专利名称：门冬氨酸阿奇霉素及其制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种门冬氨酸阿奇霉素及其制剂。
背景技术：
阿奇霉素为当今世界上公认的抗生素“第一拳头式”产品，由于阿奇霉素的自由碱形式不易溶于水，所以它的溶液从非胃肠道给药的治疗一直受到制约。市场上销售的主要品种为口服制剂，且生物利用度不高(仅为40％左右)；另外阿奇霉素在酸性环境容易分解，不够稳定，导致制剂储存时间不长，使用过程易出现副作用，对医患产生一些不利的影响。
发明内容
本发明的目的提供一种门冬氨酸阿奇霉素及其制剂。
本发明所提供的门冬氨酸阿奇霉素，其化学名称为(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-(-L-核-己吡喃糖基)氧)-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，6，8，10，12，14-七甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-(二甲氨基)-β-D-木-己吡喃糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15酮门冬氨酸盐；其分子式为C38H72N2O12(C4H7O4N2)2。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素具有阻碍细菌转肽过程，从而抑制细菌蛋白质的合成。体外试验证明，对临床上多种常见致病菌有抗菌作用，包括革兰氏阳性需氧菌、革兰氏阴性需氧菌以及特南包柔螺旋体(Lyme病原体)(Lyme disease agent)、肺炎支原体、人型支原体、脲素分解脲素原体、沙眼衣原体、卡氏肺孢子虫、鸟分枝杆菌属、弯曲菌属、单核细胞增多性李斯德杆菌等其他微生物。临床应用中未发现明显的毒副作用，产品质量稳定，临床疗效好，是目前临床上较为理想的抗细菌感染的药物。
门冬氨酸也是人体必须的氨基酸之一，与阿奇霉素成盐后既能够发挥协同作用，也能够有效的改善阿奇霉素的溶解性，扩大了阿奇霉素的制剂范围和用药途径。
本发明还提供一种上述门冬氨酸阿奇霉素的制备方法。
所述门冬氨酸阿奇霉素的制备方法，包括以下步骤1)将阿奇霉素溶于是阿奇霉素4-9倍质量的注射用水中，调节pH值至5.5-6.5，在搅拌下加入是阿奇霉素0.30-0.40倍质量的门冬氨酸，室温搅拌4-6小时待固体溶解、反应液澄明后，加活性炭脱色；2)过滤后，滤液经0.18-0.25um滤膜过滤，滤液冻干后即得门冬氨酸阿奇霉素。
所述步骤1)中，阿奇霉素溶于是阿奇霉素8.4倍质量的注射用水中，调节pH值至6.0，在搅拌下加入是阿奇霉素0.36倍质量的门冬氨酸。
所述方法中，所述阿奇霉素为阿奇霉素精品；所述阿奇霉素精品可按照以下步骤制备1)将阿奇霉素加入是阿奇霉素3-5倍质量的乙醇中，再加入是阿奇霉素质量2-3％的白陶土，搅拌30-40分钟，过滤；2)将步骤1)得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素5-6倍质量水中，将析出的白色固体滤出，加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，溶解，然后加入是阿奇霉素质量的0.3％-0.5％的针用活性炭，室温搅拌15-20分钟，过滤，得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素3-5倍质量水中，将析出的白色固体滤出，干燥，得到阿奇霉素精品。
所述阿奇霉素精品按照以下步骤制备1)将阿奇霉素加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，再加入是阿奇霉素3％的白陶土，搅拌30分钟，过滤；2)将步骤1)得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素5倍质量蒸馏水中，将析出的白色固体滤出，加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，溶解，然后加入是阿奇霉素质量的0.3％的针用活性炭，过滤，得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素五倍质量的蒸馏水中，将析出的白色固体滤出真空干燥，得到阿奇霉素精品。
本发明的制备门冬氨酸阿奇霉素的方法，是通过阿奇霉素与门冬氨酸在适宜的反应条件下获得。由于阿奇霉素具有两个氨基，可以与酸反应生成盐，门冬氨酸为氨基二羧酸结构，其一个羧基与阿奇霉素中和成盐；在成盐过程中，阿奇霉素始终处于碱性或中性的环境，避免了阿奇霉素长时间在酸性溶液中不稳定而分解的问题；从反应完成后的溶液中采用水溶液冷冻干燥法获得固体的门冬氨酸阿奇霉素。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素药物制剂，以门冬氨酸阿奇霉素或其溶剂化合物或其任意的结晶形态为药物活性成分，在其制剂中所占的质量百分比可以是0.1％-99.9％，其余为药物可接受的载体。本发明的门冬氨酸阿奇霉素制剂，以单位剂量形式存在，所述单位剂量形式是指制剂的单位，如片剂的每片、胶囊剂的每粒、注射剂的每支等，单位剂量中含门冬氨酸阿奇霉素的量为0.1g-1.0g，优选的是0.125g-0.680g。所述的门冬氨酸阿奇霉素的溶剂化合物可以是水合物，包括一水化合物、二水化合物等。
本发明提供的门冬氨酸阿奇霉素制剂可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液、糖浆剂、口含片、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂、缓释制剂、控释制剂等。本发明的制剂优选的是注射剂型，如注射用冻干粉针剂、注射用粉针剂、注射液、输液等，更优选的是注射用冻干粉针剂。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素制剂是将上述门冬氨酸阿奇霉素或其溶剂化合物或其任意结晶体与药学上可接受的载体辅料混合在一起，制备而成的。门冬氨酸阿奇霉素口服给药的片剂、胶囊通常为一种单位剂量，并含有常用的赋型剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、润活剂、崩解剂、着色剂调味剂等，并可对片剂进行包衣。
对于口服液体制剂的形式可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酊剂，或者可以是一种在使用前可以用水或其他适宜载体复配的干燥产品。这些液体制剂可以含有常规的添加剂，诸如悬浮剂(例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素硬脂酸铝或氢化食用脂肪)，乳化剂(例如卵磷脂、脱水山梨醇—油酸脂或阿拉伯胶)，非水性载体(例如杏仁油、丙二醇或乙醇)，防腐剂(例如对羟基苯甲酸酯、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸)等，并且如果需要，可以含有常规的香味剂或着色剂。
对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的门冬氨酸阿奇霉素和无菌载体。根据载体和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是将门冬氨酸阿奇霉素溶解在一种载体中，在将其装入一种适宜的小瓶前过滤、消毒然后严封，辅料如防腐剂和缓冲剂也可溶解在这种载体中。为了提高门冬氨酸阿奇霉素制剂的稳定性，可在将液体装入小瓶以后，将这种组合物放入冷冻干燥机，在真空状态下将其水分除去，得到注射用门冬氨酸阿奇霉素冻干制剂。
用基本相同的方式制备胃肠外悬浮液，除了是将活化化合物悬浮在载体而不是将其溶解，而且在将其悬浮于无菌载体之前，采用适宜的消毒剂对其进行消毒，表面活性剂或湿润剂可包括在此组化合物中，以利于这种活性化合物的均匀分布。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素制剂，在制备成制剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、氯化钠、氯化钾、右旋糖苷、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、明胶、聚乙基吡咯烷酮、甘油、吐温、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素制剂在使用时根据制剂的剂型、规格以及病人的情况确定用法用量，根据药物剂可以采取口服、肌肉注射、静脉注射等不同途径。
本发明提供的门冬氨酸阿奇霉素粉针剂的制备方法，是在上述门冬氨酸阿奇霉素中加入是门冬氨酸阿奇霉素4-6倍注射用水溶解后，加入活性炭，搅拌15-30分钟后，去掉活性炭，用0.22um微孔滤膜过滤，至溶液澄明，进行冻干得到门冬氨酸阿奇霉素粉针剂。
体外药效试验证明，本发明的门冬氨酸阿奇霉素粉针剂对临床上多种常见致病菌有抗菌作用，如金黄色葡萄球菌，大肠埃希菌，绿浓假单胞菌，表皮葡萄球菌、β-溶血性链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、肺炎克雷伯菌和枸橼酸杆菌等，临床上主要用于阿奇霉素敏感致病菌株所引起的下列感染1.鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染；支气管炎、肺炎等下呼吸道感染；中耳炎；2.泌尿道感染如急性肾盂肾炎、慢性肾盂肾炎急性发作、膀胱炎、前列腺炎等；3.沙眼衣原体所致单纯性生殖器感染；非多重耐药淋球菌所致的单纯性生殖器感染；4.外科切口、创面、皮肤、粘膜及软组织感染。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素片剂是用于治疗阿奇霉素敏感菌引起感染的口服用药，该制剂主要由下述重量份的原料组成门冬氨酸阿奇霉素170-680重量份淀粉60-240重量份十二烷基硫酸钠 4-16重量份羧甲基淀粉钠5-20重量份硬脂酸镁3.5-14重量份滑石粉 5-20重量份。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素片剂优选主要由下述重量份的原料组成门冬氨酸阿奇霉素340重量份淀粉120重量份十二烷基硫酸钠 8重量份羧甲基淀粉钠10重量份硬脂酸镁7重量份滑石粉 10重量份。
该门冬氨酸阿奇霉素片剂按照如下方法制备1)将上述量的门冬氨酸阿奇霉素、淀粉、十二烷基硫酸钠、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁、滑石粉，分别过80目筛；2)将步骤1)得到的门冬氨酸阿奇霉素、淀粉、十二烷基硫酸钠加入7.5％聚乙烯吡咯烷酮的65％乙醇溶液制成软材，用18目筛制成湿粒，40-60℃热风干燥，干粒加入上述量的硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠、滑石粉混匀，16目筛整粒，混匀，得到片剂。
本发明的门冬氨酸阿奇霉素片剂适用于对门冬氨酸阿奇霉素敏感菌引起感染，为患者提供了另外一种用药方式的选择；门冬氨酸阿奇霉素片还具有容易储存、便于携带等优点。
图1为静脉注射门冬氨酸阿奇霉素粉针剂的小鼠死亡曲线
具体实施方式
下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。
实施例1、门冬氨酸阿奇霉素的制备1)精制将阿奇霉素加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，再加入是阿奇霉素质量3％的白陶土，搅拌30分钟、过滤，得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素5倍质量的蒸馏水中，可见白色固体析出。将白色固体滤出，加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，溶解，然后加入阿奇霉素质量的0.3％的针用活性炭，过滤，得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素五倍质量的蒸馏水中，可见白色固体析出，将白色固体滤出真空干燥，得到阿奇霉素精品。
2)合成在装有搅拌器、温度计的反应缻中加入5Kg步骤1)得到的阿奇霉素精品(6.6mol)溶于42L注射用水中，在激烈搅拌条件下分批加入门冬氨酸1.8Kg(0.136mol)，调节pH值至6.0，维持室温搅拌4-6小时，待固体溶解、反应液澄明后，加入300g的针用活性炭，搅拌15-30分钟，过滤，得到的滤液继续加入300g的针用活性炭搅拌30分钟，过滤，得到门冬氨酸阿奇霉素溶液。将该溶液用0.22μm滤膜的进行超滤，待滤液澄明，进行门冬氨酸阿奇霉素溶液测量测定，采用效价法对门冬氨酸阿奇霉素溶液进行测定，测定表明本品每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位，测定可信限率＜5％。将超滤液灌装于托盘中，置冻干箱中冻干，然后出箱，装筒、加塞，轧盖，包装。该门冬氨酸阿奇霉素化学名称为(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-(-L-核-己吡喃糖基)氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，6，8，10，12，14-七甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-(二甲氨基)-β-D-木-己吡喃糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15酮门冬氨酸盐；分子式C38H72N2O12(C4H7O4N)2；分子量1015.19。
实施例2、冻干粉针剂的制备将170g(以门冬氨酸阿奇霉素计)实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素，加入1000ml注射用水搅拌溶解后，加入是门冬氨酸阿奇霉素质量0.3％的针用活性炭，搅拌30分钟后，脱炭，用0.22um微孔滤膜过滤，至溶液澄明，以效价法测定门冬氨酸阿奇霉素溶液含量，结果表明本品每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位后，检验合格后，分成1000份，分别无菌灌装于西林瓶中，半压塞，置入冷冻干燥机，按照设计的冻干曲线(对其冻干曲线的制定首先是确定其共晶点，将制品的预冻温度控制在共晶点以下15℃-20℃，保持一定真空度的情况下，第一阶段升华温度控制在共晶点以上5℃-10℃，保温，第二阶段升华视真空度而定)进行冻干，具体冻干方法为预冻使制品温度降至-40℃以下并保持1小时，在-45℃以下对冷阱制冷，然后抽真空至10Pa以下，保持1小时后加热，加热温度保持在-11℃，8小时，二阶段升华分次进行，每次6小时，制品温度在31℃，当真空度在3Pa以下时关机，压塞，出箱，压盖，轧盖，灯检，包装。
效价法测定门冬氨酸阿奇霉素溶液含量，结果表明本品每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位实施例3、冻干粉针剂的制备将340g(以门冬氨酸阿奇霉素计)实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素，加入注射用水至2000ml，搅拌溶解后，加入是门冬氨酸阿奇霉素质量0.3％针用活性炭，搅拌30分钟后，脱炭，用0.22um微孔滤膜过滤，至溶液澄明，以效价法测定门冬氨酸阿奇霉素溶液含量，测定要求本品每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位，检验合格后无菌灌装于西林瓶中，半压塞，置入冷冻干燥机，按照设计的冻干曲线(对其冻干曲线的制定首先是确定其共晶点，将制品的预冻温度控制在共晶点以下15℃-20℃，保持一定真空度的情况下，第一阶段升华温度控制在共晶点以上5℃-10℃，保温，第二阶段升华视真空度而定)进行冻干，具体冻干方法为预冻使制品温度降至-40℃以下并保持1小时，在-45℃以下对冷阱制冷，然后抽真空至10Pa以下，保持1小时后加热，加热温度保持在-11℃，8小时，二阶段升华分次进行，每次6小时，制品温度在31℃，当真空度在3Pa以下时关机，压塞，出箱，压盖，轧盖，灯检，包装。
经过效价法测定门冬氨酸阿奇霉素溶液含量，结果表明上述得到的冻干粉针剂每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位。
实施例4、冻干粉针剂的制备将680g(以门冬氨酸阿奇霉素计)实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素，加入注射用水至4000ml，搅拌溶解后，加入是门冬氨酸阿奇霉素质量0.3％的针用活性炭，搅拌30分钟后，脱炭，用0.22um微孔滤膜过滤，至溶液澄明，以效价法测定门冬氨酸阿奇霉素溶液含量，测定要求本品每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位，检验合格后无菌灌装于西林瓶中，半压塞，置入冷冻干燥机，按照设计的冻干曲线(对其冻干曲线的制定首先是确定其共晶点，将制品的预冻温度控制在共晶点以下15℃-20℃，保持一定真空度的情况下，第一阶段升华温度控制在共晶点以上5℃-10℃，保温，第二阶段升华视真空度而定)进行冻干，具体冻干方法为预冻使制品温度降至-40℃以下并保持1小时，在-45℃以下对冷阱制冷，然后抽真空至10Pa以下，保持1小时后加热，加热温度保持在-11℃，8小时，二阶段升华分次进行，每次6小时，制品温度在31℃，当真空度在3Pa以下时关机，压塞，出箱，压盖，轧盖，灯检，包装。
以效价法测定门冬氨酸阿奇霉素溶液含量，测定结果表明，上述得到冻干粉针剂的每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位。
实施例5、门冬氨酸阿奇霉素注射液的制备将340g(以门冬氨酸阿奇霉素计)实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素溶于2500ml注射用水后，加入活性炭脱色，加稀盐酸调节PH值至5-7，脱炭，过滤，滤液过0.22um微孔滤膜，加注射用水到2000ml，灌装成1000支，灭菌，贴标，包装即得。
以效价法测定门冬氨酸阿奇霉素溶液含量，测定结果表明，上述得到门冬氨酸阿奇霉素注射液的每1mg的效价皆＞670阿奇霉素(C38H72N2O12)单位。
实施例6、门冬氨酸阿奇霉素片剂的制备将实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素、淀粉、十二烷基硫酸钠、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁、滑石粉分别过80目筛(必要时粉碎)，装袋备用。称取340g门冬氨酸阿奇霉素、120g淀粉、8g十二烷基硫酸钠充分混匀，搅拌3分钟，加入黏合剂(7.5％聚乙烯吡咯烷酮(65％乙醇))制成适宜软材，用18目筛制成湿粒，40-60℃热风干燥，制成干粒，再加入7g硬脂酸镁、10g羧甲基淀粉钠、10g滑石粉混匀，16目筛整粒，混匀后，分为1000份压成长圆型异型片。
实施例7、门冬氨酸阿奇霉素及其制剂的药效学实验1、体内抗菌实验药物实施例2制备的注射用门冬氨酸阿奇霉素粉针剂。注射用乳糖酸红霉素每mg相当于606μ，由上海四药股份有限公司生产，批号050505-5。保护剂高活性干酵母，市售商品，广东省东莞糖厂酵母分厂生产，批号05-2。
动物昆明种小鼠，由江苏省药物研究所实验动物室提供，合格证号苏动质字05007菌株金黄色葡萄球菌，肺炎球菌，由江苏省人民医院检验科临床分离鉴定后提供。
培养基营养肉汤培养基，按培养基方法配制。
将金黄色葡萄球菌、肺炎球菌在实验前一天定量接种于2ml营养肉汤中，37℃孵育6h，取0.1ml转种于10ml营养肉汤中，37℃孵育18h，为实验用原菌液。预实验实验用原菌液用5％干酵母(5g干酵母/100ml水)稀释，经腹腔注射感染小鼠，测出所试菌株的100％最小致死量(100％MLD)。
将实验用小鼠雌雄各半，体重18-22g，随机分成22组，每组10只。其中11组小鼠每只用金黄色葡萄球菌腹腔感染，另外11组小鼠每只用肺炎球菌腹腔感染，每只鼠注射菌量为1MLD/0.5ml，每组10只小鼠感染后即刻静脉注射给药0.5ml/20g体重，其中5组注射实施例2制备的门冬氨酸阿奇霉素粉针剂，5组注射乳糖酸红霉素作为阳性对照，1组作为空白对照，只注射注射用水，各组的注射剂量如表1、表2所示。连续观察7天动物反应，记录给药后小鼠死亡数。采用Bliss法于IBM计算机上用POMS软件程序计算门冬氨酸阿奇霉素粉针及阳性对照药乳糖酸红霉素对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌感染小鼠的体内抗菌作用半数有效量ED50及95％可信限。门冬氨酸阿奇霉素粉针对金黄色葡萄球菌感染小鼠的体内保护实验结果如表1所示，表明静脉注射门冬氨酸阿奇霉素粉针对金葡球菌感染小鼠的体内抗菌作用的ED50值为35.31mg/kg，低于静脉注射乳糖酸红霉素的ED50值70.60mg/kg。门冬氨酸阿奇霉素粉针对肺炎球菌感染小鼠的体内抗菌作用如表2所示，表2结果表明静脉注射门冬氨酸阿奇霉素粉针对肺炎球菌感染小鼠的体内抗菌作用的ED50为9.59mg/kg，低于静脉注射乳糖酸红霉素的ED50为48.23mg/kg。表明静脉注射门冬氨酸阿奇霉素粉针对金黄色葡球菌、肺炎球菌感染小鼠的体内抗菌作用强于乳糖酸红霉素。
表1 注射用门冬氨酸阿奇霉素粉针对金黄色葡球菌感染小鼠的体内保护实验
表2 门冬氨酸阿奇霉素粉针静脉注射对肺炎球菌感染小鼠的体内保护实验
2、门冬氨酸阿奇霉素粉针剂体外抗菌药效实验受试药物实施例2制备的注射用门冬氨酸阿奇霉素粉针剂对照药物注射用乳糖酸红霉素，购自上海四药股份有限公司；批号050505-5；含量606μ/mg。
菌株药敏质控标准株金黄色葡萄球菌(ATCC，29213)，大肠埃希菌(ATCC，25922)和绿浓假单胞菌(ATCC，27853)；表皮葡萄球菌、β-溶血性链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、肺炎克雷伯菌和枸橼酸杆菌全部分离自临床标本，并严格按文献(中华人民共和国卫生部医政司，全国临床检验操作规程，第一版，南京东南大学出版社，1990399；Murry PR，etal.Manual of Clinical Microbiology.6thed.WashingtonD C.American Society for Microbiology，1995246)规定进行了种属鉴定。
菌株菌液的制备以接种环在血平皿上挑取4-5个具有相同形态的待检菌菌落种入MH肉汤中，35℃培养至轻度混浊(约2-5h)，以灭菌生理盐水调节其浊度，使<p>实施例4犬干扰素α组合物2及其粉针剂和水针剂的制备组合物2每1mL溶液包含以下成分
其制备方法类似于实施例3。
实施例5犬干扰素α组合物3及其粉针剂和水针剂的制备组合物3每1mL溶液包含以下成分
其制备方法类似于实施例3。
实施例6犬干扰素α组合物4及其粉针剂和水针剂的制备组合物4每1mL溶液包含以下成分
其制备方法类似于实施例3。
实施例7犬干扰素α组合物5及其粉针剂和水针剂的制备组合物5
表6 实验条件对药物MIC(mg/L)值的影响
3、注射用门冬氨酸阿奇霉素的急性试验药品供静脉注射用液将实施例2制备的注射用门冬氨酸阿奇霉素溶于灭菌生理盐水中。供口服用液将实施例2制备的注射用门冬氨酸阿奇霉素粉针剂或实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素溶于蒸馏水中，配制成实验所需浓度。
动物昆明种小鼠，由江苏省药物研究所实验动物室提供，合格证号苏动环字05012，苏动质字05007。
将小鼠分为两组，静脉注射(iv)组和口服(p.o)组静脉注射(iv)组预试验表明实施例2制备的注射用门冬氨酸阿奇霉素粉针剂100％估计致死量为500mg/kg体重，0％估计致死量为150mg/kg体重，而且在静脉推注缓慢下进行。据此，取健康小鼠50只，雌雄各半，体重18-22g，随机分成5组，每组10只。组间剂量等比级1∶0.80，剂量范围为163.8-400mg/kg体重，iv量为等容积，0.5ml/20g，按体重一次静脉注射给药，45s推注完毕。给药后观察7天内的动物症状和死亡情况。
口服(p.o)组预试验表明实施例2制备的注射用门冬氨酸阿奇霉素粉针剂5g/kg剂量口服给药，未见动物死亡。据此，取健康小鼠40只，雌雄各半，体重18-22g，随机分成注射用实施例2制备的门冬氨酸阿奇霉素粉针组和实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素两组。试验前禁食6h，给以水自饮。P.o量为0.5ml/20g，按体重一次灌胃给药。给药后观察7天内动物症状和死亡情况。同时测定实施例2制备的注射用门冬氨酸阿奇霉素粉针剂的口服LD50值，并与实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素进行比较。采用Bliss法于IBM计算机上用POMS软件程序计算LD50及95％可信限。
小鼠静脉注射实施例2制备的门冬氨酸阿奇霉素粉针剂后，大部分中毒小鼠在45s静脉注射完毕后呼吸急促、蹬腿、挣扎而亡。部分中毒小鼠匍伏在地，呼吸急促，轻敲鼠盒仍有知觉，中毒死亡时间在10分钟内，死亡前也是蹬腿、挣扎而亡。呼吸停止后立即解剖，各脏器无异常表现。毒性死亡时间在30分钟之内。存活7天的小鼠解剖亦未见明显异常。小鼠口服5g/kg实施例2制备的门冬氨酸阿奇霉素粉针剂和实施例1制备的门冬氨酸阿奇霉素后，小鼠活动自如，未见异常表现。在给药1h后，少数小鼠活动减少，似睡状，轻敲鼠盒有知觉，7天内未见动物死亡。存活7天的小鼠解剖亦未见明显异常。
静脉注射门冬氨酸阿奇霉素粉针7天后的小鼠急性毒性动物死亡情况及LD50和95％可信限如表7所示，死亡曲线如图1所示；口服门冬氨酸阿奇霉素粉针剂或门冬氨酸阿奇霉素7天后的小鼠急性毒性动物死亡情况及LD50和95％可信限如表8所示。表明，门冬氨酸阿奇霉素粉针的静脉注射LD50为274.59mg/kg，95％可信限为244.97-307.80mg/kg；门冬氨酸阿奇霉素粉针剂和门冬氨酸阿奇霉素口服LD50均大于5g/kg。
表7 静脉注射门冬氨酸阿奇霉素粉针剂的急性LD50的实验结果
表8 口服门冬氨酸阿奇霉素粉针剂的急性LD50的实验结果
权利要求
1.一种门冬氨酸阿奇霉素，其化学名称为(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-(-L-核-己吡喃糖基)氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，6，8，10，12，14-七甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-(二甲氨基)-β-D-木-己吡喃糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15酮门冬氨酸盐；其分子式为C38H72N2O12(C4H7O4N2)2。
2.权利要求1所述的门冬氨酸阿奇霉素的制备方法，包括以下步骤1)将阿奇霉素溶于是阿奇霉素4-9倍质量的注射用水中，在搅拌下加入是阿奇霉素0.30-0.40倍质量的门冬氨酸，调节pH值至5.5-6.5，室温搅拌4-6小时待固体溶解、反应液澄明后，加活性炭脱色；2)过滤后，滤液经0.18-0.25um滤膜过滤，滤液冻干后即得门冬氨酸阿奇霉素。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤1)中，阿奇霉素溶于是阿奇霉素8.4倍质量的注射用水中，调节pH值至6.0，在搅拌下加入是阿奇霉素0.36倍质量的门冬氨酸。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于所述阿奇霉素为阿奇霉素精品；所述阿奇霉素精品按照以下步骤制备1)将阿奇霉素加入是阿奇霉素3-5倍质量的乙醇中，再加入是是阿奇霉素质量2-3％的白陶土，搅拌30-40分钟，过滤；2)将步骤1)得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素5-6倍质量水中，将析出的白色固体滤出，加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，溶解，然后加入是阿奇霉素质量的0.3-0.5％的针用活性炭，过滤，得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素3-5倍质量水中，将析出的白色固体滤出干燥，得到阿奇霉素精品。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述阿奇霉素精品按照以下步骤制备1)将阿奇霉素加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，再加入是阿奇霉素3％的白陶土，搅拌30分钟，过滤；2)将步骤1)得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素五倍质量蒸馏水中，将析出的白色固体滤出，加入是阿奇霉素四倍质量的乙醇中，溶解，然后加入是阿奇霉素质量的0.3％的针用活性炭，过滤，得到的滤液慢慢滴入是阿奇霉素五倍质量的蒸馏水中，将析出的白色固体滤出真空干燥，得到阿奇霉素精品。
6.权利要求1所述的门冬氨酸阿奇霉素的制剂。
7.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于所述门冬氨酸阿奇霉素的制剂为门冬氨酸阿奇霉素针剂、粉针剂或片剂。
8.权利要求7所述的门冬氨酸阿奇霉素粉针剂的制备方法，是在权利要求1所述的门冬氨酸阿奇霉素中加入是门冬氨酸阿奇霉素4-6倍质量的注射用水溶解后，加入活性炭，搅拌15-30分钟后，去掉活性炭，用0.22um微孔滤膜过滤，至溶液澄明，进行冻干得到门冬氨酸阿奇霉素粉针剂。
9.权利要求7所述的门冬氨酸阿奇霉素片剂，主要由下述重量份的原料组成门冬氨酸阿奇霉素170-680重量份淀粉60-240重量份十二烷基硫酸钠 4-16重量份羧甲基淀粉钠5-20重量份硬脂酸镁3.5-14重量份滑石粉 5-20重量份。
10.根据权利要求9所述的片剂，其特征在于所述门冬氨酸阿奇霉素片剂主要由下述重量份的原料组成门冬氨酸阿奇霉素340重量份淀粉120重量份十二烷基硫酸钠 8重量份羧甲基淀粉钠10重量份硬脂酸镁7重量份滑石粉 10重量份；其中，所述片剂是按照如下方法制备1)将上述量的门冬氨酸阿奇霉素、淀粉、十二烷基硫酸钠、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁、滑石粉，分别过80目筛；2)将步骤1)得到的门冬氨酸阿奇霉素、淀粉、十二烷基硫酸钠加入7.5％聚乙烯吡咯烷酮的65％乙醇溶液制成软材，用18目筛制成湿粒，40-60℃热风干燥，干粒加入上述量的硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠、滑石粉混匀，16目筛整粒，混匀得到片剂。
全文摘要
本发明公开了一种门冬氨酸阿奇霉素及其制剂。该门冬氨酸阿奇霉素，其化学名称为(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)－13－[(2，6－二脱氧－3－C－甲基－3－O－甲基－(－L－核－己吡喃糖基)氧]－2－乙基－3，4，10－三羟基－3，5，6，8，10，12，14－七甲基－11－[[3，4，6－三脱氧－3－(二甲氨基)－β－D－木－己吡喃糖基]氧]－1－氧杂－6－氮杂环十五烷－15酮门冬氨酸盐；其分子式为C
文档编号A61P31/04GK1861623SQ200610083980
公开日2006年11月15日 申请日期2006年6月16日 优先权日2006年6月16日
发明者高凯, 周庆柱 申请人:海南斯达制药有限公司