专利名称：一种防治阿尔茨海默病或衰老的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明属医药技术领域，涉及一种预防和治疗阿尔茨海默病或衰老的药物组 合物及其制备方法。
背景技术：
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一种慢性的、与年龄相关的大脑 变性性疾病，以学习、记忆等大脑认知功能损害为主要表现。随着人口老龄化进 程的加速，AD的发病率和患病率有逐年升高的趋势，已给患者、家庭和社会带来 沉重的精神和经济负担。具报道，在欧美国家，60岁以上老年人4% — 12%发生 痴呆，其中半数以上为AD。新近的调查结果显示，我国痴呆发病率与欧美国家接
近，痴呆的老年患者已经超过500万例，其中AD占到2/3之多。
目前，AD的确切发病机理尚不清楚、也缺乏有效的预防和治疗措施。近年来 对AD发病机理的研究多集中在氧化应激方面，因为氧化应激是机体老化过程中主 要的生物学机制之一，自由基在AD发生发展中的起着重要作用，而线粒体是细胞 内自由基产生的主要来源。而AD特征性病理变化之一的老年斑主要成分是P淀粉 样蛋白(e-amyloid, AP)，越来越多的研究表明，由A P介导的线粒体氧化损伤 在AD发生发展中的起着至关重要的作用。
吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone， PQQ)是小分子化合物，最早是从 微生物中发现。有研究发现，高等真核生物体内也有PQQ存在。PQQ是细菌中多种 重要酶类的辅基，并能影响呼吸链功能与体内自由基水平。研究显示，PQQ缺乏的 小鼠生长缓慢，生殖能力差，并容易产生关节炎症，因此认为，PQQ可能是体内必需 的维生素之一。目前认为，PQQ的主要生理功能有抗氧化、改善线粒体呼吸链功
能(主要是脱氢酶复合体ni)、促神经生长作用等。
苯磷硫胺是硫胺素(维生素B1)脂溶性衍生物，其吸收、提高a-酮戊二酸脱 氢酶和转酮醇酶等活性的生理作用优于硫胺素数十倍，具有显著抗氧化、改善线 粒体呼吸链功能(主要是脱氢酶复合体I)及核酸合成功能等。
辅酶Q10是生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物，在人体呼吸链中质子移位及电子传递中起重要作用，能作为细胞代谢和细胞呼吸激活剂，还是重要的抗氧 化剂和非特异性免疫增强剂，具有促进氧化磷酸化反应，保护生物膜结构完整性， 能激活人体细胞和细胞能量的营养，具有提高人体免疫力、增强抗氧化、延缓衰 老和增强人体活力的作用。
研制有效的防治阿尔茨海默病或衰老的药物已是本领域研究者的关注热点。
发明内容
本发明的目的是提供一种防治阿尔茨海默病或衰老的药物组合物。涉及含吡 咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone， PQQ)、苯磷硫胺和/或辅酶Q10的药物 组合物及其制备方法和防、治阿尔茨海默病或衰老药物中的用途。
本发明药物组合物由吡咯喹啉醌和苯磷硫胺和/或辅酶Q10组成。
所述的PQQ，其分子式C14H6N208;分子量约为330。经动物实验表明，其具 有改善野生型和AD老年小鼠的线粒体功能、清除体内自由基、拮抗氧化损伤的功 能，从而能显著改善小鼠的认知功能、延长平均期望寿命。
所述的药物组合物中各组分的重量配比是(每日计量)
吡咯喹啉醌0. 1 画毫克，苯磷硫胺1 讓毫克，辅酶Q10 1 画毫克。
所述的吡咯喹啉醌按常规方法制成片剂、粉剂、喷雾剂、水针剂、粉针剂、直 肠栓剂或皮肤贴剂(透皮给药)。
所述的苯磷硫胺或辅酶Q10可选用其不同制剂。
本发明药物进行了动物实验，连续或分不同时间段给药达6个月，每日给药 剂量1毫克至1000毫克，其中，采用吡咯喹啉醌加苯磷硫胺；或加苯磷硫胺和辅 酶QIO，其中，吡咯喹啉醌剂量为每日0.1毫克至1000毫克，苯磷硫胺和/或辅酶 Q10每日剂量分别为1毫克至1000毫克。
本发明观测了转基因阿尔茨海默病小鼠和野生型老年小鼠治疗组与对照组的 认知功能、平均期望寿命、体重及海马神经发生功能、脑内tau蛋白异常磷酸化、 AP淀粉样蛋白分泌和沉积、神经纤维缠结、丙二醛等指标变化情况。结果表明， 与对照组相比，吡咯喹啉醌和苯磷硫胺或/和辅酶Q10具有显著的改善老年野生型 小鼠、AD模型小鼠的认知功能、延长平均期望寿命、增强海马神经发生功能、减 少tau蛋白异常磷酸化和A e淀粉样蛋白分泌与沉积等AD特征性病理变化等作用，同时所述药物还能有效降低脑组织丙二醛含量、增加NADPH/NADP+的比例，显示其 显著的抗氧化损伤作用。以上作用均证明所述药物组合物具有预防和治疗AD与衰 老的作用。
所述的转基因阿尔茨海默病小鼠为6月龄的转基因AD模型小鼠，用药量一般 按3毫克/公斤/日计算，所述的野生型老年小鼠为12月龄的野生昆明种小鼠其连 续6个月使用每日剂量为0.1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌和1毫克-1000毫克苯磷 硫胺，用药量一般按200毫克/公斤/日计算。
上述药物的动物实验中，采用Y迷宫检测小鼠的学习、记忆和总反应时间等认 知功能情况；饲养至一半小鼠死亡的时间，以此指标来推算可能的平均期望寿命; 分别用BrdU、 DCX、 Neun、磷酸化tau蛋白、AP淀粉样蛋白抗体进行组织细胞免 疫荧光染色；组织匀浆测定丙二醛、NADPIANADP+等。
本发明的动物实验结果，揭示了吡咯喹啉醌和苯磷硫胺、辅酶Q10的药物组 合物具有通过调制硫胺素相关的蛋白酶活性而改善脑细胞能量代谢、拮抗氧化损
伤途径来预防和治疗阿尔茨海默病和衰老的作用，具有重大的理论意义和潜在的 社会与经济价值。
具体实施例方式
实施例1动物实验
1) 制备不同剂型的吡咯喹啉醌
按常规方法，分别制备吡咯喹啉醌片剂、粉剂、粉针剂、直肠栓剂、皮肤贴 剂(透皮给药)、水针剂、喷雾剂等；
2) 不同剂型吡咯喹啉醌的临床应用实验， 应用不同剂型的吡咯喹啉醌，通过口 (含)服、肌肉注射、腹腔注射、静脉
注射、喷雾给药、直肠给药或透皮给药的不同途径，使用每日0. 1毫克-1000毫克 预防或治疗阿尔茨海默病或衰老；
3) 动物实验疗效观测，
通过口服或腹腔注射给药方式，给予昆明种自然衰老小鼠、转基因阿尔茨海 默病模型小鼠连续服用吡咯喹啉醌6个月，按每日每千克体重1毫克给药，以非 治疗组为对照组，结果显示，吡咯喹啉醌治疗组具有显著改善治疗动物的认知功能、延长其平均期望寿命作用，证明吡咯喹啉醌具有预防和治疗阿尔茨海默病与 衰老的作用；
连续或分不同时间段给药达6个月，每日给药剂量O. l毫克至1000毫克，其 中，采用吡咯喹啉醌加苯磷硫胺；或加苯磷硫胺和辅酶QIO。其中，吡咯喹啉醌剂 量均为每日0. 1毫克至1000毫克，苯磷硫胺或辅酶Q10每日剂量分别为1毫克至 1000毫克。
结果显示，吡咯喹啉醌和苯磷硫胺和/或辅酶Q10联合应用预防和治疗阿尔茨 海默病或衰老具有同样效果。 实施例2
1、 常规方法制备吡咯喹啉醌片剂；
2、 通过经口给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生昆明 种小鼠连续6个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌；
3、 连续或分不同时间段给药达6个月，每日给药剂量O. 1毫克至1000毫克， 其中，采用吡咯喹啉醌加苯磷硫胺；或加苯磷硫胺和辅酶QIO。其中，吡咯喹啉醌 剂量均为每日0. 1毫克至1000毫克，苯磷硫胺或辅酶Q10每日剂量分别为1毫克 至1000毫克。
结果显示，治疗组小鼠具有显著改善认知功能、延长小鼠平均期望寿命作用， 吡咯喹啉醌和苯磷硫胺和/或辅酶Q10联合应用具有预防和治疗阿尔茨海默病与衰 老的作用。 实施例3
1、 常规方法制备吡咯喹啉醌水针剂；
2、 通过腹腔给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生昆明 种小鼠连续6个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌；
3、 连续或分不同时间段给药达6个月，每日给药剂量O. l毫克至1000毫克， 其中，采用吡咯喹啉醌加苯磷硫胺；或加苯磷硫胺和辅酶QIO。其中，吡咯喹啉醌 剂量均为每日0. 1毫克至1000毫克，苯磷硫胺或辅酶Q10每日剂量分别为1毫克 至1000毫克。
结果显示，治疗组小鼠具有显著改善认知功能、延长小鼠平均期望寿命作用， 吡咯喹啉醌和苯磷硫胺和/或辅酶Q10联合应用具有预防和治疗阿尔茨海默病与衰老的作用。 实施例4
1、常规方法制备吡咯喹啉醌水针剂；
2、通过喷雾给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生昆明 种小鼠连续6个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌；
3、连续或分不同时间段给药达6个月，每日给药剂量O. 1毫克至1000毫克， 其中，采用吡咯喹啉醌加苯磷硫胺；或加苯磷硫胺和辅酶QIO。其中，吡咯喹啉醌 剂量均为每日0. 1毫克至1000毫克，苯磷硫胺或辅酶Q10每日剂量分别为1毫克 至1000毫克。
结果显示，治疗组小鼠具有显著改善认知功能、延长小鼠平均期望寿命作用， 吡咯喹啉醌和苯磷硫胺和/或辅酶Q10联合应用具有预防和治疗阿尔茨海默病与衰 老的作用。 实施例5
1、 常规方法制备吡咯喹啉醌苯磷硫胺水针剂；
2、 通过腹腔给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生昆明 种小鼠连续6个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌和1毫克-1000 毫克苯磷硫胺；
3、 结果显示，吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺治疗组小鼠具有显著改善认知功能、 延长小鼠平均期望寿命作用，证明吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺具有预防和治疗阿尔 茨海默病与衰老的作用。
实施例6
1、 常规方法制备吡咯喹啉醌苯磷硫胺水针剂；
2、 通过喷雾给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生昆明 种小鼠连续6个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌和1毫克-1000 毫克苯磷硫胺；
3、 结果显示，吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺治疗组小鼠具有显著改善认知功能、 延长小鼠平均期望寿命作用，结果证明吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺具有预防和治疗 阿尔茨海默病与衰老的作用。实施例7
1、 依据文献报道的常规方法，制备吡咯喹啉醌苯磷硫胺水针剂；
2、 通过静脉给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生 昆明种小鼠连续1个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌和1毫 克-IOOO毫克苯磷硫胺；
3、 结果显示，吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺治疗组小鼠具有显著改善认知功 能、延长小鼠平均期望寿命作用，结果证明吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺具有预防 和治疗阿尔茨海默病与衰老的作用。
实施例8
1、 常规方法制备吡咯喹啉醌苯磷硫胺辅酶Q10水针剂；
2、 通过腹腔给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生 昆明种小鼠连续6个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌、1毫 克-1000毫克苯磷硫胺、l毫克-1000毫克辅酶Q10;
3、 结果显示，吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺、辅酶Q10治疗组小鼠具有显 著改善认知功能、延长小鼠平均期望寿命作用，结果证明吡咯喹啉醌联合苯磷 硫胺、辅酶Q10具有预防和治疗阿尔茨海默病与衰老的作用。
实施例9
1、 常规方法制备吡咯喹啉醌苯磷硫胺辅酶Q10水针剂；
2、 通过喷雾给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生 昆明种小鼠连续6个月使用每日剂量为0. 1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌、1毫 克-IOOO毫克苯磷硫胺、1毫克-1000毫克辅酶Q10;
3、结果显示，吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺辅酶Q10治疗组小鼠具有显著 改善认知功能、延长小鼠平均期望寿命作用，结果证明苯磷硫胺具有预防和 治疗阿尔茨海默病与衰老的作用。
实施例10
1、 依据文献报道的常规方法，制备吡咯喹啉醌苯磷硫胺辅酶Q10水针剂；
2、 通过静脉给药途径，给6月龄的转基因AD模型小鼠或12月龄的野生昆明种小鼠连续1个月使用每日剂量为0.1毫克-1000毫克吡咯喹啉醌、1毫 克-1000毫克苯磷硫胺、1毫克-1000毫克辅酶Q10;
3、结果显示，吡咯喹啉醌联合苯磷硫胺、辅酶Q10治疗组小鼠具有显著 改善认知功能、延长小鼠平均期望寿命作用，结果证明吡咯喹啉醌联合苯磷硫 胺、辅酶Q10具有预防和治疗阿尔茨海默病与衰老的作用。
权利要求
1、一种防治阿尔茨海默病或衰老的药物组合物，其特征是由吡咯喹啉醌和苯磷硫胺和/或辅酶Q10组成，所述的吡咯喹啉醌，其分子式C14H6N2O8；分子量330；所述的药物组合物中各组分的重量配比是，每日计量吡咯喹啉醌0.1～1000毫克，苯磷硫胺1～1000毫克，辅酶Q101～1000毫克。
2、 按权利要求1所述的防治阿尔茨海默病或衰老的药物组合物，其特征是 所述的吡咯喹啉醌选自片剂、粉剂、喷雾剂、水针剂、粉针剂、直肠栓剂或皮肤 贴剂。
3、 按权利要求1所述的防治阿尔茨海默病或衰老的药物组合物，其特征是 所述的苯磷硫胺或辅酶Q10选用其不同制剂。
4、 权利要求1的药物组合物，其中的吡咯喹啉醌和苯磷硫胺在制备预防和治 疗阿尔茨海默病或衰老药物中的用途。
5、 权利要求l的药物组合物，其中的吡咯喹啉醌、苯磷硫胺和辅酶Q10在 制备预防和治疗阿尔茨海默病或衰老药物中的用途。
全文摘要
本发明属医药技术领域，涉及一种含吡咯喹啉醌、苯磷硫胺和/或辅酶Q10药物组合物及其制备方法和预防、治疗阿尔茨海默病或衰老药物中的用途。经动物实验证实，本发明药物组合物具有改善野生型和阿尔茨海默病老年小鼠的线粒体功能、清除体内自由基、拮抗氧化损伤的功能，从而能显著改善小鼠的认知功能、延长平均期望寿命，具有预防和治疗阿尔茨海默病和衰老的作用，和广泛临床应用前景。可制备预防和治疗阿尔茨海默病或衰老的药物。
文档编号A61P25/00GK101317849SQ20071004229
公开日2008年12月10日 申请日期2007年6月20日 优先权日2007年6月20日
发明者钟春玖, 顾建新 申请人:复旦大学附属中山医院