药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶的制作方法

专利名称：：药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶的制作方法
技术领域：
：本发明涉及在光交联透明质酸中以共价键导入药剂的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。另外，本发明还涉及导入药剂和光反应性基团的药剂导入光反应性透明质酸衍生物。
背景技术：
：若可以利用可用注射器等注入工具对患处直接给药，可保持足够量的药剂，另外具有可停留在患处长时间地释放药剂的缓释性，且对生物体安全的给药系统(下面，也称为DDS)，对于治疗变形性关节病、慢性关节风湿病等整形外科疾病、肺瘤等是极其有用的。透明质酸(下面也称为HA)和糖胺聚糖(下面也称为GAG)等源自生物体的多糖类的生物体适应性高，迄今为止提出了各种利用这些多糖类的DDS。例如，报道了通过在交联的透明质酸中混合药剂或进行水合，由此在交耳关体中包含药剂，尝试将该物质用作DDS的基质或缓释用制剂(专利文献l等)。在其中，交联的HA或交联的GAG与药剂通过离子间相互作用形成复合体，存在保持药剂的能力弱；给药于生物体内时，药剂在短时间内被释放的缺点，对于用于药剂緩释用途或将药剂输送到目标患处的DDS用途来说，没有得到充分的效果。对此，还提出以共价键将药剂结合到如上所述的多糖类上的材料，迄今为止提出了以酯键将药剂结合到HA的羧基上的HA衍生物(专利文献2);通过间隔物和肽分解性基团以共价键将药剂结合到交联的海藻酸凝胶等上的高分子凝胶(专利文献3);通过间隔物以共价键将药剂结合到HA或交联HA等HA衍生物上的HA衍生物(专利文献4)等。但是，通常常识是以共价键将药剂等疏水性高的物质导入到高分子的多糖或HA上时，生成物的溶解性将大幅度下降，变为不溶或半不溶化，导入药剂越多，生成物的不溶化趋势越强，不能获得可由注射器等注入的性状的物质。上述专利文献2中，对于导入药剂的HA衍生物而言，从药剂的导入、内部酯化中所使用的HA的羧基的量来看，并非以保持亲水性为前提。专利文献3的高分子凝胶为通过水性液体膨胀的物质，并非可由注射器等注入的物质，导入药剂的生成物被制成片、膜等形态。专利文献4未对导入药剂的生成物的性状进行记载，但在实施例中，关系到溶解性的结合到羧基的导入率被设定为较低。如上所述，符合可以用注射器等注入工具对关节、脏器等患处直接对局部给药、并可保持足够量的药剂、且具有可停留在患处长时间地释放药剂的緩释性的所有条件的、以HA为基础的DDS尚未为人所知。另一方面，本发明人此前提出了利用光交联基团的光交联透明质酸作为亲水性高的透明质酸凝胶(专利文献5)。专利文献l:日本特许第3107488号公才艮专利文献2:WO89/10941公报专利文献3:美国专利第5,770,229号il明书专利文献4:WO99/596037》报专利文献5:美国专利第6,602,859号说明书
发明内容发明要解决的问题本发明的目的在于提供如下的给药系统可以用注射器等注入工具对患处直接给药，通过这样直接给药，在给药处或患处可保持足够量的药剂，由于停留在给药处或患处而具有可长时间地释放药剂的药剂緩释性，且对生物体安全的给药系统。另外本发明的目的在于提供对制造如上所述的给药系统有用的中间体。用于解决问题的方法本发明人为解决上述问题进行了深入研究，结果发现通过将药剂导入到利用了光交联基团的光交联透明质酸，可以提供作为符合上述条件的DDS的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，并进一步研究了用于药剂导入的各条件，直至完成了本发明。即，本发明涉及以下的(1)~(31)。(1)药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其为以共价键导入药剂的光交耳关透明质酸衍生物凝胶，并为可由注入工具挤出的性状。(2)根据(1)所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其中，"光反应性基团"与"药剂"分别通过间隔物以共价键结合到"透明质酸"上。(3)根据(1)或(2)所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其可由20~25G(gauge)注射针，以0.55kg/cm2的压力挤出。(4)根据(1)~(3)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"光反应性基团"由肉桂酸衍生物或氨基肉桂酸书亍生物构成。(5)根据(1)~(4)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"为具有可与羧基或羟基结合的官能团的物质。(6)根据(5)所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其中，"间隔物"为具有2个以上选自羧基、幾基及氨基的官能团的化合物的残基。(7)根据(1)~(6)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其中，"药剂"选自非类固醇类抗炎症剂、抗风湿剂、基质金属蛋白酶抑制剂、类固醇剂以及抗癌剂。(8)根据(7)所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"为非类固醇类抗炎症剂或抗风湿剂。(9)根据(1)~(8)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"光反应性基团"和"药剂"分別结合于透明质酸的羧基上。(10)根据(I)~(9)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"光反应性基团"或"结合有光反应性基团的间隔物"以酰胺键结合于透明质酸的羧基上。(11)根据(1)~(10)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"以酯键或酰胺键直接结合于透明质酸的羧基。(12)根据(1)~(10)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"以酯键与"间隔物"结合，该药剂结合间隔物以酰胺键结合于透明质酸的羧基上。(13)根据(1)~(12)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其中，"光反应性基团"和"药剂"的总计导入率相对于透明质酸的重复二糖单元摩尔凄t为10~45摩尔％。(14)根据(1)~(13)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其通过在制造工序中，在光交联之前进行碱处理而得到。(15)药剂导入光反应性透明质酸衍生物，其特征在于，其中，"光反应性基团"与"药剂"分别以共价键结合于"透明质酸"上，且对水性介质为可溶性。(16)根据(15)所述的药剂导入光反应性透明质酸衍生物，其特征在于，"光反应性基团"与"药剂"分別通过间隔物以共价键结合到"透明质酸"上。(17)根据(15)或(16)所述的药剂导入光反应性透明质酸衍生物，其通过在制造工序中，在向透明质酸导入光反应性基团和/或药剂后的任意阶段进行碱处理而得到。(18)药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其通过对(15)~(17)任一项所述的药剂导入光反应性透明质酸衍生物的水性溶液照射紫外线而得到。(19)根据(18)所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其通过在照射紫外线后进行灭菌而得到。(20)内装药剂的注入工具，其在注入工具中填充有(1)~(11)、(18)和(19)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，并用垫圈密封。(21)才艮据(20)所述的内装药剂的注入工具，其进行了灭菌。(22)药品，其含有(1)~(11)、(18)和(19)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。(23)局部给药用制剂，其含有(1)~(11)、(18)和(19)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。(24)关节炎治疗剂，其含有(1)~(11)、(18)和(19)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。(25)药剂緩释用制剂，其含有(1)~(11)、(18)和(19)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，具有将导入到透明质酸的药剂緩释的性质。(26)药剂衍生物，其中，具有2个以上选自羧基、羟基及氨基的反应性基团的间隔物与药剂以共价键结合。(27)根据(26)所述的药剂衍生物，其中，"药剂"选自非类固醇类抗炎症剂、抗风湿剂、基质金属蛋白酶抑制剂、类固醇剂以及抗癌剂。(28)可注入的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶的制造方法，其特征在于，将"光反应性基团"与"药剂"分别通过或不通过间隔物以共价键结合到"透明质酸"上而得到药剂导入光反应性透明质酸杉f生物之后，对该衍生物的水性溶液照射紫外线。(29)可注入的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶的制造方法，其特征在于，其包含如下工序将(15)~(17)任一项所述的药剂导入光反应性透明质酸衍生物溶解于水性介质而调制溶液，对该溶液照射紫外线的工序。(30)药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶作为药剂緩释制剂的应用，其特征在于，将(1)~(11)、(18)和(19)任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶直接给药于患处。(31)透明质酸衍生物注入用试剂盒，其中，(1)~(11)、(18)和(19)4壬一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶被填充在可才齐出该凝胶的注入工具中。根据本发明，可以提供作为如下给药系统的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，该给药系统可用注射器等注入工具对关节、脏器等患处直接局部给药；通过这样的直接给药，在给药部位或患处可以保持足够量的药剂；由于停留在给药处或患处而具有可长时间地释放药剂的药剂缓释性；且对生物体安全。本发明的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶(下面，也称为"药剂导入HA-gel")可以用注射器等注入工具对患处直接给药，并控制药剂在给药部位的释放，使药剂可以緩释。另外，本发明的药剂导入HA-gel，根据其具体的构成要素的选择情况，可以通过湿热灭菌等常规方法灭菌，因此在药品用途中非常有用。通过使用本发明的可由注入工具挤出的药剂导入HA-gel,不仅可以将药剂作为局部给药用制剂对患处直接给药，而且可以通过选择药剂应用于各种应用中。例如将用非类固醇类抗炎症剂(NSAIDs)或抗风湿药(DMARD)作为药剂的药剂导入HA-ge1直接给药于变形性关节病或慢性风湿这样的慢性关节炎患者的膝关节腔内时，由于药剂导入HA-gel长期地停留在膝关节腔内或滑膜组织内，而使药剂緩慢释放到患处，因此可以长期地减轻慢性膝关节炎患者的痛苦。另外，例如将制癌剂、抗癌剂等作为导入药剂使用时，通过将导入有制癌剂的光交联透明质酸凝胶直接给药到癌变组织，可以不对其他正常的脏器带来坏影响而只对必要的位置缓释制癌剂，还可以将患者从伴随副作用的长期服用制癌剂的痛苦中解脱出来。作为DDS的基本概念，具有将药剂包于基质中，运输到必要的位置(输送)、在必要的位置(患处)释放的功能，但由于生物体内存在各种防御作用和阻碍，事实上，即使将这种概念的DDS制剂进行给药，基本上在到达目标患处之前消失或失活，进而，大部分即使到达目标患处也没能释放药剂。对此，本发明的药剂导入HA-gel由于可由注入工具4齐出，因此可对关节等局部给药，并且，基质光交联透明质酸凝胶自身的安全性高，因此具有即使长时间停留在生物体内也不会带来坏影响的性质。利用这样的性质，使利用如下的有效方法的治疗成为可能，该方法是使药剂不经过迂回的途径输送而是直接给药(注射)到目标患处，并使该凝胶停留在目标患处，然后緩慢释放药剂。根据上述方法，可得到如下优点不是利用生物体内的功能输送药剂，而是将药剂导入HA-gel直接给药于患处，因此可以使药剂准确地到达患处，且基质可以固定在患处而停留，因此，可以获得使药剂准确地长期地从该处緩释。具体实施方式下面详细说明本发明。本发明的药剂导入HA-gel为交联透明质酸，其具有透明质酸链间或透明质酸分子内通过光交联基团以共价键结合而形成的交联结构，进而，药剂或其衍生物直接或通过间隔物以与透明质酸官能团的共价键保持在其上。本发明的药剂导入HA-gel如下制造将光交联基团、以及药剂或其衍生物同时或逐次导入到透明质酸上而形成药剂导入光反应性透明质酸衍生物，将该药剂导入光反应性透明质酸衍生物进行光交if关，从而制造。本发明的药剂导入HA-gel中所使用的透明质酸为由葡糖醛酸与N-乙酰葡糖胺构成的二糖单元的聚合物，但在不损害本发明的效果的范围内，本发明中的透明质酸还包含其衍生物，作为这样的衍生物的例子，可以列举例如具有还原末端的透明质酸衍生物、透明质酸中的羟基被部分乙酰化的乙酰化透明质酸等。透明质酸的来源没有特别的限制，鸡冠、脐带等动物来源的透明质酸、使用产生透明质酸的微生物、或基因工程制造的透明质酸、以及化学合成制造的透明质酸等均可使用。特别优选纯化为高纯度、基本上不含药品中不允许混入的物质的透明质酸。透明质酸的分子量没有特别的限定，但重均分子量为例如10000~5000000，伊二选为100000~3000000,4争另'J4尤选为600000~1500000。另外，GAG中，高分子的透明质酸更有利于发挥本发明的效果。即，如上所述，多糖越为高分子物质，导入了疏水性高的物质的多糖衍生物的溶解性下降越显著而不溶化，这是常识，另外高分子的透明质酸易于通过光交联反应而凝胶化。因此，通过应用本发明而获得的、减轻导入药剂等疏水性高的物质而引起的不溶化、可维持可由注射器等注入的性状的效果，对于高分子的透明质酸更加有意义。本发明中使用的透明质酸可以为不形成盐的游离状态，也可以为药学上可以允许的盐的形态。作为透明质酸的药学上可以允许的盐，可以列举例如钠盐、钾盐等碱金属离子盐，镁盐、钙盐等碱土类金属离子盐，铵盐等与无机碱形成的盐；二乙醇胺盐、环己胺盐、氨基酸盐等有机碱。由于对生物体的亲和性特别高，因此透明质酸盐优选为与碱金属离子所成的盐，特别优选为与钠离子所成的盐。使用光反应性交联基(光反应性基团)作为本发明的药剂导入HA-gel的基质即光交联透明质酸的交联基。光反应性基团为通过光(紫外线)照射而发生光二聚反应或光聚合反应的化合物的残基，只要是在透明质酸上作为光反应性基团通过光照射而在透明质酸分子间或分子内进行交联的化合物的残基，就没有特别限制，这样的化合物优选为具有共轭双键的烯烃系化合物。作为具体例子可以列举肉桂酸、取代肉桂酸、丙烯酸、马来酸、富马酸、山梨酸、香豆素、胸腺嘧啶等。这些之中，优选为可通过光形成环丁烷的具有亚乙烯基的物质，从光反应性及安全性方面出发优选肉桂酸及取代肉桂酸。作为取代肉桂酸的例子，可以列举用低级烷基(例如曱基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基等)、低级烷氧基(例如曱氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基等)、氨基、羟基等取代肉桂酸的苯环上任意1个或2个氢的取代肉桂酸。作为取代肉桂酸优选氨基肉桂酸、特别优选对氨基肉桂酸。光反应性基团以共价键结合于透明质酸的羧基或羟基上。只要可以实现本发明的目的，其结合方式就没有特别的限定，但优选为酯键或酰胺键，最优选为酰胺键。光反应性基团可以直接结合于透明质酸上，但从提高光反应性、易于进行光交联反应、易于进行将光反应性基团导入到多糖的反应等方面出发，光反应性基团优选通过间隔物结合于透明质酸上。所以，间隔物结合于肉桂酸或取代肉桂酸上所形成的衍生物(间隔物衍生物)的残基，是作为光反应性基团最为优选的。成为如上所述的间隔物的化合物，只要是具有两个以上可与光反应性基团及透明质酸结合的官能团的化合物就没有特別限制，但优选为具有2个以上选自羧酸、羟基及氨基的官能团的化合物，作为优选的例子，可以列举例如氨基醇(H2N-(CH2)n-OH(n=1~18)、H2N-(CH2-O)m-H(m=2~9)等)、二胺(H2N-(CH2)!-NH2(1=2~10)等)、二醇(HO-(CH2)k-OH(k=2~10)等)、氨基酸(H2N-CHR-COOH(R:氨基酸侧链)、H2N-(CH2)j-COOH(j=2~18))以及肽等。可以将如上所述的构成间隔物的化合物结合于透明质酸上，然后再结合构成光反应性基团的化合物，但从制造容易程度出发，优选先将构成间隔物的化合物与构成光反应性基团的化合物结合，再将所得的化合物结合于透明质酸上。作为如上所述的将构成间隔物的化合物与构成光反应性基团的化合物结合所得的化合物优选的例子，可以列举例如氨基醇与肉桂酸的羧基形成酯键的肉桂酸氨基烷基酯衍生物(Ph-CH=CH-CO-O-(CH2)n-NH2、Ph-CH=CH-CO-(OCH2)m-NH2(n、m与上述相同、Ph表示苯基)等)、氨基醇与肉桂酸的羧基形成酰胺键的肉桂酸酰胺衍生物(Ph_CH二CH-CO-NH-(CH2)n-OH、Ph-CH=CH-CO-丽-(CH20)m-OH(n、m与上述相同，Ph表示苯基)等)、二胺与肉桂酸的羧基以酰胺键结合的肉桂酸酰胺书f生物(Ph-CH=CH-CO-NH-(CH2)i-NH2(1、Ph与上述相同)等)、二醇与肉桂酸的羧基以酯键结合的肉桂酸酯书亍生物(Ph-CH=CH-CO-O-(CH2)k-OH(k、Ph与上述相同)等)、将氨基酸或肽以酰胺键结合于取代肉桂酸(氨基肉桂酸)上的衍生物(HOOC-CH=CH-Ph-NH-CO-CHR-NH2(R、Ph与上述相同)等)，优选氨基醇与肉桂酸的羧基以酯键结合的衍生物(肉桂酸氨基烷基酯)、氨基醇与肉桂酸的羧基形成酰氨键的肉桂酸酰氨衍生物。氨基醇优选为上述通式H2N-(CH2)n_OH表示的氨基醇，n为218,优选为2~6,更优选为2~4。作为构成间隔物的化合物的优选的例子，可以列举氨基乙醇、氨基丙醇及氨基丁醇等。透明质酸的、与光反应性基团或结合有光反应性基团的间隔物衍生物的结合部位(透明质酸的官能团)，可以列举羟基或羧基，但从光反应性基团或间隔物衍生物的导入反应的容易性出发优选羧基。另外，构成间隔物的化合物与构成光反应性基团的化合物的结合方式、以及构成间隔物的化合物与透明质酸的结合方式的组合并没有特别的限制，可以采用任意组合的结合。例如，光反应性基团使用肉桂酸、间隔物使用氨基醇时，肉桂酸的羧基与氨基醇形成酯键，氨基醇的氨基与透明质酸的羧基形成酰胺键，由此，光反应性基团通过间隔物结合于透明质酸上；或者也可以是氨基醇与肉桂酸的羧基形成酰胺键，氨基醇的羟基与透明质酸的羧基形成酯键，由此，光反应性基团通过间隔物结合于透明质酸上。导入到本发明的药剂导入HA-gel中的药剂，只要具有用于结合到透明质酸的羧基或鞋基上的官能团、可以以共价键直接导入到透明质酸的药剂，或可以通过具有可结合于透明质酸的羧基或羟基上的官能团的间隔物结合的药剂，就没有特别的限制。优选具有可以与羧基或羟基结合的官能团的物质。作为导入到本发明的药剂导入HA-gel中的药剂的例子，可以列举水杨酸系非类固醇类抗炎症剂(水杨酸、水杨酰水杨酸、阿司匹林、二氟尼柳、水杨酰胺等)、灭酸系非类固醇类抗炎症剂(氟灭酸、氟灭酸铝、曱灭酸、氟壹氨苯酯、托灭酸等)、芳基醋酸系非类固醇类抗炎症剂(联苯乙酸、双氯芬酸、托美丁钠、舒林酸、芬布芬、吲哚美辛、引哚美辛法呢酯、阿西美辛、马来酸丙谷美辛、氨芬酸钠、萘布美通、莫非吉兰、依托度酸、阿氯芬酸等)、丙酸系非类固醇类抗炎症剂(布洛芬、氟比洛芬、酮洛芬、萘普生、普拉洛芬、非诺洛芬钙、噻洛芬酸、奥沙普秦、洛索洛芬钠、阿明洛芬、扎托布洛芬、噻洛芬酸等)、吡唑啉酮系非类固醇类抗炎症剂(酮基保泰松等)、昔康系非类固醇类抗炎症剂(比洛昔康、替诺昔康、安吡昔康等)、其他的非类固醇类抗炎症剂(盐酸噻拉米特、盐酸替诺立定、盐酸千达明、嘧吡唑、依莫法宗、托美丁、二氟尼柳、醋氨酚、夫洛非宁、替诺立定等)等非类固醇类抗炎症剂(NSAIDs);环氧化酶-2抑制剂；青霉胺、氯笨扎利二钠、金诺芬、布西拉明、阿克他利、柳氮磺吡咬、金硫丁二钠、氯喹、TNFa受体制剂、咪唑立宾、环孢素、甲氨蝶呤、来氟米特、疏唑噤呤、抗TNFa抗体、抗IL-6受体抗体、抗CD4抗体、IL-l受体拮抗剂、抗CD52抗体、p38MAP激酶抑制剂、ICE抑制剂、TACE抑制剂等抗风湿药(DMARD);醋酸可的松、氢化可的松、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、曲安西龙、丙炎杠、地塞米松、地塞米松棕榈酸酯、倍他米松、倍他米松醋酸酯、醋酸卣泼尼松、法呢酸泼尼松龙酯、醋酸二十四肽促皮质素等类固醇剂；盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因、盐酸利多卡因等局部麻醉药；异羟厉酸等基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂；黄。票呤类药(茶碱等)、抗过敏药(非索非那定、依匹斯汀、西替利嗪、酮替芬、色甘酸钠、哌罗来斯等)、抗组胺药(非索非那定、西替利。秦等)等过敏性疾病治疗药；依利替康、5-氟尿嘧啶等抗癌剂等，但并不限于这些。作为优选的药剂，可以列举为非类固醇类抗炎症剂、抗风湿剂、MMP抑制剂、类固醇剂、抗癌剂，其中优选列举非类固醇类抗炎症剂、抗风湿剂、抗癌剂。通过间隔物将药剂导入到透明质酸时，构成该间隔物的化合物为分别具有与透明质酸结合的官能团及与药剂结合的官能团的化合物，并可以具有多个这些官能团。该间隔物的官能团可以根据与透明质酸及与药剂的结合方式选择各种基团，但该间隔物与透明质酸及药剂的结合方式优选为酯键或酰胺结合。另外，构成间隔物的化合物与药剂的结合方式以及构成间隔物的化合物与透明质酸的结合方式的组合没有特别的限制，可以采用任意组合的结合。例如，与透明质酸的羧基形成酰胺键来导入间隔物时，可以选择具有氨基的间隔物，与透明质酸的羧基或鞋基形成酯键来导入间隔物时，可以选择具有羟基或羧基的间隔物。药剂与间隔物的结合也同样，例如，具有羟基或羧基的药剂的情况下，如果选择具有羧基或羟基的间隔物，则可以通过酯键导入药剂，如果选择具有氨基的间隔物，则可以通过酰胺键导入药剂。另外，向生物体内注入药剂导入HA-gel时，更优选要求药剂在生物体内緩慢地从透明质酸链游离并释放。可以考虑药剂随着光交联透明质酸衍生物的分解而緩慢释放，但尤其期待药剂与间隔物的结合部分进行生物降解。通过改变药剂与间隔物的结合方式，可以改变对生物降解的耐性，由此，还可以控制緩释速度。例如考虑到在生物体内发生的水解的情况下，酯键比酰胺键容易^皮分解。因此，选择与透明质酸形成酰胺键、与药剂形成酯键的间隔物时，注入到生物体内的药剂导入HA-gel容易通过水解从透明质酸链游离药剂。同样，将药剂直接导入透明质酸时，考虑到在生物体内的水解的话，优选以酯键将药剂导入到透明质酸。本发明的药剂导入HA-gel中，可以考虑如上所述的观点来选择药剂和透明质酸的结合中使用的间隔物，只要可以与药剂和透明质酸结合、并可以实现本发明的目的，就没有特别的关于光反应性基团的导入所记载的物质，更优选为氨基醇，可列举例如氨基乙醇、氨基丙醇及氨基丁醇等。构成如上所述的间隔物的化合物，可以与光反应性基团的导入同样，先将间隔物结合于透明质酸上，然后将药剂结合于结合有间隔物的透明质酸上，但从制造的容易性方面出发，优选先合成构成间隔物的化合物与药剂的结合物，再将得到的化合物结合于透明质酸上。另外，透明质酸的、与药剂或间隔物的结合部位(透明质酸的官能团)，与光反应性基团的导入同样可以为羟基，但从药剂或间隔物的导入反应的容易性出发，优选为羧基。并且，在下面的叙述中，对于向透明质酸导入光反应性基团及药剂，未指明直接还是通过间隔物进行的情况下，基本上两者均可。即，光反应性基团及药剂分别包含具有间隔物部分的光反应性基团衍生物及具有间隔物部分的药剂衍生物。在本发明的药剂导入HA-gel的制造中，首先调制作为中间产物的、在透明质酸中导入有光反应性基团和药剂的可溶于水性介质的药剂导入光反应性透明质酸衍生物，接着，通过对该药剂导入光反应性透明质酸衍生物水溶液进行光照射，4吏其交联而制造药剂导入HA-gel。作为中间产物的水溶性药剂导入光反应性透明质酸衍生物，可以通过将光反应性基团和/或药剂导入透明质酸后，进行碱处理来制造。将药剂及光反应性基团导入透明质酸时，可以使用将光反应性基团导入透明质酸后再导入药剂的方法、导入药剂后再导入光反应性基团的方法、或同时导入药剂和光反应性基团的方法的任意一种。先导入药剂或光反应性基团任意一者时，可以使用导入药剂或光反应性基团后，进行后处理而分离，重新导入另一者的方法，或者，在一步反应中从任意一方开始依次导入的方法的任意一种。前一方法的情况下，需要工序上的功夫和时间，但具有可以精确控制药剂及光反应性基团的导入率的优点，后一方法的情况下，具有不需要反应上的功夫和时间、高效地获得目标物的优点。如上所述，光反应性基团或药剂可以结合于透明质酸的羧基或羟基的任意一方上，但从官能团所具有的反应性出发，结合于羧基上是容易的故而优选。作为实现这样的结合的方法，可以列举例如^吏用水溶性碳二亚胺(例如，1-乙基-3-(3-二曱基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCIHC1)、1-环己基-3-(2-吗啉代乙基)碳二亚胺-甲氧基对曱苯磺酸酯、1-环己基-3-(2-吗啉代乙基)碳二亚胺盐酸盐等)等水溶性缩合剂的方法，使用N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)、N-羟基苯并三唑(HOBt)等辅助縮合剂与上述縮合剂的方法，活性酯法，酸酐法等。这些方法当中，作为水性介质存在下的反应，优选的是使用水溶性缩合剂的方法或使用反应助剂和水溶性缩合剂的方法。特别从抑制副反应的观点出发，更优选使用反应助剂与水溶性缩合剂的方法。作为水性介质，除可列举水的单一溶剂外，还可以列举水与水溶性有机溶剂例如二噁烷、二曱基曱酰胺(DMF)、丙酮、醇(曱醇、乙醇等.)等的混合溶剂。如上所述，优选透明质酸的羧基与光反应性基团或药剂以酯键或酰胺键结合。本发明的药剂导入HA-gel中，光反应性基团及药剂向透明质酸的导入率，只要是药剂导入光反应性透明质酸衍生物对水性介质的可溶性得以保持，进而将其进行光交联得到的药剂导入HA-gel可由注入工具挤出的性状得以保持，就没有特别的限制。换言之，必须选择导入率以便符合这些条件。在本说明书中，导入率是指表示药剂或光反应性基团，相对于透明质酸二糖单元的导入比例(百分率)。例如，将药剂导入透明质酸的羧基上时，药剂的导入率为10%是指以该透明质酸链的100个二糖单元上导入10个的比例导入药剂。当然，也可以在相邻的二糖单元各自的羧基上分别取代有药剂。光反应性基团及药剂的导入率可以通过改变缩合剂、辅助缩合剂、光反应性基团及药剂的加入量、反应溶剂、反应温度等的反应条件而进行调整，应考虑在此后的交联反应中的光反应性基团的必要量或对生物体给药时药剂在患处的必要量或緩释效率等来确定光反应性基团和药剂的适当的导入率。相对于透明质酸的重复二糖单元摩尔数，药剂的导入率通常为1~60摩尔％,优选为5~30摩尔％,更优选为5~25摩尔％，特别优选为720摩尔％。光反应性基团的导入率通常为5~50摩尔％,优选为5~30摩尔％,更优选为5~20摩尔o/。，特别优选为8~20摩尔％。进而，光反应性基团与药剂总计的总导入率通常为6~60摩尔％,优选为10~50摩尔％,更优选为1045摩尔％，特别优选为15~40摩尔％。更期待在这样的范围内光反应性基团与药剂分别以合适的比率导入。光反应性基团及药剂的导入量可以用例如吸光度的测定或HPLC、NMR等方法进行测定。优选将如上所述而制造的药剂导入光反应性透明质酸衍生物进一步用；咸进^亍处理。使导入反应后的反应溶液成为碱性的碱处理，只要是使该溶液变为碱性的处理，就没有特别的限制。具体地说作为^威处理可以例示将有机;威或无机碱任意一种添加到该溶液的方法，但考虑之后的处理等时，优选无机碱。进而，无机碱中，与氢氧化钠这样的强碱相比，碳酸氢钠或碳酸钠这样的弱碱由于对透明质酸和药剂带来影响的可能性低，故而优选。这里的i咸处理的pH条件可以例示7.211,优选为7.5~10。碱处理的处理时间，只要对透明质酸的低分子化不带来影响就没有特別的限制，可以列举为212小时，优选列举为26小时，处理该时间的话，可以不对透明质酸带来影响地获得可溶性的药剂导入光反应性透明质酸衍生物。即，作为一个例子，向将药剂及光反应性基团导入到透明质酸后的反应液中添加碳酸氲钠等弱碱，搅拌处理数小时后，通过进行乙醇沉淀、干燥等后处理，可以得到可溶性的药剂导入光反应性透明质酸书于生物。通常，如上所述的光反应性基团和药剂导入到透明质酸的羧基上时，该羧基通过取代成酰胺键或酯键的取代反应，其亲水性降低，但通过进行上述碱处理，即使光反应性基团及药剂的导入量特别是药剂的导入量为现有技术中前所未见的大量，药剂导入光反应性透明质酸衍生物仍能够维持对水性介质的可溶性(保持与原料透明质酸同等的可溶性)。通过对如上所述而制造的药剂导入光反应性透明质酸衍生物照射光使其交联，可以制造本发明的药剂导入HA-gel。即，分离如上所述制造的药剂导入光反应性透明质酸衍生物，将其溶解于水性介质制成水溶液之后，将该水溶液供于光照射而进行交联。溶液所使用的水性介质只要对生物体没有影响并对后续工序的光交联反应没有影响，就没有特别的限制，但期待为生理盐水或磷酸盐緩冲生理盐水。为得到可以用注入工具挤出的性状的药剂导入HA-gel,上述水溶液中药剂导入光反应性透明质酸书f生物的浓度以重量％计通常为0.1%~10%,更优选为0.5%~3%,进一步优选为0.5%~1.5%。如上所述地将药剂导入光反应性透明质酸衍生物作为中间产物进行分离的优点之一为通过将药剂导入光反应性透明质酸衍生物溶解于緩沖液等水系介质，暂时形成均匀的水溶液状态，通过在该状态下进行光照射而交联，可以在含水状态即多个水分子水合在透明质酸链上的状态下进行交联，由此最终形成可由注入工具挤出的性状的凝胶。另外作为制造上的优点，用该中间产物进行暂时精致、分离，因此可以除去未反应的物质和缩合剂等杂质，进而因为该药剂导入光反应性透明质酸衍生物在水性介质中可溶，因此，形成水溶液后，通过过滤该水溶液可以灭菌、除菌或除去异物。对药剂导入光反应性透明质酸衍生物水溶液的光照射可以以任何形态进行，<旦期待将药剂导入光反应性透明质酸衍生物水性溶液填充于玻璃针筒后，进行光照射。例如使用肉桂酸衍生物作为光反应性基团的情况下，光照射后，通过肉桂酸之间形成二聚体，从而透明质酸链之间形成交联结构。使用高压汞灯、金属囟化物灯等紫外线灯作为光源的情况下，使用玻璃针筒时，玻璃自身可以截止对透明质酸带来坏影响的波长，发挥使光反应所需的波长透过的截止滤光片的作用。对上述药剂导入光反应性透明质酸衍生物水溶液进行光照射而进行交联的药剂导入HA-gel由于在包含、含有水分子的状态下进行交联，因此可以形成凝胶状结构，它们具有可由注射针等挤出的性质。在本发明中，"可由注入工具挤出"的性状是指由安装在填充有本发明的药剂导入HA-gel的通常使用的医用注射器上的注射针等，不通过机械加压而是通过人(一般成人)的常规手操作可获得程度的加压也可以挤出本发明的药剂导入HA-gel,可注入到生物体等对象的性质。更具体而言，是指例如在25°C左右的室温下，可由安装有20(外径0.90mm、内径0.66mm)~27(夕卜^圣0.40mm、内径0.22mm)G、4尤选20~25(夕卜径0.50mm、内径0.32mm)G、更优选23(外径0.65mm、内径0.40mm)~25G注射针的注射器，以0.5~5kg/cm2、优选0.5~2kg/cn^程度的压力挤出的性质。当然，用于得到上述定义的压力的加压可以是通过机械加压也可以是通过人的手操作加压均可。另外，作为通常使用的医用注射器可以列举医疗或生物实验等中所使用的注射器，可以列举例如直径14mm、针筒长度58mm、容量5ml(例如，TERUMOCORPORATION生产的5ml针筒)的注射器。例如在该注射器上安装上述注射针(例如20~25G)，以上述压力(例如0.5~5kg/cm2)挤出5ml量的所填充的本发明的药剂导入HA-gd需要l秒~5分钟。药剂导入HA-gel的"可由注入工具挤出"的性质并不一定严格对应于药剂导入HA-gel的粘度。但是，将药剂导入HA-gel的粘度作为本发明的"可由注入工具挤出，，的性质的一个指标来考虑时，该性状对应于通过旋转粘度计使用标准圆锥(1°34，、lrpm)在20.0。C下测得的粘度优选为1~50Pas,更优选为3~40Pas,进一步优选为335Pas左右。本发明的药剂导入HA-gel可根据上述特性，制成由注入或注射而将药剂导入HA-gel给药于对象(生物体等)的局部给药用制剂或非经口给药用制剂。进而，本发明可提供具备注入工具内填充有药剂导入HA-gel、并用垫圏进行密封的注入工具，和具备该注入工具和药剂挤出用活塞等的试剂盒等。例如，将NSAIDs导入HA-gel用作局部给药用制剂时，可以避免消化系统的代谢和对消化器官的副作用，可以期待更有效、安全性更高的治疗效果。这样的交联的药剂导入HA-gel在生物体内的残留性比通过交联将药剂导入的透明质酸变得更长，另外可以通过改变交联程度(交联率)来控制其残留性。由于药剂以共价键导入到光交联透明质酸上，因而刚刚给药后，药剂并非迅速释放而是伴随基质即光交联透明质酸的分解或光交联透明质酸与药剂间的键的解离而缓释。因此，通过调制残留性高即交联率高的药剂导入HA-gel,可以延长缓释期限。本发明的药剂导入HA_gel不仅显示出作为具有停留在给药部位长期释放药剂的药剂緩释性的载体的作用，同时还可以期待例如给药于关节患病部位时，透明质酸原本所具有的润滑作用。如上所述，为了使用于制造本发明药剂导入HA-gel的中间产物即药剂导入光反应性透明质酸衍生物成为水溶性，另外，为了使药剂导入HA-gel具备可从注入工具挤出的性状，将药剂导入光反应性透明质酸衍生物进行碱处理之外，主要需要适当选择透明质酸的分子量、光反应性基团及药剂的种类、导入率、将药剂导入光反应性透明质酸衍生物进行交联时其在水溶液中的浓度等，可以制造具有期望性状的物质。所以，确定本发明的药剂导入HA-gel的具体组成时，对于必须的药剂，可以适当选择这些要素。从这样的观点出发，本发明的药剂导入HA-gel的具体的形态可以列举如下((l)~(14))。但本发明并不受限于这些。(1)本发明的药剂导入HA-gel,其中，透明质酸的分子量为100005000000，光反应性基团的导入率相对于透明质酸二糖单元(以下均相同)为5~50摩尔％,药剂的导入率为1~60摩尔％，光反应性基团及药剂的导入率总计为6~60摩尔％。(2)本发明的药剂导入HA-gel,其中，透明质酸的分子量为100003000000,光反应性基团的导入率为5~30摩尔％，药剂的导入率为5~30摩尔％,光反应性基团及药剂的导入率总计为10~50摩尔％。(3)本发明的药剂导入HA-gel,其中，透明质酸的分子量为600000~1500000，光反应性基团的导人率为5~20%,药剂的导入率为5~25%,光反应性基团及药剂的导入率总计为10~45%。(4)本发明的药剂导入HA-gel,其中，透明质酸的分子量为600000~1500000,光反应性基团的导入率为5~20摩尔％,药剂的导入率为5~25摩尔％，光反应性基团及药剂的导入率总计为10~45摩尔％,药剂的分子量为100~500。(5)本发明的药剂导入HA-gel，其中，透明质酸的分子量为800000~1200000，光反应性基团的导入率为5~20%,药剂的导入率为5~25%,光反应性基团及药剂的导入率总计为10~45%。(6)上述(3)~(5)的本发明的药剂导入HA-gel,其可通过使药剂导入光反应性透明质酸衍生物的溶液的浓度为0.5~3重量％进行光交联而得到。(7)本发明的药剂导入HA-gel,其中，透明质酸的分子量为800000~1200000,光反应性基团的导入率为8~20摩尔％，药剂的导入率为7~20摩尔％,光反应性基团及药剂的导入率总计为15~40摩尔％,药剂为选自NSAIDs、DMARD的药剂。(8)本发明的药剂导入HA-gel，其中，透明质酸的分子量为800000~1200000,光反应性基团的导入率为820摩尔％,药剂的导入率为7~20摩尔％,光反应性基团及药剂的导入率总计为15~40摩尔％，药剂为抗癌剂。(9)本发明的药剂导入HA-gel，其中，透明质酸的分子量为800000~1200000,光反应性基团的导入率为8~20摩尔％、药剂的导入率为7~20摩尔％,光反应性基团及药剂的导入率总计为15~40摩尔％,药剂选自萘普生、布洛芬、氟比洛芬、联苯乙酸、双氯芬酸、依托度酸及阿克他利。(10)上述(7)~(9)的本发明的药剂导入HA-gel,其可通过使药剂导入光反应性透明质酸衍生物的溶液的浓度为0.5~1.5重量％进行光交联而得到。(11)本发明的药剂导入HA-gel,其中，光反应性基团(光交联基团)以酯键结合于间隔物上，该光反应性基团(光交联基团)结合间隔物以酰氨键结合于透明质酸的羧基上，药剂以酯键结合于间隔物上，该药剂结合间隔物以酰胺键结合于透明质酸的羧基上。(12)上述(11)的本发明的药剂导入HA-gel,其中，间隔物为氨基醇，光反应性基团为肉桂酸或取代肉桂酸。(13)上述(11)的本发明的药剂导入HA-gel,其中，间隔物为选自氨基乙醇、氨基丙醇及氨基丁醇的氨基醇，光反应性基团为肉桂酸或氨基肉桂酸，透明质酸的分子量为800000~1200000，光反应性基团的导入率为5~20%，药剂的导入率为525%，光反应性基团及药剂的导入率总计为10~45%。(14)上述(13)的本发明的药剂导入HA-gel,其可通过使药剂导入光反应性透明质酸衍生物的溶液浓度为0.5~1.5重量％进行光交联而得到。实施例下面通过实施例进一步具体地说明本发明，j旦本发明并不受限于这些。(调制例l)叔丁氧羰基-氨基丙醇(Boc-氨基丙醇)的合成将1.542g(20.5mmo1)氨基丙醇溶解于10ml二氯甲烷，在冰冷却下，緩慢滴加10ml的4.484g二碳酸二叔丁酯(Boc20)(20.5mmol)的二氯甲烷溶液。然后，使反应液恢复到室温，搅拌2小时40分钟，用薄层色傳(以下，也称为TLC)确定原料消失之后，减压蒸馏除去二氯甲烷。反应定量地进行，得到产量为3.92g的油状Boc-氨基丙醇。用1H-NMR(CDC13)鉴定结构。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>(调制例2)肉桂酸氨基丙酯盐酸盐的合成向1.21g(6.9mmo1)叔丁氧羰基-氨基丙醇中力卩入6ml氯仿，在》]c7令^卩下，依,欠力t7人956(iL(6.9mmo1)三乙胺，1.15g(6.9mmo1)肉桂酰氯，253mg(2.1mmo1)4-二曱基氨基吡口定。室温下搅拌20分钟后，向该反应液加入醋酸乙酯，用5%柠檬酸水溶液分液洗涤2次，用水、5%碳酸氢钠水溶液分液洗涤2次，用水、饱和食盐水分液洗涤后，用无水硫酸钠干燥有机相。滤除该硫酸钠，减压浓缩滤液后，用己烷洗涤所析出的白色固体，减压干燥得到1.38g化合物(1-1)(收率65%)。接着，在冰冷^卩下，向860mg(2.8mmo1)4匕合净勿(1一1)中力口入6ml的4M氯化氢的二噁烷溶液，室温下搅拌35分钟。减压千燥得到白色晶体状的肉桂酸氨基丙酯盐酸盐。收率76%。(实施例l)肉桂酸氨基丙酯导入透明质酸钠(以下，也称为光反应性HA)的合成将1.0g重均分子量90万的透明质酸钠(2.5mmol/二糖单元(作为二糖单元的摩尔数(以下相同))，以下该透明质酸钠也称为HA)溶解于水115ml/二噁烷144ml中后，依次加入N-羟基琥珀酰亚胺(以下，也称为HOSu)172mg/水5ml、水溶性碳二亚胺盐酸盐(以下，也称为WSCI'HC1)143mg/水5ml、肉桂酸氨基丙酯盐酸盐181mg/水5ml，搅拌3小时30分钟进行反应。接着，向反应液中加入10ml7.5%碳酸氢钠水溶液，搅拌2小时50分钟之后，加入醋酸214mg/水2ml进行中和，接着加入lg氯化钠并进行搅拌。力口入500ml乙醇进行沉淀，向所得的沉淀物中加入150ml乙醇，进行2次倾析后，用95%乙醇洗涤2次，在40。C下减压干燥一晚，得到].Og肉桂酸氨基丙酯导入HA(光反应性HA)的白色固体。肉桂酸的导入率为16.2%。(实施例2)萘普生导入光交联透明质酸钠凝胶的合成(1)氨基丙酯-萘普生(酯)盐酸盐的合成将350mg(2mmo1)调制例1中得到的Boc-氨基丙醇与462mg(2mmo1)萘普生溶解于2ml二氯甲烷，在水冷却下依次添加48mg(0.4mmo1)N，N-二曱基氨基吡梵(以下，也称为DMAP)、WSCIHC1422mg(2.2mmo1)/二氯甲烷2ml。将反应液恢复到室温并搅拌4小时50分钟后，减压蒸馏除去二氯曱烷，再加入醋酸乙酯，用5%柠檬酸分液洗涤2次，用水和5%碳酸氢钠分液洗涤2次，再用水和饱和食盐水依次分液洗涤。用硫酸钠进行脱水干义喿后，减压蒸馏除去醋酸乙酯，得到720mgBoc-氨基丙酯-萘普生(收率93%)的白色晶体。用^_NMR(CDC13)鉴定结构。2H-NMR(500MHz,CDCi)(S(卯m):1.42(9H,s,Boc),1.58(3H,d,-OCOCH('CH)-)，1.75(2H'qua!i丄，..Nh!CH￡HCH(〕一)，3.07(2H,rn,一NHCHCHCH〔)-.-),3.85v',''》'j勺"±:"，ii、'——■(1H,q'-(XXX:H((:I.>.),3.91(:3H，s，--OCH),4.13(21-!，ra,-冊!CHCPi￡H0-)'4■63(1H，br,一NHCH-),7.09—7.75(6H，sn'AromaUcH)将得到的684mg(1.76mmo1)Boc-氨基丙酯-萘普生溶解于lml二氯曱烷，在冰冷却下，力。入2ml4N盐酸/醋酸乙酯(渡边化学工业(抹)生产)，在水冷却下搅拌20分钟，然后，在室温下搅拌l小时。用TLC确定Boc-氨基丙酯-萘普生消失后，向反应液中加入二乙基醚，进行3次倾析。接着，进行减压干燥，得到氨基丙酯_萘普生(酯)盐酸盐(产量564mg)。用^-NMR(CDC13)鉴定结构。!H-NMR(500MHz,C)C1+CD00)S(ppm):1,57(3H,〔i,—OCOCH(Qd)，2.02(2H,qua"t,-NHCHCH(:H,O),2.88(2H，rn,-NHCH,CH戶..。-),3.87(1H'q，一OCC)CH(CH)—),3.90(3H,s'-OCH),4.17(2'ri,m,—NHCHCH￡H0—)'7.08—7.7^'j。■■■'—t3(6H,rn,Aroma丄i(:H),8.10(br'glfCH。-)(2)萘普生导入光交联透明质酸钠凝胶(萘普生导入光交联HA凝胶)的合成将100mg实施例l中得到的肉桂酸氨基丙酯导入HA(光反应性HA)(0.25mmol/二糖单元)溶解于水11.5ml/二噁烷11.5ml的溶液中后，依次力口入0.1mllmol/L的HOSu、O.lml0.5mol/L的WSCI'HC1、及O.lml上述(l)中得到的0.5mol/L的氨基丙酯-萘普生(S旨)盐酸盐，搅拌一昼夜进行反应。向反应液加入1.5ml5%碳酸氲钠水溶液，搅拌4小时。接着，加入43/il50%醋酸进行中和，然后，力。入620mg氯化钠并进行搅拌。力口入50ml乙酉孚进行沉淀，用80%乙醇洗涤2次，用乙醇洗涤2次，用二乙基醚洗涤l次，减压干燥一晚，得到83mg萘普生导入光反应性HA的白色固体。萘普生的导入率为9.3%。调制所得到的萘普生导入光反应性HA(光反应性基团肉桂酸)的1%磷酸緩冲生理食盐水溶液，填充到5ml玻璃针筒。用3kw的金属卣化物灯对充填的针筒进行光照射，得到萘普生导入光交联HA凝胶。进而，对充填有萘普生导入光交联HA凝胶的针筒进行12厂C、20分钟的热处理。4吏用旋转粘度计测定20。C的粘度，标准圆锥(1。34'，lrmp)下为34.7Pas。(实施例3)布洛芬导入光交联透明质酸钠凝胶的合成(1)氨基丙酯_布洛芬(酯)盐酸盐的合成将352mg(2mmo1)调制例1中得到的Boc-氨基丙醇与412mg(2mmo1)布洛芬溶解于2ml二氯曱烷，在水冷却下，依次添力口48mg(0.4mmo1)DMAP、423mg(2.2mmo1)WSCIHCl/二氯曱烷2ml。使反应液恢复到室温，搅拌一昼夜。进而，加入醋酸乙酯，用与实施例2(1)同样的方法进行分液洗涤及脱水干燥后，减压蒸馏除去醋酸乙酯，得到Boc-氨基丙酯-布洛芬665mg(收率91%)。用'H-NMR(CDC13)鉴定结构。H-NMR(500MHz，CDC1.)5(ppm):0.88(6H,d，-CH(CH)),1.44(9H,s,Boc)，1..49(3H，d,-。COCH(QH.)—)'1.75(2H,m,-NHCH"CH。CH、。-),1.85(1H,m,-CH.,01(CH、))，2.45(2H,d,-￡H—,CH(CH久)，3,05(2H,m，—NHQinCHCH,0—),3.69(1H,q,-OCOCH(CH)-)，4.13加，t'-NHCHCHCH0-),4,63(1H,br,-NHC:i222H,)'7,07-7.21(4H,m，AromaticH.)将636mg(1.75mmo1)所得到的Boc-氨基丙酯-布洛芬溶解于lml二氯曱烷，在冰冷却下，加入4ml4N盐酸/醋酸乙酯，在冰冷却下，搅拌10分钟，然后，在室温下搅拌3小时。用TLC确定Boc-氨基丙酯-布洛芬消失后，向反应液中加入二乙基醚，进行3次倾析。接着，进行减压干燥，得到氨基丙酯-布洛芬(酯)盐酸盐(产量406mg,收率77%)。用-NMR(CDC13)鉴定结构。"十NMK('5,他,CDC1)S(ppm):0.89(6ii,d,CH(CH)),1.47(3H,d,…OCO〔.雄H)-),1.83(1H'm,'CHCH(aO),2.08(2H,qua威，'N'1CHCHCHO),244(21!,d,C〗！CIl(CH)),3.01(21〗，t'N！iCHCHCHO),3.71(]H,q,OCOi。ii'-'CH(CH》'),'l.il-'1.27(2H'm,1VHCH,(:1〖貝,O),7-06.7.20(4H，m'Aro腦ticH)T8.25(br，HlfCH--)(2)布洛芬导入光交联透明质酸钠凝胶(布洛芬导入光交联HA凝胶)的合成使用100mg实施例l中得到的肉桂酸氨基丙酯导入HA(光反应性HA)(0.25mmol/二糖单元)和0.1ml上述(1)中得到的0.5mol/L氨基丙酯-布洛芬(酯)盐酸盐，用和实施例2(2)同样的步骤，得到85mg布洛芬导入光反应性HA的白色固体。布洛芬的导入率为9.1%。调制所得到的布洛芬导入光反应性HA的1%磷酸緩冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进4亍光照射，得到布洛芬导入光交联HA凝胶，进而，进行121。C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计，测定2(TC下的粘度，标准圆锥(1。34',lrmp)下为13.1Pas。(实施例4)氟比洛芬导入光交联透明质酸钠凝胶的合成(1)氨基丙酯-氟比洛芬(酯)盐酸盐的合成将352mg(2mmol)调制例l中得到的Boc-氨基丙醇和489g(2mmo1)氟比洛芬溶解于2ml二氯曱烷，用和实施例3(1)同样的步骤，得到753mgBoc-氨基丙酯-氟比洛芬(收率94%)。用巾-NMR(CDC13)鉴定结构。;H-NfVIK(500MHz,CDC1)S(卯m):1.26(9H,s,Boc),1.54(3H,d,-OCOCH(C〗J).),L80(2H,quant,NHCHOiCHO.),3.13(2H,m,一NH组CHCHO),3.76￡2]J3i:2:3(1H'q,-OC(:謂:CH,)-),4.!.5(2H'm,-NHCH,CH，C〗-1,,(>),4,66(〗H'br,.，CH-.),7.10-7—55(9H,m,Aromalk:H)将720mg(1.79mmo1)上述得到的Boc-氨基丙酯-氟比洛芬溶解于lml二氯甲烷，在冰冷却下，加入4ml4N盐酸/醋酸乙酯，在冰冷却下搅拌3分钟，然后，在室温下搅拌3小时10分钟。用TLC确定Boc-氨基丙酯-氟比洛芬消失后，向反应液加入二乙基醚，进行2次倾析。接着进行减压干燥，得到氨基丙酯-氟比洛芬(酯)盐酸盐(产量352mg,收率94%)。用-NMR(CDC13)鉴定结构。〗H-NMR(500MHz，CDC1)S(ppra):1.51(3H,d,-OCOCH(Qi))，2、〗0(2H,qua3im'--NHCH￡HCHO—),3.05(2H,t'-NHCHCHCH〔:>-)，3.76(川，q，--OC()CH(2j2aCH).-),'1.3-.4.29(2H,rri，-NHCHCHCHO--),7.07-7.53(9H'm'A國adcH)'8.27(br,即:CH,,)(2)氟比洛芬导入光交联透明质酸钠凝胶(氟比洛芬导入光交联HA凝胶)的合成将200mg实施例1中得到的肉桂酸氨基丙酯导入HA(光反应性HA)(0.5mmol/二糖单元)溶解于水23ml/二噁烷23ml中后，依次加入0.2ml的lmol/LHOSu，0.2ml的0.5mol/LWSCIHC1，及0.2ml上述(1)中得到的0.5mol/L的氨基丙酯-氟比洛芬(酯)盐酸盐，搅拌一昼夜进行反应。向反应液中加入1.5ml5%碳酸氢钠水溶液，搅4半4小时。接着，加入43jul50%醋酸进行中和，然后，加入1.2g氯化钠并进行搅拌。加入100ml乙醇进行沉淀，用80%乙醇洗涤2次，用乙醇洗涤2次，用二乙基醚洗涤l次，进行一晚减压干燥，得到204mg氟比洛芬导入光反应性HA。氟比洛芬的导入率为9.3%。调制所得到的氟比洛芬导入光反应性HA的1%磷酸緩冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到氟比洛芬导入光交联HA凝胶，进而，进行12厂C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计测定20。C的粘度，标准圓锥(1。34',lrmp)下为21.2Pas。(实施例5)联苯乙酸导入光交联透明质酸钠凝胶的合成(1)氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐的合成将2.04mmol调制例1中得到的Boc-氨基丙醇、2.04mmo1联笨乙酸及0.41mmo1DMAP溶解于7ml二噁烷后，在冰冷却下，加入7mlWSCI.HC12.35mmol/二噁烷二氯甲烷(3:4)溶液。进而，添加3ml二曱基曱酰胺(以下，也称为DMF),反应液变澄清后，恢复到室温，搅拌一昼夜。加入醋酸乙酯，依次用5%柠檬酸水溶液、5%碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水进行分液洗涤。用硫酸钠脱水干燥后，减压蒸馏除去溶剂。将所得的残渣用硅胶色谱纯化(展开溶剂(己烷醋酸乙酯=3:1的0.5%三甲胺溶液))，得到Boc-氨基丙酯-联笨乙酸623mg(收率83%)。用巾-NMR(CDC13)鉴定结构。H—NMR(500MHz,CDCl)5(卯m):l.M(9H,s，Boc)'1,80—1.85(2H'm,BocHNCH,凤CH,0-)'3-15-&〗.9(2H'm,BocH頌—CH'CHoO-)，3,67(2H，s,Ph￡H.-),4.18(2H,t'BocHNCHCHQlO),4,67(1H's，NH)，7,34-7.59(9H,m'ArornaUc)，')。，&将1.69mmo1所得到的Boc-氨基丙酯-联苯乙酸溶解于lml二氯曱烷，在冰冷却下加入3ml4N盐酸/醋酸乙酯后，在室温下搅拌2小时。用TLC确定Boc-氨基丙酯-联苯乙酸消失后，向反应液加入二乙基醚，离心分离生成的沉淀。得到的沉淀用二乙基醚进行3次倾析后，进行减压干燥，得到氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐(产量511.7mg，收率99%)。用-NMR(CDC13)鉴定结构。;H-得,1R(500MHz,C〖:)a:(:DOL)=l:l)S(卯m):1.98-2,04(2H'm,H,NCHpM,CH0-),2.95(2H,l，HNCHCHCH0-.),3.73(2H，s,-画PhCH-),4.23(2H,l.，fINCHCH凤O),'/.33U加，m，Aro脂tic.:)(2)联苯乙酸导入光交联透明质酸钠凝胶(联苯乙酸导入光交联HA凝胶)的合成将100mg实施例1中得到的肉桂酸氨基丙酯导入HA(光反应性HA)(0.25mmol/二糖单元)溶解于水11.5ml/二噁烷11.5ml后，依次加入HOSu(0.1mmol)/水0.1ml、WSCI'HCl(0.05mmo1)/水0.1ml、及2ml上述(1)中得到的氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐(0.05mmo1)/水二噁烷(l:l)溶液，搅拌一昼夜进行反应。向反应液中力。入1.5ml5%碳酸氢钠水溶液，搅拌4小时。接着，力。入43pl50%醋酸进行中和，然后，力口入600mg氯化钠并进行搅拌。力。入90ml乙醇进行沉淀，用80%乙醇洗涤2次，用乙醇洗涤2次，用二乙基醚洗涤l次，在室温下减压干燥一夜，得到94mg联苯乙酸导入光反应性HA的白色固体。联苯乙酸的导入率为10.8%。调制所得到的联苯乙酸导入光反应性HA的1%磷酸緩冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到联苯乙酸导入光交联透明质酸钠凝胶，进而，进行12厂C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计测定20。C下的粘度，在标准圆锥(1。34',lrmp)下为7.32Pas。(实施例6)双氯芬酸导入光交联透明质酸钠凝胶的合成(1)氨基丙酯-双氯芬酸(酯)盐酸盐的合成将135.8mg(0.775mmo1)调制例1中《旱到的Boc—氛基丙醇溶解于lml二氯曱烷，依次加入4ml预先H-泡沫化的双氯芬酸229.6mg(0.775mmo1)/二氯曱烷溶液，lmlDMAP18.9mg(0.155mmo1)/二氯曱烷溶液，0.5mlDMF,在冰冷却下，力口入2mlWSCIHC1191.4mg(0.998mmo1)/二氯曱烷溶液，边緩慢变为室温，边搅拌7小时。进而将反应液进行水冷却，依次加入lml预先H-泡沫化的双氯芬酸91.9mg(0.31Ommo1)/二氯曱烷溶液、7.5mg(0.061mmo1)DMAP、lml70.9mg(0.370mmo1)WSCIHCl/二氯曱烷溶液，边缓慢变为室温，边搅拌ll小时。进而将反应液进4亍冰冷却，依次加入lml预先H-泡沫化的双氯芬酸91.8mg(0.31Ommo1)/二氯甲烷溶液，lmlWSCI.HC170.4mg(0.367mmo1)/二氯甲烷溶液，边緩慢变为室温，边搅拌5小时。进而将反应液进行冰冷却，依次加入lml预先H-泡沫化的双氯芬酸91.9mg(0.31Ommo1)/二氯甲烷溶液，lmlWSCIHC170.7mg(0.369mmo1)/二氯曱烷溶液，边緩慢变为室温，边搅拌5小时。进而将反应液进行冰冷却，依次加入lml预先H-泡沫化的双氯芬酸91.7mg(0.31Ommo1)/二氯曱烷溶液，lmlWSCIHC171.6mg(0.374mmo1)/二氯曱》jU容液，边緩慢变为室温，边搅拌14小时。进而将反应液水冷却，依次加入lml预先H-泡沫化的双氯芬酸92.0mg(0.311mmol)/二氯曱烷溶液，lmlWSCIHC172.0mg(0.376mmol)/二氯曱烷溶液，边緩慢变为室温，边搅拌6小时。加入醋酸乙酯，依次用5%柠檬酸水溶液分液洗涤2次，5%5灰酸氬钠水分液洗涤2次，饱和食盐水分液洗涤。用硫酸钠脱水后，减压蒸馏除去醋酸乙酯。将所得的残渣用硅胶色谱纯化(展开溶剂为己烷醋酸乙酯(7:1)的0.5%三乙胺溶液)，得到280.2mg标记化合物(80%)。用111-NMR鉴定结构。^H-NMR(500MHz，CDCi)S(卯m):〗.44(9H,s，Boc),l.肪(2H'quant,-NHCHGHCH(>)，3.16(2H,q'—NHCHCHCHO-)，3.82(2H,s，Ph—￡H—CO)'4.22(2H,'.f。'j,，':■'，t,-NHCHCHCH0—),4,68(〗H,s'NH),6,54—7.35(8H,ra,AromaticH,NH)将1019mg所得到的Boc-氨基丙酯-双氯芬酸溶解于2ml二氯甲烷，在冰冷却下，加入8ml4N盐酸/醋酸乙酯，搅拌3小时。加入150ml二乙基醚进行沉淀，将沉淀减压干燥，得到791mg(90%)氨基丙酯-双氯芬酸(酉旨)盐酸盐。用NMR鉴定结构。'H-NMR(幼OMHz,CDC1)5(p,):2,13(2H,quant,-NHCHCH0-),3.08(2H,t,-NHCIlCHCHO-)，3.84(2H,s，Ph—CH-CO),4.25(2H，t，一NHCHCHC222222—H0-),6,52—7.33(8H,m，AromaticH,MH)(2)双氯芬酸导入光交联透明质酸钠凝胶(双氯芬酸导入光交联HA凝胶)的合成将110mg实施例l中得到的肉桂酸氨基丙酯导入HA(光反应性HA)(0.28mmol/二糖单元)溶解于水12.7ml/二噁烷12.7ml后，依次加入HOSu(O.llmmol)/水O,llml、WSCIHC1(O.055mmol)/水0.11ml、2ml实施例6(1)中得到的氨基丙酯双氯芬酸(酯)盐酸盐(0.055mmol)/水二噁烷l:l溶液，搅拌一昼夜进行反应。向反应液加入1.65ml5%碳酸氢钠水溶液，才觉4半4小日寸。向反应〉夜力口人47jul50%醋酉臾中和后，力口入660mg氯化钠并进行搅拌。加入90ml乙醇进行沉淀，将沉淀物用80%乙醇洗涤2次，用乙醇洗涤2次，用二乙基醚洗涤，室温下减压干燥一晚。得到lllmg双氯芬酸导入光反应性HA的白色固体。通过tH-NMR可知双氯芬酸的导入率为13.6%。调制上述得到的双氯芬酸导入光反应性HA的1%磷酸緩冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到双氯芬酸导入光交联透明质酸钠凝胶。(实施例7)依托度酸导入光交联透明质酸钠凝胶的合成(1)氨基丙酯-依托度酸(酯)盐酸盐的合成将178.8mg(1.02mmo1)调制例1中得至'J的Boc—氛基丙醇、293.8mg(1.02mmo1)依4乇度酸及23.8mg(0.20mmo1)DMAP溶解于4ml二氯曱烷，在冰冷却下，力卩入2mlWSCI'HC1233.8mg(1.22mmo1)/二氯曱烷溶液，边缓慢变为室温边搅拌一昼夜。进而在)7J^令^卩下力口入2mlWSCIHC168.8mg(0.36mmo1)/二氯曱烷溶液，边緩慢变为室温边搅拌80分钟。加入醋酸乙酯，依次用5%柠檬酸水溶液分液洗涤2次，5%碳酸氢钠水分液洗涤2次，饱和食盐水分液洗涤。用硫酸钠脱水后，减压蒸馏除去醋酸乙酯。将所得的残渣用硅胶色谱纯化(展开溶剂为己烷醋酸乙酉旨(3:1)的0.5%三乙胺溶液)，得到436.3mgBoc-氨基丙酯-依托度酸(收率96%)。用^-NMR鉴定结构。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>将421.5mg(0.948mmol)上述得到的Boc-氨基丙酯-依托度酸溶解于lml二氯曱烷，在水冷却下力o入3ml4N盐酸/醋酸乙酯并搅拌3小时。加入二乙基醚、己烷进行沉淀，将沉淀减压干燥。将所得的沉淀用硅胶色谱(展开溶剂为氯仿曱醇(3:1)的0.5%三乙胺溶液)纯化，得到197.6mg(55%)氨基丙酯-依托度酸(酯)盐酸盐。用'H-NMR鉴定结构。Sh..崔R(500固z'C13Ci)S(卯m):0.81(3il，t,-CH貝),i.35(3H>"),1.92-2.i7(4H,m,-QlCH，「NHCHQl.,Cl人O)，4.12(iH,quant,-NliCi人CHCHO),4.20(ill,q隨t,NUCHCHOiO-)，6,99-7.35(3H,rn,A腦alic8.99(1H,s,NH)(2)依托度酸导入光交联透明质酸钠凝胶(依托度酸导入光交联HA凝胶)的合成将89.2mg实施例1中得到的肉桂酸氨基丙酯导入HA(0.223mmol/二糖单元)溶解于水10.3ml/二噁烷10.3ml后，依次力口入HOSu(0.0892mmol)/水0.1ml、WSCI'HCl(0.0446mmoi)/水0.1ml、2ml实施例7(1)中得到的氨基丙酯-依托度酸(酯)盐酸盐(0.0446mmo1)/水二噁烷(l:l)溶液，搅拌一昼夜进行反应。向反应液加入1.34mi5%碳酸氲钠水溶液，搅拌4小时。向反应液加入38jiL50%醋酸中和后，力卩入540mg氯化钠并进行搅拌。加入90ml乙醇进4亍沉淀，将沉淀物用80%乙醇洗涤2次，用乙醇洗涤2次，用二乙基醚洗涤，在室温下减压千燥一晚。得到80mg依托度酸导入光反应性HA(白色固体)。用HPLC测定的依托度酸的导入率为7.7%。调制上述得到的依托度酸导入光反应性HA的1%磷酸缓冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到依托度酸导入光交联HA凝胶，进而进行121。C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计测定20。C下的粘度，标准圆锥(1°34',lrmp)下为12.7Pas。(实施例8)阿克他利导入光交联透明质酸钠凝胶的合成(1)氨基丙酯-阿克他利(酯)盐酸盐(抗风湿药)的合成将123.1mg(0.703mmo1)调制例1中4寻到的Boc_氛基丙西f溶解于2ml二氯曱烷，力。入lml阿克他利136.0mg(0.704mmo1)/DMF〉容液，在-水冷却下依次力口入17.1mg(0.140mmo1)DMAP、175.4mg(0.915mmo1)WSCIHC1,边緩'艮变为室温边搅拌一昼^复进^亍反应。向反应液加入醋酸乙酯，用和实施例5(1)同样的方法进行分液洗涤，脱水干燥后，蒸馏除去溶剂，用硅胶色i普纯化，硅胶色i普的展开溶剂使用己烷醋酸乙酯(l:2)的0.5%三乙胺溶液。得到203.1mg(83%)氨基丙酯-阿克他利(酯)盐酸盐。用111-NMR鉴定结构。!H-NMR(5冊MlIz'CDC、)S(卯m):1.44(9H,s,Boc),l.柳(2H,quant,-NHCH、￡HCI!0),2.18(3H,s,NAc),3.14(211,q,NHC!!CHCH0),<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>H,CO),4」5(2H,t'NnCH,CH,CH'O),《66(1H,s,NH),7.13(lHts,NH),7.23(2H,d'Aroma"cH),7.46(2H,(l'AromaticH)将201.3mg(0.574mmo1)所得到的Boc-氨基丙酯-阿克他利溶解于2ml二氯甲烷，在冰冷却下，加入3ml4N盐酸/醋酸乙酯，4觉拌3小时。加入二乙基醚进行沉淀，将沉淀用二乙基醚洗涤2次后，减压干燥，得到161.3mg(98%)氨基丙酯-阿克他利(酯)盐酸盐。用111-NMR鉴定结构。〗H-NMR(500MHz,CD'OD)S(卯m):1.94-1.99(2H,m'-NHCH,凤CH/)-),2.]1(3H,s,NAc),2.94(2H,l,-,OiCHCH0_)，3.63(2H，s，Ph-￡H-CO),4.19(^o，，，，:，2H't,-NHCHCHCH0-),7.22-7,51(4H，m'AromaticH)(2)阿克他利导入光交联透明质酸钠凝胶(阿克他利导入光交联HA凝胶)的合成将100mg(0.25mmol/二糖单元)实施例l中得到的肉桂酸氨基丙酯导入HA(光反应性HA)溶解于水11.5ml/二噁烷11.5ml后，依次力口入HOSu(0.2mmo1)/水0.1ml、WSCIHC1(O.l醒ol)/水0.1ml、2ml上述(1)中得到的氨基丙酯-阿克他利(酯)盐酸盐(O.lmmol)/水二噁烷l:l溶液，搅拌一昼夜进行反应。向反应液加入1.5ml5%碳酸氢钠水溶液，〗觉拌5小时10分钟。用和实施例5(2)同样的方法，中和反应液后，用乙醇进行沉淀，洗涤沉淀物，进行减压干燥，得到100mg阿克他利导入光反应性HA的白色固体。用HPLC测定的阿克他利的导入率为15.6%。调制所得到的阿克他利导入光反应性HA的1%磷酸缓冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到阿克他利导入光交联HA凝胶，进而进4亍121。C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计测定20。C下的粘度，标准圓锥(1。34',lrmp)下为10.8Pas。(实施例9)同时添加肉桂酸氨基丙酯盐酸盐及氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐的联笨乙酸导入光交耳关HA凝胶的合成将100mg重均分子量80万的透明质酸(0.25mmol/二糖单元)溶解于水11.25ml/二噁烷11.25ml后，加入HOSu(0.275mmo1)/水0.1ml、WSCIHCi(0.1375mmo1)/水0.1ml，进而，同时添加实施例5(1)中得到的氨基丙酯-联笨乙酸(酯)盐酸盐(0.05mmol)和2ml调制例2中得到的肉桂酸氨基丙酯盐酸盐(0.0875mmol)/水二噁烷(1:l)溶液，搅拌一昼夜进行反应。通过和实施例5(2)同样的步骤，向反应液加入1.5ml5%碳酸氢钠水溶液，搅拌4小时，接着，中和反应液后，用乙醇进行沉淀，洗涤沉淀物，减压干燥，得到92mg联苯乙酸导入光反应性HA的白色固体。用HPLC测定的联苯乙酸的导入率为8.70/。、反式-肉桂酸的导入率为13.3%。调制所得到的耳关苯乙酸导入光反应性HA的1%磷酸缓冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到联苯乙酸导入光交联HA凝胶，接着，进行热处理。使用旋转粘度计测定20。C下的粘度，标准圓锥(1°34',lrmp)下为12.1Pa*s由上述结果可知，同时导入肉桂酸氨基丙酯盐酸盐及氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐而制造的药剂导入光反应性透明质酸也能够凝胶化。(实施例IO)通过向氨基丙酯-联苯乙酸导入透明质酸钠中添加肉桂酸氨基丙酯盐酸盐来合成^关苯乙酸导入光交联HA凝胶(1)联苯乙酸导入透明质酸钠(联苯乙酸导入HA)将500mg重均分子量80万的透明质酸(1.25mmol/二糖单元)溶解于水56.3ml/二噁烷56.3ml后，依次加入HOSu(0.5mmo1)/水0.5ml、WSCIHC1(0.25mmo1)/水0.5ml、5ml实施例5(1)中得到的氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐(0.25mmo1)/水二噁烷(l:l)溶液，搅拌一昼夜进行反应。向反应液加入7.5ml5%碳酸氢钠水溶液，搅拌4小时。向反应液加入215pl50%醋酸中和后，力n入3g氯化钠并进行搅拌。力。入500ml乙醇进行沉淀，将沉淀物依次用80%乙醇洗涤2次，用乙醇洗涤2次，用二乙基醚洗涤，在室温下减压干燥一晚。得到489mg联苯乙酸导入HA的白色固体。用HPLC测定的耳关苯乙酸的导入率为7.60/0。(2)联苯乙酸导入光交联HA凝胶将100mg实施例10(1)中得到的联苯乙酸导入HA(0.25mmol/二糖单元)溶解于水11.25ml/二噁烷11.25ml后，依次加入HOSu(0.2mmo1)/水0.2ml、WSCIHC1(O.lmmol)/水0.2ml、2ml实施例2制造的肉桂酸氨基丙酯盐酸盐(O.lmmol)/水二噁烷(1:l)溶液，搅拌一昼夜进行反应。向反应液加入1.5ml5%碳酸氢钠水溶液，搅拌4小时。接着，用和实施例5(2)同样的步骤，中和反应液后用乙醇进行沉淀，洗涤沉淀物，减压千燥，得到85mg联苯乙酸导入光反应性HA的白色固体。用HPLC测定的反式-肉桂酸的导入率为14.8%。调制所得到的联苯乙酸导入光反应性HA的1%磷酸緩冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到联苯乙酸导入光交联HA凝胶，然后，进行121。C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计测定20。C下的粘度，标准圆锥(1°34',lrmp)下为27.08Pas。(实施例ll)逐次添加氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐及肉桂酸氨基丙酯盐酸盐来合成联笨乙酸导入光交联HA凝胶将100mg重均分子量80万的透明质酸(0.25mmol/二糖单元)溶解于水11.25ml/二噁烷11.25ml后，依次力p入HOSu(O.lmmol)/水0.1ml、WSCIHC1(0.05mmo1)/水0.1ml、2ml实施例5(1)中得到的氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐(0.05mmo1)/水二噁烷(l:l)溶液，搅拌6小时。进而，依次力口入HOSu(0.2mmo1)/7jC0.2ml、WSCIHC1(O.lmmol)/水0.2ml、2ml肉桂酸氨基丙酯盐酸盐(O.lmmol)/水二噁烷(1:l)溶液，搅拌一昼夜进行反应。向反应液加入1.5ml5%碳酸氢钠水溶液，搅拌5小时30分钟。向反应液加入43pl50%醋酸中和后，力卩入0.6g氯化钠并进行搅拌。加入100ml乙醇进行沉淀，将沉淀物依次用80%乙醇洗涤2次，用乙醇洗涤2次，用二乙基醚洗涤，在室温下减压干燥一晚。得到90mg联苯乙酸导入光反应性HA的白色固体。用HPLC测定的联苯乙酸及反式-肉桂酸的导入率为11.4%及13.9%。调制所得到的联苯乙酸导入光反应性HA的1%磷酸緩沖生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到联笨乙酸导入光交联HA凝胶，然后，进行121。C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计测定20。C下的粘度，标准圆锥(1°34',lrmp)下为12.95Pas。(实施例12)逐次添加肉桂酸氨基丙酯盐酸盐及氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐来合成联苯乙酸导入光交联HA凝胶将100mg重均分子量80万的透明质酸(0.25mmol/二糖单元)溶解于水]丄25ml/二噁烷11.25ml后，依次力卩入HOSu(0.2mmo1)/水0.2ml、WSCIHC1(O.lmmol)/水0.2ml、2ml肉桂酸氨基丙酯盐酸盐(O.lmmol)/水二噁烷(l:l)溶液，搅拌6小时。进而，依次力口入HOSu(O.lmmol)沐O.lml、WSCIHCl(0.05mmol)/水0.1ml、2ml实施例5(1)中得到的氨基丙酯-联苯乙酸(酯)盐酸盐(0.05mmol)/水二噁烷(l:1)溶液，搅拌一昼夜进行反应。用和实施例ll同样的步骤，向反应液加入1.5ml5%碳酸氢钠水溶液，4觉拌5小时30分钟后，中和反应液，用乙醇进4亍沉淀，洗涤沉淀物，减压干燥。得到89mg联苯乙酸导入光反应性HA的白色固体。用HPLC测定的反式-肉桂酸及联苯乙酸的导入率为18.2%及5.7%。调制所得到的联苯乙酸导入光反应性HA的1%磷酸緩冲生理食盐水溶液，用和实施例2(2)同样的方法进行光照射，得到联苯乙酸导入光交联HA凝胶，然后，进行121。C、20分钟的热处理。使用旋转粘度计测定20。C下的粘度，标准圆锥(1。34',lrmp)下为22.58Pas。(实施例13)调查上述实施例25、实施例79共7种药剂导入交联HA凝胶的粘度、性状及由23G注射针挤出的挤出情况。按照如下标准进行评价。[性状]由注射针尖的挤出状态在下述"挤出情况"试验中，对可挤出的被测物质，将由向下方倾斜约45度的23G注射针緩慢挤出时在针尖形成具有保形性的块儿的记为(o)，不能形成的记为(x)。[挤出情况]o:易于挤出x:难以才齐出另外，作为挤出情况的标准，将在限制压力(0.5~5kg/cm2)范围内，通过23G注射针将填充于5ml容量的针筒内的凝胶(2m卜5ml)全部挤出的情况记为易于挤出(o)。另外，将通过同样操作，由于例如不溶物引起堵塞等而导致填充于针筒内的凝胶不能全部挤出的情况记为难以挤出(x)。结果示于下表。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>权利要求1.药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其为以共价键导入药剂的光交联透明质酸衍生物凝胶，并为可由注入工具挤出的性状。2.根据权利要求1所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其中，"光反应性基团，，与"药剂"分别通过间隔物以共价键结合到"透明质酸"上。3.根据权利要求1或2所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其可由20~25G注射针，以0.5~5kg/cm2的压力挤出。4.根据权利要求l~3任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"光反应性基团"由肉桂酸衍生物或氨基肉桂酸书亍生物构成。5.根据权利要求l~4任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"为具有可与羧基或羟基结合的官能团的物质。6.根据权利要求5所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"间隔物"为具有2个以上选自羧基、羟基及氨基的官能团的化合物的残基。7.根据权利要求l~6任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其中，"药剂"选自非类固醇类抗炎症剂、抗风湿剂、基质金属蛋白酶抑制剂、类固醇剂以及抗癌剂。8.根据权利要求7所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"为非类固醇类抗炎症剂或抗风湿剂。9.根据权利要求l~8任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"光反应性基团"和"药剂"分别结合于透明质酸的羧基上。10.根据权利要求l~9任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"光反应性基团"或"结合有光反应性基团的间隔物"以酰胺键结合于透明质酸的羧基上。11.根据权利要求l~IO任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"以酯键或酰胺键直接结合于透明质酸的羧基上。12.根据权利要求l~IO任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其特征在于，"药剂"以酯键与"间隔物"结合，该药剂结合间隔物以酰胺键结合于透明质酸的羧基上。13.根据权利要求l~12任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其中，"光反应性基团"和"药剂"的总计导入率相对于透明质酸的重复二糖单元摩尔数为10~45摩尔％。14.根据权利要求l~13任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝月交，其通过在制造工序中，在光交联之前进行碱处理而得到。15.药剂导入光反应性透明质酸衍生物，其特征在于，其中，"光反应性基团"与"药剂"分别以共价键结合于"透明质酸"上，且对水性介质为可溶性。16.根据权利要求15所述的药剂导入光反应性透明质酸衍生物，其特征在于，"光反应性基团"与"药剂"分别通过间隔物以共价键结合于"透明质酸"上。17.根据权利要求15或16所述的药剂导入光反应性透明质酸衍生物，其通过在制造工序中，在向透明质酸导入光反应性基团和/或药剂后的任意阶段进行碱处理而得到。18.药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其通过对权利要求15~17<壬一项所述的药剂导入光反应性透明质酸书f生物的水性溶液照射紫外线而得到。19.根据权利要求18所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，其通过在照射紫外线后进行灭菌而得到。20.内装药剂的注入工具，其在注入工具中填充有权利要求l~11、18和19任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，并用垫圏密封。21.根据权利要求20所述的内装药剂的注入工具，其进行了灭菌。22.药品，其含有权利要求1U、18和19任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。23.局部给药用制剂，其含有权利要求111、18和19任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。24.关节炎治疗剂，其含有权利要求111、18和19任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。25.药剂緩释用制剂，其含有权利要求111、18和19任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶，具有将导入到透明质酸的药剂緩释的性质。26.药剂衍生物，其中，具有2个以上选自羧基、羟基及氨基的反应性基团的间隔物与药剂以共价键结合。27.根据权利要求26所述的药剂衍生物，其中，药剂选自非类固醇类抗炎症剂、抗风湿剂、基质金属蛋白酶抑制剂、类固醇剂以及抗癌剂。28.可注入的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶的制造方法，其特征在于，将"光反应性基团"与"药剂，，分别通过或不通过间隔物以共价键结合到"透明质酸，，上而得到药剂导入光反应性透明质酸衍生物之后，对该衍生物的水性溶液照射紫外线。29.可注入的药剂导入光交联透明质酸々于生物凝月交的制造方法，其特征在于，其包含如下工序将权利要求1517任一项所述的药剂导入光反应性透明质酸衍生物溶解于水性介质而调制溶液，对该:容液照射紫外线的工序。30.药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶作为药剂緩释制剂的应用，其特征在于，将权利要求111、18和19任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶直接给药于患处。31.透明质酸衍生物注入用试剂盒，其中，权利要求l~11、18和19任一项所述的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶被填充在可挤出该凝胶的注入工具中。全文摘要本发明涉及以共价键导入药剂的光交联透明质酸凝胶、且可由注入工具挤出的性状的药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶。该药剂导入光交联透明质酸衍生物凝胶可通过例如20～25G注射针、以0.5～5kg/cm²的压力挤出。文档编号A61K47/48GK101217982SQ200680024510公开日2008年7月9日申请日期2006年7月5日优先权日2005年7月6日发明者安田洋祐,宫本建司申请人:生化学工业株式会社