生成的所述附加骨的任何实质部分的再吸收的方法。
本发明的另一个目的是提供能诱导骨迅速形成从而可借助所述附加骨形成进行骨整形/成型的方法。
本发明另外的目的是提供包括配置为能用来实施上述本发明方法的试剂盒的产品。
在优选实施方案中，本发明的方法用于人受试者。然而，本发明还考虑了兽医用途。
在一个实施方案中，本发明提供诱导需要诱导的受试者中的骨形成的方法，该方法包括以下步骤(a)机械诱导受试者中成骨细胞活性的增加；和(b)升高受试者中至少一种骨合成代谢药剂的血液浓度，例如通过给用所述药剂或通过给用引起所述药剂自然形成的化合物。上述步骤可以任意顺序进行，但是时间要足够接近，使得合成代谢药剂浓度的升高和机械诱导的成骨细胞活性的增加至少部分地重叠。
在本发明另外的实施方案中，所述方法包括以受试者的至少一个骨作为治疗目标的步骤，其中所述每个目标骨在其中限定了骨髓腔。骨髓腔特别地含有一些骨髓和大量的成骨细胞。该方法另外包括机械改变骨髓腔内容物从而刺激并由此增加骨髓腔内成骨细胞分化和/或活性。该方法另外包括对受试者给用至少一种骨合成代谢药剂，给用持续足够的时间并且给用足够的浓度以致升高受试者内的所述合成代谢药剂的血液水平高于其自然水平，从而延长机械诱导的成骨细胞活性。在需要促进骨生长的骨中，骨髓腔内容物的机械改变使得受试者的特定骨能作为诱导其中骨形成的特定目标。
本发明另外提供诱导骨量减少受试者中的骨形成的方法，该方法包括以受试者的至少一个骨作为治疗目标的步骤，其中每个目标骨在其中限定骨髓腔。骨髓腔含有一些骨髓和大量的成骨细胞。本发明的方法另外包括机械改变骨髓腔内容物从而刺激并由此增加骨髓腔中成骨细胞活性(如通过刺激成骨细胞增加分化或增加骨形成)。之后，由于成骨细胞活性增加而增加了腔内的骨量。该方法另外包括对受试者给用至少一种骨合成代谢药剂，给用持续足够的时间并且给用足够的浓度以致升高受试者内的所述合成代谢药剂的血液水平高于其自然水平，从而延长机械诱导的成骨细胞活性。然而，该方法另外包括附加地给用抗吸收药剂，抗吸收药剂的给用(1)与给用骨合成代谢药剂同时进行、或者(2)与给用骨合成代谢药剂重叠进行、或者(3)在给用骨合成代谢药剂后进行，抗吸收药剂的给用持续足够的时间并给用足够的浓度以致减少由于成骨细胞活性生成的新骨的再吸收。正如上述方法的情况一样，在需要刺激骨生长的骨中，骨髓腔内容物的机械改变因此使得能以受试者的特定骨作为骨形成增强的特定目标。
本发明另外提供在需要骨形成的受试者中的至少一个目标骨中促进骨形成的试剂盒。该试剂盒包括至少一个其中含有至少一种骨合成代谢药剂的容器，以及用于改变至少一个目标骨中骨髓腔内容物的机械改变装置。该试剂盒可另外装备有用于从骨髓腔排出至少一部分内容物的排空装置。


图1是在三周试验方案中以一周为间隔的试验大鼠组中股骨远端骨髓腔骨矿物质密度(“BMD”)的PIXIMUS分析结果的图示。PIXIMUS分析器得自Lunar Corp.，Palo Alto，CA并提供了关于小动物如小鼠和大鼠的双能量X射线吸光测定法(“DEXA”)数据。处死9周龄的雄性Sprague-Dawley大鼠(每组5只动物)并在0时间和第1、2和3周后进行检测。各个组经历以下的治疗模式A组-左股骨对照；B组-左股骨伪物(sham)；C组-机械除去骨髓(bone marrow ablation，bmx)以改变左股骨的骨髓腔内容物；D组-左股骨的机械除去骨髓治疗(bmx)与给用酰胺化甲状旁腺激素截短物(truncate)(PTH[1-34]-NH2)1-21天相结合；和E组-在给用酰胺化甲状旁腺激素截短物(PTH[1-34]-NH2)1-21天内治疗的大鼠进行右(非bmx)股骨BMD测量，其中大鼠的左股骨经历了骨除去(bmx)治疗；图2是处死并在0时间和第1、2和3周后测量的第二组雄性9周龄大Sprague-Dawley大鼠(每组5只动物)股骨远端骨髓腔BMD的PIXIMUS分析结果的图示。各个组经历以下的治疗模式F组-左股骨对照；G组-左股骨伪物；H组-机械除去骨髓(bmx)以改变左股骨的骨髓腔内容物；I组-左股骨机械除去骨髓(bmx)与给用酰胺化甲状旁腺激素截短物(PTH[1-34]-NH2)1-7天、然后给用鲑鱼降钙素(sCT)抗吸收药剂7-21天相结合；和J组-给用酰胺化甲状旁腺激素截短物(PTH[1-34]-NH2)处理的大鼠的右股骨BMD测量，其中大鼠的左股骨髓经历了骨髓除去(bmx)治疗；图3A-3D说明了用于在从上述讨论的A-J组的一组中的大鼠中进行左股骨骨髓除去的典型系列步骤。图3A)通入股骨远端；图3B)钻进股骨远端的骨髓腔内；图3C)洗涤骨髓腔；和图3D)缝合切口；图4是比较在通过卵巢切除术诱导骨质疏松症的骨质疏松雌性Sprague-Dawley大鼠中获得的腰部脊椎骨矿物质密度的柱状图。大鼠用(1)PTH[1-31]-NH2；(2)PTH[1-34]-NH2和PTH[1-34]-OH治疗；和图5是比较在通过卵巢切除术诱导骨质疏松症的骨质疏松雌性Sprague-Dawley大鼠中获得的腰部脊椎骨形成率的柱状图。大鼠用(1)PTH[1-31]-NH2；(2)PTH[1-34]-NH2和PTH[1-34]-OH治疗。
本发明的优选实施方案的详细说明在第一实施方案中，本发明提供诱导需要诱导的受试者中的新骨形成的方法。该方法包括机械诱导受试者中成骨细胞活性的增加和升高受试者中至少一种骨合成代谢药剂的血液浓度的步骤。上述步骤可以任意顺序进行，但是时间要足够接近，使得合成代谢药剂浓度的升高和机械诱导的成骨细胞活性的增加至少部分地重叠。
骨生长的诱导可包括例如在目前尚未发生骨生长的位置产生新骨或附加骨和/或刺激已经处在形成过程中的骨的生长(即增加其速度)。不以任何方式束缚于理论，申请人相信骨生长诱导的发生由以下综合效应引起(1)机械诱导受试者中成骨细胞活性和(2)升高受试者中至少一种骨合成代谢药剂的血液浓度的结合。
在本发明的优选实施方案中，机械诱导成骨细胞活性的增加可通过骨髓灌洗和除去方法获得。另外，不以任何方式束缚于理论，申请人相信骨髓灌洗和除去过程导致骨髓腔内凝块形成，凝块通过生物化学反应级联有助于增加受试者中的成骨细胞活性。
在另一个实施方案中，增加的成骨细胞活性还可通过将机械诱导与诸如生物化学诱导的附加诱导形式相结合而获得。这种生物化学诱导可通过对受试者给用例如一些血液因子如因子(“F”)VII、因子VIIa或其组合获得。在组织或血管损伤后，通过血浆FVII/FVIIa与组织因子(组织促凝血酶原激酶)的结合引发凝块。该复合物(FVII/FVIIa+促凝血酶原激酶)启动了导致凝血级联活化并最终导致纤维蛋白沉积和血小板活化的事件序列。这一复杂的事件序列可在某种程度上有助于刺激骨髓中的成骨细胞。因子VII和VIIa可购自Novo Nordisk。
使用本发明的方法获得的成骨细胞活性增加可能由于多种因素引起，所述因素包括但不必需限于(1)成骨细胞分化，即，附加成骨细胞的产生，(2)增加在诱导受试者骨形成中已经存在的成骨细胞的活性和/或有效性，和(3)上述的组合。在本发明的优选实施方案中，成骨细胞活性的增加将包括上述所有功能。
在一个实施方案中，至少一种骨合成代谢药剂的血液浓度可通过对受试者直接给用一种或多种骨合成代谢药剂升高。
在本发明另外的实施方案，所述方法另外包括以受试者的一个或多个特定骨作为骨生长诱导的“目标”。所述的以受试者的一个或多个特定骨作为骨生长诱导的目标是通过机械改变每个目标骨中骨髓腔内容物从而诱导骨髓腔中成骨细胞活性的增加而完成。
因此，本发明的方法不仅可用于骨修复，例如，正如用于由于创伤引起的骨折的情况下，而且可用于在通过双能量X射线吸光测定法(“DEXA)”或其它技术表明需要增加骨量和/或骨密度以预防骨折的个体中或在由于骨变弱而患有可归因于如脊椎挤压的状况的慢性疼痛的个体中以位置特异性的方式增强骨。另外，如上所述，本发明的方法另外用于提供(和保持)需要用作假体如人造髋、膝和肩和/或植入物如牙齿植入物锚定物(anchor)的新骨。
在另一个实施方案中，本发明的方法另外包括为受试者提供至少一种抗吸收药剂的升高的血液浓度，其中升高的浓度足以减少根据本发明机械诱导的成骨细胞活性的升高产生的新骨生长的再吸收。
在一个实施方案中，本发明提供了诱导需要诱导的受试者中的骨形成的方法，其中所述方法包括(a)机械诱导受试者中成骨细胞活性的增加；和(b)对受试者给用至少一种引起受试者中内源性骨合成代谢药剂的血液水平升高的药剂。上述步骤可以任意顺序进行，但是时间要足够接近，使得合成代谢药剂浓度的升高和机械诱导的成骨细胞活性的增加至少部分地重叠。在该方法的一个实施方案中，引起内源性骨合成代谢药剂表达增加的药剂可以是抑钙性(calcilytic)药剂。可用于本发明方法的抑钙性药剂包括但不限于任何限制钙与其受体的结合并从而触发内源性PTH释放的药剂。这些抑钙性化合物的例子在美国专利6,362,231、6,395,919、6,432,656和6,521,667中阐述，其内容作为参考并入本文。
本发明另外提供诱导骨量减少或骨创伤受试者中的骨形成的方法。该方法包括以受试者的至少一个骨作为治疗目标的步骤，其中每个目标骨在其中限定了骨髓腔。骨髓腔特别地含有一些骨髓和大量的成骨细胞。本发明的方法另外包括机械改变骨髓腔内容物从而刺激并由此增加骨髓腔内成骨细胞活性。该方法另外包括对受试者给用至少一种骨合成代谢药剂，给用持续足够的时间并且给用足够的浓度以致升高受试者内的所述合成代谢药剂的血液水平高于其自然水平，从而延长机械诱导的成骨细胞活性。例如，在人体内内源性生成的骨合成代谢药剂是游离酸形式的PTH[1-84]，其在人受试者中以每升血液小于约8皮摩尔的水平存在。因此，本发明的实践将如上所述包括升高受试者内骨合成代谢药剂的血液水平到相应地高于所述自然水平的水平。还如上面所述，机械改变骨髓腔内容物由此使得能以受试者的特定骨作为增强骨形成的目标。
在本发明的实施方案中，骨形成可在受试者骨中的长骨骨折部位进行诱导，以增加骨折的愈合速度。在另一个实施方案中，所述方法另外包括通过在受试者的至少一个目标骨上以受控方式诱导附加骨形成而对受试者的至少一个目标骨进行整形或成型。
申请人令人惊讶地发现，通过在与最初的成骨细胞活性骤增至少部分地重叠的期间内升高骨合成代谢药剂的血液水平，可实现最初的成骨细胞活性骤增在意想不到的高水平下的持续。这种作用通过比较图1所示的C组和D组的曲线进行说明。没有骨合成代谢药剂时，最初的骨形成骤增之后迅速是新形成的骨的再吸收(例如参见图1中的C组曲线)。图1中E组获得的曲线表明尽管由于单独给用PTH骨合成代谢药剂而诱导骨生长的增加，但是这一增加不能升高到由结合使用骨髓除去(bmx)加上给用PTH所实现的水平。图1的结果清楚地表明，bmx+PTH的组合相对于单独的bmx或PTH的作用提供了意想不到的骨形成的程度、速度和寿命增加，以及目标位置特异性响应。表1(在下)描述了图1中A-E组获得的曲线所基于的值。因为在第1周和第2周没有获得关于对照(A组)和伪物(B组)组的读数，这些值被估计用于制备这两组曲线的目的。另外，表1提供了在各组中获得的值的标准偏差，该标准偏差也在图1中示出。
表1

在上述实验期间由本发明人进行的外周定量计算机化断层显象(“pQCT”)测量未显示bmx+PTH的组合相对于单独的PTH在总体骨内容物中的改善。这应归于股骨主要含有皮层骨并且pQCT数据(其还没有被换算成相当于各种类型的骨的值)目前涉及所有骨组织的集合体的事实。
图2用于特别地说明由重叠给用(即与PTH给用重叠)或在给用抗吸收药剂鲑鱼降钙素(sCT)后给用所实现的另外的有益效果。首先，通过比较H组(单独的bmx)和J组(PTH+sCT，没有bmx)获得的曲线与I组(bmx+PTH+sCT)获得的曲线，提供了进一步的可归固于本发明方法的使用的协同效应的证据。另外，I组获得的曲线还表明，在因使用bmx和PTH的组合而发生的最初的成骨细胞活性骤增后给用抗吸收药剂sCT，显著减少新形成的骨由于破骨细胞的作用被吸附进入受试者体内的比例。表2(在下)描述了图2中曲线所基于的值。因为在第1周和第2周没有获得关于对照(F组)和伪物(G组)组的读数，这些值被估计用于制备这两组曲线的目的。另外，表2提供了在各组中获得的值的标准偏差，该标准偏差也在图2中示出。
表2

*F、G和H组与A、B和C组相同(见表1)。
以上讨论的图1和图2和相应的表1和表2中的结果使用如图3A-3D中所示的机械诱导成骨细胞活性增加的方法获得。提供图3A-3D所示方法的目的仅仅是示例性的，然而，本发明不限于附图中所示的过程。因为，本领域技术人员公知的各种替代技术可用于获得成骨细胞活性的必要机械诱导。因此，在图3A-3D所示的代表性方法中，将9周龄的雄性Sprague-Dawley大鼠，即，处于快速生长阶段的大鼠，在手术(bmx)前圈养5-10天。在手术当天，将大鼠称重并使用decapione用氯胺酮(50mg/kg)和甲苯噻嗪(10mg/kg)的组合将大鼠麻醉。通过将0.4-0.8毫升氯胺酮与0.5毫升甲苯噻嗪和8.5毫升盐水混合制备麻醉剂。以0.1ml/10g体重的比率对每只大鼠注射麻醉剂。
在手术准备中，剃除每只大鼠左膝关节上方的毛发。将剃除区域用聚维酮碘(Betadine)刷预处理，然后用乙醇洗。然后在膝关节的中间方位切开长1.0厘米的切口(见图3A)。然后将膝弯曲并将切割的组织拉回以暴露膝盖骨腱作为标记。将膝盖骨推开并通过光滑的0.035k-金属丝钻头在腱上方的股骨髁内V型切口钻通开口到骨髓腔内的1.0mm孔(见图3B)。重复钻5次，然后，使用螺纹型0.045英寸的钻头重复上述钻孔步骤。
当形成所述孔后，使用与26-口径针头连接的注射器通过向股骨内注射5毫升的生理盐水溶液对骨髓腔内容物进行反冲洗。下一步包括用4-0Dexon线缝合中间韧带结构并用手术用金属夹闭合皮肤切口(见图3D)。然后，对每只大鼠弹丸注射5ml的盐水并作标签用于辨别。在恢复过程中，在术后第一个24小时内对大鼠给用Tylenol溶液(300毫克/千克/天)，然后在前5天内每天进行检查。
在处死当天，每只大鼠在CO2室中实施安乐死。然后通过心脏穿刺收集大鼠血液。除去股骨并固定在4％甲醛液中，之后，将其在分级的一系列乙醇溶液中脱水处理。
然后对骨进行各种样品分析技术。这些技术包括X射线分析，其中在各个密封塑料袋中进行股骨的X-射线照射；PIXIMUS分析，使用Lunar PIXIMUS扫描器测量股骨骨髓腔中的骨矿物质密度；MicroCT分析；和骨钙蛋白、PTH、CT、NTX和生长因子的血液分析。
在本发明的一个实施方案中，对受试者给用骨合成代谢药剂可与机械诱导骨细胞活性(无论是通过骨细胞形成的增加和/或通过预先存在的成骨细胞的骨形成增加)同时进行，所述机械诱导可通过例如改变骨髓腔而实现。在优选实施方案中，在压力下(例如通过改变骨髓腔内与之外的相对压力)去除骨髓腔的骨髓和/或其它组分。
在另一个实施方案中，在这些机械诱导后给用骨合成代谢药剂。在另一个实施方案中，骨合成代谢药剂可在机械诱导之前给用，使得骨合成代谢药剂水平的升高在机械诱导时已经存在，然后可间歇式地保持或维持该水平延长的时段。
骨合成代谢药剂的给用可通过经口、静脉内、肌内、皮下、经植入物、透粘膜、透皮、经直肠、经鼻、通过储库型(depot)注射、或通过吸入和肺吸收进行。在另一个实施方案中，骨合成代谢药剂可以时间释放制剂给用一次，多次，或给用一个或多个延长的时段。优选合成代谢药剂的血液水平的升高在机械诱导后至少间歇式地保持约14-365天，更优选保持约30-180天。甲状旁腺激素例如PTH[1-34]-NH2的间歇式给用可一天一次或一周一次，产生血液峰浓度，该血液峰浓度在用药之间返回到基线水平，但是以与升高的成骨细胞活性重叠的方式产生骨合成代谢药剂的周期性升高的血液水平，所述升高的成骨细胞活性最初通过机械诱导，尽管，之后至少在某种程度上通过合成代谢药剂得以保持。
在另外的实施方案中，合成代谢药剂选自甲状旁腺激素(PTH)、合成代谢维生素D类似物、低密度脂蛋白受体-相关蛋白质5(LRP5)、非基因组雌激素样信号传导活化剂(ANGELS)、骨形态发生蛋白(BMP)、胰岛素样生长因子(IGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、sclerostin、瘦素(leptin)、前列腺素、他汀类、锶、生长激素、生长激素释放因子(GHRF)、肝细胞生长因子(HGF)、降钙素基因相关肽(CGRP)、甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)、转化生长因子(TGF)-β1及其组合。如本文使用的，术语甲状旁腺激素包括但不限于天然甲状旁腺激素、天然甲状旁腺激素的截短物、天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物、酰胺化的天然甲状旁腺激素及其组合。
在一个实施方案中，骨合成代谢药剂是游离酸形式的截短PTH[1-34]。该物质购自Eli Lilly & Co.，商品名为Forteo(特立帕肽)，为FDA批准的药物制剂形式。用于本发明的其它有用的骨合成代谢药剂包括但不限于天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物、PTH[1-30]NH2、PTH[1-31]NH2、PTH[1-32]NH2、PTH[1-33]NH2、PTH[1-34]NH2及其组合。在一个优选实施方案中，骨合成代谢药剂是PTH[1-34]NH2。制备甲状旁腺激素截短物的方法在Mehta等人的美国专利6,103,495中有述。另外，这些甲状旁腺激素截短物的酰胺化的方法在例如Bertelsen等人的美国专利5,789,234和Gilligan等人的6,319,685中提供。每个这些专利的内容被特别地并入本文作为参考。
在本方法的一个实施方案中，将足够量的本文所述的优选的甲状旁腺激素截短物对受试者给用以实现并然后保持其在受试者中的脉动血液浓度(pulsatile blood concentration)为约50到350pg/ml，优选为约100到200pg/ml，最优选为约150pg/ml。在另一个实施方案中，受试者中甲状旁腺激素的血液浓度在机械改变骨髓腔内容物后的不超过7天内升高到其优选水平。正如本领域所公知的，必须计算出PTH骨合成代谢药剂的适当剂量以获得上述的血液浓度。在注射剂的情况下，例如，对如人受试者给予的剂量(以活性激素的纯重量表示)可以是在与关于这些各种药剂的骨合成代谢活性的文献中所记载的那样。所述剂量可以但不必要地为约10-200μg，一天给用一次，更优选每剂量为约20-100μg，最优选每剂量为约20-50μg。包括除了上述甲状旁腺激素基药剂的骨合成代谢药剂的注射剂的剂量水平将与上面关于PTH药剂所述的剂量一致。
进行了一系列的实验，以比较通过PTH[1-31]-NH2和PTH[1-34]-OH与在缺少本发明的机械诱导步骤下的上述优选的PTH[1-34]-NH2类似物实现的(1)腰部脊椎骨矿物质密度，和(2)腰部脊椎骨形成率。研究包括用三种上述甲状旁腺激素截短物治疗10月大并处在为诱导骨质疏松症而进行卵巢切除术(“OVX”)后的6个月的雌性Sprague-Dawley大鼠，历时四周。大鼠被随机分为以下各组伪OVX，OVX+媒介物，OVX+PTH[1-31]-NH2或PTH[1-34]-NH2(得自Unigene Laboratories，Inc，皮下2.5、10或40μg/kg/天)，或PTH[1-34]-OH(得自Bachem，皮下10μg/kg/天)。在治疗4周后，通过DEXA和骨组织形态学分析每只动物的右股骨。图4提供了用PTH[1-31]-NH2、PTH[1-34]-NH2和PTH[1-34]-OH实现的腰部脊椎骨矿物质密度的比较柱状图。图5是用这些相同的截短物实现的腰部脊椎形成率的比较柱状图。基于这些实验结果，可以确定这些PTH类似物的每一个的骨合成代谢活性基本上是等效的。因为在上述甲状旁腺激素之间的合成代谢作用的类似性，因此有理由预期所有已知的PTH类似物将在本发明的方法中以所需的方式有利地发挥功能。
在本发明另外的实施方案中，成骨细胞活性的机械诱导通过将配置为或适于物理改变骨髓腔内容物并从而刺激骨髓腔内成骨细胞活性的物体插入到被针对用以增强骨形成的目标骨的骨髓腔内而完成。在另一个实施方案中，机械改变可包括去除至少一部分骨髓腔内容物。
在另外的实施方案中，本发明的方法另外包括对受试者给用抗吸收药剂，给用持续足够地时间并给用足够的浓度以致基本上防止由于成骨细胞活性生成的新骨再吸收。在一个实施方案中，抗吸收药剂可与骨合成代谢药剂同时给用。在另一个实施方案中，抗吸收药剂的给用在骨合成代谢药剂给用之后。在另外的实施方案中，抗吸收药剂的给用可在骨合成代谢药剂给用期间开始，并且抗吸收药剂的给用然后可持续超过骨合成代谢给用结束之时。
在本发明的另一个实施方案中，可给用具有骨合成代谢性和抗吸收性二者的单个药剂。这些物质的例子包括但不限于雌激素、锶ranalate、和选择性雌激素受体调节剂(SERMS)。
在本发明方法的一个实施方案中，抗吸收药剂可以是选自以下的降钙素人降钙素、鲑鱼降钙素(“sCT”)、鳗鱼降钙素、elkatonin、猪降钙素、鸡降钙素、降钙素基因相关肽(CGRP)及其组合。在优选实施方案中，抗吸收药剂是鲑鱼降钙素。当用作抗吸收药剂时，降钙素的血液水平优选为约5-500pg/ml，更优选为约10-250pg/ml，最优选为20-50pg/ml。另外，为实现上述血液水平所必需的主题降钙素药剂的人剂量水平，在注射剂的情况下，可在关于使用这些物质作为合成代谢药剂的文献中教导的那些。所述剂量可以但不必要地为约5-200μg/kg，每天给用一次，更优选每天给用约5-50μg/kg，最优选为8-20μg/kg，根据纯药物的重量计。通过其它途径，即经鼻或经口给用途径，给用的鲑鱼降钙素(sCT)将需要比上述剂量更高的剂量。
或者，各种其它的抗吸收药剂(即，降钙素以外的药剂)可用于本发明的方法中，这些抗吸收药剂通常包括激素代替治疗(HRT)剂，如选择性雌激素受体调节剂(SERMS)、双膦酸盐类、组织蛋白酶-K抑制剂、锶ranalate和其各种的组合。其它的抗吸收药剂的具体例子包括但不限于(1)Premarin，得自Wyeth Laboratories，其包括雌激素作为活性成分，典型的可接受剂量为每天一片0.625mg片剂；(2)Actonel，得自Proctor & Gamble，其包括利塞膦酸钠作为其活性成分，典型的可接受剂量为每天一片5毫克片剂或每周一片35毫克片剂；(3)Evista，得自Eli Lilly & Co.，其包括雷洛昔芬盐酸盐作为活性成分，该制剂典型的可接受的剂量为每天一个60毫克的片剂；和(4)Fosamax，得自Merck Pharmaceuticals，其包括阿仑膦酸盐(alendronate)作为活性成分。该物质的典型剂量是10毫克/天或70毫克/周。
除非另有说明或可从上下文显而易见，否则本文的剂量是指不受药物赋形剂、稀释剂、载体或其它成分影响的活性化合物的重量，尽管这些其它成分通常包括在可用于本发明方法中的各种剂型中。通常用于制药工业的任何剂型(即，胶囊、片剂、注射剂等等)适用于本发明，并且术语“赋形剂”、“稀释剂”或“载体”包括所述通常包括在制药工业中并与活性成分在一起的非活性成分。例如，包括典型的胶囊、小丸、肠溶衣、固体或液体稀释剂或赋形剂、调味剂、防腐剂等等。另外，还注意到，关于本文推荐的所有剂型，主治临床医师将监控个体患者的响应并相应地调节所述剂量。
抗吸收药剂可通过经口、静脉内、肌内、皮下、经植入物、透粘膜、经直肠、经鼻、通过储库型注射、或通过吸入和肺吸收或透皮途径给用。另外，抗吸收药剂可给用一次，多次，或给用一个或多个延长时段。抗吸收药剂可通过经口、静脉内、肌内、皮下、经植入物、透粘膜、经直肠、经鼻、通过储库型注射、或通过吸入和肺吸收、或透皮途径给用。另外，抗吸收药剂可以给用一次，多次，或给用一个或多个延长的时段。
本发明另外提供诱导骨量减少受试者中的骨形成的方法，该方法包括以受试者的至少一个骨作为治疗目标的步骤，其中每个目标骨在其中限定骨髓腔。骨髓腔含有一些骨髓和大量的成骨细胞。该方法另外包括机械改变骨髓腔内容物从而刺激并由此增加骨髓腔内成骨细胞活性。之后，由于成骨细胞活性增加而增加了骨髓腔内的骨量。该方法另外包括对受试者给用至少一种骨合成代谢药剂，给用持续足够的时间并且给用足够的浓度以致升高受试者内的所述合成代谢药剂的血液水平高于其自然水平，从而延长机械诱导的成骨细胞活性。然后，该方法另外包括附加地给用抗吸收药剂，抗吸收药剂的给用(1)与给用骨合成代谢药剂同时进行、或者(2)与给用骨合成代谢药剂重叠进行、或者(3)在给用骨合成代谢药剂后进行，抗吸收药剂的给用持续足够的时间并给用足够的浓度以致基本上防止由于根据本发明实现的成骨细胞活性增加而生成的新骨再吸收。还如上述方法中的情况一样，机械改变骨髓腔内容物因此使得能以受试者的特定骨作为骨形成增强目标。
在上述方法的一个实施方案中，骨合成代谢药剂可选自天然甲状旁腺激素、天然甲状旁腺激素的截短物、天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物、酰胺化的天然甲状旁腺激素及其组合。在一个具体实施方案中，骨合成代谢药剂可为游离酸形式的PTH-[1-34]，得自Eli Lilly &Co，商品名为Forteo(特立帕肽)，在骨合成代谢药剂的另一个实施方案中，骨合成代谢药剂是天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物并且可选自PTH[1-30]NH2、PTH[1-31]NH2、PTH[1-32]NH2、PTH[1-33]NH2、PTH[1-34]NH2及其组合。优选的骨合成代谢药剂是PTH[1-34]NH2。
在本方法的一个实施方案中，将足够量的天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物对受试者给用以实现其在受试者中的脉动血液浓度为约50到500pg/ml，优选为约100到200pg/ml，最优选为约150pg/ml。在注射剂的情况下，例如，对如人受试者给予的剂量(以活性激素的纯重量表示)可为在关于这些各种药剂的骨合成代谢活性的文献中记载的。所述剂量可为但不必要地为每剂量约10-200μg，更优选约20-100μg，最优选为约20-50μg。当使用其它递送方法时，所述剂量可为但不必要地为约10μg-10mg。
在抗吸收药剂的具体实施方案中，抗吸收药剂可以是选自以下的降钙素人降钙素、鲑鱼降钙素、鳗鱼降钙素、elkatonin、猪降钙素、鸡降钙素基因相关肽(CGRP)及其组合。在抗吸收药剂的一个实施方案中，其是鲑鱼降钙素。当使用鲑鱼降钙素作为抗吸收药剂时，降钙素的血液水平优选达到约5-500pg/ml，更优选约10-250pg/ml，最优选约20-50pg/ml。为了实现上述的血清水平，以例如注射剂形式使用的抗吸收药剂的每日剂量可为约5-200μg(药物的纯重量)，更优选约5-50μg，最优选约8-20μg。当使用除了注射途径之外的其它递送方法时，剂量可以为约5μg-5mg。抗吸收药剂的给用优选持续至少3个月，更优选持续12-24个月。
本发明的一个实施方案包括使用上述任意方法在受试者的颌区域内形成足够量的附加骨以提供用于植入所述颌区域内的牙齿植入物的锚定物。替代地，或附加地，可使用上述任意方法在受试者的一个或多个目标骨内形成足够量的附加骨，以将假体装置稳固锚定到所述目标骨上。所述的假体装置可包括但不限于假体膝、肩或髋。在另外的实施方案中，可使用本发明的任意方法在受试者的任何位置形成足够量的附加骨作为稳固的锚定物，用于将空心可调节插入件锚定于所述位置上。另外，可使用本发明的任意方法将至少一个椎骨作为附加骨形成的目标，其中将足够量的骨附加到所述的至少一个椎骨中，从而所述受试者基本上没有由脊椎挤压(crush)引起的慢性疼痛。
在另一实施方案中，本发明提供在需要骨形成的受试者中的至少一个目标骨中促进骨形成的试剂盒。该试剂盒包括至少一个其中含有至少一种骨合成代谢药剂的容器，以及用于改变受试者的至少一个目标骨中骨髓腔内容物的机械改变装置。在另一个实施方案中，该试剂盒可另外包括用于从骨髓腔排出至少一部分内容物的排空装置。在另外的实施方案中，该试剂盒可另外包括至少一个其中含有至少一种抗吸收药剂的容器。
在本发明试剂盒的一个实施方案中，所述骨合成代谢药剂选自天然甲状旁腺激素、天然甲状旁腺激素的截短物、天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物、酰胺化的天然甲状旁腺激素及其组合。在优选实施方案中，骨合成代谢药剂是天然甲状旁腺激素的截短物。在优选实施方案中，骨合成代谢药剂是游离酸形式的PTH[1-34]。其它优选的截短物包括酰胺化截短物。因此，骨合成代谢药剂可选自PTH[1-30]NH2、PTH[1-31]NH2、PTH[1-32]NH2、PTH[1-33]NH2、PTH[1-34]NH2及其组合。在特定实施方案中，骨合成代谢药剂是PTH[1-34JNH2。
在本发明试剂盒的另外的实施方案中，抗吸收药剂可以是选自以下的降钙素人降钙素、鲑鱼降钙素、鳗鱼降钙素、elkatonin、猪降钙素、鸡降钙素、降钙素基因相关肽(CGRP)及其组合。在具体实施方案中，抗吸收药剂是鲑鱼降钙素。
尽管已经描述了本发明的具体实施方案，但是本领域的技术人员显然可对其进行其它的改变和修改以及用于其它应用。因此本发明不由本文的具体公开所限定，而仅仅由权利要求限定。
权利要求
1.诱导需要诱导的受试者中的骨形成的方法，该方法包括以下步骤(a)机械诱导所述受试者中成骨细胞活性的增加；和(b)升高所述受试者中至少一种骨合成代谢药剂的血液浓度，其中步骤(a)和(b)以任意顺序进行，但是时间要足够接近，使得所述合成代谢药剂浓度的升高和所述机械诱导的成骨细胞活性的增加至少部分地重叠。
2.权利要求1的方法，其中骨合成代谢药剂血液浓度的升高通过对所述受试者直接给用骨合成代谢药剂实现。
3.权利要求1的方法，其进一步包括以所述受试者的一个或多个特定的骨作为所述诱导骨生长的目标，通过机械改变每个所述目标骨内骨髓腔内容物从而诱导骨髓腔内所述成骨细胞活性的增加诱导骨生长。
4.权利要求1的方法，其进一步包括为所述受试者提供至少一种抗吸收药剂的升高的血液浓度，其中所述升高的浓度足够基本上防止由所述增加的成骨细胞活性生成的新骨生长的再吸收。
5.诱导需要诱导的受试者中的骨形成的方法，该方法包括以下步骤(a)机械诱导所述受试者中成骨细胞活性的增加；和(b)对所述受试者给用至少一种引起所述受试者内内源性骨合成代谢药剂的血液水平升高的药剂，其中步骤(a)和(b)以任意顺序进行，但是时间要足够接近，使得所述合成代谢药剂浓度的升高和所述机械诱导的成骨细胞活性的增加至少部分地重叠。
6.权利要求5的方法，其中引起所述受试者内所述的内源性骨合成代谢药剂的表达增加的药剂是抑钙性(calcilytic)药剂。
7.诱导骨量减少或骨创伤受试者中的骨形成的方法，所述方法包括以下步骤(a)以所述受试者的至少一个骨作为治疗目标，每个所述的目标骨在其中限定了骨髓腔，所述骨髓腔含有一些骨髓和大量的成骨细胞；(b)机械改变所述骨髓腔内容物从而刺激并由此增加骨髓腔内成骨细胞活性；和(c)对所述受试者给用至少一种骨合成代谢药剂，所述给用持续足够的时间并且给用足够的浓度以致升高所述受试者内的所述合成代谢药剂的血液水平高于其自然水平，从而延长所述的机械诱导的成骨细胞活性，从而骨髓腔的机械改变使得能以所述受试者的特定的骨作为通过所述方法增强其骨形成的目标，其中步骤(b)和(c)以任意顺序进行，但是时间要足够接近，从而所述骨合成代谢药剂浓度的升高和所述机械诱导的成骨细胞活性的增加至少部分地重叠。
8.权利要求7的方法，其中所述骨形成在所述受试者的骨中长骨骨折的位置被诱导以增加所述骨折的愈合速度。
9.权利要求7的方法，其进一步包括通过在所述受试者的至少一个目标骨上以受控方式诱导附加骨形成而对所述受试者的至少一个目标骨进行整形或成型。
10.权利要求7的方法，其中骨合成代谢药剂通过经口、静脉内、肌内、皮下、经植入物、透粘膜、经直肠、经鼻、通过储库型注射、通过吸入和肺吸收、或透皮途径给用。
11.权利要求1的方法，其中所述至少一种骨合成代谢药剂选自甲状旁腺激素(PTH)、合成代谢维生素D类似物、低密度脂蛋白受体-相关蛋白质5(LRP5)、非基因组雌激素样信号传导活化剂(ANGELS)、骨形态发生蛋白(BMP)、胰岛素样生长因子(IGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、sclerostin、瘦素、前列腺素、他汀类、锶、生长激素、生长激素释放因子(GHRF)、肝细胞生长因子(HGF)、降钙素基因相关肽(CGRP)、甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)、转化生长因子(TGF)-β1及其组合。
12.权利要求11的方法，其中骨合成代谢药剂是选自以下的至少一种甲状旁腺激素天然甲状旁腺激素、天然甲状旁腺激素的截短物、天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物、酰胺化的天然甲状旁腺激素及其组合。
13.权利要求12的方法，其中骨合成代谢药剂选自游离酸形式的PTH[1-84]、PTH[1-84]NH2、游离酸形式的PTH[1-34]、PTH[1-30]NH2、PTH[1-31]NH2、PTH[1-32]NH2、PTH[1-33]NH2、PTH[1-34]NH2及其组合。
14.权利要求12的方法，其中将足够量的所述甲状旁腺激素对所述受试者给用以实现所述受试者中的甲状旁腺激素的脉动血液浓度为约50-350pg/ml。
15.权利要求14的方法，其中所述足够量的甲状旁腺激素为每剂量约10μg-10mg纯重量的PTH激素。
16.权利要求14的方法，其中所述甲状旁腺激素通过注射给用并且足够量的甲状旁腺激素为每剂量约10-200μg。
17.权利要求14的方法，其中所述甲状旁腺激素在所述受试者中的血液浓度在机械改变骨髓腔内容物后的不超过7天内被升高到约50-350pg/ml的水平。
18.权利要求1的方法，其中机械诱导成骨细胞活性通过将配置为或适于物理改变骨髓腔内容物并从而刺激所述骨髓腔内所述成骨细胞活性的物体插入到作为骨形成增强目标的骨的骨髓腔内而实现。
19.权利要求18的方法，其中所述机械改变进一步包括去除所述被改变的骨髓腔内容物的至少一部分以在所述骨髓腔内提供附加空间用于增加骨量。
20.权利要求7的方法，其中所述骨合成代谢药剂还基本上防止由所述成骨细胞活性生成的新骨的再吸收。
21.权利要求20的方法，其中骨合成代谢是雌激素、锶ranalate或选择性雌激素受体调节剂(SERM)。
22.权利要求1的方法，其进一步包括(c)对所述受试者给用抗吸收药剂，给用持续足够的时间并给用足够的浓度以致基本上防止由所述成骨细胞活性生成的新骨的再吸收，其中步骤(b)和(c)以任意顺序进行，但是时间要足够接近，从而所述合成代谢药剂浓度的升高和所述机械诱导成骨细胞活性的增加至少部分地重叠。
23.权利要求22的方法，其中所述抗吸收药剂的给用在骨合成代谢药剂给用期间开始并且持续超过所述骨合成代谢药剂给用结束之时。
24.权利要求22的方法，其中抗吸收药剂是选自以下的降钙素人降钙素、鲑鱼降钙素、鳗鱼降钙素、elkatonin、猪降钙素、鸡降钙素、降钙素基因相关肽(CGRP)及其组合。
25.权利要求24的方法，其中抗吸收药剂是鲑鱼降钙素并且其中鲑鱼降钙素以经计算可实现其基本上连续的血液浓度为约5-500pg/ml的量对所述受试者给用。
26.权利要求25的方法，其中所述鲑鱼降钙素的量为每剂量约5μg到5mg纯重量的降钙素。
27.权利要求25的方法，其中鲑鱼降钙素通过注射途径给用并且所述鲑鱼降钙素的量为每剂量约5μg-200μg。
28.权利要求22的方法，其中抗吸收药剂通过经口、静脉内、肌内、皮下、经植入物、透粘膜、经直肠、经鼻、通过储库型注射、通过吸入和肺吸收、或透皮途径给用。
29.权利要求7的方法，其进一步包括对所述受试者给用经计算以进一步增加所述成骨细胞活性的量的因子VII或因子VIIa。
30.诱导骨量减少或骨创伤受试者中的骨形成的方法，所述方法包括以下步骤(a)以所述受试者的至少一个骨作为治疗目标，每个所述的目标骨在其中限定骨髓腔，所述骨髓腔含有一些骨髓和大量的成骨细胞；(b)机械改变所述骨髓腔内容物从而刺激并由此增加所述骨髓腔内成骨细胞活性，从而相应地增加所述骨髓腔内的骨量；(c)对所述受试者给用至少一种骨合成代谢药剂，所述给用持续足够的时间并且给用足够的浓度以致升高所述受试者内的所述合成代谢药剂的血液水平高于其自然水平，从而延长所述机械诱导的成骨细胞活性；和(d)在所述骨合成代谢药剂给用的同时或之后额外给用抗吸收药剂，所述抗吸收药剂的给用持续足够的时间并给用足够的浓度以致基本上防止由所述成骨细胞活性生成的新骨的再吸收，从而骨髓腔的机械改变使得能以所述受试者的特定的骨作为通过所述方法增强其骨形成的目标。
31.权利要求30的方法，其中骨合成代谢药剂选自游离酸形式的PTH[1-84]、PTH[1-84]NH2、游离酸形式的PTH[1-34]、PTH[1-30]NH2、PTH[1-31]NH2、PTH[1-32]NH2、PTH[1-33]NH2、PTH[1-34]NH2及其组合。
32.权利要求31的方法，其中将足够量的所述的天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物对所述受试者给用以实现其在所述受试者中的脉动血液浓度为约50-500pg/ml。
33.权利要求30的方法，其中所述抗吸收药剂是选自以下的降钙素人降钙素、鲑鱼降钙素、鳗鱼降钙素、elkatonin、猪降钙素、鸡降钙素及其组合。
34.权利要求33的方法，其中抗吸收药剂是鲑鱼降钙素并且其中鲑鱼降钙素对所述受试者以经计算以实现其在所述受试者中的血液浓度为约50-350pg/ml的量给用。
35.权利要求1的方法，额外包括在所述受试者的颌区域内形成足够量的附加骨以提供用于将牙齿植入物植入到所述颌区域内的锚定物。
36.权利要求1的方法，额外包括在所述受试者的一个或多个目标骨中形成足够量的附加骨，使得被植入至少一个所述目标骨中的假体装置稳固地锚定于目标骨上。
37.权利要求1的方法，额外包括在所述受试者内形成足够量的附加骨作为稳固的锚定物，用于将空心可调节插入件锚定于所述附加骨上。
38.权利要求1的方法，其进一步包括以所述受试者的至少一个椎骨作为附加骨形成的目标，并且其中将足够量的骨附加到所述的至少一个椎骨从而所述受试者基本上没有由脊椎挤压引起的慢性疼痛。
39.权利要求1的方法，其中附加骨在所述受试者的至少一种椎骨上以由于所述椎骨的增强而足以稳定所述至少一个椎骨的量形成。
40.用于在需要骨形成的受试者中的至少一个目标骨中促进骨形成的试剂盒，所述试剂盒包括(a)至少一个其中含有至少一种骨合成代谢药剂的容器；和(b)用于改变至少一个所述目标骨中的骨髓腔内容物的机械改变装置。
41.权利要求40的试剂盒，进一步包括用于从所述骨髓腔排出至少一部分内容物的排空装置。
42.权利要求40的试剂盒，进一步包括至少一个其中含有至少一种抗吸收药剂的容器。
43.权利要求40的试剂盒，其中所述骨合成代谢药剂选自天然甲状旁腺激素、天然甲状旁腺激素的截短物、天然甲状旁腺激素的酰胺化截短物、酰胺化的天然甲状旁腺激素及其组合。
44.权利要求43的试剂盒，其中骨合成代谢药剂游离酸形式的PTH[1-84]、PTH[1-84]NH2、游离酸形式的PTH[1-34]、PTH[1-30]NH2、PTH[1-31]NH2、PTH[1-32]NH2、PTH[1-33]NH2、PTH[1-34]NH2及其组合。
45.权利要求42的试剂盒，其中所述抗吸收药剂是选自以下的降钙素人降钙素、鲑鱼降钙素、鳗鱼降钙素、elkatonin、猪降钙素、鸡降钙素及其组合。
全文摘要
本发明提供诱导需要诱导的受试者中的骨形成的方法，该方法包括机械诱导受试者中成骨细胞活性增加和升高受试者中至少一种骨合成代谢药剂的血液浓度的步骤。上述步骤可以任意顺序进行，但是时间要足够接近，使得合成代谢药剂浓度的升高和机械诱导的成骨细胞活性的增加重叠。该方法可另外包括为受试者提供至少一种抗吸收药剂的升高的血液浓度，其中所述升高的浓度足够防止由于成骨细胞活性生成的新骨生长的再吸收。所述方法的使用使得能以受试者的特定的骨作为骨生成和保持、骨更快生成和骨合成代谢药物提前终止的目标。本发明提供了适于实施所述方法的试剂盒。
文档编号A61K38/12GK101052410SQ200580023744
公开日2007年10月10日 申请日期2005年5月12日 优先权日2004年5月14日
发明者A·维内里, N·M·梅塔, J·P·吉利甘 申请人:尤尼基因实验室公司, 耶鲁大学