专利名称：：一种治疗肝炎的中药复方制剂的制作方法
技术领域：
：本发明属于中药领域，具体涉及一种由青叶胆、黄芪、胡黄连和虎杖组成的中药复方制剂，本复方制剂在治疗肝炎上有很好的疗效。
背景技术：
：肝炎属于中医"肝瘟"、"瘟黄"范畴，其多因温热疫毒侵犯人体肝、胆、脾、胃，致中焦壅滞，升降失司；肝气疏泄失常，气机不利，不通则痛，故见胁痛、胁涨；肝木伐脾土，脾胃蕴华功能失常，故见纳差、厌油、乏力；温热内蕴，胆汁不循常道，外溢肌肤而目黄、身黄、溲黄。肝炎为常见疾病，肝炎患者一般表现为全身乏力、厌食厌油、恶心呕吐、黄疸黑斑等，对身体健康造成严重影响，肝炎具有传染性，发病率高，因此，对新药需求大。本发明经多次筛选、配方和实验，发现由青叶胆、黄芪、胡黄连和虎杖组成的中药复方对肝炎的治疗有很好的疗效。《中国药典》记载，青叶胆为龙胆科獐芽菜属植物青叶胆SwertiamileensisT.N.HoetW.L.Shih的全草，在云南又称小青叶胆、走胆药、肝炎药，金鱼胆、小苦草。青叶胆分布广泛，全草清肝利胆、清热利湿，用于黄疸尿赤、热淋涩痛。众多研究证明青叶胆对肝病的治疗有较好的疗效。云南省药品检验所用獐牙菜苷(獐牙菜苷含量10%,实则总苦苷)用于四氯化碳引起的大白鼠急性肝损伤的治疗，发现肝小叶中心坏死区大部分修复，肝细胞浆疏松、气球样变及脂肪性变的细胞大为减少，肝糖原蓄积明显增多，还能明显降低谷丙转氨酶及加强肝区巨噬细胞的吞噬功能，提高机体免疫能力，增加肝血流量，改善肝微循环障碍。本方就是在以青叶胆为主药的基础上，配以其它辅助治疗药物，组方出一种对肝炎有较好疗效的复方。
发明内容本发明的目的在于提供一种治疗肝炎的中药复方，通过药味之间的配合，增强疗效，同时提高机体的免疫力，更好的发挥治疗作用。本发明中所指的肝炎，包括乙型肝炎，丙肝。本发明的基本原料组成为青叶胆、黄芪、胡黄连、虎杖。方中，青叶胆味苦、性寒，归肝、胆、膀胱经，具有清肝利胆、清热利湿之功效，用于黄疸尿赤，热淋涩痛，为君药；黄芪味甘性温，具有补气固表、利尿托毒、敛疮生肌之功效，同时可以提高人体之正气，增强人体机体免疫功能，起到扶正祛邪的作用，辅助青叶胆之治疗功效，为臣药；虎杖味微苦性微寒，归肝胆肺经，具有祛风利湿、散瘀定痛、止咳化痰的作用，胡黄连胃苦性寒，归肝、胃、大肠经，能清湿热、除骨蒸、消疳积，常用于湿热泄痢、黄疸、骨蒸潮热、小儿疳积，为使药。全方配伍，共奏清热利湿解毒、利肝胆、扶正祛邪之功。研究表明，与黄芪有相似的扶正祛邪作用的党参、灵芝、云芝、猪荟或茯苓，其药材提取物在治疗肝炎方面有类此黄芪的作用，所以，本发明中，黄芪也可以用上述药材代替。以上组方为本发明的基本组方，本组方中，还可根据治疗需要，在主方中加减药，如肝炎患者并带阴虛者，可在方中加入滋阴药，如鳖甲、熟地等；带有肝气郁结者，可随方中加入疏肝理气药，如青皮、香附等。基本方中原料药的份数为青叶胆8-20重量份，黄芪3-IO重量份，胡黄连1-4重量份，虎杖1-4重量份。按重量配比，方中各原料药的优选配比为青叶胆10重量份，黄芪4重量份，胡黄连l重量份，虎杖1重量份。本发明中药复方制剂的活性成分制备可以通过如下方式实现黄芪先用去离子水提取，过滤浓縮得水提液浸膏I;黄芪药渣再与青叶胆、胡黄连、虎杖合并，以40%-70%的乙醇提取，过滤浓缩得醇提取液浸膏II;合并浸膏I、II,混匀，干燥，即得本发明复方活性成分。或真本发明的活性成分还可以通过这样的方式实现黄芪先用去离子水提取，过滤浓缩得水提液浸膏I;黄芪药渣再与青叶胆、胡黄连、虎杖合并，以40%-70%的乙醇提取，过滤合并乙醇提取液，浓缩至无醇味，使相对密度为1.15,浓缩液上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱除去一些水溶性而不被树脂吸附的杂质，继续用50%-80%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩得浓缩液n，，合并浓缩液i、n，，混匀，干燥即得本发明活性成分。'本发明中，所用的提取方法可以是煎煮法、回流提取法、温浸法或渗漉提取法。本发明中，黄芪用水提时先采用煎煮提取，水提取后的黄疾与其它原料药合并后，采用乙醇回流提取。本发明中，大孔吸附树脂柱可以是HP-20型大孔吸附树脂、D-101型大孔吸附树脂、AB-8型大孔吸附树脂、NKA-9型大孔吸附树脂。实现本发明的技术方案除上述提到的两种外，还可以是将4种原料药直接用水煎煮提取后浓缩得到本发明活性成分；或者直接用50%的乙醇回流提取后得到本发明活性成分，或者先用水煎煮提取后，改用80%的乙醇回流提取，合并两次提取物得到本发明活性成分。总之，本申请中药复方制剂的制备方法不仅限于上述的具体方案，在此基础上的任何变化都在本申请的保护范围之内。本发明活性提取物中，加入药学上需要的辅料，可制成所需要的药物剂型，优选口服剂型。具体实施例药理实施例以下从本发明的药效实验来说明本发明的有意效果。1、体外药理实施例本发明设三个剂量组分别为低剂量组、中剂量组、高剂量组，剂量分别为10、50、100|ug/ml。(1)对体外培养CC14损伤肝细胞的影响正常原代肝细胞培养36h后，加入本发明提取物培养液，以VitE作阳性对照，继续培养12h，将培养板置于密封盒内，盒内放入0.4ml/L的CC14，37。C下损伤60min，移出培养板继续常规培养3h后收集细胞及检测上清液MDA、ALT活性，其中一板损伤前加入0.5%MTT20W,损伤lh后在5%二氧化碳培养箱中37。C下继续培养3h,小心吸去上清液，每孔加入100tnlDM-SO-乙醇(1:1)溶液，在微型振荡器上振荡10min,用酶标仪于570nm波长处测光密度值。试验结果(表l)可见，CC14损伤肝细胞后，促进肝细胞内酶的释放，其中ALT、MDA活性明显升高；与模型组比较，给药组细胞存活率明显升高，ALT、MM活性显著性降低，存在明显剂量-效应关系。表l各组CC14损伤后肝细胞存活率及ALT、MDA活性测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*:与模型组相比，p<0.05,**:与模型组相比，p<0.01(2)细胞增殖实验及MDA、SOD及I型胶原的测定采用含3。/。小牛血清的DMEM培养传l代培养的HSC为1105个/ml细胞悬液，接种于96孔板，每孔100W,待细胞长至近单层后分组空白组用含3%小牛血清的DMEM培养液；模型组换含终浓度0.l咖ol/LFeNTA和3%小牛血清的DMEM培养液；阳性组换含终浓度0.1mmol/LFe亂50Hmol/LVitE和3%小牛血清的DMEM培养液；其余各组换含终浓度0.lnwiol/LFeNTA、不同浓度的药液和3%小牛血清的函EM培养液。每组设5个复孔，24h后每孔加0.5%MTT贮备液20"继续孵育4h,弃上清液并每孔加100吣DMSO溶解细胞内结晶，以酶标仪于570咖波长测定0D值。釆用含3%小牛血清DMEM培养传1代培养的HSC24h后，按照上述方法制备，每组设5个复孔。培养4h后，收集上清液，按测定试剂盒推荐方法检测MDA,S0D并以酶联免疫吸附法测定型胶原。试验结果(表2)可见，本发明各给药组可不同程度抑制MM活性升高和SOD活性降低，抑制HSC的增殖和型胶原的生成，呈明显的剂量-效应关系。表2各组FeNTA诱导氧应激HSC增殖、培养液中的MDA、SOD及口型胶原测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*:与模型组相比，p<0.05，**:与模型组相比，p<0.012、体内药理实施例(1)对化学性肝损伤小鼠的治疗作用小鼠60只随机分为6组，每组10只，即正常对照组，模型组，联苯双酯组,丹参胡黄连高、中、低剂量给药组。连续7天口服给药，末次给药后1小时腹腔注射800mg/kg的氨基半乳糖，隔16小时后眼眶取血测定血液升化指标ALT，MDA。结果(表3)显示本发明提取物能够明显降低氨基半乳糖小鼠的ALT的含量，高剂量组能显著降低模型组的MDA水平。表3药物对氨基半乳糖小鼠肝损伤模型的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>承与模型组比较p0.05，^与模型组比较p0.01本发明具体制备实施例以下实施例仅是对本发明实施例的进一步说明，而不是限制本发明实施方式。实施例1:制备成硬胶囊剂配方青叶胆1000g黄芪400g胡黄连100g虎杖100g取黄芪200g，粉碎成细粉，备用；另200g黄芪先用8倍量蒸馏水提取2次，过滤合并滤液，减压浓缩得浓缩液I;黄芪药渣与青叶胆但、胡黄连、虎杖三味药用10倍量60%的乙醇回流提取3次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，减压浓缩，得浓縮液II,合并浓縮液I、II,混匀，干燥，粉碎制成干浸膏粉，将干浸膏粉与上述黄芪药粉混匀，装入硬胶囊中，制成1000粒，即得。实施例2制备成片剂配方青叶胆2000g黄芪800g胡黄连400g虎杖400g黄芪先用IO倍量蒸馏水提取两次，每次l小时，过滤，合并滤液，浓缩得浓縮液I;黄芪药渣与青叶胆、胡黄连、虎杖合并，以10、8、8倍量的70%的乙醇回流提取，每次1.5小时，过滤，合并滤液，滤液浓缩至无醇味，使相对密度约为1.15，上以处理好的HP-20大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至水洗液颜色变淡，约需洗4个柱体积，改用70%的乙醇洗脱6个柱体积，合并70%的乙醇洗脱液，减压浓缩得浓缩液n,将浓缩液i、n合并，混句，干燥，粉碎制成干浸膏粉，以75%的乙醇制粒，6(TC干燥，加入适量的硬脂酸镁，lOiMi冲模压片，包糖衣或薄膜衣，制成1000片，即得。实施例3制成软胶囊剂配方青叶胆800g黄芪300g胡黄连200g虎杖200g上4味药，用12倍量的40%的乙醇回流提取3次，每次l小时，过滤合并滤液，减压浓缩，干燥，粉碎制成干浸膏粉；将由大豆油700g、白蜂蜡40g、司盘-20108制成的软胶囊壳熔融，搅匀，与干浸膏药粉混合，过胶体磨研勾，制成混悬液，上软胶囊机压制成1000粒，即得。权利要求1、一种治疗肝炎的中药复方制剂，其特征是由下列重量份的原料药组成青叶胆8-20份，黄芪3-10份，胡黄连1-4份，虎杖1-4份。2、如权利要求l所述的中药复方制剂，其特征是所述原料药的重量份为青叶胆10份，黄芪4份，胡黄连l份，虎杖1份。3、一种制备如权利要求1或2所述中药复方制剂的方法，其特征包括以下步骤黄芪先用水提取，过滤浓缩得水提液浸膏I;黄芪药渣再与青叶胆、胡黄连、虎杖合并，以40%-70°/。的乙醇提取，过滤浓缩得醇提取液浸膏II;合并浸膏I、II，混匀，干燥，粉碎，加入药用辅料和赋形剂，制成所需剂型。4、如权利要求3所述的方法，其特征是提取液浸膏II还可再经过大孔吸附树脂柱，用水洗脱除去一些杂质成分后，再用50%-80°/。的乙醇洗脱下活性成分，收集乙醇洗脱活性成分，浓缩得浸膏n，，将浸膏I和浸膏II，合并，混匀，干燥，粉碎，加入药用辅料和赋形剂，制成所需剂型。5、如权利要求3或4所述的方法,其特征是所述的药物剂型主要为口服制剂。6、如权利要求1或2所述的中药复方制剂在制备具有治疗肝炎作用药物中的应用。7、如权利要求1或2所述的中药复方制剂，其特征是所述的原料药黄芪还可用党参、灵芝、云芝、猪苓或茯苓代替。全文摘要本发明涉及一种治疗肝炎的中药复方制剂及其制备方法和应用，本复方由青叶胆、黄芪、胡黄连和虎杖组成，通过适当的方法将其活性成分提取，加入制药上可接受的制药辅料，可制成所需剂型。本发明中药复方制剂经药理实验证明，能显著降低血清中ALT、MDA含量，增强SOD活性。文档编号A61P31/14GK101297893SQ20071012105公开日2008年11月5日申请日期2007年8月29日优先权日2007年8月29日发明者张树祥申请人:北京星昊嘉宇医药科技有限公司