专利名称：：使用腺苷和肌苷组合用于诊断和治疗的组合物、方法和试剂盒的制作方法使用腺苷和肌苷组合用于诊断和治疗的组合物、方法和试剂盒1.相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2006年3月31日提交的申请序列号60/787,771的利益，其内容通过引用并入本文。2.背景噤呤核苷、腺苷广泛用于临床实践，用于诊断药理学应激试验设计中的心脏和冠状动脉异常和治疗室上性心动过速。除它的强心血管作用和负性变时作用之外，研究已经显示腺苷对心、脑和脊髓的局部缺血性损伤后的再灌注损伤具有保护效应，具有强抗炎活性，刺激修复过程、抑制血小板聚集和能在手术期间减少痛苦和麻醉需求。然而，尽管它有极其短的半衰期(约为数秒)，但是副作用妨碍腺苷以提供最大效力的剂量使用。例如，当通过以药理学应激试验所推荐的剂量140昭/kg/min连续静脉内输注6分钟来施用时，腺苦导致频繁的副作用。参见Adenoscan(腺苷注射剂)产品标签。副作用(包括主观症状，如热感、发红、呼吸困难和胸痛)是剂量相关的以70吗/kg/min或更少的剂量，腺苷不良反应非常少且强度轻。然而，当通过以70pg/kg/min或更少、或甚至以90-120吗/kg/min静脉内灌注用于应激试验时，腺苷显示效力降低，且不推荐以这种低剂量用于临床用途。为了以最有效的激动剂剂量减少副作用，正发展对不同的腺香受体亚型有选择性的腺普能试剂(adenosinergicagent)。参见，例如U.S.专利第7,019,027;6,531,457;6,448,235;6,322,771;和5,877,180号。然而这些化合物具有比腺苷更长的半衰期，且趋于诱导与它们特异性针对的受体亚型相关的副作用一例如在刺激腺苷A2a受体下的发红、头痛和呼吸困难或在刺激腺苷A受体后的胸痛。因此，尽管更有特异性，但是这些试剂比腺苷本身更有可能触发延长的副作用和需要施用药理学解毒药，一旦停止施用所述腺苷，其副作用快速消失。此外，这些选择性试剂还没有一个批准用于临床使用。因此，本领域持续需要可注射的腺苷能激动剂，其能以最大效力使用以及能在临床上以与腺苷相同的方式处理并且具有减少的副作用。3.发明概述如在下文实施例中描述，目前已发现，^5几苷以所选的腺苷:肌苷重量比充分增强和/或调节某种腺苷作用以便允许腺苷以降低的剂量使用，来减少副作用并达到最大效力。这两种天然核苷(每种具有清楚确定的药动学和安全性特征)的组合直接用于诊断和治疗。因此，本文描述的是用于开发一定剂量的腺苷和肌苷的血管舒张作用、细胞保护活性和细胞修复能力的组合物、试剂盒和方法，在所述剂量下腺苷的最常见副作用显著降低或避免，同时保持在治疗和诊断损伤的组织中的最大效力。在一个方面中，提供了包含腺苷和肌苦的药物组合物(以单个组合物的腺苷和肌苦的组合，以下称为"BIDOSINE";)。在一个系列的实施方案中，腺苷:肌苷(A:I)重量比在1:1至1:20之间，其中典型的实施方案具有从1:1至1:6的A:I比。在另一个系列的实施方案中，所述A:I比在约1:1至约20:1之间，其中典型的实施方案具有4:1至7:1的A:I比。在各种实施方案中，药物组合物适用于静脉内、心房内或动脉内输注。在典型的实施方案中，腺苷和肌苷以适于10-100jig/kg/min的腺苷剂量速率和10-2000pg/kg/min的肌苷剂量速率的静脉内施用的浓度存在。在一些实施方案中，药物组合物包含腺苷和肌苷，所述腺苷和肌苷的浓度适于35-70ng/kg/min的腺苷剂量速率和35-350pg/kg/min的肌苷剂量速率的静脉内施用。在其他实施方案中，药物组合物包含腺香和肌苷，所述腺苷和肌苷的浓度适于10-30pg/kg/min的腺苷剂量速率和200-600吗/kg/min的肌苷剂量速率的静脉内施用。在各种实施方案中，药物组合物包含约0.5至4mg/ml的浓度的腺苷。在一些实施方案中，药物组合物包含浓度约0.3至约20mg/ml的肌苷。在另一个方面中，提供的单位剂量的药物组合物包含7-30ml为无菌无热原的适于胃肠外施用的液体药物组合物。在一些实施方案中，所述单位剂量包含约5ml、10ml或15ml。在其他的实施方案中，所述单位剂量包含约200-750ml。在另一个方面中，提供了通过胃肠外途径以单个"BIDOSINE"药物组合物或以单独的组合物共同输注腺苷和肌苷的方法。在一些实施方案中，例如，腺苷以35-70ng/kg/min输注，且肌苷以2:1至10:1的A:I比输注(例如，在一个系列的实施方案中，腺苷以50-70貼/kg/min输注，且肌苷以10-20)ig/kg/min)。本文所述的药物组合物可通过静脉内、心房内或动脉内连续输注而施用至哺乳动物。在一些实施方案中，将药物组合物施用至清醒的哺乳动物。在其他的实施方案中，将药物组合物施用至麻醉的经受手术的哺乳动物。在一些实施方案中，将药物组合物施用至人。用于静脉内施用至人的典型剂量包含10至100pg/kg/min的剂量的腺苦和10至600(ig/kg/min的剂量的肌苷。在各种实施方案中，施用至人的剂量包含35-70pg/kg/min的腺苷和35-350pg/kg/min的肌苷。在一些其他的实施方案中，腺苷以10-30吗/kg/min输注，且肌苷剂量为200-600吗/kg/min。在一些具体的实施方案中，腺苷以40-70pg/kg/min输注，而肌苷以10-20吗/kg/min输注。用于选择性动脉内施用至人(l分钟或更长)的典型剂量包含20至40吗/min的剂量的腺苷和20至100吗/mm的剂量的肌苷。在各种实施方案中，用于选择性动脉内输注的剂量包含30pg/min的腺苷和30至60貼/min的肌苷。在一个方面中，提供了用于药理学应激试验的改良的方法，所述改良包括共同施用腺苷和肌苷以诱发药理学应激，其中所述腺苷和肌苷以约1:1ii至约1:20的腺普:肌苦比施用。在一些实施方案中，包含腺香和肌苷的药物组合物作为应激物(stressor)施用，且心肌功能障碍的存在和/或严重性使用单光子发射计算机断层摄影术(SPECT)或正电子发射断层摄影术(PET)来评估。在其他方面中，腺香和肌苷的共同胃肠外施用(例如通过本文所述的药物组合物)用于治疗急性炎症和再灌注疾病，包括但不限于有或没有心肌梗塞的急性冠状动脉综合征、中风、肢体局部缺血、脊髓损伤或局部缺血、急性胰腺炎、肠系膜局部缺血。在一个系列的实施方案中，例如，提供了治疗局部缺血后心肌损伤的方法。该方法包括在急性心脏局部缺血事件期间或之后，施用腺香和肌苷的至少第一次共同胃肠外输注。所述腺苷:肌苷比为约1:1至约1:20，或相反地为约1:1至20:1。在一些实施方案中，所述急性局部缺血事件是心肌梗塞。在另一个方面中，提供了用于治疗中枢或外周神经系统的急性损伤的方法。所述方法包括在中枢或外周神经系统的急性损伤期间或之后，施用至少第一次共同胃肠外输注腺苷和肌苷。在各种实施方案中，腺苷和肌苷以约1:1至约1:20或约1:1至约20:1的A:I比输注。在其他的方面中，腺香和肌苷(例如通过本文所述的药物组合物)的共同胃肠外施用用于治疗急性肺阻力和/或用于增加左心室射血分数和/或用于增加心输出量。在其他的方面中，腺苷和肌苷的共同胃肠外施用(例如通过本文所述的BIDOSINE组合物的胃肠外施用)施用至麻醉的经受手术的患者以减少疼痛。在某些实施方案中，将药物组合物施用至麻醉的经受心脏或神经病学外科手术的患者以减少术后并发症(如心肌梗塞或认知损伤)的发生率。在一些实施方案中，将药物组合物施用至麻醉的经受移植外科手术的患者。在各种实施方案中，将腺苷和肌苷经鞘内或使用用于引入至脑室或小脑延髓池的适当的递送方法，共同直接施用至脑脊液。在一些实施方案中，将腺苷和肌苷以单个组合物施用。例如，在一些实施方案中，将组合物直接施用至脑液(cerebralfluid)以确保腺苷和肌苷的局部浓度在1pm至1mM范围内。4.附图简述图1示例了通过连续施用腺苷在大鼠中可达到的最大颈动脉血流量(CaBF)通过以0.1mg/kg/min输注腺苷给定的5分钟时段来获得。(当腺苷在实验或临床环境中用作单剂时给予最大效应所需的剂量在下文中称为所述环境的"腺苷最大值"或"腺苷最大剂量")。数据显示了在麻醉的大鼠中腺苷的增加剂量(0.01、0.03、0.1、0.3和1mg/kg/min)(每个剂量以5分钟连续i.v.输注施用)对CaBF(mL/min)的效应。数值表示为基线的百分比变化(平均土SEM,n=6)。图2A-2D显示了与以腺苷最大值的CaBF比较，由固定剂量的腺苷(通过连续输注施用0.05mg/kg/min，与半数腺苷最大值相等)与肌苷以不同腺苷:肌普(A:I)重量比的组合产生的对CaBF(mL/min)的增强效应。图3显示了半数腺苷最大值的腺苷与肌普以1:4的A:I重量比的组合对CaBF的增加的协同效应。数据显示了对CaBF(mL/min)的效应，即6分钟连续i.v.输注腺苷(0.05mg/kg/min)、肌苷(0.2mg/kg/min)和腺苷(0.05mg/kg/min)+肌苷(0.2mg/kg/min)对麻醉大鼠的CaBF(mL/min)的效应。数值表示为基线的变化百分比(平均土SEM，n=6)。该数据验证了与用腺苷半数最大值(0.05mg/kg/min)的单独腺香增力。7±4%相比较，以及与用0.2mg/kg/min的单独肌苷增加4±2%相比较，半数腺苷最大值(0.05mg/kg/min)的腺苷与0.2mg/kg/min的肌香的组合(1:4的A:I重量比)使CaBF增加13±6%。表示为基线的增加百分比，通过组合实现的CaBF的增加大于由以单剂形式的腺苦和肌苷引起的增加的总和。图4显示了当腺苷剂量减少至半数腺苷最大值以下时，仍可看到腺苷与肌苷组合的增强的效应。该数据显示了6分钟连续i.v.输注腺香(O.lmg/kg/min,腺苷最大值)、腺苷(0.03mg/kg/min)和腺苷(0.03mg/kg/min)+肌苷(0.25mg/kg/min)对麻醉大鼠的CaBF(mL/min)的效应。在此实施例中，与0.25mg/kg/min的月几苷组合的0.03mg/kg/min的腺苷剂量(1:8的A:I重量比)，观察到增强。甚至在该减少的腺苷剂量学下，对CaBF的效应通过肌苷明显增强。数值表示为相对基线变化的百分比(平均士SEM，n=6)。图5显示了单独肌苷对增加CaBF效果很差，甚至以10倍于单独腺苷是有效的剂量的剂量。数据显示了肌香增加的剂量(0.3、1、3、10和30mg/kg/min)对麻醉大鼠的CaBF(mL/min)的效应，每个剂量以5分钟i.v.输注施用。数值表示为相对基线的绝对变化，以mL/min表示(平均士SEM,n=6)。在0.3mg/kg/min下没有观察到反应。在1mg/kg/min(腺苷最大值的10倍)下观察到CaBF适度减少。在1至10mg/kg/min之间，CaBF急剧下降和剂量依赖性减少。图6A-6F描述了腺香和肌苷的组合对平均动脉血压和颈动脉血管阻力的效应。对于固定为半数腺苦最大值的腺香，当A:I比从1:1增加至1:3时，组合对动脉阻力(减少)和血压(减少)的效应渐进性增加，等于腺苷最大值对以1:3的A:I比的平均的效应。小组6A和6B分别显示了连续输注单独的腺苷(O.lmg/kg/min,腺苷最大值)、单独的腺苦(0.05mg/kg/min，半数腺苷最大值)和半数腺苦最大值的腺香+肌苷(0.05mg/kg/min，1:1的A:I比)对平均动乐;K血压和颈动乐:K血管阻力的效应。小组6C和6D分別显示了连续输注单独的腺苷(O.lmg/kg/min，腺苦最大值)、单独的腺苷(0.05mg/kg/min,半数腺苷最大值)和半数腺苷最大值的腺苷+肌苷(0.1mg/kg/min,1:2的A:I比)对平均动脉压和颈动脉血管阻力的效应。小组6E和6F显示了连续输注单独的腺苷(0.1mg/kg/min,腺苷最大值)、单独的腺苷(0.05mg/kg/min,半数腺苷最大值)和半数腺苷最大值的腺香+肌苷(0.15mg/kg/min，1:3的A:I比)对平均动脉压和颈动脉血管阻力的效应。图7A-7D示例了以1:4和更大的A:I比的半数腺苷最大值的腺苷对血压(减少)和动脉阻力(减少)的效应超过腺苷最大值的效应。图8A和8B显示了腺苷和BIDOSINE对羊的左心室舒张常数(Tau)的效应。Tau(左心室舒张常数)是舒张的参数。Tau比dP/dtmm具有较小的负载依赖性。该数据验证了腺苷最大值的腺苷和BIDOSINE(半数腺苷最大值14的腺苷，1:5的A:I比)都增加射血分数和刺激收缩功能，并且也提高舒张功能。该数据进一步显示了BIDOSINE比腺苷完成得略好。特别地，与基线比较，腺苷和BK)OSINE后的Tau显著更短(ANOVAp^.001)。通过腺苷和BIDOSINE的Tau的变化是可相当的。这表示两种产物都提高舒张。此结果与由dP/dWn描述的效应相反(参见表2),这种差异由dP/dtmm的负载依赖性引起，并且BIDOSINE比腺苷对负载条件具有更少的效应。图9A-9C显示了BIDOSINE1:5(半数腺苷最大值0.05mg/kg/min的腺苷，与0.25mg/kg/min的肌苷)加速了脊髓缺血的大鼠模型的行为恢复，其结杲等于多个试验的以0.1mg/kg/min的腺苷效应。在损伤后直至第10天，在不同组之间(n42/组)比较了粗略和细微的运动功能结果(BIDOSINE对生理盐水，双向ANOVApO.OOl)。试验小组9A(开放场地试验)；小组9B(斜面试验)；小组9C(网格导航)。图10A-10B显示了BIDOSINE1:5(半数腺香最大值0.05mg/kg/min的腺苷，与0.25mg/kg/min的肌苦)加速了脊髓缺血的大鼠模型的行为恢复，其中结果等于多个试验的以0.1mg/kg/min的腺苷效应。小组10A和10B显示了不同组之间的本体感受比较。图11显示了BIDOSINE1:5(半数腺苷最大值0.05mg/kg/min的腺苷，与0.25mg/kg/min的肌苷)加速了脊髓缺血的大鼠模型的行为恢复，其中结果等于多个试验的以0.1mg/kg/min的腺苷效应。数据比较膀胱功能(BIDOSINE对生理盐水，双向ANOVAp<0.001)。5.发明详述5.1综述如在下列实施例中阐述，目前已经发现，。票呤核香、肌苷充分增强腺苷在某种重量(或摩尔)比下的活性以允许腺苷以低剂量使用，来降低副作用并达到诊断和治疗血管舒张、心血管治疗、神经保护和治疗各种其他的急性病理学障碍的最大效力。在一些腺苷对肌苷(A:I)的比率下，看到加和效应。在其他A:I比下，看到协同效应。通过本7〉开，A:I比表示为重量比。例如，在单个组合的组合物中的相对浓度情况下或在单独施用的组合物中的相对浓度情况下，本文表示的A:I比指腺苷(mg):肌苷(mg)、或腺苷(mg/ml):肌苷(mg/ml)。在静脉内输注剂量情况下，本文表示的A:I比指腺苷(貼核苷/kg体重/min):肌苷(貼核苷/kg体重/min)。在动脉内的输注剂量(如冠状动脉内的输注剂量)情况下，本文表示的A:I比指腺苷Oig/min):肌苷(昭/min)。鉴于它们分子量接近(腺香为267.42,肌苷为268.27),故重量比与摩尔比^艮近似。在临床目的是冠状血管舒张或减少动脉阻力的实施方案中，通常在1:3至1:6之间的A:I比观察到最佳作用。在临床目的是实现细胞保护、维持细胞功能和/或诱导细胞修复的实施方案中，最佳A:I比的范围通常为1:1至10:1,或相反地为从1:15至1:20，且目前不太优选其他比率。无论什么临床目的，肌苷的共同施用允许腺苷以少于当腺苦以单剂形式使用时提供最大血管舒张或最佳细胞保护或细胞修复所需的剂量(以下称为"腺苷最大值"或"腺苷最大剂量")施用，同时保留最大效力。例如，在经受心脏试验的人患者中，用于静脉内施用的腺苷最大值为约140吗/kg/min持续6分钟；在某些实施方案中，肌苷以优选比率的共同施用允许腺苷以70貼/kg/min有效施用4分钟或甚至更少。例如，在急性冠状动脉综合征中，已经研究显示以70pg/kg/min静脉内施用单剂形式的腺苷3小时比以50pg/kg/mm静脉内输注3小时更有效。为了避免副作用，不测试高于70吗/kg/min的剂量。在某些实施方案中，共同施用以优选比率的肌苷允许腺苷以50吗/kg/min有效地施用3小时或更少。由于肌苷有极其好的耐受性，以及腺苷副作用为剂量依赖性的，所以在各种实施方案中，本发明的方法和组合物减少在目前实践中观察到的有害的副作用。再灌注疾病，用于检测心肌功能障碍的存在和/或评价其严重性，用于在所选的患病患者中减轻肺动脉阻力和/或增加左心室射血分数和/或增加心输用于改善将千细胞递送至器官。如本文所用，"急性炎症疾病"是指在最近无论什么病因(局部缺血、感染、中毒、创伤、发炎等)而受伤的任何组织或器官，其中急性炎症过程和局部血流量的减少发生，任选伴有细胞毒性物质的释放。再灌注疾病是指使血流恢复至局部缺血组织而经常引起的蔓延超过仅有局部缺血观察到的损伤的事件。"急性炎症和再灌注疾病"包括诸如心肌梗塞、在外科手术中的脑缺血或脊髓缺血、中风、严重肢体局部缺血、脊髓损伤、急性胰腺炎、肾缺血、肠系膜局部缺血或移植手术期间的任何再灌注器官的病症。5.2药物组合物在第一个方面中，本发明提供了包含腺苷和肌苷的药物组合物。这种组合物(不论绝对量或相对量的腺苷和肌苷)在本发明中表示为BIDOSINE。在典型的实施方案中，药物组合物包含以约1:1至约1:20的腺普:肌苷(A:I)重量比的腺苷和肌苷。在某些实施方案中，所迷比率为约1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、甚至1:20,和1:1至1:20之间允许的非整数比率。在某些目前优选的实施方案中，组合物包含以约1:1至1:10、优选约1:3至约1:6的比率的腺苷和肌苷。对下面进一步描述的某些临床方法来说，组合物通常包含以约1:4或1:5的A:I重量比的l^苷和月几苷。在某些实施方案中，药物组合物包含以约20:1至约1:1的A:I重量比的腺苷和肌苷。在某些实施方案中，所述比率为约20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、甚至1:1，和20:1至1:1之间允许的非整数比率。在目前优选的实施方案中，所述A:I比为约2:1至10:1。在某些实施方案中，药物组合物适于静脉内、心房内或动脉内输注。所述组合物例如可以是以无菌无热原的液体组合物的形式。在典型的液体实施方案中，腺苷的浓度为至少约0.5mg/ml，经常至少17约1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、甚至4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml或更高,以及允许的中间、非整数值。在某些实施方案中，腺苷以约3mg/ml的浓度存在。在各种实施方案中，肌香的浓度为至少约0.3mg/ml，且可以有益地如20mg/ml—样高。在某些实施方案中，浓度可以为至少约0.3mg/ml、0.4mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml或更高,包括7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、11mg/ml、12mg/ml、13mg/ml、14mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17mg/ml、18mg/ml、19mg/ml或20mg/ml,以及允许的中间、非整数值。在某些实施方案中，组合物包含约3mg/ml的浓度的腺苷、和约9-18mg/ml的浓度的肌苷。在一个实施方案中，例如组合物包含约3mg/ml的浓度的腺苷和约15mg/ml的浓度的肌苷。在另一个实施方案中，组合物包含约3mg/ml的浓度的腺芬和约12mg/ml的浓度的肌苦。在其他的实施方案中，组合物是千燥的，并适于在输注前通过加入无菌液体(如生理盐水)重建(reconstitution)。有益地，组合物包含以适于允许在密封容器中重建至上述的腺苷和肌苷浓度的量的腺苷和肌苷。不论液体或干燥物，组合物可进一步包含如在本领域公知的适于静脉内、心房内和动脉内施用的载体和赋形剂。参见Remington:TheScienceandPracticeofPharmacv(雷明顿药学的科学和方法),第21版(2005),LippincottWilliams&Wilkins(ISBN:0781746736),其通过引用并入本文。组合物可进一步包含另外的活性剂，且在一些实施方案中，可进一步包含造影剂(包括超声和MRI造影剂)。对于下迷的各种方法中的静脉内输注，腺苷和肌苷的剂量有益地根据哺乳动物受治疗者(如人患者)的重量来确定，并且每种活性剂(腺苷和肌苷)的剂量有益地表示为以pg/kg/min给定的输注速率。因此，在用于连续静脉内输注的实施方案中，腺普通常以一定浓度或一定重量存在于药物组合物中，所述浓度或重量允许腺苦以约10Hg/kg/min至约100(ig/kg/min的速率llr注。在这些实施方案的若干个中，腺苷以一定量存在，所述量允许以至少约10jig/kg/min、至少约15jig/kg/min、至少约20^ig/kg/min、至少约25jxg/kg/min、至少约30(ig/kg/min、至少约35jxg/kg/min、至少约40[ig/kg/min、至少约45ng/kg/min、至少约50^g/kg/min、至少约55pg/kg/min、至少约60|Lig/kg/min、至少约65jig/kg/min、至少约70jxg/kg/min、至少约75jxg/kg/min、至少约80jxg/kg/min、至少约85貼/kg/min、至少约9。)ig/kg/niin、至少约95^g/kg/min和至少约100pg/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以一定量存在于组合物中，所述量允许以不超过约100ng/kg/min、不超过约95pg/kg/min、不超过约90jxg/kg/min、不超过约85pg/kg/min、不超过约80^g/kg/min、不超过约75吗/kg/min、不超过约70pg/kg/min、不超过约65吗/kg/min、不超过约60)ig/kg/min、不超过约55吗/kg/min、不超过约50pg/kg/min、不超过约45pg/kg/min、不超过约40pg/kg/min、不超过约35^g/kg/min、不超过约30pg/kg/min、不超过约25jxg/kg/min、不超过约20pg/kg/min、不超过约15pg/kg/min和不超过约10pg/kg/min的速率输注。在用于动脉内输注(如冠状动脉内输注或心房内输注)的实施方案中，剂量有益地不依赖受治疗者的体型(size)或循环容积而设定。因此，对于动脉内(如冠状动脉内)输注，剂量有益地表示为以每种活性剂(腺香和肌苷)的pg/min给定的输注速率。在这些实施方案的若干个中，腺苷以一定量存在于组合物中，所述量允许以至少约10pg/min、至少约15pg/min、至少约20pg/min、至少约25pg/min、至少约30pg/min、至少约35pg/min、至少约40pg/min、甚至至少约45pg/min的速率动脉内输注。在各种实施方案中，腺苷以一定量存在于组合物中，所述量允许腺苷以不超过约45^g/min、不超过约40pg/min、不超过约35pg/min、不超过约30pg/min、不超过约25^ig/min、不超过约20吗/min、不超过约15jxg/min、甚至不超过10pg/min的速率输注。在用于连续静脉内输注的实施方案中，肌苷通常以一定浓度或以一定重量存在于药物组合物中，所述浓度或重量允许肌香以约10吗/kg/min至600貼/kg/min之间的速率输注。在这些实施方案的若干个中，肌苦以一定量存在，所述量允许以至少约10pg/kg/min、至少约20pg/kg/min、至少约30pg/kg/min、至少约40jig/kg/min、至少约50pg/kg/min、至少约60pg/kg/min、至少约70(xg/kg/min、至少约80pg/kg/min、至少约90pg/kg/min、至少约100pg/kg/min、至少约110pg/kg/min、至少约120pg/kg/min、至少约130pg/kg/min、至少约140<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>(ig/kg/min和至少约600pg/kg/min的速率^r注。在一些实施方案中，肌苷以一定量存在于组合物中，所述量允许以不超过约600ng/kg/min、不超过约590jxg/kg/min、不超过约580pg/kg/mm、不超过约570昭/kg/min、不超过约560貼/kg/min、不超过约550吗/kg/min、不超过约540將/kg/min、不超过约530pg/kg/min、不超过约520ng/kg/min、不超过约510(ig/kg/min、不超过约500pg/kg/min、不超过约490pg/kg/min、不超过约480吗/kg/min、不超过约470pg/kg/min、不超过约460pg/kg/min、不超过约450吗/kg/min、不超过约440jxg/kg/min、不超过约430pg/kg/min、不超过约420貼/kg/mm、不超过约410昭/kg/min、不超过约400昭/kg/min、不超过约390貼/kg/mm、不超过约380貼/kg/nmi、不超过约370吗/kg/min、不超过约360貼/kg/min、不超过约350吗/kg/min、不超过约345吗/kg/min、不超过约340昭/kg/rmn、不超过约335^ig/kg/min、不超过约330吗/kg/min、不超过约325昭/kg/mni、不超过约320^g/kg/min、不超过约315吗/kg/mm、不超过约310貼/kg/imn、不超过约305^ig/kg/mni、不超过约300吗/kg/mm、不超过约295昭/kg/imn、不超过约290pg/kg/mm、不超过约285^ig/kg/min、不超过约280吗/kg/min、不超过约275吗/kg/min、不超过约270^kg/rmn、不超过约265昭/kg/nmi、不超过约260^ig/kg/min、不超过约255pg/kg/min、不超过约250吗/kg/mui、不超过约245^kg/mitr、不超过约240貼/kg/mim不超过约235昭/kg/min、不超过约230昭/kg/皿n、不超过约225昭/kg/min、不超过约220吗/kg/min、不超过约215ng/kg/min、不超过约210吗/kg/imn、不超过约200昭/kg/mm、不超过约195ng/kg/mm、不超过约190叫/kg/imn、不超过约185昭/kg/mm、不超过约180昭/kg/mm、不超过约175ng/kg/mm、不超过约170吗/kg/rmn、不超过约165ng/kg/min、不超过约160貼/kg/imn、不超过约155昭/kg/min、不超过约150pg/kg/mm、不超过约145昭/kg/min、不超过约140吗/kg/rmn、不超过约135tig/kg/min、不超过约130^ig/kg/min、不超过约125昭/kg/mm、不超过约120ng/kg/min、不超过约115pg/kg/mku不超过约110吗/kg/rmn、不超过约105吗/kg/min、不超过约则昭/kg/min、不超过约95ng/kg/mm、不超过约90吗/kg/min、不超过约85吗/kg/min、不超过约80昭/kg/imn、不超过约75吗/kg/min、不超过约70吗/kg/min、不超过约65貼/kg/imn、不超过约60^g/kg/min、不超过约55ng/kg/mm、不超过约50昭/kg/mm、不超过约45^ig/kg/mui、不超过约40pg/kg/mm、不超过约35^g/kg/imn和不超过约30ng/kg/mki、不超过约25吗/kg/mm、不超过约20昭/kg/min、不超过约15貼/kg/min、甚至不超过约10昭/kg/min的速率静脉内输注。在用于动脉内或心房内输注的药物組合物的实施方案中，肌苷通常以一定浓度或一定重量存在，所述浓度或重量允许肌苷以约20^/mm至100Hg/min之间的速率專#注。在这些实施方案的若千个中，肌苷以一定量存在，所述量允许以至少约20pg/min、至少约30pg/min、至少约40pg/min、至少约50pg/min、至少约60ng/min、至少约70|ig/min、至少约80ng/min、至少约90pg/min和至少约100pg/min的速率输注。在各种实施方案中，肌香以一定量存在于组合物中，所述量允许肌苷以不超过约100pg/min、不超过约95pg/min、不超过约90|ig/min、不超过约85貼/min、不超过约80貼/min、不超过约75吗/min、不超过约70jxg/min、不超过约65pig/min、不超过约60pg/min、不超过约55pg/min、不超过约50]Lig/min、不超过约45吗/min、不超过约40貼/min、不超过约35pg/min、不超过约30^g/mm、不超过约25pg/min、不超过约20pg/min的速率输注。5.3单位剂型和试剂盒本发明的药物组合物有益地以适于各种下文进一步描述的临床方法的单位剂型包装。在其中药物组合物是以无菌无热原的适于胃肠外输注的液体形式的实施方案中，组合物可以例如以5-500ml的体积包装。用于短静脉内输注(例如用于下文进一步描述的心脏灌注成像)的方便单位剂型可包含5至15ml,通常7、10、12或15ml。用于更长的静脉内输注(例如用于对再灌注损伤的治疗或预防)的实施方案可包含250、300、350、400、450、500ml或更多。在某些实施方案中，单位剂型包含在总共10ml中的30mg腺苷和90mg、120mg、150mg或180mg肌苷以及允许的中间量肌苷。在各种实施方案中，单位剂型包含在总共250ml中的750mg腺苷和75、750、1,500或2,250mg肌苷以及允许的中间量肌苷。用于本发明的单位剂型的容器通常适于与标准静脉内输注装置使用。在无热原的适于胃肠外输注的液体中组合，腺苷最大溶解度为约4mg/ml，而肌苷为20mg/ml。接近这些最大值的一个或两个的浓度对用于长时间输注的单位剂型是方便的，因为高浓度的核苷活性剂减少了需要输注的体积。典型的实施方案包括，例如包含1,000mg腺苷和100mg、1,000mg、2，000mg、甚至3,000mg、4,000mg、5,000mg、甚至6,000mg肌苷以及允许的中间量肌苷的250ml容器(管形瓶等)。即使没有任选的防腐剂，本发明的无菌包装的组合物可在室温下稳定至少一至两年。在另一个方面中，提供了试剂盒。在一个系列的实施方案中，所述试剂盒包含本发明的药物组合物的多个单位剂量。在一些实施方案中，所述多个单位剂量具有相同的组合物。在其他的实施方案中，单位剂量中的所述组合物在腺苷和/或肌苷的量和/或浓度、或在它们中间的比率不同。在某些实施方案中，试剂盒进一步包含适于实现静脉内输注的输注装置。在其他的实施方案中，试剂盒包含至少一种适于胃肠外施用的单位剂量的腺苦和至少一种单独包装的适于胃肠外施用的单位剂量的肌苷。有益地，试剂盒包含与多个单位剂量的肌香包装的多个单位剂量的腺苷(每个具有固定量或固定浓度的腺苷)，至少多个单位剂量的肌香在肌普的量或浓度方面不同，允许容易选择的期望的A:I比。某些实施方案中，试剂盒进一步包含适于实现静脉内输注的输注装置。5.4心脏停4粵液在另一个方面中，本发明提供了包含以1:1至1:20的A:I比的腺苷和月几香的心脏停搏液。在各种实施方案中，心脏停搏液包含至少约1:1、1:2、1'.3、1:4、甚至至少约1:5的A:I比的腺苷和肌普。在某些实施方案中，所述A:I比有益地为至少约1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。在某些实施方案中，所述心脏停搏液包含0.5至3mg/ml的腺香和0.5至15mg/ml的肌苷。在一些实施方案中，心脏停搏液不包含另外的心脏停搏活性剂，例如钾。在其他的实施方案中，腺苷和肌苷用于补充已有的心脏停搏液。5.5方法5.5.1施用在本发明的方法中，通过进行一定量的胃肠外输注，以A:I比共同施用腺苷和肌苷，并且持续一段足以实现期望的治疗或诊断效果的时间。在一些实施方案中，腺苷和肌苷可以以单独的组合物施用。当该A:I比在手术期间需要或期望来滴定或调整时，可优选这种实施方案。在这些实施方案中，包含腺苷和肌苷的组合物可输注至不同的血管部位，或通过相同的部位。通过相同部位的输注有益地可通过使用单个输注装置施用两种组合物来实现。在其他的实施方案中，腺香和肌苷以具有确定A:I比的单个组合物来施用，如上述的药物组合物。有益地使用可程序控制的注射器泵或微泵(这在临床实践中是典型的)如下文进一步所述，施用的途径根据期望的临床效果来选择。在某些实施方案中，药物组合物通过静脉内输注来施用。在其他的实施方案中，组合物通过动脉内(如冠状动脉内)输注来施用。在又一个实施方案中，组合物通过心房内输注来施用。在某些实施方案中，组合物经鞘内输注。在又一个实施方案中，组合物以灌注液的形式施用。在典型的实施方案中，除了用于治疗室上性心动过速，不支持推注施用，并且腺苷和肌苷在至少1分钟、通常至少2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、6分钟的时段内输注，而对于不同的实施方案，输注甚至至少10分钟、20分钟或30分钟。在某些实施方案中，输注腺苷和肌普长达30分钟、40分钟、50分钟、60分钟、甚至120分钟或更多。本文所用的"连续输注"指在至少2分钟的时段内输注。在各种实施方案中，第一次胃肠外输注后，可以以相同或不同剂量的一种或两种活性剂进行至少第二次胃肠外输注。在某些实施方案中，该方法包括至少第一次共同胃肠外输注以约1:1至约1:20的腺苷:肌苷(A:I)重量比的腺苷和肌苷。在某些实施方案中，所述比率为约l:l、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、甚至1:20，以及1:1至1:20之间允许的非整数比率。在某些目前优选的实施方案中，该方法包括共同输注以约1:2至1:10、优选约1:3至约1:6的比率的腺苷和肌苷。对某些下文进一步描述的方法来说，实施方案有益地包括共同胃肠外输注以约1:4或1:5的A:I重量比的腺苷和肌苷。在某些实施方案中，该方法包含共同胃肠外输注以约20:1至约1:1的A:I重量比的腺苷和肌苦。在某些实施方案中，所述比率为约20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、甚至1:1，以及20:1至1:1之间允许的非整数比率。在这些实施方案的若干个中，所述A:I比为约2:1至10:1。在一些实施方案中，腺苷通过以10貼/kg/min至100pg/kg/min之间的输注速率的静脉内输注来施用。因此，在一些实施方案中，腺苷以至少约10pg/kg/min、至少约15ng/kg/min、至少约20pg/kg/min、至少约25jig/kg/min、至少约30|xg/kg/min、至少约35ng/kg/min、至少约40pg/kg/min、至少约45pg/kg/min、至少约50pg/kg/min、至少约55pg/kg/min、至少约60fig/kg/min、至少约65pg/kg/min、至少约70pg/kg/min、至少约75^ig/kg/min、至少约80pg/kg/min、至少约85^ig/kg/min、至少约90pg/kg/min、至少约95jig/kg/min和至少约100pg/kg/min的速率输注。在各种实施方案中，腺苷以不超过约100^g/kg/min、不超过约95吗/kg/min、不超过约90pg/kg/min、不超过约85pg/kg/min、不超过约80吗/kg/min、不超过约75ng/kg/min、不超过约70pg/kg/min、不超过约65昭/kg/min、不超过约60pg/kg/min、不超过约55jig/kg/min、不超过约50(ig/kg/min、不超过约45pg/kg/min、不超过约40pg/kg/min、不超过约35pg/kg/min、不超过约30吗/kg/min、不超过约25pg/kg/min、不超过约20昭/kg/min、不超过约15貼/kg/min和不超过约10^g/kg/min的速率静脉内输注。在一些实施方案中，腺苷通过以20至45吗/min的输注速率的动脉内输注(如冠状动脉内输注)来施用。因此，在一些实施方案中，腺苷以至少约20pg/min、至少约25[ig/min、至少约30[ig/min、至少约35pg/min、至少约40|xg/min和至少约45ng/min的速率输注。在各种实施方案中，腺苷以不超过约45昭/min、不超过约40貼/min、不超过约35pg/min、不超过约30貼/min、不超过约25^g/min、甚至不超过约20jig/min的输注速率动脉内输注。在一些实施方案中，肌苷通过以10pg/kg/min至600pg/kg/min之间的输注速率的静脉内输注来施用。因此，在一些实施方案中，肌苷以至少约10(xg/kg/min、至少约20pg/kg/min、至少约30pg/kg/min、至少约40pg/kg/min、至少约50jig/kg/min、至少约60ng/kg/min、至少约70pg/kg/min、至少约80ng/kg/min、至少约90pg/kg/min、至少约100pg/kg/min、至少约110pg/kg/min、至少约120pg/kg/min、至少约130(ig/kg/min、至少约140jxg/kg/min、至少约150jxg/kg/min、至少约160fig/kg/min、至少约170jxg/kg/min、至少约180(xg/kg/min、至少约190jxg/kg/min、至少约200jig/kg/min和至少约210jig/kg/min、至少约220(ig/kg/min、至少约230(ig/kg/min、至少约240貼/kg/min、至少约250fig/kg/min、至少约260jxg/kg/min、至少约270jxg/kg/min、至少约280jxg/kg/min、至少约290(xg/kg/min、至少约300jig/kg/min、至少约310吗/kg/min、至少约320jxg/kg/min、至少约330jig/kg/min、至少约340(ig/kg/min、至少约350(xg/kg/min、至少约360jig/kg/min、至少约370fig/kg/min、至少约380jig/kg/min、至少约390[ig/kg/min、至少约400jxg/kg/min、至少约410吗/kg/min、至少约420(ig/kg/min、至少约430jig/kg/min、至少约440(xg/kg/min、至少约450貼/kg/min、至少约460jxg/kg/min、至少约470(xg/kg/min、至少约480貼/kg/min、至少约490jxg/kg/min、至少约500吗/kg/min、至少约510[ig/kg/min、至少约520Hg/kg/min、至少约530jig/kg/min、至少约540(xg/kg/min、至少约550jig/kg/min、至少约560(ig/kg/min、至少约570Hg/kg/min、至少约580jxg/kg/min、至少约590jig/kg/min、至少约600fig/kg/min的速率静脉内输注。在一些实施方案中，肌苷以不超过约600吗/kg/min、不超过约590吗/kg/min、不超过约580pg/kg/min、不超过约570吗/kg/min、不超过约560吗/kg/min、不超过约550ng/kg/min、不超过约540pg/kg/min、不超过约530吗/kg/min、不超过约520pg/kg/min、不超过约510pg/kg/min、不超过约500ng/kg/min、不超过约490吗/kg/min、不超过约480ng/kg/min、不超过约470ng/kg/min、不超过约460(ig/kg/min、不超过约450吗/kg/imn、不超过约440吗/kg/mm、不超过约430叫/kg/mm、不超过约420吗/kg/min、不超过约41G吗/kg/mm、不超过约400吗/kg/min、不超过约390貼/kg/min、不超过约380吗/kg/mm、不超过约370ng/kg/min、不超过约360ng/kg/min、不超过约350吗/kg/mm、不超过约345ng/kg/mm、不超过约340^g^g/min、不超过335ng/kg/min、不超过约330—kg/min、不超过约325昭/kg/mki、不超过约320昭/kg/mm、不超过约315ng/kgAnin、不超过约310pg/kg/min、不超过约305吗/kg/mm不超过约300)ig/kg/mni、不超过约295^ig/kg/mm、不超过约290吗/kg/mm、不超过约285^g/kg/min、不超过约280貼/kg/mni、不超过约275昭/kg/min、不超过约270^kg/min、不超过约265^/kg/min、不超过约260昭/kg/mm、不超过约255ng/kg/min、不超过约250貼/kg/mm、不超过约245昭/kg/mm、不超过约240吗/kg/min、不超过约235ng/kg/imn、不超过约230吗/kg/mm、不超过约225^kg/mm、不超过约220pg/kg/nun、不超过约215昭/kg/rmn、不超过约210^ig/kg/mni、不超过约205n^kg/mm、不超过约200昭/kg/mm、不超过约195吗/kg/mm、不超过约190^/kg/nim、不超过约185吗/kg/min、不超过约，^kg/min、不超过约175^kg/min、不超过约170吗/kg/min、不超过约165^ig/kg/min、不超过约160吗/kg/tmn、不超过约155昭/kg/min、不超过约150吗/kg/min、不超过约145^ig^g/min、不超过约140pg/kg/min、不超过约135jig/kg/min、不超过约130^g/kg/min、不超过约125將/kg/imn、不超过约120吗/kg/min、不超过约115吗/kg/min、不超过约110吗/kg/imn、不超过约105^/kg/mm、不超过约100^ig/kg/mui、不超过约95ng/kg/mm、不超过约90^ig/kg/min、不超过约85ng/kg/min、不超过约80pg/kg/mm、不超过约75pg/kg/mm、不超过约70pg/kg/min、不超过约65ng/kg/min、不超过约60pg/kg/min、不超过约55^ig/kg/min、不超过约50^ig/kg/niin、不超过约45^ig/kg/min、不超过约40吗/kg/miri、不超过约35昭/kg/min、不超过约30ng/kg/mim不超过25貼/kg/min、不超过20貼/kg/min、不超过15pg/kg/mm和不超过10吗/kg/min的速率静脉内输注。在一些实施方案中，肌苷通过以20pg/min至100pg/min之间的输注速率的动脉内输注来施用。因此，在一些实施方案中，肌香以至少约20(xg/min、至少约30^g/min、至少约40pg/min、至少约50pg/min、至少约60叱/min、至少约70pg/min、至少约80昭/min、至少约90pg/min、甚至至少约100pg/min的速率动脉内输注。在各种实施方案中，肌香以不超过约100(ig/min、不超过约95pg/min、不超过约90pg/min、不超过约85pg/min、不超过约80貼/min、不超过约75昭/min、不超过约70pg/min、不超过约65jig/min、不超过约60pg/min、不超过约55昭/min、不超过约50jxg/min、不超过约45jxg/min、不超过约40昭/min、不超过约35吗/min、不超过约30昭/min、不超过约25pg/min或不超过约20jig/min的输注速率动脉内输注。5.5.2药理学应激试验在一个方面中，本发明提供了药理学应激试验的改良方法，所述改良包括共同施用为药理学应激物的腺苷和肌苷。通常，腺苷和肌苷以约1:1至约1:20的腺苷:肌苷比施用。在某些实施方案中，腺苷:肌苷比为至少约1:3、1:4、1:5或更多。在各种实施方案中，腺苷:肌苷比为至少约1:6、1:7、1:8、1:9、1:10或甚至如至少约1:20—样高。在一些实施方案中，腺普:肌苷比为不超过约1:20、通常不超过约1:15、不超过约I:IO，并且可以为不超过约1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4或甚至不超过约1:3。腺苷和肌苷以足以引起冠状动脉的血管舒张的剂量输注。在某些实施方案中，腺苷和肌苷以足以引起冠状动脉的最大血管舒张的剂量输注。在典型的实施方案中，腺苷和肌苷以减少一种或多种当腺香以140吗/kg/min用作单剂应激物时常见的副作用的严重性或消除前迷副作用的剂量输注，所述副作用例如低血压；发红；胸部不适；呼吸困难或迫使深呼吸；头痛；喉、颈或颌不适；肠胃不适；轻浮/眩晕；上肢不适。在某些实施方案中，腺苷和肌苦通过静脉内输注来施用。在典型的实施方案中，腺苷以少于约140ng/kg/min的速率连续静脉内输注。在各种实施方案中，腺苷以少于约130pg/kg/min、120pg/kg/min、110jxg/kg/min、100jxg/kg/min、甚至少于约90貼/kg/min或少于约80pg/kg/min的速率输注。在某些实施方案中，腺苷以至少约30pg/kg/min、至少约40pg/kg/min、至少约50ng/kg/min、甚至至少约60或70照/kg/min的速率输注。在某些实施方案中，腺苷以约70pg/kg/min的输注速率施用，且肌苷以至少约1:3、至少约1:4或至少约1:5的腺苷:肌苷比的速率输注。在某些实施方案中，腺苷以约70pg/kg/min的速率施用，且肌香以约280pg/kg/min的速率输注。在其他的实施方案中，腺苷以50-70pg/kg/min的速率输注，且肌苷以150-420吗/kg/min(1:3至1:6的A:I比)。方便地，如上文所述，腺苷和肌苷可通过连续外周静脉内输注包含腺苷和肌苷的本发明的药物组合物来施用。与使用以单剂形式的腺苷相比较，BIDOSINE的效力允许更短的输注时间。在一些实施方案中，输注腺苷和肌苷达至少6分钟的时段。在其他的实施方案中，连续输注腺苷和肌苷达短于6分钟的时段(包括输注5分钟、4分钟、3分钟以及甚至2分钟)。短输注时间表明减少副作用的频率和强度的优势。因此，本文描述的药理学应激试验方法进一步包括在输注期间从质量或数量上评价一种或多种心功能的参数的步骤。在各种实施方案中，有益地测量的功能包括心肌灌注的成像、心室功能的成像或测量和测量冠状动脉血流速度。在各种实施方案中，心功能的评价包括使用一种或多种选自由下列组成的组的^支术心电描记术、回波描记术(M型，二维和三维)、回波多普勒、心脏成像、包括平面(常规)闪烁照相术、单光子发射计算机断层摄影术(SPECT)、动态单光子发射计算机断层摄影术(D-SPECTTMCardiacScan)、正电子发射断层摄影术(PET)、放射性核素血管造影术(首过效应和平衡研究，利用例如锝99m-标记的红血细胞)、核磁共振(NMR)成像、灌注对比超声心动描记术、数字减影血管造影术(DSA)和超高速x-射线计算机断层摄影术(CINECT)。SPECT研究可使用已知适于这类研究的任何同位素来完成，如铊-201、司他比锝、替曲膦(tetrofosmine)。PET研究可使用已知适于这类研究的任何同位素来完成，如铷-82、氮-13、氟-18、碳-11、硼-11和氧-15。通常，同位素在输注腺苷和肌苷期间注射，并在输注结束后成像开始。5.5.3治疗心肌再灌注损伤如在下文实施例3中例证，当在急性冠状动脉机能不全的实验动物模型的心脏缺血损伤后不久施用时，共同胃肠外输注腺香和肌苷保持射血分数。因此，在另一个方面中，本发明提供了治疗局部缺血后心肌损伤(如再灌注损伤)的方法。治疗包括预防，并包括局部缺血后再灌注损伤的严重性、大d、和/或症状的下降以及心功能的恢复。该方法包括施用腺苷和肌苦的至少第一次共同胃肠外输注，所述腺苷和月/L苦在急性局部缺血事件期间或之后以约1:1至约1:20的A:I比输注。急性局部缺血事件(incident)例如可以是心肌梗塞。在典型的实施方案中，静脉内输注腺苷和肌苷。在一些实施方案中，腺苷和肌苷以包含两种核普的单个组合物(如上述的药物组合物)输注。在各种实施方案中，腺苷以少于约140pg/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以少于130ng/kg/min、少于120^tg/kg/min、少于110昭/kg/min、甚至少于100pg/kg/min的速率输注。在某些实施方案中，腺苷以少于90[xg/kg/min、甚至少于约80吗/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以50-70吗/kg/min(包括在其中间的非整数值)的速率输注。在典型的实施方案中，A:I比为1:1至1:20之间。在某些实施方案中，该比率为至少1:1、至少1:2、至少1:3、至少1:4、甚至至少1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，该比率为少于约1:20、1:19、1:18、1:17、1:16或1:15。在某些实施方案中，腺苷以50-70貼/kg/min的速率输注，且肌苷以50-210pg/kg/min的速率有益地输注(l:l至1:3的A:I比)。在其他的实施方案中，腺苷以20-30貼/kg/min的速率输注，且肌普以200-600昭/kg/min的速率输注(I:IO至1:20的A:I比)。第一次胃肠外输注优选在一检测到局部缺血就马上开始，并可以迟至局部缺血损伤后24-48小时有益地启动。在某些实施方案中，该方法进一步包含至少一次后续胃肠外输注以1:1至1:20的A:I比的腺苷和肌香。在一些实施方案中，一次或多次后续输注与第一次输注的腺苷和肌苷输注速率和A:I比相同。在其他的实施方案中，一次或多次后续输注与第一次输注的一次或多次腺苷输注速率、肌苷输注速率或A:I比不同。在各种实施方案中，第一次和任选后续输注的每个持续至少约10分钟的时段。在典型的实施方案中，每次输注为至少约20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、甚至至少约60分钟、120分钟或甚至至少约180分钟的时段。有益地，每次输注持续时间为约60-120分钟。在某些实施方案中，在^r测到局部缺血后，每天一次、一天两次、一天三次、一天甚至四次或更多次施用输注，通常持续至少1天、2天、3天、甚至5天之多。有益地，在患者住院期间可施用输注。可以通过心脏病学领域技术人员借助独立滴定腺苷和/或肌苷输注速率来容易地测定用于任何个体患者的腺苷和肌苦的优选的剂量，以实现一个或多个血液动力学参数(如冠状动脉血流量、心输出量、心肌灌注或左心室射血分数)的期望水平。此外或作为替代，可以先滴定腺苷输注速率至最大剂量，所述最大剂量不会引起显著的低血压；发红；胸部不适；呼吸困难或迫使深呼吸；头痛；喉、颈或颌不适；肠胃不适；轻浮/眩晕；或上肢不适，然后肌苷剂量单独滴定以实现期望的血液动力学参数，如期望的左心室收缩压、平均动脉血压、心输出量、冠状动脉血流量、心肌灌注或左心室射血分数。5.5.4增加心肌微循环因此，在另一个方面中，本发明提供了增加例如急性心肌梗塞、慢性局部缺血和/或充血性心力衰竭后的心肌微循环的方法，所述方法包括在有或没有另外的治疗剂下，通过胃肠外输注共同施用腺苷和肌香。该方法包括对具有至少一个心肌缺血的区域(包括一个或多个心月几梗塞的区域)的患者施用腺苷和肌苷的至少第一次胃肠外输注，所述腺苷和肌苷以约1:1至约1:20的A:I比输注。在典型的实施方案中，静脉内输注腺苷和肌苷。在一些实施方案中，腺苷和肌苷以包含两种核苦的单个组合物(如上述的药物组合物)输注。在各种实施方案中，腺苷以少于约140^g/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以少于130pg/kg/min、少于120ng/kg/min、少于110昭/kg/min、甚至少于100pg/kg/min的速率输注。在某些实施方案中，腺苷以少于90吗/kg/min、甚至少于约80pg/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以50-70ng/kg/min(包括在其中间的非整数值)的速率输注。在典型的实施方案中，A:I比为1:1至l:20之间。在某些实施方案中，该比率为至少1:2、至少1:3、至少1:4、甚至至少1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，该比率为少于约1:20、1:19、1:18、1:17、1:16或1:15。在某些实施方案中，腺苷以50-70昭/kg/min的速率输注，且肌苷以50-210吗/kg/min的速率有益地输注(l:l至1:3的A:I比)。在其他的实施方案中，腺香以20-30pg/kg/min的速率输注，且月几苷以200-600pg/kg/min的速率输注(I:IO至1:20的A:I比)。在替代实施方案中，腺苷和肌苷通过直接冠状动脉内输注施用。在某些这样的实施方案中，腺苷以20-40貼/min输注，且肌苷以20-100pg/min有益地输注。笫一次胃肠外输注在一检测到局部缺血就马上开始，但是也可以在急性局部缺血损伤解决后启动。在某些实施方案中，该方法进一步包括至少一次后续胃肠外输注以1:1至1:20的A:I比的腺苷和肌苷。在一些实施方案中，一种或多种后续输注与第一次输注的腺苷和肌苷输注速率和A:I比相同。在其他的实施方案中，一种或多种后续输注与第一次输注的一次或多次腺苷输注速率、肌苷输注速率或A:I比不同。在各种实施方案中，第一次和任选后续输注的每个为至少约5分钟的时段。在典型的实施方案中，每次输注为至少约IO分钟、至少约20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、60分钟、甚至至少约120分钟的时段。有益地，每次输注持续时间为约30-60分钟。在某些实施方案中，每天一次、一天两次、一天三次、一天甚至四次或更多次施用输注，通常持续至少1天、2天、3天、甚至5天之多。可以通过心脏病学领域技术人员借助独立滴定腺苷和/或肌苷输注速率容易地测定用于任何个体患者的腺苷和肌苷的优选的剂量，来实现一个或多个血液动力学参数(如冠状动脉血流量、心输出量、心肌灌注或左心室射血分数)的期望水平。此外或作为替代，可以先滴定腺苷输注速率至最大剂量，所述最大剂量不会引起显著的低血压；发红；胸部不适；呼吸困难或迫使深呼吸；头痛；喉、颈或颌不适；肠胃不适；轻浮/眩暈；或上肢不适，然后肌香剂量单独滴定以实现期望的血液动力学参数，如期望的左心室收缩压、平均动脉血压、心输出量、冠状动乐;K血流量、心l几灌注或左心室射血分数。5.5.5治疗神经系统损伤如在下文实施例中验证，共同胃肠外施用腺苷和肌苷可加快急性脊髓缺血损伤的标准动物模型的行为恢复。因此，在另一个方面中，本发明提供了通过共同胃肠外施用以约1:1至约1:5或约1:1至10:1的A:I比的腺苷和肌苷来治疗中枢或外周神经系统的损伤的方法。在各种实施方案中，所述损伤为急性和自发的，例如血管起源的急性损伤，如中风或急性脊髓损伤。在某些实施方案中，所述损伤为急性和医院来源的，例如从神经外科产生，包括例如脊柱外科，如用于减轻脊髓或脊才艮压缩的脊柱外科；和脑外科，如用于脑动脉瘤的外科。在一些实施方案中，非急性损伤是可检测的，且该方法预防地或辅助地用于已知与不论是否通过局部缺血或栓塞诱发的神经系统损伤相关的外科或医疗环境，其包括例如颈动脉外科；颈动脉内膜剥脱术(carotidendarterectomy);心外科，包括但并不限于具有心肺分流的心脏外科；包括减轻脊髓/脊根压缩的脊柱外科；包括脑动脉瘤外科的脑神经外科手术。33在典型的实施方案中，静脉内输注腺苦和肌苷。在一些实施方案中，腺香和肌苦以包含两种核苦的单个组合物(如上述的药物组合物)输注。在各种实施方案中，腺苷以少于约140貼/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以少于130吗/kg/min、少于120pg/kg/min、少于110昭/kg/min、甚至少于100pg/kg/min的速率输注。在某些实施方案中，腺香以少于90pg/kg/min、甚至少于约80吗/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以35-70ng/kg/min(包括在其中间的非整数值)的速率输注。在典型的实施方案中，A:I比在1:1至l:5之间。在某些实施方案中，该比率为至少1:2、至少1:3、至少1:4、甚至至少1:5。在一些实施方案中，相反地，该比率为约10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1或2:1，以及允许的非整数比率。在某些实施方案中，腺苷以腺苷35-70吗/kg/min的速率输注，且肌苷以10-210吗/kg/min的速率输注(1:3的最大A:I比)。在其他的实施方案中，腺苷以50-70貼/kg/min输注，且肌苷以10至35pg/kg/min输注。在某些术中的实施方案中，腺苷在外科手术期间以70-100吗/kg/min静脉内施用，且以10-500jig/kg/min共同输注肌普。在急性损伤的情况下，第一次胃肠外输注优选在一检测到损伤就开始，优选不迟于损伤发病后6小时。因此，在一些实施方案中，第一次胃肠外输注在损伤后1小时、损伤后2小时、损伤后3小时、损伤后4小时、甚至损伤后5或6小时内启动，尽管第一次输注的稍后启动在某些实施方案(包括损伤正进行的那些)中使用。在治疗是对手术的预防或辅助的实施方案中，第一次胃肠外输注在外科手术期间有益地开始。在各种手术的实施方案中，此外或作为替代，在重症监护病房期间，通过外科手术结束后不久的胃肠外输注来施用腺普和肌苷。在某些术后的实施方案中，腺苷以不超过约70吗/kg/min的速率静脉内输注，在一些实施方案中不超过约5(Hig/kg/min，并且肌普以不超过约210[ig/kg/min和有时不超过约10叫/kg/min的输注速率静脉内输注。在某些术后的实施方案中，A:I比范围为从1:1至7:1或从10:1至4:1。在某些实施方案中，该方法进一步包括至少一次后续胃肠外输注以1:1至1:20的A:I比的腺苷和肌苦。在一些实施方案中，一次或多次后续输注与第一次输注的腺苷和肌苦输注速率和A:I比相同。在其他的实施方案中，一次或多次后续输注与第一次输注的一次或多次腺苷输注速率、肌苷输注速率或A:I比不同。在各种实施方案中，第一次和任选后续输注的每个为至少约10分钟的时段。在典型的实施方案中，每次输注为至少约20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、60分钟、甚至至少约120分钟和180分钟的时段。有益地，每次输注持续时间为约60-120分钟。在某些实施方案中，在损伤或检测到局部缺血后，每天一次、一天两次、一天三次、一天甚至四次或更多次、一天最多12次施用输注，通常持续至少l天、2天、3天、甚至5天或10天之多。在一些实施方案中，在损伤3天、4天、5天后有益地中断输注。有益地，在患者住院期间可施用输注。在其他的实施方案中，腺香和肌苷以约1:1至约1:20的A:I比通过鞘内输注来共同施用。在其他的实施方案中，施用是通过输注进入脑脊液。在某些这类实施方案中，滴定腺苷和肌苷的输注速率以提供腺苷在5至25,的损伤部位的局部浓度，以及肌苷在25至50,的损伤部位的局部浓度。可以通过临床领域技术人员借助独立滴定腺苷和/或肌苦输注速率上升至不会相反地影响全身血压和/或脑血流量的水平，容易地测定用于任何个体患者的腺苷和肌苷的优选的剂量。例如，在通过术后胃肠外输注以共同施用腺苷和肌苷至神经外科患者的实施方案中，可以滴定腺苷和/或肌苷的剂量以使全身血压维持在手术前稳态的20%内。因为腺苷可以以不引起显著的患者不适的剂量有效地使用，所以本文提供的方法可在清醒的患者中使用。5.5.6治疗急性肺血管阻力在另一个方面中，提供了用于通过至少第一次共同胃肠外施用以约1:1至约1:20的A:I比的腺苷和肌苷治疗急性肺血管阻力的方法，所述急性肺血管阻力包括在快速和严重的右心室功能障碍期间的急性肺阻力和与慢性肺疾病和呼吸性窘迫综合征相关的急性虚脱。在典型的实施方案中，静脉内输注腺苷和肌苷。在其他的实施方案中，动脉内输注腺香和肌苷，如直接进入肺动脉。在一些实施方案中，腺苷和月几苷以包含两种核苷的单个组合物(如上述的药物组合物)输注。在各种实施方案中，腺苷以少于约140pg/kg/min的速率静脉内输注。在一些实施方案中，腺苷以少于130貼/kg/min、少于120貼/kg/min、少于110pg/kg/min、甚至少于100pg/kg/min的速率输注。在某些实施方案中，腺苷以少于90路/kg/min、甚至少于约80昭/kg/min的速率输注。在一些实施方案中，腺苷以30-70昭/kg/min(包括在其中间的非整数值)的速率输注。在典型的实施方案中，A:I比为1:1至l:20之间。在某些实施方案中，该比率为至少1:2、至少1:3、至少1:4、甚至至少1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，该比率为少于约1:20、1:19、1:18、1:17、1:16或1:15。在某些静脉内输注实施方案中，腺苷以30貼/kg/min的速率静脉内输注，且肌普以90-150吗/kg/min的速率输注(1:3至1:5的A:I比)。在另一个实施方案中，腺苷以50^g/kg/min静脉内输注，且肌香以250昭/kg/min共同输注(1:5的摩尔比)。在又一个实施方案中，腺苷和肌苷都以50^ig/kg/minllT注(l:l的A:I比)。第一次胃肠外输注优选在一检测到增加的肺血管阻力就开始。在某些实施方案中，该方法进一步包括至少一次后续胃肠外输注以1:1至1:20的A:I比的腺苷和肌苷。在一些实施方案中，一次或多次后续输注与第一次输注的腺苷和肌苷输注速率和A:I比相同。在其他的实施方案中，一次或多次后续输注与第一次输注的一次或多次腺苷输注速率、肌苷输注速率或A:I比不同。5.5.7心脏再血管化(revascularization)手术的辅助在另一个方面中，提供了用于在有或没有支架放置下改善经皮腔内冠状动脉血管成形术(PTCA)和/或冠状动脉血栓溶解操作(包括在患有急性冠状动脉综合征的患者中进行的操作)的临床结果的方法。在各种实施方案中，腺香和肌苷以1:1至l:20的A:I比(包括1:1至1:10的比率)输注。在其他的实施方案中，该比率有益地是7:1至5:1。在各种实施方案中，腺苷在PTCA和/或冠状动脉血栓溶解期间有益地在术中和任选术后施用，通过以35-70jig/kg/min静脉内输注，而肌苷以35-70貼/kg/min(A:I比1:1)。在其他的实施方案中，腺苷以35pg/kg/min输注，且月几香以35pg/kg/min输注(l:l的A:I),在又一个实施方案中，腺苷以50貼/kg/min输注，且肌苷以50pg/kg/min输注。在一些实施方案中，腺普以20-30pg/kg/min输注，且肌苷以200-600jng/kg/min共同输注。在又一个实施方案中，腺苷以50-70吗/kg/min静脉内施用，且肌苷以10吗/kg/min(7:l至5:1的A:I比)。在替代实施方案中，腺苷和肌苷通过直接冠状动脉内输注来施用。在某些这样的实施方案中，腺苷以20-40昭/min输注，且肌苷以20-100pg/min有益地输注。在典型的实施方案中，施用在几分钟前开始，并在再血管化操作期间继续，且可继续持续几小时。在某些实施方案中，血栓溶解剂(如链激酶、尿激酶和组织型纤溶酶原激活剂)与一种或两种腺苷和肌苷共施用。在某些实施方案中，腺普和肌苷以单个组合物(如上述的药物组合物)与在第二组合物中共同施用或在其中混合的一种或多种血栓溶解剂共同施用。5.5.8i曾力口心丰^r出量在一个方面中，通常在期望这种增加实现而没有增加心脏做功的医疗条件下，共同输注腺苷和肌苷以增加心输出量。在一些实施方案中，例如，在有或没有进一步施用多巴胺下共同施用腺苷和肌苷以治疗急性心力衰竭(心源性休克)。在各种实施方案中，腺苷以35-50pg/kg/min的速率静脉内输注，且肌苷以35-150pg/kg/min的速率(l:l至1:3的A:I比)。在一些需要长输注时间(l至几小时)来稳定心功能和减少因腺苷蓄积的副作用危险的实施方案中，可以优选1:10至1:20的A:I比。例如，在某些实施方案中，腺苷以20-30pg/kg/min静脉内输注，且肌苷以200-600pg/kg/min静脉内输注。5.5.9术中和术后的止痛术(analgesia)在另一个方面中，提供了通过共同胃肠外输注以约1:1至约1:20的比率的腺苷和肌苷减少术中和术后疼痛的方法。在某些实施方案中，腺普以70-100pg/kg/min静脉内输注，且肌苦以70-210jig/kg/min。在另一个方面中，共同胃肠外施用以约1:1至约1:20的比率、或在其他的实施方案中以7:1至5:1的比率的腺苷和肌苦，用来减少经受冠状动脉4荅桥手术的患者中的术后并发症。在某些这类实施方案中，腺苷通过以70-100pg/kg/min静脉内输注来施用，且肌苷以10-500pg/kg/min组合。在一些实施方案中，进一步施用腺苷和肌苷通过在夹紧期间(clampingperiod)将核苷加入心脏停搏液(如上述)来实现。6.实施例实施例1:肌苷增强腺苷对大鼠动脉血流量的效应进行研究以确定是否以及在什么剂量下组合的肌苷可有效增强腺苷对动脉血流量的效应，以允许腺苷以当腺苷以单剂形式施用时实现最大效应所需的剂量("腺苷最大值"或"腺芬最大剂量")的半数施用具有最大效力。对称重为250-300g的7周龄雄性Wistar大鼠进行研究。用仲丁辟u巴比妥(Inactin)100mg/kgi.p麻醉大鼠。优选仲丁硫巴比妥而不是其他麻醉剂，是因为其对血压影响适度。将肝素-填充的(在生理盐水中100IU/ml)导管引入至左颈总动脉和左颈静脉，用于分别测量血压和药物施用。将流量^:测器插入在右颈动脉的附近，用于测量颈动脉血流量(CaBF)。手术操作完成后，观察到15分钟的平衡阶段以获得稳定的血液动力学条件。在第一系列实验中，以单剂形式施用腺苷以识别提供颈动脉血流量的最大增加的剂量("腺苷最大值")。在这个实验中，不同浓度的腺苷通过颈静脉导管连续输注5分钟，并共同测量颈动脉血流量。结果在图1中总结。数据显示在麻醉的大鼠中腺苷增加的剂量(O.Ol、0.03、0.1、0.3和1mg/kg/min)(每个剂量以5分钟连续i.v.输注施用)对CaBF(mL/min)的效应。数值表示为相对基线CaBF的百分比变化(平均士SEM,n=6)。该数据验证了在此系统中以单剂形式的提供最大CaBF的腺苷剂量为0.1mg/kg/min。进行第二系列的实验以评价肌香是否能增强以半数腺苷最大值连续静乐:K内输注腺香对CaBF的效应。在每个实验中，评价下列对CaBF的效应(i)单剂形式的腺香以腺苷最大值(0.1mg/kg/min)连续输注5分钟；(ii)单剂形式的腺苷以半数腺苷最大值(0.05mg/kg/min)连续输注5分钟；和(iii)包含固定剂量半数腺苷最大值(0.05mg/kg/min)的腺苦的组合物与肌苦组合连续输注5分钟。在单独的试验中，肌苷以一定量包括在组合的组合物("BIDOSINE")中，所述量是实现以0.1mg/kg/min(1:2的A:I重量比，图2A)、0.15mg/kg/min(1:3的A:I重量比，图2B)、0.2mg/kg/min(1:4的A:I重量比，图2C)和0.25mg/kg/min(1:5的A:I重量比，图2D)输注必需的。如在图2A-2D所示，肌苷以1:4和1:5的A:I比增强腺苷增加CaBF的能力。图3显示了半数腺苷最大值的腺苷与肌香以1:4的A:I重量比的组合对CaBF的增加的协同效应。数据显示了对CaBF(mL/min)的效应，即6分钟连续i.v.输注腺苷(0.05mg/kg/min)、肌苷(0.2mg/kg/min)和腺苷(0.05mg/kg/min)+肌苷(0.2mg/kg/min)对麻醉大鼠的CaBF(mL/min)的效应。数值表示为相对基线的变化百分比(平均士SEM，n=6)。数据验证了与用腺苷半数最大值(0.05mg/kg/min)的单独腺苷增力口7±4%相比较，以及与用0.2mg/kg/min的单独肌苷增加4±2%相比较，半数腺苷最大值(0.05mg/kg/min)的腺苷与0.2mg/kg/min的肌苷的组合(1:4的A:I重量比)使CaBF增加13±6%。表示为相对基线的增加百分比，通过组合实现的CaBF的增加大于由以单剂形式的腺苷和肌苦引起的增加的总和。在另一系列的实验中，腺苷的固定剂量从0.05mg/kg/min的半数腺苦最大值略减少至0.03mg/kg/min,且肌苷剂量略增加至0.25mg/kg/min，以提供1:8比的A:I重量比。结果如图4中所示。图4显示了当腺苷剂量减少至半数腺苷最大值以下时，仍可看到腺香与肌苷组合的增强的效应。数据显示了6分钟连续i.v.输注腺苷(O.lmg/kg/min，腺苷最大值)、腺苷(0.03mg/kg/min)和腺芬(0.03mg/kg/min)+肌苷(0.25mg/kg/min)对麻醉大鼠的CaBF(mL/min)的效应。在此实施例中，与0.25mg/kg/min的肌苷组合的0.03mg/kg/min的腺苦剂量(1:8的A:I重量比)，观察到增强。甚至在减少的腺苷剂量学下，对CaBF的效应通过肌苷明显增强。数值表示为相对基线的变化百分比(平均士SEM，n=6)。单独肌苷不增加此系统的CaBF。图5显示了单独肌普对增加CaBF无效，甚至以10倍于单独腺苷是有效的剂量的剂量。数据显示了肌苷增加的剂量(0.3、1、3、10和30mg/kg/min)对麻醉大鼠的CaBF(mL/min)的效应，每个剂量以5分钟i.v.输注施用。数值表示为相对于基线的绝对变化，以mL/min表示(平均土SEM，n=6)。在0.3mg/kg/min下没有观察到反应。在1mg/kg/min(腺苷最大值的10倍)下观察到CaBF适度减少。在1至10mg/kg/min之间，CaBF急剧下降和剂量依赖性减少。在另一个系列的实验中，研究了腺苷和腺苷:肌苷组合(BIDOSINE)对平均动脉血压和颈动脉血管阻力的效应。结果在图6A-6F和7A-7D所示。图6A-6F描述了腺苷和肌普的组合对平均动脉血压和颈动脉血管阻力的效应。对于固定在半数腺苷最大值的腺香，当A:I比从1:1增加至1:3时，组合对动脉阻力(减少)和血压(减少)的效应渐进性增加，等于腺苷最大值对以1:3的A:I比的平均的效应。小组6A和6B分别显示了连续输注单独的腺苷(O.lmg/kg/min,腺苷最大值)、单独的腺苷(0.05mg/kg/min,半数腺苷最大值)和半数腺苷最大值的腺苷+肌苷(0.05mg/kg/min，1:1的A:I比)对平均动脉血压和颈动脉血管阻力的效应。小组6C和6D分别显示了连续输注单独的腺苷(O.lmg/kg/min，腺苷最大值)、单独的腺苷(0.05mg/kg/min，半数腺苷最大值)和半数腺苷最大值的腺苷+肌苷(0.1mg/kg/min，1:2的A:I比)对平均动脉压和颈动脉血管阻力的效应。小组6E和6F显示了连续输注单独的腺苷(0.1mg/kg/min,腺苷最大值)、单独的腺苷(0.05mg/kg/min,半数腺苷最大值)和半数腺苷最大值的腺苷+肌苷(0.15mg/kg/min,1:3的A:I比)对平均动脉压和颈动脉血管阻力的效应。图7A-7D进一步展示了以1:4以上的A:I比的半数腺苷最大值的腺苷对血压(减少)和动脉阻力(减少)的效应超过以其最大有效剂量的单独腺苷的效应。与图6A-6F、图7A-7D中的数据一起验证了当腺苦:肌苷比从1:1增长至1:5时对血压的剂量相关的效应。在这些研究中观察到的血压的下降主要是由于伴随的血管阻力的降低。然而，在各种A:I组合比下心率略微下降，这也可有助于减压。尽管在这些研究中观察到心率降低和肌苷浓度增加的趋势统计上无显著性(参见下文表l)，但是应注意到，已知麻醉可抑制心脏的交感神经刺激。因此，在警觉(即清醒的)的动物(包括患者)中观察到类似的心率趋势是明显不可能的。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>概括来说，这些实验验证了通过连续静脉内输注与腺苷共同施用的肌苷能增强某种腺苷的生理效应，允许腺苷以作为单剂所需剂量的半数施用，从而实现颈动脉血流量的最大增加。在某些重量比下，肌香与腺苷协同地作用。它也可得出结论(i)单独的肌苷效果很差；(ii)腺苷和肌苷的组合可调节动脉阻力。实施例2:与减少剂量的腺苦组合的肌苷提高羊的冠状动脉血流量和心输出量且副作用更小在各种条件下为有创血液动力学测量开发的试验性羊模型用于研究肌苷对连续腺苷输注的增强和协同效应。该模型在Tanoue等，"Ischemicpreconditioningreducesunloadedmyocardialoxygenconsumptioninanin-vivosheepmodel(局部缺血预调节减少了体内羊模型的去负载心肌氧消耗)"，Can/ZowwcM/ari^sean:/255:633-641(2002)和Xia等，"Remotepreconditioninglessensthedeteriorationofpulmonaryfunctionafterrepeatedcoronaryarteryocclusionandreperfusion(远程子贞调节减轻了在复发的冠状动脉闭塞和再灌注后肺功能的恶化)"，C""ad/:a"Jcwma/0/爿Me对/jewa50:481-488(2003)中描述，其全部公开内容通过引用并入本文。对全部12只动物进行了研究。简短的说，对羊预先给药、麻醉、插管、通风(用正压通风)。接着进行心电图(ECG)。将颈动脉用外科手术棵露以放置用于动脉血压(ABP)测量的动脉管道。进行颈静脉的棵露以放置用于测量中心静脉压(CVP)和流体和药物施用的两个或三个腔中心静脉管道。在第三或第四肋间隙中进行小左开胸术，并且将心脏悬于心嚢支架中。将流量探测器(超音速探测器)放置在肺动脉的附近和左冠状动脉回旋支的附近。将导管插入肺动脉中以测定肺动脉压。此外，9只动物接受放置在左心室和右心室中的传导导管(conductancecatheter),通过腔静l永和/或肺动脉和/或主动脉的闭塞和/或压缩来制造负栽前-负载后的变化以便研究心肌收缩性。使用彩色微球注射技术，还进行局部血流量测量。每只动物用作其自身对照。测量的顺序总是相同的1)在基线条件下；2)在腺苷下；3)b分钟稳定，然后在基线条件下新测量；4)在bidosine下测量。从第一组三只动物实验中，确定200昭/kg/min的腺香是最佳的单剂腺苷剂量，即确保最高冠状动脉血流量的剂量(腺香最大值)。因此，所有更多的实验将此剂量与包含100pg/kg/min(即半数腺苷最大值)腺苷+500吗/kg/min肌苷(1:5的A:I比)的BIDOSINE制剂比较。结果在表2中给出。表2羊的心血液动力学数据<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>就冠状动l^血流量和心输出量而言，BIDOSINE显示了至少相等的效力，且副作用更少。具体地，观察到当以单剂形式施用腺苷时，冠状动脉血流量从起初基线的50.7cms/sec上升至129,5cms/sec,当连续i.v.输注BIDOSINE时，从第二基线的57.8至145.5cms/sec。BIDOSINE的冠状动脉输出量(5072.9)与以单剂形式的腺苷(4943)—样高，均高于基线。使用腺苷的收缩压、舒张压和平均动脉血压比使用BIDOSINE更显著地降低。使用腺苦的左心室收缩压比使用BIDOSINE更显著地降低。中心静脉压显示没有差异。心率略微增加，但是对于BIDOSINE,更显著地增加。dP/dtmax显示没有差异。对于腺苷，dP/dtmin比bidosine更显著地恶化。关于舒张压和平均肺动脉压，注意到没有差异。还研究了局部血流量以及冠状动脉血流量分布至心肌不同部分的潜在的变化。这通过使用彩色微球技术来完成，基本上如在Muller等，"Developmentalchangesincerebralautoregulatorycapacityinthefetalsheepparietalcortex(胎羊顶叶皮质的脑自动调整能力的发育变化),"J尸/2，Zo/.539(Pt3):957-67(2002);Miller等，"Physiologicalevidenceforarteriovenousanastomosesintheuterinecirculationoflate-pregnantewes(B免孕其月母羊的子宫循环中动静脉吻合的生理证据),"C//".Exp.尸/aw^co/.尸/ywo/.25(2):92-8(1998);Herijgers等，"Changesinorganperfusionafterbraindeathintheratanditsrelationtocirculatingcatecholamines(大鼠月亩死亡后器官;翟注的变化及其与循环儿茶酚胺类的关系),"rra似p/朋雄/朋62:330-335(1996);和Wouters等，"Ischemiceventcharacteristicsdeterminetheextentofmyocardialstunninginconsciousdogs(局部缺血事寸牛4争4正确定清醒狗的心肌顿抑的程度)，"Sos/ci^s.C"rafe/.91(2):140-6(1996)中描述，其全部公开内容通过引用并入本文。简要地，在基线处和在腺苷或BIDOSINE施用5分钟后注射彩色微球。尸检时，将组织消化，并且测定组织样品的每克湿重的彩色微球数。通过将这些数与以预定速率从主动脉抽取的对照样品的微球数比较，我们能定量当注射微球时组织样品的绝对流速。通过关于血液动力学参数的相同方法学，进行统计分析。微球实验的结果在表3中列出。数值以ml/min/g组织表示(湿重)丄V-左心室；RA^右心室；end(^心内膜一半；印i二心外膜一半。如在表2中所示，数字反映实验条件的顺序，如下1)在基线条件下；2)在腺苷下；3)15分钟稳定，然后在基线条件下新测量；4)在bidosine下测量。<table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>总之，腺苷和BIDOSINE1:5对冠状动脉血管舒张具有相同的效应同时提高心血液动力学。然而，BIDOSINE提供了这些副作用更少、血压下降显著更少的效应。此外，以单剂形式的腺苷和BIDOSINE有利地影响左心室舒张。图8A和8B显示了在此实验模型中腺苷和BIDOSINE对左心室舒张常数(Tau)的效应。Tau(左心室舒张常数)是用于舒张的参数。Tau比dP/dt腿具有更小的负载依赖性。该数据验证了腺苷最大值的腺苷和BIDOSINE(半数腺苷最大值的腺苷，1:5的A:I比)都增加射血分数和刺激收缩功能，并且也提高舒张功能。该数据进一步显示了BIDOSINE比腺苷完成得略好。特别地，与基线比较，腺普和BIDOSINE后的Tau显著更短(ANOVAp=0.001)。通过腺苷和BIDOSINE的Tau的变化是相当的。这表示两种产品都提高舒张。此结果与由dP/dtmin描述的效应相反(参见表2),这种差异由dP/dtmm的负载依赖性引起，并且BIDOSINE比腺香对负载条件具有更少的效应。实施例3:BIDOSINE预防大鼠的心肌缺血后的再灌注损伤该研究的目的是评价腺苷和腺苷(以半数腺苷最大值)与肌苷的组合(以l:5的A:I重量比)(BIDOSINEl:5)减少或预防再灌注损伤的效应。在这些实验中，在建立大鼠的左心肌缺血后评价连续输注腺普和BIDOSINE1:5对左心室射血分数(EF)的效应。主要目的是证实BIDOSINE比以其最大有效静脉内剂量的单剂形式的腺苷能减少再灌注损伤和具有相等或更大的效力。用氯胺酮(Ketalar)50mg/kg和乙酰丙。秦(Vetranquil)2mg/kg的混合物使用肌内注射将全部24只雄性Wistar大鼠麻醉。经口插管后，大鼠用空气机械地通风(HarvardRodentVentilatormodel683)，并将它们的左侧上方固定。通过第三肋间间隙进行左开胸术，并且小心地切割肌肉和心嚢。使用放大镜，将LAD(左前降支的)冠状动脉局部化，并且在与LAD的分叉正好邻近处用6-0非可吸收的聚丙烯(Prolene)缝线结扎。闭塞35分钟后，解开冠状动脉缝线。在随后的60分钟内，使用电输注泵通过股静脉连续施用试剂。给予大鼠(i)0.1mg/kg/min(腺苷最大值)的腺苷、(ii)0.05mg/kg/min(半数腺苷最大值)的腺苷加上0.25mg/kg/min的肌苷(1:5的A:I重量比)；或生理盐水。用6-0非可吸收的聚丙烯缝线闭合肋间间隔，并且用5-0可吸收Vicryl缝线闭合皮肤。在术后第2天(基线)和术后第30天，进行回波心动描记术研究。表4显示了腺苷、BIDOSINE和对照(生理盐水)组在术后第2天(基线)和术后第30天的舒张末期容积(EDV)、收缩末期容积(ESV)和射血分数(EF)。表4对左心室射血分数的效应<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>该数据验证了当局部缺血损伤后以其最大有效剂量直接施用时，连续静脉内输注腺普维持射血分数(射血分数59%)。数据进一步验证了连续输注其最大有效剂量的半数的腺苷与肌苷以1:5A:I重量比的组合提供相当的保护(射血分数60%)。在第30天时对照组射血分数仅为46%。在局部缺血的45分钟期间并在增加另一个BIDOSINE实验组的情况下，重复实验。用于这个增加组的BIDOSINE组合物包含以0.01mg/kg/min(1/10其单剂最大有效剂量)施用的腺普与以0.20mg/kg/min施用的肌香(1:20的A:I重量比)。这项正进行的研究的预试结果(每组11=5)在下面表5中给出，报告局部缺血后30天的结果。尽管还未达到统计显著性，但是令人惊奇地，明显的趋势是便于BIDOSINE1:20超过单独的腺苷以及BIDOSINE1:5(0.05mg/kg/min的腺香加上0.25mg/kg/min的月/l苷)，其中左心室EF(LVEF)分別为69%、45%和34%。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>实施例4:BIDOSINE对大鼠脊髓损伤的效应急性脊髓损伤(SCI)后微脉管系统的早期研究已经证实长期残疾的主要原因之一是微循环的继发性障碍。本研究的目的是评价30分钟和60分钟连续静脉内(i.v.)输注BIDOSINE1:5——0.05mg/kg/min(半数腺苷最大值)的腺苷与0.25mg/kg/min的肌苷的组合(1:5的A:I重量比)潜在的神经保护效应。将BIDOSINE施用与损伤后通过连续i.v.输注30至60分钟的腺苷施用(0.1mg/kg/min)比较(每组n-13)。作为对照，接受60分钟IV灌注生理盐水溶液的动物组(11=11)在损伤后30分钟开始。该化合物的潜在神经保护效应通过进行不同的行为研究来评价。在这些实验中，选择局部缺血的光血栓形成模型(photothromboticmodel)优于闭塞模型(主动脉夹)，因为它更好地复制了局部缺血损伤的病理生理学。所述光血栓形成模型具有以下优势(i)导致持久的局灶性缺血，其具有更完美模仿临床上观察到的病理生理学条件的再灌注过程，和(ii)影响神经组织的受控体积。而且，损伤的部位可限于精确的区域(三至四个条件等色)。所述损伤使用通过在所选脊推部位上的纤维光学传送的氙灯束来建立。辐射在脊推板的半透明的背面上进行。绿光(560nm)诱发先前注射的存在于脊髓微脉管系统的染料(玫瑰红)的激发。所得的光化学反应释放损害髓内血管的内皮和诱发微脉管系统的血小板聚集和血栓形成的非自由基反应氧簇。结果在图9-11中总结，这证实损伤后第10天(D10)对于所有试验的功能，BIDOSINE1:5等于腺苦，并且对于膀胱功能的恢复则好于腺苷。此外，使用BIDOSINE在D4至D10的恢复速率更快。BIDOSINE加速了脊髓缺血的大鼠模型的行为恢复，其结果等于多个试验的以0.1mg/kg/min的腺苷效应。显示了损伤后第IO天的结果。图9A-9C显示了开放场地试验(图9A)、斜面试验(图9B)和网格导航(图9C)的结果。与对照比较，腺苷和BIDOSINE粗略和细微的运动功能结果验证了优于对照的统计上显著的提高(t^l2/组)(BIDOSINE对生理盐水，双向ANOVAp〈0.001)。图10A-10B显示了BIDOSINE1:5(半数腺苷最大值0.05mg/kg/min的腺苷，与0.25mg/kg/min的肌苷)加快了本体感受的恢复，其结果等于以0.1mg/kg/min的腺香效应。图11显示了与膀胱功能比较的数据(BIDOSINE对生理盐水，双向ANOVAp〈0.001)验证了BIDOSINE加速了脊髓损伤后膀胱功能的恢复。该数据验证了连续i.v.输注以腺苷最大剂量的单独的腺苷提供了最好的效力，直到第4天。然而，行为随访一贯显示了与其他组比较，60分钟BIDOSINE组的运动、感觉和反射得分提高更快。因此，在第10天(D10)，此组动物达到完全与用腺苷治疗获得的得分相当的得分。恢复的时间过程表明了损伤后用BIDOSINE治疗60分钟可提高其余的组织的功能性，并50且导致行为恢复(特别对于膀胱功能)的更快的速率。此外，运动和感觉得分曲线的分析表明了在更长时间的随访时间下，损伤后用BTDOSTNE治疗60分钟可比用腺苷的早期治疗更有益。为了一切目的，本申请引用的所有出版物、专利、专利申请和其他文件以全部内容通过引用并入本文，其程度如同为了一切目的，每个单独出版物、专利、专利申请或其他文件均独立地通过引用并入。尽管已经示例并描述了各种具体实施方案，但是应理解，在不偏离本发明的精神和范围下可进行各种变化。权利要求1.一种药物组合物，其包含以约1:1至约1:20的腺苷:肌苷重量比率的腺苷和肌苷。2.—种药物组合物，其包含以约1:1至约20:1的腺苷:肌苷重量比率的腺苷和肌苷。3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述比率为约l:l。4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述比率为约1:3至约1:6。5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中所述比率为约1:4。6.根据权利要求4所述的药物组合物，其中所述比率为约1:5。7.根据权利要求2所述的药物组合物，其中所述比率为约10:1。8.根据权利要求2所述的药物组合物，其中所述比率为约7:1至约4:1。9.根据权利要求l-8任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物适于静步K内、心房内或动月永内llr注。10.根据权利要求9所述的药物组合物，其中腺香和肌苷以适于10-100吗/kg/min的腺苷剂量速率和10-2000pg/kg/min的肌苦剂量速率静脉内施用的浓度存在。11.根据权利要求10所述的药物组合物，其中腺苷和肌苷以适于35-70吗/kg/min的腺苷剂量速率和35-350吗/kg/min的肌苷剂量速率静脉内施用的浓度存在。12.根据权利要求10所述的药物组合物，其包含适于10-30jig/kg/min的腺苷剂量速率和200-600ng/kg/min的肌苷剂量速率静脉内施用的浓度的腺苷和肌苦。13.根据权利要求10所述的药物组合物，其包含适于50-70貼/kg/min的腺苷剂量速率和10-35pg/kg/min的肌苷剂量速率静脉内施用的浓度的腺苷和肌苷。14.根据权利要求9所述的药物组合物，其包含适于20-45貼/min的腺苷剂量速率和40-100pg/min的肌苷剂量速率动脉内施用的浓度的腺苷和肌香。15.根据权利要求l-14任一项所述的药物组合物，其中腺苷的浓度为约0.5至4mg/ml。16.根据权利要求15所述的药物组合物，其中腺苷的浓度为约0.5mg/ml。17.根据权利要求15所述的药物组合物，其中腺苷的浓度为约1mg/ml。18.根据权利要求15所述的药物组合物，其中腺苷的浓度为约3mg/ml。19.根据权利要求15所述的药物组合物，其中腺香的浓度为约4mg/ml。20.根据权利要求15所述的药物组合物，其中肌香的浓度为约0.3至约20mg/ml。21.根据权利要求20所迷的药物组合物，其中肌普的浓度为约0.3至约0.4mg/ml。22.根据权利要求20所述的药物组合物，其中肌苷的浓度为约3至约4mg/ml。23.根据权利要求20所迷的药物组合物，其中肌苦的浓度为约6至约8mg/ml。24.根据权利要求20所述的药物组合物，其中肌苷的浓度为约9mg/ml。25.根据权利要求20所述的药物组合物，其中肌苷的浓度为约10mg/ml。26.根据权利要求20所述的药物组合物，其中肌苦的浓度为约12mg/ml。27.根据权利要求20所述的药物组合物，其中肌香的浓度为约15mg/ml。28.根据权利要求20所述的药物组合物，其中肌苷的浓度为约18至约20mg/ml。29.—种单位剂量，其包含约7-30ml的根据权利要求l、4-6、9-11、15、18、19和24-28任一项所述的组合物，其中所述组合物为无菌、无热原的液体。30.根据权利要求29所述的单位剂量，其包含约5ml。31.根据权利要求29所述的单位剂量，其包含约10ml。32.根据权利要求29所述的单位剂量，其包含约15ml。33.—种单位剂量，其包含约200-750ml的根据权利要求1-3、7-13、15-28任一项所述的组合物，其中所述组合物为无菌、无热原的液体。34.根据权利要求33所述的单位剂量，其包含约250ml无菌液体。35.根据权利要求33所述的单位剂量，其包含约500ml无菌液体。36.—种药理学应激试验的方法，其改良包括共同施用腺苷和肌苷以诱发药理学应激，其中腺苦和肌香以约1:1至约1:20的腺苷:肌苷比施用。37.根据权利要求36所述的方法，其中腺苷和肌苷通过静脉内输注来施用。38.根据权利要求37所述的方法，其中腺苷和肌香通过静脉内输注组合物来施用，所述组合物包含以约1:1至约1:20的腺苷:肌苷比的腺苷和肌苷。39.根据权利要求38所述的方法，其中腺苷:肌苷比为约1:4。40.根据权利要求38所述的方法，其中腺苷:肌苷比为约1:5。41.根据权利要求36-40任一项所述的方法，其中腺苷以少于约140|ig/kg/min输注。42.根据权利要求41所述的方法，其中腺苷以不超过约70昭/kg/min输注。43.根据权利要求36-42任一项所述的方法，其中腺苷和肌苷连续施用达至少2分钟的时段。44.根据权利要求43所述的方法，其中腺苷和肌苷连续施用达超过2分钟但少于6分钟的时羊史。45.—种药理学应激试验的方法，所述方法包括共同施用腺芬和肌苷以诱发药理学应激，其中腺香和肌香以约1:1至约1:20的腺苷:肌苷比施用；且在输注期间或之后评价一种或多种心功能的参数。46.根据权利要求36或45所述的方法，其中心功能的评价包括使用一种或多种选自由下列组成的组的4支术心电描记术、M型回波描记术、二维回波描记术、三维回波描记术、回波多普勒、心脏成像、平面(常规)闪烁照相术、单光子发射计算机断层摄影术(SPECT)、动态单光子发射计算机断层摄影术、正电子发射断层摄影术(PET)、首过效应放射性核素血管造影术、平衡放射性核素血管造影术、核磁共振(NMR)成像、灌注对比超声心动描记术、数字减影血管造影术(DSA)和超高速x-射线计算机断层摄影术(CINECT)。47.根据权利要求45所述的方法，其中所述评价通过SPECT进行。48.根据权利要求45所述的方法，其中所述评价通过PET进行。49.一种治疗局部缺血后心肌损伤的方法，所述方法包括在急性心局部缺血事件期间或之后施用至少第一次共同胃肠外输注腺苷和肌香，其中所述腺芬和肌苷以约1:1至约1:20或约1:1至20:1的A:I比豸lr注。50.根据权利要求49所述的方法，其中急性局部缺血事件是心肌梗塞。51.根据权利要求49或权利要求50所述的方法，其中腺香和肌苷以根据权利要求l-14任一项的药物組合物来输注。52.根据权利要求49-50任一项所述的方法，其中腺苷和肌苷静脉内输注。53.根据权利要求52所述的方法，其中腺苷以少于约140ng/kg/min的速率输注。54.根据权利要求53所述的方法，其中腺苷以少于约80pg/kg/min的速率输注。55.根据权利要求54所述的方法，其中腺苷以约35-70pg/kg/min的速率输注。56.根据权利要求54所述的方法，其中腺苷以约10-30pg/kg/min的速率输注。57.根据权利要求49和52所述的方法，其中肌苷以35-210吗/kg/min的速率输注。58.根据权利要求49和52所述的方法，其中肌香以200-600pg/kg/min的速率输注。59.根据权利要求49和52所述的方法，其中肌苷以10-30pg/kg/min的速率输注。60.根据权利要求49-59任一项所述的方法，其中第一次胃肠外输注在急性局部缺血发病的6小时内开始。61.根据权利要求49-59任一项所述的方法，其进一步包括至少第二次共同胃肠外输注腺苷和肌苷，其中腺苷和肌苷以约1:1至约1:20或约1:1至20:1的A:I比输注。62.根据权利要求49-61任一项所述的方法，其中每次输注为期至少30分钟。63.—种治疗中枢或外周神经系统的急性损伤的方法，所述方法包括:在中枢或外周神经系统的急性损伤期间或之后施用至少第一次共同胃肠外输注腺苷和肌苷，其中所述腺苷和肌苷以约1:1至约1:20或约1:1至约20:1的A:I比输注。64.根据权利要求63所述的方法，其中所述损伤是脊髓的急性损伤。65.根据权利要求63所述的方法，其中所述损伤是中风。66.根据权利要求63-65任一项所述的方法，其中腺苷和肌苷以根据权利要求l-14任一项的药物组合物输注。67.根据权利要求63-65任一项所述的方法，其中腺苷和肌香静脉内输注。68.根据权利要求63所述的方法，其中腺苷以少于约80吗/kg/min的速率输注。69.根据权利要求63所述的方法，其中腺苷以35-70貼/kg/min的速率输注。70.根据权利要求63所述的方法，其中肌苷以35-70pg/kg/min输注。71.根据权利要求63所述的方法，其中肌普以10-210pg/kg/min输注。72.根据权利要求63-71任一项所述的方法，其中第一次输注在急性损伤发病的6小时内开始。73.根据权利要求63-71任一项所述的方法，其进一步包括至少第二次共同胃肠外输注腺苷和肌苷，其中腺苷和肌香以约1:1至约1:20或约1:1至20:1的A:I比输注。74.根据权利要求63-71任一项所述的方法，其中每次输注为期至少30分钟。75.—种治疗急性肺血管阻力的方法，所述方法包括在急性心血管或呼吸障碍期间或之后施用至少第一次共同胃肠外输注腺苷和肌苷，其中所述腺香和肌苷以约1:1至约1:20的A:I比输注。76.—种经皮腔内冠状动脉血管成形术或血栓溶解的方法，其改良包括在血管成形术或血栓溶解期间共同施用腺苷和肌苦，其中腺香和肌苷以约1:1至约1:20或约1:1至20:1的腺苷:肌香比施用。77.—种增加心输出量的方法，所述方法包括施用至少第一次共同胃肠外输注以1:1至1:20的腺苷:肌苷比的腺苷和肌苷，输注的量和持续时间足以增加心输出量。78.—种预防术后并发症的方法，所述方法包括在重症监护病房期间，术中或外科手术结束后不久共同施用腺苷和肌苷，其中腺苷和肌苷以约1:1至约1:20或约1:1至20:1的腺苷:肌苷比施全文摘要本发明涉及使用腺苷和肌苷组合用于诊断和治疗的组合物、方法和试剂盒。文档编号A61K9/00GK101453984SQ200780020011公开日2009年6月10日申请日期2007年3月30日优先权日2006年3月31日发明者菲利浦·古尔内申请人:艾登欧比公司