专利名称：包含zd6474和抗雄激素剂的组合的制作方法
技术领域：
本发明涉及在任选用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，尤其是治疗癌症，特别是涉及实体瘤的癌症的方法，所述方法包括给予ZD6474并联合雄激素剥夺；涉及含ZD6474和抗雄激素剂的药用组合物；涉及在通过治疗人或动物机体的治疗方法中使用的、含ZD6474和抗雄激素剂的联合产品；涉及含ZD6474和抗雄激素剂的药剂盒；涉及ZD6474和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在任选用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
正常的血管发生在包括胚胎发育、创伤愈合和女性生育功能的几个组成的多个过程中起重要作用。不合需要的或病理性血管发生与包括糖尿病性视网膜病、银屑病、癌症、类风湿关节炎、动脉粥样化、卡波济氏肉瘤和血管瘤的疾病状态相关联(Fan等，1995，TrendsPharmacol.Sci.1657-66；Folkman，1995，Nature Medicine 127-31)。血管渗透性的改变考虑在正常的和病理生理过程中均起作用(Cullinan-Bove等，1993，Endocrinology 133829-837；Senger等，1993，Cancer andMetastasis Reviews，12303-324)。已经鉴定了具有体外促进内皮细胞生长活性的几种多肽，包括酸性和碱性成纤维细胞生长因子(aFGF&bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)。由于其受体表达的限制，VEGF的生长因子活性相比于FGFs而言，相对特异性地针对内皮细胞。近期的证据指出，VEGF是正常和病理性血管发生(Jakeman等，1993，Endocrinology，133848-859；Kolch等，1995，Breast Cancer Research andTreatment，36139-155)和血管渗透性(Connolly等，1989，J.Biol.Chem.26420017-20024)的重要刺激因子。通过以抗体将VEGF阻隔(sequestration)而对VEGF作用的拮抗作用，导致肿瘤生长的抑制(Kim等，1993，Nature 362841-844)。
受体酪氨酸激酶(RTKs)在细胞跨细胞质膜的生化信息的传导中是重要的。这些跨膜分子特征性地由细胞外的配体结合域通过在细胞质膜中的片段连接细胞内酪氨酸激酶结构域组成。配体与受体结合产生对受体-关联的酪氨酸激酶活性的刺激，导致受体和细胞内其它分子的酪氨酸残基磷酸化。酪氨酸磷酸化中的这些变化开启了导致多种细胞反应的信号级联。迄今为止，已鉴定由氨基酸同源序列定义的至少十九个不同的RTK亚家族。这些亚家族中之一目前由fms-样酪氨酸激酶受体，Flt-1(也称为VEGFR-1)、含激酶插入域的受体，KDR(也称为VEGFR-2或Flk-1)和另一个fms-样酪氨酸激酶受体，Flt-4组成。这些亚家族中的与RTKs、Flt-1和KDR有关的两个已经显示与VEGF结合具有高亲和力(De Vries等，1992，Science 255989-991；Terman等，1992，Biochem.Biophys.Res.Comm.1992，1871579-1586)。VEGF与在异源细胞中表达的这些受体的结合，与细胞蛋白质的酪氨酸磷酸化状态和钙流的变化相关联。
VEGF是血管形成(vasculogenesis)和血管发生(angiogenesis)的关键刺激因子。该细胞因子通过诱导内皮细胞增殖、蛋白酶表达和迁移，产生使血管发芽的显型，随后使细胞组织形成毛细血管(Keck，P.J.，Hauser，S.D.，Krivi，G.，Sanzo，K.，Warren，T.，Feder，J.，和Connolly，D.T.，Science(Washington DC)，2461309-1312，1989；Lamoreaux，W.J.，Fitzgerald，M.E.，Reiner，A.，Hasty，K.A.，和Charles，S.T.，Microvasc.Res.，5529-42，1998；Pepper，M.S.，Montesano，R.，Mandroita，S.J.，Orci，L.和Vassalli，J.D.，Enzyme蛋白质，49138-162，1996.)。另外，VEGF诱发显著的血管渗透(Dvorak，H.F.，Detmar，M.，Claffey，K.P.，Nagy，J.A.，van de Water，L.，和Senger，D.R.，(Int.Arch.Allergy Immunol.，107233-235，1995；Bates，D.O.，Heald，R.I.，Curry，F.E.和Williams，B.J.Physiol.(Lond.)，533263-272，2001)，促使病理性血管发生特征的高通透的、不成熟的血管网络形成。
已经显示，仅激活KDR足以促进所有的对VEGF的主要表型反应，包括内皮细胞增殖、迁移和生存，并且引起血管渗透(Meyer，M.，Clauss，M.，Lepple-Wienhues，A.，Waltenberger，J.，Augustin，H.G.，Ziche，M.，Lanz，C.，Büttner，M.，Rziha，H-J.，和Dehio，C.，EMBO J.，18363-374，1999；Zeng，H.，Sanyal，S.和Mukhopadhyay，D.，J.Biol.Chem.，27632714-32719，2001；Gille，H.，Kowalski，J.，Li，B.，LeCouter，J.，Moffat，B，Zioncheck，T.F.，Pelletier，N.和Ferrara，N.，J.Biol.Chem.，2763222-3230，2001)。
为VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂的喹唑啉衍生物在国际专利申请公布号WO 98/13354和WO 01/32651中描述。在WO 98/13354和WO 01/32651中，化合物被描述为具有抗VEGF受体酪氨酸激酶(VEGF RTK)活性同时具有某种抗表皮生长因子(EGF)受体酪氨酸激酶(EGF RTK)活性。ZD6474为4-(4-溴代-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉 ZD6474在WO 98/13354的宽泛的一般公开的范围之内，并且在WO 01/32651中被作为例子。ZD6474是潜在的VEGF RTK抑制剂并且也具有某种抗EGF RTK活性。在每天一次口服给药后的一系列模型中，已经显示ZD6474产生广谱抗-肿瘤活性(Wedge SR，Ogilvie DJ，Dukes M，等.口服给药后ZD6474抑制血管内皮生长因子信号传导、血管发生和肿瘤生长.Cancer Res 2002；624645-4655)。
在WO 98/13354和WO 01/32651中，陈述其发明的化合物
“可作为单独疗法使用或除了本发明化合物外，还可与一个或多个其它物质和/或治疗联合使用。这样的联合治疗可通过同时、序贯或分开给予所述治疗的单个成分实现。”WO 98/13354和WO 01/32651则继续描述了这样的联合治疗的实例，包括手术、放射治疗和多种类型的化学治疗剂，后者包括“抗雄激素剂(例如，氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、乙酸环丙孕酮)、LHRH激动剂和拮抗剂(例如，乙酸戈舍瑞林、luprolide、阿巴瑞克)、睾酮5α-还原酶抑制剂(例如，非那雄胺)”。
然而，无论WO 98/13354和WO 01/32651中均未建议采用特别的ZD6474和雄激素剥夺的组合。
无论WO 98/13354和WO 01/32651中均未提及本发明的任何化合物与其它治疗联合使用将产生令人吃惊的有利效果。
EGF受体酪氨酸激酶抑制剂与抗雄激素剂的联合应用，在国际专利申请号WO 01/76586中有描述。
雄激素剥夺可通过手术和/或化学的方式实现。手术阉割包括通过手术切除睾丸。在手术阉割后，肾上腺将继续产生雄激素，虽然雄激素水平下降，但没有完全去除。可通过给予抗雄激素剂实现化学阉割。抗雄激素剂能够抑制由睾丸和由肾上腺产生的雄激素的作用，因此，通过化学阉割实现的雄激素剥夺的程度可比通过手术阉割所达到的程度大。手术阉割和化学阉割可一起应用。抗雄激素剂的实例包括促黄体生成素释放激素(LHRH)激动剂诸如戈舍瑞林、布舍瑞林、曲普瑞林或亮丙瑞林，LHRH拮抗剂，非类固醇类抗雄激素剂诸如比卡鲁胺(或其对映体)、氟他胺和尼鲁米特和类固醇类抗雄激素剂诸如乙酸环丙孕酮和乙酸甲地孕酮。某些这些抗雄激素剂的性质和用途已在，例如以下文献中综述，所有这些文献通过引用的方式结合于本文比卡鲁胺B J A Furr等，Urology，1996，47(Suppl.1A)，13-25，G J C Kolvenbag等，Urology，1996，47(Suppl.1A)，
70-79和欧洲专利申请号0100172如列于实施例6表中的第八个化合物；氟他胺 R O Neri，J.Drug Develop.，1987，1(Suppl.)，5-9和Urology，1989，34(Suppl.4)，19-21和英国专利申请号1360001；尼鲁米特 M G Harris等，Drugs和Aging，1993，3，9-25和英国专利申请号1518444。
雄激素剥夺常用于治疗前列腺癌。可是，在前列腺癌中，由于前列腺癌细胞从激素-依赖状态最终转化为激素-非依赖状态和/或雄激素-非依赖前列腺癌细胞的克隆选择，雄激素剥夺的好处通常是暂时的。应该理解，在此任何时候涉及到抑制前列腺癌细胞从激素-依赖状态转化为激素-非依赖状态，都相当于涉及抑制雄激素-非依赖性前列腺癌细胞的克隆选择。
出乎意料和令人惊奇的是，本发明人现在已经发现特别的化合物ZD6474，用于与WO 98/13354和WO 01/32651中所列联合疗法的广泛描述的特别选择的组合、即与雄激素剥夺的联合，产生比单独使用ZD6474和雄激素剥夺中任何之一都显著好的作用。尤其是，联合使用ZD6474和雄激素剥夺，比单独使用ZD6474和雄激素剥夺中任何之一，产生显著好的抗-癌作用，尤其是在实体瘤上产生显著好的抗-癌作用。更特别的是，联合使用ZD6474和雄激素剥夺在前列腺癌中产生显著好的抗-癌作用。
本发明治疗的方法中的抗-癌作用包括，但不限于抗-肿瘤作用、有效率(response rate)、疾病进展时间和生存率。本发明治疗的方法中的抗-肿瘤作用包括，但不限于抑制肿瘤生长、延缓肿瘤生长、肿瘤的消退(regression)、肿瘤大小缩减(shrinkage)、停止治疗时肿瘤的再生长时间增加、疾病进展的减慢。期望的是，当将本发明治疗的方法施予需要治疗癌症的、患有或不患实体瘤的温血动物诸如人时，所述治疗方法将起作用，所述作用通过，例如以下的一种或多种方法检测抗-肿瘤作用程度、有效率、疾病进展时间和生存率。抗-癌作用包括预防性治疗以及对实际存在的疾病的治疗。
依据本发明，提供在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
依据本发明的另一方面，提供在温血动物如人中治疗癌症的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
特别是，所述癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中治疗包括实体瘤在内的癌症的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
具体地说，包括实体瘤在内的癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，所述方法包括在给予有效量的抗雄激素剂之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中治疗癌症的方法，所述方法包括在给予有效量的抗雄激素剂之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中治疗包括实体瘤在内的癌症的方法，所述方法包括在给予有效量的抗雄激素剂之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态的方法，所述方法包括在给予有效量的抗雄激素剂之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞的方法，所述方法包括在给予有效量的抗雄激素剂之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供包括与药学上可接受的赋形剂或载体混合的ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂的药用组合物。
依据本发明的再一方面，提供在通过治疗人或动物机体的治疗方法中使用的、含ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂的联合产品。
依据本发明的再一方面，提供包含ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂的药剂盒。
依据本发明的再一方面，提供一种药剂盒，它包含a)在第一单位剂型中的ZD6474或其药学上可接受的盐；b)在第二单位剂型中的抗雄激素剂；以及
c)用于容纳所述第一和第二剂型的容器装置。
依据本发明的再一方面，提供一种药剂盒，它包含a)在第一单位剂型中的、与药学上可接受的赋形剂或载体一起的ZD6474或其药学上可接受的盐；b)在第二单位剂型中的、与药学上可接受的赋形剂或载体一起的抗雄激素剂；以及c)用于容纳所述第一和第二剂型的容器装置。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中产生抗-癌作用。
具体地说，所述癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
具体地说，所述肿瘤是前列腺癌肿瘤。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中产生抗-癌作用。
具体地说，所述癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
具体地说，所述肿瘤是前列腺癌肿瘤。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
依据本发明的再一方面，提供一种疗效性联合治疗(therapeuticcombination treatment)，所述联合治疗包括在需要疗效性治疗的温血动物如人中给予有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起，并且同时、序贯或分开给予有效量的抗雄激素剂，其中抗雄激素剂可任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
这样的疗效性治疗包括抗血管生成和/或血管渗透性作用、抗-癌作用和抗-肿瘤作用。
这样的疗效性治疗还包括抑制前列腺中的癌细胞从激素-依赖状态转化为激素-非依赖状态和抑制前列腺细胞转化为癌性细胞。
如在本文中所定义的，本发明的联合治疗可通过同时、序贯或分开给予所述治疗的各个成分(components)实现。如在本文中所定义的联合治疗可作为单独的治疗应用，或除了本发明的联合治疗之外，还可包括另外的手术或放射治疗或另外的化学治疗剂。
手术可包括在用本文描述的给予ZD6474的联合治疗之前、期间或之后的部分或全部肿瘤切除的步骤。
用于和本发明的联合治疗任选使用的其它化学治疗剂包括那些在WO 01/32651(其通过引用结合于本文)中描述的化学治疗剂。这样的化学治疗可涵盖五类主要治疗剂(i)其它的抗血管生成剂包括血管靶向剂；(ii)细胞抑制剂；(iii)生物反应调节剂(例如，干扰素)；(iv)抗体(例如，依决洛单抗(edrecolomab))；和(v)如用于医学肿瘤学中的抗增殖/抗肿瘤药物及其组合；和其它类别的治疗剂为(vi)反义治疗；(vii)基因治疗手段；和(ix)免疫治疗手段。
与本发明的联合治疗一起使用的具体化学治疗剂的实例为环磷酰胺、雷替曲塞、依托泊苷、长春新碱、长春瑞宾、紫杉醇、多西他赛、顺铂、奥沙利铂、卡铂、吉西他宾、伊立替康(CPT-11)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；期望这样的联合对于前列腺癌的治疗是特别有用的。
给予ZD6474、雄激素剥夺和电离辐射的三元联合可产生作用，诸如抗-肿瘤作用，大于那些单用ZD6474、雄激素剥夺和电离辐射任何之一所达到的作用，大于那些用ZD6474和雄激素剥夺的联合所达到的作用，大于那些用ZD6474和电离辐射的联合所达到的作用，大于那些用雄激素剥夺和电离辐射的联合所达到的作用。
依据本发明，提供在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中治疗癌症的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
具体地说，所述癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中治疗包括实体瘤在内的癌症的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
具体地说，所述包括实体瘤在内的癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中治疗癌症的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中治疗包括实体瘤在内的癌症的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供在温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，其中ZD6474和抗雄激素剂可各自任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起给予。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
依据本发明的再一方面，本文提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-癌作用。
具体地说，所述癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
具体地说，所述肿瘤是前列腺癌肿瘤。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-癌作用。
具体地说，所述癌症是前列腺癌。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
具体地说，所述肿瘤是前列腺癌肿瘤。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
依据本发明的再一方面，提供ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
依据本发明的再一方面，提供疗效性联合治疗，所述联合治疗包括向需要这样的疗效性治疗的温血动物诸如人，给予任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起的有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐，并且给予任选与药学上可接受的赋形剂或载体一起的有效量的抗雄激素剂和给予有效量的电离辐射，其中ZD6474、抗雄激素剂和电离辐射可同时、序贯或分开给予以及以任何顺序给予。
用电离辐射治疗的温血动物诸如人，意为在给予药物或包括ZD6474和雄激素剥夺的联合治疗之前、之后或同时用电离辐射治疗的温血动物诸如人。例如，可在给予药物或包括ZD6474和雄激素剥夺的联合治疗之前一周至之后一周的时期内，将所述电离辐射给予所述温血动物诸如人。这意味着，可以任何顺序分开或序贯给予或可同时给予ZD6474、雄激素剥夺和电离辐射。温血动物可同时经受ZD6474、雄激素剥夺和放射各自的作用。
依据本发明的一方面，在ZD6474和雄激素剥夺之一之前或ZD6474和雄激素剥夺之一之后给予电离辐射。
依据本发明的一方面，在ZD6474和雄激素剥夺两者之前或ZD6474和雄激素剥夺两者之后给予电离辐射。
依据本发明的一方面，在用电离辐射治疗动物之后，给予温血动物ZD6474。
依据本发明的另一方面，期望本发明的治疗方法的作用至少相当于单独使用所述治疗的各自成分作用的相加，即，相当于单独使用ZD6474和雄激素剥夺中的每一种作用的相加或单独使用ZD6474、雄激素剥夺和电离辐射中的每一种作用的相加。
依据本发明的另一方面，期望本发明的治疗方法的作用大于单独使用所述治疗的各自成分作用的相加，即，大于单独使用ZD6474和雄激素剥夺中的每一种作用的相加或大于单独使用ZD6474、雄激素剥夺和电离辐射中的每一种作用的相加。
依据本发明的另一方面，预期本发明的治疗方法的作用为协同作用。
依据本发明，如果所述作用通过例如对反应程度、有效率、疾病进展的时间和生存期检测的，在治疗学上优于以常规剂量给予一种或联合治疗中的其它成分可达到的作用，则联合治疗定义为提供协同作用。例如，如果作用在治疗学上优于于单用ZD6474或雄激素剥夺或电离辐射可达到的作用，则联合治疗的作用是协同的。而且，如果在一组对ZD6474或雄激素剥夺或电离辐射单用没有反应(或反应差)的患者中取得有益效果，则联合治疗的作用是协同的。另外，如果以常规剂量给予一种成分和以减低的剂量给予其它成分，并且通过例如对反应程度、有效率、疾病进展时间和生存期检测的治疗作用，相当于联合治疗的各成分在常规量给予时可达到的作用，则联合治疗的作用定义为提供协同作用。特别是，如果ZD6474或雄激素剥夺或电离辐射的常规剂量可以减低而不有损于反应程度、有效率、疾病进展时间和生存数据中的一个或多个，尤其是不损害反应的持续时间，而且与使用常规剂量的各个成分相比，所出现的令人讨厌的副作用更少和/或较少时，认为出现协同作用。Less如上所述，本文中所定义的本发明的联合治疗，由于它们的抗血管生成和/或血管渗透性作用而具有重要意义。血管发生和/或血管渗透性作用的增加存在于广泛的疾病状态中，包括癌症(包括白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤)、糖尿病、银屑病、类风湿关节炎、卡波济氏肉瘤、血管瘤、急性和慢性肾病、动脉粥样化、动脉再狭窄、自身免疫性疾病、急性炎症、淋巴水肿、子宫内膜异位、功能异常性子宫出血和包括老年黄斑变性在内的伴视网膜血管增殖的眼病。本发明的联合治疗特别期望在前列腺癌的预防和治疗中有用。本发明的联合治疗还可用于预防和治疗前列腺的良性疾病诸如良性前列腺肥大/良性前列腺增生(BPH)。
本文描述的组合物可以以下的形式给予，适合于口服给予的，例如，片剂或胶囊剂，适合于鼻腔给予或经吸入给予的，例如，如粉剂或溶液剂，适合于胃肠外注射(包括静脉内、皮下、肌肉内、血管内注射或输注)的，例如灭菌溶液剂、悬浮剂或乳剂，适合于局部给予的，例如软膏剂或乳膏剂，适合于直肠给予的，例如栓剂或通过可直接注射入肿瘤或通过区域传递或通过局部传递的途径给予。在本发明其它的实施方案中，联合治疗的ZD6474可经内窥镜、气管内、损伤部位内(intralesionally)、透皮、静脉内、皮下、腹膜内或肿瘤内传递。ZD6474优选口服给药。通常，可用常规的方法使用常规赋形剂制备本文描述的组合物。本发明组合物以单位剂型存在为有利。
正常情况下，ZD6474将以每平方米动物体表面积10-500mg范围的单位剂量给予温血动物，例如，在人约为0.3-15mg/kg。单位剂量设计在例如，0.3-15mg/kg的范围内，优选0.5-5mg/kg，并且这通常是治疗有效的剂量。单位剂型诸如片剂或胶囊剂通常将含例如，25-500mg的活性成分。优选每天剂量采用的范围为0.5-5mg/kg。
可依据已知给药途径和剂量给予抗雄激素剂。例如，可以每天150mg的单一每天口服剂量给予比卡鲁胺。例如，可以或者每28天3.6mg或者每12周10.8mg皮下注射给予戈舍瑞林。
剂量和给药方案可依据具体的疾病状态和患者整体状况不同而异。如果除了本发明的联合治疗之外，还使用一个或多个其它的化学治疗剂，剂量和给药方案也可变化。可由治疗任何具体患者的执业医师确定给药方案。
依据临床放射治疗中的已知规程，给予放射治疗。电离辐射的剂量将为那些已知用于临床放射治疗的剂量。所用的放射治疗将包括例如，应用γ-射线、X-射线和/或从放射性同位素直接释放的放射线。其它形式的DNA损伤因子也包含在本发明中诸如微波和UV-照射。例如，可以每天1.8-2.0Gy的剂量，每周5天给予X-射线5-6周。通常，总的分次照射的剂量将在45-60Gy的范围内。作为放射治疗过程的部分，可给予单次较大剂量，例如，5-10Gy。可在外科手术进行时给予单次剂量。可采用超分割(Hyperfractionated)放射治疗，由此在一个时期内有规律性地给予小剂量的X-射线，例如，几天内每小时0.1Gy。用于放射性同位素的剂量范围变化很大，并且依赖于同位素的半衰期、发出射线的强度和类型以及依赖于细胞的摄取。
如上所述，需要对具体疾病状态进行治疗性或预防性治疗的每次治疗的剂量大小，将必须依据被治疗的对象、给药途径和被治疗疾病的严重程度不同而变化。因此，可由治疗任何具体患者的执业医师确定最佳剂量。例如，为降低毒性，减低上述联合治疗的各成分的剂量可能是必须的或需要的。
本发明涉及雄激素剥夺与ZD6474或与ZD6474的盐的联合。
用于药用组合物的ZD6474的盐将是药学上可接受的盐，但是其它的盐可用于产生ZD6474及其药学上可接受的盐。这样的盐可用提供药学上可接受的阳离子的无机或有机碱形成。这样的与无机或有机碱形成的盐包括例如，碱金属盐，诸如钠盐或钾盐，碱土金属盐诸如钙盐或镁盐、铵盐或例如，与甲基胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、吗啉或三-(2-羟乙基)胺形成的盐。
依据任何已知的制备ZD6474的方法，可合成ZD6474。例如，依据在WO 01/32651中描述任何方法；例如，那些在WO 01/32651的实施例2(a)、2(b)和2(c)中描述的方法，可制备ZD6474。
抗-雄激素剂是商业上可获得的。
优选的抗雄激素剂是比卡鲁胺。
优选的抗雄激素剂是戈舍瑞林。
以下实验可用于证明与雄激素剥夺联合的ZD6474的活性。
LNCaP人前列腺癌异种移植物(xenograft)模型向6-8周龄的Swiss裸小鼠的前侧腹部注射悬浮于0.1ml无血清的外加100μl的基质胶(Matrigel)培养基中的5×106个肿瘤细胞。一旦形成肿瘤，将小鼠随机分配为对照和治疗组。将ZD6474悬浮于1％(v/v)的在去离子水中的聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯溶液中，并以0.1 ml/10g体重每天经口灌胃给药。
以50mg/kg/天的剂量，在荷瘤的正常和阉割小鼠中，相对于适当的对照组，检查ZD6474对肿瘤生长的影响。
一周检查小鼠两次，并用测径器在十字交叉的两个最大直径测量肿瘤大小。安乐处死动物后，通过切开邻近的器官和结构，摘取肿瘤并在分析天平上称重。为了进行组织学分析，将组织样本于10％中性缓冲的福尔马林中固定和通过分级的乙醇和二甲苯加工，用于石蜡包埋并用标准方法染色。为了计算坏死百分率，在低能量下(10x)检查在40天时摘取的肿瘤的每个肿瘤的5个随机区域。使用可在ImagePro计算机处理的图像分析包(Media Cybernetics)获得的工具，对每个区域的坏死面积进行电子学上的范围确定，以产生面积。操作人员执行此鉴定并且圈定坏死面积用于所有的分析结果(analyzedissues)。使用切片的总面积作为分母，评价每个区域的坏死百分率。为得到所有实验肿瘤组的平均值，将每个区域的百分坏死对组中的所有肿瘤的总数量进行平均。
使用重复的检测模型分析体内肿瘤体积。使用几个协方差结构，包括AR-1和随机系数模型，均获得相似的结论。本文报告的分析基于用协方差矩阵的粗略估计(robust estimates)的随机系数模型。采用F-检验在对照的基础上对各治疗组进行特定比较。用SAS PROC MIXED进行统计分析；用GAUSS 5.0作图。误差棒形图(Error bars)代表与均值间的标准误差。用Kaplan-Meier曲线估计治疗开始的时间至肿瘤体积超过截止值(肿瘤体积＞300mm3)的时间并且用对数秩检验对各治疗组进行交叉比较。采用肿瘤体积截止值以避免使用将包含使动物显著痛苦的存活终点，并且使用适于比较所有组间的肿瘤生长数据的阈值。
在使用的剂量下，与50mg/kg/天的ZD6474相关联的对体内LNCaP异种移植物生长的作用，最有可能与对VEGF受体信号传导的作用有关。
在治疗之前，异种移植物达到134mm3(范围4-616mm3)的平均体积。治疗开始时，肿瘤体积在各组间没有显著性差异。ZD6474治疗后38天，观察到肿瘤体积，在ZD6474组和睾丸切除术组(P＜0.001)以及对照组之间有显著性差异(P＜0.001)(Fig.1A)。类似地，在联合治疗组和睾丸切除术组(P＜0.001)以及对照组之间观察到显著性差异(P＜0.001)。
在治疗后第13-38天，发现ZD6474治疗组和睾丸切除术组之间在统计学上显著性差异(P＜0.05)。这个结果可提示，当肿瘤在经历雄激素剥夺而变得雄激素不应的(refractory)小鼠身上时，ZD6474使肿瘤维持静止停滞状态(stasis)。
在单用ZD6474治疗40天然后停用化合物后进行监测的动物中，延迟一些天(～15天)后肿瘤恢复生长(Fig.2A)。所述延迟从KaplanMeier分析(Fig.2B)中也得到证明。肿瘤再生长的延迟可能部分由于需要从组织中去除化合物的时间和/或对从测径器测量的活的肿瘤组织估计过高，因为慢性给予ZD6474可导致显著的肿瘤坏死。仔细检查未治疗的和之前ZD6474治疗的肿瘤的肿瘤生长率，在考虑约15天的延迟时，提示两者间没有显著性差异(Fig.2C)。
当在行睾丸切除术的小鼠中检查到ZD6474已经去除，发现雄激素剥夺与固定时期的ZD6474治疗的联合，产生最大的纯治疗作用(Fig.2A)。相对于停用ZD6474那天测量的肿瘤体积，肿瘤生长的证据仅在去除化合物之后40-58天是明显的。该数据提示，在用两种用药程式(modalities)治疗的动物中，雄激素剥夺的细胞抑制剂作用甚至在停用ZD6474之后仍然维持。
为了用免疫组织学检查治疗的结果，本发明人评价了在开始治疗后第40天的来自每个实验组的5份肿瘤。当与溶媒-治疗对照组比较时，发现来自用ZD6474(每天一次，p.o.)50mg/kg/天治疗的，或来自那些经历睾丸切除术的小鼠肿瘤异种移植物(xenografts)具有较高的坏死百分率(分别为48±5％和51.1±5％对31±7％，P＝0.047)(Fig.3)。用睾丸切除术和ZD6474联合治疗的动物，比任一单一治疗组观察到具有更多坏死的肿瘤(73±6％对51±5％，P＝0.01)。
当停用ZD6474治疗时，在雄激素-剥夺的动物中观察到肿瘤再生长的最强抑制。也在用此两种手段联合治疗的小鼠中观察到增加的肿瘤坏死。
类似的实验可被用于观察ZD6474和抗雄激素剂的联合以及ZD6474和雄激素剥夺与电离辐射的联合。
数据以图表方式在
图1、2和3中显示。
图1溶媒(对照)、ZD6474(50mg/kg/天)、睾丸切除术或ZD6474(50mg/kg/天)和睾丸切除术对LNCaP肿瘤异种移植物生长的作用。异种移植物经皮下种植在裸小鼠上并且治疗之前达到134mm3(范围4-616mm3)的平均(所有治疗组联合)体积。然后开始每天一次口服给予ZD6474或溶媒并持续整个实验期间。数据点代表对照组9只小鼠、睾丸切除术组12只小鼠、ZD6474组15只小鼠的和联合治疗组12只小鼠的平均值，SEs以单向(in one direction)显示。在开始给予ZD6474时，同时进行阉割。数据代表减去每只动物治疗前最后的肿瘤体积之后的肿瘤大小(mm3)。A，最初肿瘤体积(134mm3)中值时评估的各组间肿瘤生长。B，在肿瘤体积(339mm3)达到第90个百分点时评估的各组间肿瘤生长。C，在肿瘤体积(30.4mm3)达到第25个百分点时评估的各组间肿瘤生长。
图2停用ZD6474(50mg/kg/天)对LNCaP肿瘤异种移植物生长的作用。在第40天，停止用ZD6474慢性治疗并且继续监测肿瘤。A，数据点(±SE)代表13只正常小鼠和在给予ZD6474之前睾丸切除术的6只小鼠的平均值。数据代表肿瘤大小(mm3)的变化。组间有统计意义上的差异(P＜0.001，F-检验)。误差棒指均值的一个标准误。B，达到300mm3肿瘤体积时的时间的Kaplan-Meier评价。排除在治疗开始之前肿瘤达到300mm3的动物。在最后随访时，对肿瘤体积少于300mm3的实施安乐死的动物进行检查。C，在对照组和ZD6474治疗前(即停用药物之后)小鼠(对于对照组，第0-35天和对于ZD6474组，第41-76天)中，肿瘤的生长比较图。数据为对照组9只小鼠和ZD6474组13只小鼠的平均值。
图3治疗40天的5份LNCaP肿瘤异种移植物的组织学分析。A，苏木精和曙红组织切片(10x物镜)，随机选自(i)对照组(溶媒-治疗)；(ii)睾丸切除术组；(iii)ZD6474(50mg/kg天)-治疗组；(iv)睾丸切除术+ZD6474(50mg/kg/天)-治疗组。所有肿瘤在40天时摘取。发现与接受单一任一治疗的小鼠肿瘤比较，在ZD6474(50mg/kg/天，每天一次，p.o.)加睾丸切除术组中总的肿瘤坏死百分率显著增加。B，在A中描述的肿瘤的形态测定图像分析的肿瘤坏死百分率。
权利要求
1.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
2.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中产生抗-癌作用。
3.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
4.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
5.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
6.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
7.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中产生抗-癌作用。
8.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
9.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
10.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
11.一种药用组合物，它包含与药学上可接受的赋形剂或载体混合的ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂。
12.一种药剂盒，它包含ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂。
13.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
14.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-癌作用。
15.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
16.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
17.ZD6474或其药学上可接受的盐和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
18.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
19.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-癌作用。
20.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗的和任选用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗-肿瘤作用。
21.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺中的癌细胞从激素依赖状态转化为激素非依赖状态。
22.ZD6474或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于在用雄激素剥夺治疗和用电离辐射治疗的温血动物如人中抑制前列腺细胞转化为癌细胞。
23.一种在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
24.一种在温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，所述方法包括在有效量的雄激素剥夺之前、之后或同时和在有效量的电离辐射给予之前、之后或同时给予所述动物有效量的ZD6474或其药学上可接受的盐。
全文摘要
本发明涉及在任选用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用的方法，尤其是治疗癌症，特别是涉及实体瘤的癌症的方法，所述方法包括给予ZD6474并联合雄激素剥夺；涉及含ZD6474和抗雄激素剂的药用组合物；涉及在通过治疗人或动物机体的治疗方法中使用的、含ZD6474和抗雄激素剂的联合产品；涉及含ZD6474和抗雄激素剂的药剂盒；涉及ZD6474和抗雄激素剂在制备药物中的应用，所述药物用于在任选用电离辐射治疗的温血动物如人中产生抗血管生成和/或降低血管渗透性作用。
文档编号A61P35/00GK101094673SQ200580045397
公开日2007年12月26日 申请日期2005年11月1日 优先权日2004年11月3日
发明者S·R·韦奇 申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司