一种促进肌腱损伤愈合的药物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种促进肌腱损伤愈合的药物，所述药物含有药用有效量的1,4?二氨基?2,3?二氰基?1,4?双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。另一种促进肌腱损伤愈合的药物由1,4?二氨基?2,3?二氰基?1,4?双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯、维生素C和医药学上可接受的非活性成分组成。采用体内大鼠膑腱损伤模型也已证明本发明药物可以有效促进膑腱愈合。该药物与其它治疗方案相比，具有成本低、给药方便、疗效好、安全无毒副作用等优点，是比较理想的促进肌腱损伤的药物。
【专利说明】
一种促进肌腱损伤愈合的药物
技术领域
[0001] 本发明属于肌腱损伤治疗药物技术领域，特别是涉及一种促进肌腱损伤愈合的药 物。
【背景技术】
[0002] 肌腱和韧带的损伤是常见的骨科问题。肌腱损伤的发病率正逐年增高，究其原因 主要与越来越多的中年人参与运动或者剧烈运动有关。以跟腱为例:跟腱断裂发病率为(6-37)/105，其中75%与体育运动有关，这还不包括跟腱的其它损伤。肌腱损伤可以分为急性 和慢性损伤，其原因包括内在或外在的因素，无论是内在因素或内外因素组合都会引起肌 腱损伤。肌腱损伤主要发生在运动和工作场所，这通常会导致患处疼痛、僵硬和肌腱强度损 伤。跟腱和髌腱损伤是最常见的两种运动肌腱损伤。在肌腱损伤相关的因素中，年龄和性别 因素是最常见的因素，并且男性的发病率较女性更高。工作引起的损伤占急性创伤性肌腱 损伤的24.9%。因为肌腱损伤后愈合缓慢，并且没有一种手术方案能使受损的肌腱恢复到 正常的组织结构和机械强度，所以肌腱损伤在临床上仍是一个严重的并且悬而未决的问 题。
[0003] 肌腱损伤难以修复。肌腱愈合的发生可以分为三个阶段。在初始的炎性反应阶段， 红细胞和炎症细胞，特别是噬中性细胞，进入到损伤部位。然后，肌腱细胞将逐渐迀移到伤 口，III型胶原蛋白的合成也在此阶段被启动。过了几天，增生期开始。III型胶原在此阶段 的合成达到峰值，并将持续数周。约六周后重塑阶段开始，期间细胞构成降低、胶原蛋白减 少，并且开始合成糖胺聚糖。然而，愈合后肌腱组织的生化和机械性能仍于那些完好的肌腱 相差甚远。
[0004] 肌腱损伤会产生大量的不健全状态，而且无论采用什么样的护理方法，它造成的 残疾可能会持续数月。许多物理方式被用在肌腱病症的治疗管理。然而，虽然这些方式被用 于常规临床中，只有少数临床对照试验已经完成。大多数证据仍然属于临床前的研究，并且 有时结果是具有争议的。在大鼠的由胶原酶诱导的跟腱炎模型中，体外冲击波治疗已被证 明通过诱导TGF01(Transforming growth factor-beta，转化生长因子-β)和IGF-I (Insulin-like growth factor 1，胰岛素样生长因子1)的表达促进肌腱的愈合。并且，在 大鼠跟腱炎模型，17赫兹脉冲磁场和电磁场可以提高胶原纤维排列的频率。此外，近年来随 着组织工程学和生物医学的新兴发展，某些细胞因子和生长因子例如TGFP和IGF-I，以及基 因治疗和组织工程用的MSC(mesenchymal stem cell，间充质干细胞）已经被用于肌腱损伤 的治疗，并表现出诱人的前景。但这些生长因子的问题是价格昂贵并且容易降解，给患者带 来很大的经济负担。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种促进肌腱损伤愈合的药物。
[0006] 本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种促进肌腱损伤愈合的药物，所述 药物含有药用有效量的I，4-二氨基-2，3-二氰基-I，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。优选 地，所述药物含有5μΜ~15μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二 烯。更优选地，所述药物含有1 ΟμΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基） 丁二烯。
[0007] 另一种促进肌腱损伤愈合的药物，由1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯 氧基巯基)丁二烯、维生素 C和医药学上可接受的非活性成分组成。优选地，所述药物含有5μ M~15μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。更优选地，所述药 物含有1 ΟμΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。
[0008] 在本发明如上所述的促进肌腱损伤愈合的药物中，医药学上可接受的非活性成分 为:医药学上可接受的稀释剂、医药学上可接受的赋形剂，以及医药学上可接受的载剂。
[0009] 在本发明如上所述的促进肌腱损伤愈合的药物中，所述药物为任意一种临床可接 受的口服剂型、注射剂型或外用剂型。
[0010] 在本发明如上所述的促进肌腱损伤愈合的药物中，所述药物为为片剂、胶囊剂、颗 粒剂、丸剂、滴丸剂、液体制剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贝占 剂。
[0011] 本发明提出用U0126促进肌腱损伤愈合研究的理论和思路。其主要作用原理是 U0126可以促进大鼠及人的肌腱来源的间充质干细胞向肌腱细胞分化，从而修复受损组织。
[0012] 本发明提出的UO126单方制剂，其中UO126的最佳剂量是ΙΟμΜ，并可根据受损面积 大小做适宜调整，十分安全。这种药物可按药剂学的现代工艺制备成注射剂供临床应用。临 床应用时每隔两天注射一次。对于含有维生素 C的组合物，VC最佳剂量25μΜ，υ〇126的最佳剂 量是ΙΟμΜ。
[0013] 本发明还提供促进肌腱损伤愈合的药物的制备方法，所述药物为如上任一项所述 的促进肌腱损伤愈合的药物，所述制备方法包括以下步骤：
[0014] 步骤1，称量，按照预定配方配比称取1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双（邻氨基苯 氧基巯基)丁二烯、维生素 C和医药学上可接受的非活性成分；
[0015] 步骤2,混匀，将步骤1中称量的组分混合均匀形成药物原料备用；
[0016] 步骤3，将步骤2中获得的药物原料制备成临床可接受的剂型。
[0017]本发明采用体内大鼠膑腱1/3损伤模型也已证明这一药物制剂可以有效促进膑腱 愈合。该药物与其它治疗方案相比，具有成本低、给药方便、疗效好、安全无毒副作用等优 点，是比较理想的促进肌腱损伤的药物。
【附图说明】
[0018]图1为U0126对间充质干细胞毒性测试结果；
[0019]图2-1至2-6为U0126处理24h大鼠间充质干细胞向肌腱细胞分化状况；
[0020]图3-1至3-6为U0126处理72h大鼠间充质干细胞向肌腱细胞分化状况；
[0021]图4为UO126处理72h人间充质干细胞向肌腱细胞分化状况；
[0022]图5为大鼠膑腱三分之一损伤模型示意图；
[0023]图6为大鼠膑腱愈合结果；
[0024]图7-1至7-2为大鼠膑腱力学测试结果。
【具体实施方式】
[0025] U0126(C18H16N6S2 · 1/2C2H50H)是一种高度选择性的MEK1/2抑制剂，U0126作用于 TPA (12-〇_Tetradecanoylphorbol 13-acetate，对苯二甲酸）刺激的细胞，通过阻断 MAPK (Mitogen-activated protein kinases，丝裂原活化蛋白激酶)信号传递，显著抑制c-Fos 和c-Jun mRNA的上调及蛋白水平，抑制达50-80%，导致AP_l(Activator protein 1，激活 子蛋白-1)转录活性受抑制，IC50为0.96μΜ。ΙΟμΜ U0126通过抑制ERK2而不是ERKl磷酸化， 显著抑制细胞死亡。UO126按30mg/kg剂量腹腔注射给药患过敏性哮喘的小鼠，具有显著的 抗炎效果，这种作用存在剂量依赖性。
[0026] 维生素 C(又称L-抗坏血酸)是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。抗 坏血酸在大多的生物体可借由新陈代谢制造出来，但是人类是最显着的例外。最广为人知 的是缺乏维生素 C会造成坏血病。在生物体内，维生素 C是一种抗氧化剂，保护身体免于自由 基的威胁，维生素 C同时也是一种辅酶。维生素 C为抗体及胶原形成，组织修补(包括某些氧 化还原作用），脂肪、蛋白质的合成，维持免疫功能，及保持血管的完整，促进非血红素铁吸 收等所必需。维生素 C与U0126组成的药物组合物可以促进大鼠及人的肌腱来源的间充质干 细胞向肌腱细胞分化，从而修复受损组织。
[0027] 第一种【具体实施方式】的促进肌腱损伤愈合的药物，所述药物含有药用有效量的1， 4_二氨基_2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。优选地，所述药物含有5μΜ~15 μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。更优选地，所述药物含 有1 ΟμΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。
[0028] 第二种【具体实施方式】的促进肌腱损伤愈合的药物，由1，4-二氨基-2，3-二氰基-1， 4_双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯、维生素 C和医药学上可接受的非活性成分组成。优选地， 所述药物含有5μΜ~15μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。 更优选地，所述药物含有1 〇μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二 稀。
[0029] 上述医药学上可接受的非活性成分为：医药学上可接受的稀释剂、医药学上可接 受的赋形剂，以及医药学上可接受的载剂。
[0030] 在本发明如上所述的促进肌腱损伤愈合的药物中，所述药物为为片剂、胶囊剂、颗 粒剂、丸剂、滴丸剂、液体制剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贝占 剂。
[0031]实施例1液体制剂
[0032] 将10μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯溶解到10μ 1去离子水中，形成液体制剂。
[0033]实施例2液体制剂
[0034] 将5μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯溶解到10μ1 去离子水中，形成液体制剂。
[0035]实施例3液体制剂
[0036] 将15μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯溶解到10μ 1去离子水中，形成液体制剂。
[0037] 实施例4片剂
[0038] 取1，4-二氨基_2,3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯，加入乳糖，硬脂 酸，淀粉，过80目筛，混匀，用70 %乙醇制软材，20目筛制粒，干燥，16目筛整粒，压片，片重约 100mg，每片含活性成分15μΜ。
[0039] 实施例5气雾剂
[0040]发泡剂:十二烷基磺酸钠0.9g，尼纳尔0.6g，水28.5g，混合均匀；
[0041]推进剂:异戊烷4g，二氟一氯甲烷3g，正丁烷3g，混匀；
[0042]将1，4_二氨基-2,3_二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯与发泡剂和推进 剂混合，形成气雾剂，其中有效成分的浓度为ΙΟμΜ/ml。
[0043]实施例6液体制剂
[0044] 将25μΜ维生素 C和ΙΟμΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁 二烯溶解到1 〇μ 1去离子水中，形成液体制剂。
[0045] 实施例7片剂
[0046] 取维生素 C、1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯，加入乳 糖，硬脂酸，淀粉，过80目筛，混匀，用70%乙醇制软材，20目筛制粒，干燥，16目筛整粒，压 片，片重约l〇〇mg，每片含U0126 15μΜ、维生素 C 25μΜ。
[0047] 实施例8气雾剂
[0048]发泡剂:十二烷基磺酸钠0.9g，尼纳尔0.6g，水28.5g，混合均匀；
[0049]推进剂:异戊烷4g，二氟一氯甲烷3g，正丁烷3g，混匀；
[0050]将1，4_二氨基-2,3_二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯与发泡剂和推进 剂混合，形成气雾剂，其中UOl26的浓度为ΙΟμΜ/ml，维生素 C 25μΜ/πι1。
[00511应用效果实施例
[0052] 1材料和方法
[0053] 1.1肌腱来源的间充质干细胞的培养
[0054]取8周龄SD大鼠，雄性，体重为200-250g。腹腔麻醉后，取出大鼠双侧膑腱，剔除腱 鞘及腱周部分，将肌腱均勾剪碎成Imm X Imm大小，每IOOmg组织加入含3mg/ml I型胶原酶 (Sigma公司）于37°C孵箱消化lh。中止消化后，连同可能未消化完全的肌腱残留组织直接种 于细胞培养瓶中，加入含l〇〇U/ml青霉素、100U/ml链霉素及10%胎牛血清（Invitrogen公 司）的DMEM(Invitrogen公司）培养基，置于37°C、5%C02的温箱中孵育。继续培养8-10天(换 液周期为3天/次），可以观察到肌腱干细胞集落形成。细胞扩增后，取P3~P8代用于相关实 验。人源的肌腱干细胞由香港中文大学威尔士亲王医院捐赠，是在捐赠者同意的前提下所 采集的样品，该细胞也同样培养于DMEM培养基中，并已加入10%胎牛血清及lOOU/ml青霉 素、lOOU/ml链霉素，置于37°C、5%C02的温箱中孵育。
[0055] 1.2药物
[0056] PBS，U0126均购于美国Sigma Chemical公司。
[0057] 1.3 U0126制剂对间充质干细胞毒性的研究
[0058]为验证不同浓度的U0126制剂对间充质干细胞的毒性，我们以MTT法测定细胞的活 力。将间充质干细胞接种于96孔板内，并用不同浓度的U0126制剂处理24和72小时后，在培 养基中加入5mg/ml的MTT，孵育4h后读数。
[0059] 1.4 U0126制剂促进间充质干细胞成肌腱分化
[0060]为证明U0126对充质干细胞成肌腱分化的影响，我们将大鼠间充质干细胞在体外 用U0126诱导24h和72h，或者将人源肌腱干细胞用该药物组合物处理72h，同时我们以TGFP 作为阳性对照组。之后用RNea sy小提试剂盒从细胞中提取总RNA，测量RNA浓度后用MMLV逆 转录酶根据提供的操作指南进行逆转录。用实时定量PCR检测分析细胞内肌腱相关标记基 因的表达状况，如Tenomodul in，Scleraxis，Col lagen type I and 11, Tenascin C, Decorin ,Bigly can 和 Fibromodul in 等。
[00611 1.5大鼠膑腱损伤模型的建立和U0126治疗
[0062]选用4月龄SPF级雄性SD大鼠20只（香港中文大学实验动物中心提供），体重(254土 20)g。适应性喂养IOcL根据我实验室已经建立好的大鼠髌腱缺损模型，将大鼠的髌腱暴露， 纵切切除中间三分之一(约1mm)。将大鼠随机分为PBS(磷酸缓冲盐溶液)对照组和药物治疗 组（1〇μ1的1〇μΜ U0126)，每组10只。每隔两天在髌腱缺损位置注射I3BS或治疗药物，共计三 次。所有动物自由摄水及摄食(标准饲料，含钙1.33%，磷0.95% )，在室温25~28°C，湿度75 ~80%清洁级环境中喂养。3周后取材，部分样品进行力学测试(n = 6)，剩余部分膑腱进行 固定处理，之后进行石蜡切片和组织学观察如HE染色和免疫组织化学染色等。
[0063] 1.6力学测试
[0064] 力学测试的方法按照以下方法进行。首先，分离出完整的膑腱组织，之后用两个并 在一起的手术刀片切掉周边的原有肌腱组织而保留新生的肌腱组织。之后，将膑腱的两端 固定在力学测试系统(Hounsfield H25KS力学测试机，Tinius Olsen公司，英国）。力学测试 所用的参数为40毫米/分钟，并预先加载0.1 N的拉力，当到达新生肌腱组织所能承受的最大 力时肌腱发生断裂，此时机器会记录力与位移的曲线。根据曲线和预先测得的新生肌腱组 织的横截面积，我们计算出最大力（单位是N/mm2)。而杨氏模量则根据曲线的斜率计算得 到。
[0065] 1.7统计
[0066] 计量资料用均数土标准差（x±.s·):表示，采用SPSS16.0软件行ANOVA方差分析并以 LSD-t检验进行组间比较，P〈0.05可认为具有统计学意义。
[0067] 2 结果
[0068] 2.1 U0126对间充质干细胞无毒性
[0069]首先，我们通过MTT法测量了不同浓度的U0126对大鼠间充质干细胞的毒性。结果 表明，在浓度0.1_20μΜ范围内，U0126对细胞没有显著的毒性作用，表明该药物对细胞是安 全的（图1)。
[0070] 图1显示不同浓度的U0126对间充质干细胞无毒性。间充质干细胞经不同浓度的 U0126处理24和72小时后，用MTT法测定细胞的活力(η = 5)。
[0071] 2.2 U0126可以启动间充质干细胞成肌腱分化
[0072]根据U0126的细胞毒性实验，我们最终选定ΙΟμΜ作为肌腱损伤治疗的理想剂量。为 检测U0126对间充质干细胞成肌腱分化的影响，将间充质干细胞经ΙΟμΜ U0126分别处理24h 和72h后，提取细胞的总RNA进行逆转录和实时定量PCR(real time PCR)检测。检测的肌腱 分化相关的标记基因包括colI(Collagen type I，I型胶原蛋白）、scx(Scleraxis)、mkx (Mohawk Homeobox)、tnmd(Tenomodulin)、fmod(Fibromodulin)和decorin(图2-3) 〇结果表 明，110126处理组的(：〇11、3〇1、1111?、1：11111(1和;1^1〇(1的表达有显著变化。
[0073]同时，我们用人源间充质干细胞重复了上述实验，即用ΙΟμΜ U0126处理72h后，进 行实时定量PCR检测肌腱分化相关的标记基因的表达。结果表明，ΙΟμΜ U0126相比空白对照 组和16?-摊且，能更好地提高〇〇11、1111?311111(1和(16〇〇1'；[11的表达（图4)，与大鼠间充质干细胞 的实验结果基本吻合。这些结果表明，U0126是一个潜在的促进间充质干细胞向肌腱分化的 有效小分子化合物。
[0074]图2-1至图2-6U0126启动大鼠间充质干细胞向肌腱细胞分化。间充质干细胞经10μ M U0126处理24小时后，提取细胞的总RNA进行定量PCR检测(η = 3)。通过进一步的试验对加 入维生素 C的效果进行检测，UO126结合VC启动大鼠间充质干细胞向肌腱细胞分化。间充质 干细胞经ΙΟμΜ U0126和25μΜ维生素 C处理24小时后，提取细胞的总RNA进行定量PCR检测(η =3)。结果表明，大鼠间充质干细胞向肌腱细胞分化的倍性变化较单独使用ΙΟμΜ U0126处 理高出32 %~40 %。上述数据表明，维生素 C能够进一步增加 UO126的使用效果，促进细胞分 化。
[0075]图3-1至图3-6U0126启动大鼠间充质干细胞向肌腱细胞分化。间充质干细胞经10μ M U0126处理72小时后，提取细胞的总RNA进行定量PCR检测（η = 3)。间充质干细胞经ΙΟμΜ U0126和25μΜ维生素 C处理72小时后，提取细胞的总RNA进行定量PCR检测(η = 3)。结果表明， 大鼠间充质干细胞向肌腱细胞分化的倍性变化较单独使用1〇μΜ UO126处理高出30 %~ 41%。上述数据表明，维生素 C能够进一步增加 U0126的使用效果，促进细胞分化。
[0076]图4 U0126启动人间充质干细胞向肌腱细胞分化。人间充质干细胞经ΙΟμΜ U0126 处理72小时后，提取细胞的总RNA进行定量PCR检测(η = 3)。人间充质干细胞经ΙΟμΜ U0126 和25μΜ维生素 C处理72小时后，提取细胞的总RNA进行定量PCR检测(η = 3)。结果表明，人间 充质干细胞向肌腱细胞分化的倍性变化较单独使用1〇μΜ U0126处理高出28%~36%。上述 数据表明，维生素 C能够进一步增加 U0126的使用效果，促进细胞分化。
[0077] 2.3 U0126促进肌腱愈合
[0078]为进一步验证U0126对损伤肌腱的愈合能否起到促进作用，我们建立了大鼠膑腱 三分之一损伤模型（图5)。期间对大鼠每隔两天注射一次ΙΟμΜ U0126,剂量为10μ1，共注射 三次，对照组注射PBS缓冲液。三周后取材进行力学测试和组织学检验。HE染色及Scx免疫组 织化学染色证明U0126治疗的膑腱愈合情况明显好于对照组（图6)。并且，力学测试的结果 表明U0126能显著提高治疗组大鼠膑腱所能承受的最大力，而杨氏模量与对照组没有显著 差别（图7-1至图7-2)。再进一步的实验中，对大鼠每隔两天注射一次ΙΟμΜ U0126和25μΜ维 生素 C，共注射三次，三周后取材进行力学测试，力学测试的结果表明U0126结合维生素 C能 进一步提尚治疗组大鼠膜腫所能承受的最大力。
[0079]上述披露的各技术特征并不限于已披露的与其它特征的组合，本领域技术人员还 可根据发明之目的进行各技术特征之间的其它组合，以实现本发明之目的为准。
【主权项】
1. 一种促进肌腱损伤愈合的药物，所述药物含有药用有效量的I，4-二氨基-2，3-二氰 基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。2. 根据权利要求1所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，所述药物含有5μΜ~ 15μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。3. 根据权利要求2所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，所述药物含有ΙΟμΜ的 1，4-二氨基-2，3-二氛基-1，4-双(邻氨基苯氧基疏基)丁二稀。4. 根据权利要求1所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，由1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双（邻氨基苯氧基巯基）丁二烯、维生素 C和医药学上可接受的非活性成分组 成。5. 根据权利要求4所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，所述药物含有5μΜ~ 15μΜ的1，4-二氨基-2，3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基巯基)丁二烯。6. 根据权利要求5所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，所述药物含有ΙΟμΜ的 1，4-二氨基-2，3-二氛基-1，4-双(邻氨基苯氧基疏基)丁二稀。7. 根据权利要求4-6任一项所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，医药学上可 接受的非活性成分为:医药学上可接受的稀释剂、医药学上可接受的赋形剂，以及医药学上 可接受的载剂。8. 根据权利要求1所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，所述药物为任意一种 临床可接受的口服剂型、注射剂型或外用剂型。9. 根据权利要求1所述的促进肌腱损伤愈合的药物，其特征在于，所述药物为为片剂、 胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、液体制剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气 雾剂、贴剂。10. 促进肌腱损伤愈合的药物的制备方法，其特征在于，所述药物为权利要求4-9任一 项所述的促进肌腱损伤愈合的药物，所述制备方法包括以下步骤： 步骤1，称量，按照预定配方配比称取1，4_二氨基-2,3-二氰基-1，4-双(邻氨基苯氧基 巯基)丁二烯、维生素 C和医药学上可接受的非活性成分； 步骤2，混匀，将步骤1中称量的组分混合均匀形成药物原料备用； 步骤3，将步骤2中获得的药物原料制备成临床可接受的剂型。
【文档编号】A61K31/277GK105943531SQ201610293848
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年5月5日
【发明人】李刚, 徐亮亮, 刘洋, 张锦芳
【申请人】香港中文大学深圳研究院