获得透明质酸和游离形式维生素c和/或它们的盐的稳定凝胶的方法
【专利说明】获得透明质酸和游离形式维生素C和/或它们的盐的稳定 凝胶的方法 发明领域
[0001] 本发明涉及一种交联或非交联透明质酸或称为透明质酸盐的其至少一种盐，和维 生素C或称为抗坏血酸盐的其盐的能存储数月无任何显著降解且优选不泛黄的稳定水凝 胶形式的可注射含水组合物的获得方法。更具体地说，本发明涉及一种可通过这种方法获 得的交联或非交联透明质酸或其盐，和酸形式的维生素C或其衍生自维生素C盐的抗坏血 酸盐形式的等价物的水凝胶形式的可注射含水组合物。
[0002] 根据本发明的组合物可尤其用于美容或治疗目的。
[0003] 现有技术方案
[0004] 通常以可注射凝胶的形式使用透明质酸组合物。在美容医学或再生医学中，为了 能够填充皱纹和细纹、重塑面部或嘴唇，可在皮肤下注射透明质酸凝胶。这些凝胶也在治疗 医学中使用并尤其应用于眼科领域，其中，在角膜移植或青光眼或白内障手术后凝胶能够 使眼睛获得水分并缓解角膜疼痛。为了减少关节疼痛，特别是风湿病，也可在关节中注入凝 胶。
[0005] 通过使用添加剂可对这些凝胶进行改进，尤其是其效果的持续时间和在体内的抗 降解性。
[0006] 这些添加剂也可具有通过注射透明质酸增强治疗效果的补充性效果。这样的添加 剂，例如能延长期望效果的持续时间、优化所注入产品的分布、限制注射过程中的疼痛并提 供补充性作用，尤其是抗瘀斑性、抗氧化性或生成透明质酸或胶原的刺激性。
[0007] 在可以使用的各种添加剂中，L-抗坏血酸或维生素C由于其抗氧化性、抗衰老及 胶原促进性，因此是特别有利的。
[0008] 然而，已证明，将游离形式维生素C和/或其盐-即以酸形式或衍生自维生素C盐 的抗坏血酸盐形式-与透明质酸凝胶组合不可能生成足够稳定的凝胶。实际上，加入维生 素C使透明质酸降解并导致凝胶的液化和溶液的泛黄。在加热消毒这些组合物时，它们快 速降解的情况下，这种变质是特别不希望的。此外，维生素C分子本身不是很稳定且快速降 解。因此，这样的组合物不容易生产、存储备用或灭菌。
[0009] 透明质酸凝胶和维生素C的降解导致凝胶粘度和粘弹性的显著降低，即在完全分 解成液体之前早期降解的迹象，伴随出现深黄色。
[0010] 从文献US2001/0171286、TO2011/086458 和US2012/0225842 已知结合透明质酸 凝胶和抗坏血酸衍生物的可能包含添加稳定剂的稳定组合物。然而，只有当使用维生素C 衍生物，特别是抗坏血酸磷酸镁或抗坏血酸磷酸钠和抗坏血酸-2-葡糖苷（AA2G)时，这样 的组合物才是稳定的。实际上，当使用游离形式的维生素C和/或其盐时，当在高压釜中对 组合物灭菌时，透明质酸凝胶迅速降解。在高压釜中处理后，凝胶泛黄且降解。本领域技术 人员也知道透明质酸的这种降解。例如，文献W0 95/29683和FR2 900 575描述了当透明 质酸凝胶与游离形式的维生素C或其盐结合时，透明质酸凝胶的稳定性问题。
[0011] 此外，人们普遍接受的是，使用抗坏血酸酯，特别是棕榈酸酯或其他维生素C衍生 物-例如，脂肪酸抗坏血酸盐、抗坏血酸-2-葡糖苷或抗坏血酸磷酸盐提供比直接使用游离 形式维生素C或其盐更少的效果。
[0012] 因此，需要一种包含透明质酸和游离形式的维生素C和/或一种其盐的可注射凝 胶，其足够稳定以能够在高压釜中加热灭菌，即凝胶的粘度和/或粘弹性不会显著降低、凝 胶不会降解成液体形式且不会泛黄。
[0013] 发明目的
[0014] 本发明的目的尤其在于克服现有技术的这些缺点。
[0015] 更准确地说，本发明的一个目的是实施包含交联或非交联透明质酸或称为透明质 酸盐的其至少一种盐、游离形式的维生素C和/或称为抗坏血酸盐的其盐和选自偏亚硫酸 氢盐的稳定剂的含水凝胶的获得方法。
[0016] 在其实施方案的至少一个中，本发明的另一个目的是提供一种包含交联或非交联 透明质酸或对应透明质酸盐，和游离形式的维生素C和/或称为抗坏血酸盐的其盐的含水 凝胶。在凝胶或其组分，特别是维生素C无任何显著降解的情况下，为了存储数月，优选至 少6个月，凝胶必须足够稳定以能够在高压釜中灭菌并包装。
[0017] 在其实施方案的至少一个中，本发明的另一个目的是将透明质酸注射剂的优点和 以游离形式使用的维生素C和/或其盐的抗氧化作用、抗衰老作用以及胶原促进作用结合。
[0018] 本发明的另一个目的是含有酸或盐形式的交联或非交联透明质酸；游离形式，即 酸或抗坏血酸盐形式的维生素C和/或其盐，特别是抗坏血酸钠；以及选自偏亚硫酸氢盐的 稳定剂的制剂（formula)在化妆品领域中的用途。
[0019] 本发明的另一个目的是包含酸或盐形式的交联或非交联透明质酸；游离形式的维 生素C或其盐，特别是抗坏血酸钠；以及选自偏亚硫酸氢盐的稳定剂的可注射凝胶在美容 目的、再生目的或治疗目的的用途。
[0020] 发明描述
[0021] 根据具体实施方案，本发明涉及一种制备包含透明质酸、维生素C和选自偏亚硫 酸氢盐的稳定剂的含水凝胶的方法。
[0022] 根据本发明，这样的方法包括下述步骤：
[0023] a)制备一种混合物，所述混合物包含摩尔质量为lOOODa至lOMDa的交联或非交联 透明质酸和/或其盐、〇.lwt% -20.Owt%的酸形式的维生素C或其衍生自维生素C盐的抗 坏血酸盐形式的等价物、0. 〇lwt% -1. 00wt%的选自偏亚硫酸氢盐的稳定剂以及为了形成 水凝胶加入的使得透明质酸含量为0. 01mg/ml-100mg/ml的水溶液；
[0024] b)在正在形成的水凝胶完全溶胀之前将混合物脱气。
[0025] 本发明的一般原理是基于加入选自偏亚硫酸氢盐的稳定剂，所述加入与在制备凝 胶过程中的组合物脱气步骤结合。令人惊讶的是，发明人发现，当加入稳定剂与在制备凝胶 过程中的组合物脱气步骤结合时，获得凝胶的稳定性，即，至少6个月的时间内或在高压釜 内处理时没有降解，且没有出现泛黄。所述稳定性对应于透明质酸凝胶本身关于其粘弹性 的稳定性和维生素C的稳定性两者，后者也导致所述凝胶不存在泛黄。
[0026] 在凝胶的组合物中使用稳定剂。这种稳定剂必须与医学应用或化妆品应用，特别 是注射剂相容。所述稳定剂选自按质量计〇. 01% -1%的浓度，优选〇. 08% -1%的浓度下 使用的还原剂或抗氧化剂。这种稳定剂选自偏亚硫酸氢盐，优选地选自碱金属偏亚硫酸氢 盐和碱土金属偏亚硫酸氢盐，更优选地选自碱金属偏亚硫酸氢盐，最优选地选自偏亚硫酸 氢钾和偏亚硫酸氢钠。优选的稳定剂是偏亚硫酸氢钠。
[0027] 因此，本发明是基于将使用偏亚硫酸氢盐形式的稳定剂与脱气步骤结合的完全新 颖和具有创造性的方法。事实上，如果加入稳定剂使得防止凝胶液化，但出人意料的是， 即使在高浓度稳定剂下，其也不可能防止凝胶泛黄。例如，浓度为〇.〇8wt% -lwt%的稳定 剂不可能防止凝胶的泛黄。为了防止透明质酸凝胶的泛黄，有必要在制备凝胶过程中进行 脱气步骤。
[0028] 特别是，本发明人通过制备包含摩尔质量为lOOODa至10MDa(107Da)，优选50KDa 至5MDa，或更优选200KDa至3MDa的交联或非交联透明质酸或其盐的胶凝化含水组合物解 决了这些降解和变色问题，过高摩尔质量使凝胶难以处理，而l〇〇〇Da以下的摩尔质量使组 合物太稀。胶凝化含水组合物还包含0.lwt% -20.Owt%，优选2wt% -10wt%的酸形式的 维生素C或其衍生自维生素C盐的抗坏血酸盐形式的等价物；0.Olwt% -1. 00wt%，优选 0. 08wt% -1. 00wt%的、选自偏亚硫酸氢盐，优选地选自碱金属偏亚硫酸氢盐和碱土金属偏 亚硫酸氢盐，更优选地选自碱金属偏亚硫酸氢盐，最优选地选自偏亚硫酸氢钠和偏亚硫酸 氢钾的稳定剂（优选的稳定剂是偏亚硫酸氢钠）；以及加入的使得透明质酸含量在〇. 〇lmg/ ml-100mg/ml，优选在 2mg/ml-50mg/ml的水溶液。
[0029] 将使用术语透明质酸以无差别地描述交联或非交联透明质酸或相应的透明质酸 盐。优选地，透明质酸盐是钠盐。
[0030] 根据期望的应用，可以使用交联和非交联透明质酸的混合物。事实上，交联透明质 酸允许获得较高的粘度和稳定性。相反，非交联透明质酸允许获得更流态的组合物。交联 剂优选是二醇，其特别可选自1，4-丁二醇二缩水甘油醚、1，4-双（2, 3-环氧丙氧基）丁烷、 1，4-双缩水甘油氧丁烷、1，2-双（2, 3-环氧丙氧基）乙烯和1- (2, 3-环氧丙基）-2, 3-环 氧环己烷。
[0031] 由于这些原因，在制造植入物中组合交联透明质酸和非交联透明质酸可以是有利 的。透明质酸特别在Allergan公司的商标Juvederm下或MedicisAesthetics公司的商 标Restylane下出售。
[0032] 术语维生素C可被解释为涵盖游离形式的抗坏血酸，即左旋酸形式或称为抗坏血 酸盐的其盐形式的抗坏血酸。
[0033] 本领域技术人员可基于公知常识选择用于制备透明质酸凝胶的水相以使其与可 注射凝胶的应用相容。
[0034] 可注射凝胶应