专利名称：：丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明为医药领域，尤其是天然药物领域，具体涉及丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用。
背景技术：
：疼痛已成为影响人们生活和工作的重要疾病之一。调查显示，头痛、牙痛、肌肉和关节痛是我国居民最常经历的疼痛，其次为受运动损伤导致的疼痛和经痛。其中，不同年龄段头痛的发生比例都超过了半数；30岁以下以及30-45岁人群头痛发生率均超过70°/。；肌肉关节痛和牙痛的发生比例也在提高。现阶段常用的镇痛药主要有两大类阿片类麻醉性镇痛药，以吗啡为代表；非甾体类抗炎药，以阿斯匹林为代表。阿片类镇痛药是中枢神经抑制剂，虽效果明显但易成瘾并产生耐受性。非甾体类抗炎药作用于外周神经系统，是以阻断前列腺素的合成为目的，该类药物副作用较大，长期服用会引起变态反应、胃出血和溃疡。因此，迫切需要寻找有效、安全可靠的镇痛药物。随着人们对中医药独特优势的日益理解及化学镇痛药毒副作用与药害问题日益突出，中药镇痛药得到了更广泛的重视和应用。从中草药中寻找和研制具有良好镇痛作用的药物，具有疗效好、副作用小、及安全可靠等许多优点，而愈来愈引起人们的重视。丹参为唇形科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBunge)的干燥根及根茎，己被多版《中华人民共和国药典》收载。丹参性微寒、味苦。归心、肝经。具有止痛，养心安神，活血祛瘀，凉血，消肿，调经等功能。用于治疗失眠，心痛，闭经，冠心病，痛经，月经失调，心肌梗死，缺血性中风，脑梗死，高血压，脑缺血等疾病。主要化学成分为两大类，即水溶性丹参酚酸类和脂溶性丹参酮类。后者主要是以丹参酮IIA为代表的邻醌结构丹参酮类化合物。丹参酮IIA和其磺化后得到的磺酸钠临床上用于心脑血管疾病如缺血性中风，脑梗死，冠心病，高血压，脑缺血等的治疗。但丹参酮类化合物和丹参酮提取物并未有镇痛作用的报道。
发明内容本发明旨在提供丹参酮类化合物及总丹参酮提取物的新医药用途，即在制备镇痛药物中的应用，以获得疗效好、副作用小、安全可靠、能长期服用的镇痛药物。利用小鼠醋酸扭体等试验，对大量天然药用植物的提取物进行镇痛活性筛选，并通过活性追踪的方法发现了丹参酮类化合物以及总丹参酮提取物具有镇痛活性，且未显示出毒副作用。以天然植物或中药材，如丹参为原料，采用溶剂提取法、溶剂萃取法、树脂吸附法、二氧化碳超临界萃取等工艺中的一种或多种工艺，并结合浓缩干燥、减压干燥或冷冻干燥等常用干燥方法，再利用包括吸附树脂柱层析、真空液相柱层析、硅胶柱层析、S印hadex凝胶柱层析、中低压柱层析以及制备型高压液相(HPLC)柱层析，以及沉淀、结晶等方法获得丹参酮类化合物或总丹参酮提取物。所采用的溶剂提取法中，可选用水或甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、丙酮、乙酸乙酯、甲酸乙酯、氯仿、二氯甲垸、乙醚、石油醚等有机溶剂或两种或多种互溶的混合溶剂，在室温下浸渍提取或用超声提取或加热状态下的回流提取，提取次数可为一次，也可为多次。所采用的溶剂萃取法中，可将上述得到的提取物悬浮于水中用适宜溶剂(丁醇、戊醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、石油醚等)直接进行萃取，萃取次数可为一次，也可为多次。所采用的树脂法为大孔吸附树脂法，水、醇或含水醇提取物可用大孔吸附树脂进行处理，弃去水洗脱部分，全部或部分收集醇洗脱部分即得。所采用的二氧化碳超临界萃取法可根据情况加入适当的夹带剂，如环己垸、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙醇等。本发明所述丹参酮类化合物包括丹参酮I(tanshinoneI)、丹参酮IIa(tanshinoneIIa)、隐丹参酮(cryptotanshinone)、二氢丹参酮(dihydrotanshinone)和新丹参酮(miltiron)。这些丹参酮类化合物可以是从植物或中草药中提取的，也可以是化学合成的。所述总丹参酮提取物是指以天然植物或中草药，如丹参为原料，通过上述提取分离方法得到的含有上述一种或多种丹参酮类化合物的提取物，其中总丹参酮的含量为5090%。本发明中所述丹参酮类化合物或总丹参酮提取物作为制备镇痛药物的有效成份，可单独应用或者合用或与可接受的赋形剂等结合，按照常规方法制成口服剂型或非口服剂型的治疗疼痛的药物。试验结果表明，丹参酮类化合物或总丹参酮提取物具有明显的镇痛效果，可用于制备镇痛药物；且具有明显疗效，副作用小，安全可靠，适合中轻度疼痛，能够长期服用。具体实施例方式实施例l:总丹参酮提取物的制备取唇形科鼠尾草属植物丹参的饮片300g，用90%乙醇提取，浓縮浸提液得乙醇提取物，提取物分散于水中，低温放置后，过滤，干燥，即得到总丹参酮提取物。其中总丹参酮含量为80%。实施例2:丹参中丹参酮类化合物的提取分离取实施例1中所述总丹参酮提取物，上硅胶柱，石油醚氯仿梯度洗脱，获得丹参酮I、丹参酮IIa、隐丹参酮和新丹参酮等丹参酮类化合物。实施例3:丹参酮类化合物对小鼠的镇痛作用试验取实施例2中得到的丹参酮I、丹参酮IIa、隐丹参酮和二氢丹参酮，口服给药，应用于小鼠醋酸扭体实验。操作方法为取1822g小鼠30只，随机分为三组，分别按体重100mg/kg、30mg/kg和10mg/kg口服给药，给药组样品液0.6ml/只；另设对照组给等体积生理盐水。60分钟后，各鼠腹腔注射0.7%醋酸0.1ml/10g，观察并记录10分钟内产生扭体反应的动物数或每组扭体反应的次数，与对照组比较其镇痛效果。结果如表l。取丹参酮IIa，口服给药，应用于小鼠福尔马林实验和热板实验，结果如表2。小鼠福尔马林实验取25g30gICR小鼠30只，分别按体重100mg/kg、30mg/kg和10mg/kg口服给药，给药组样品液0.6ml/只；另设对照组给等体积生理盐水。60分钟后注射福尔马林(2.5%，0.9%生理盐水)20^1于后足跖部。记录给福尔马林后，05分钟(1相，用PI表示)，20~35分钟(2相，用PII表示)内小鼠舔足的时间。1相(PI)的反应与急性痛有关，2相(PII)的反应与慢性痛有关。热板实验取25g30glCR小鼠30只，分别按体重100mg/kg、630mg/kg和10mg/kg口服给药，给药组样品液0.6ml/只；另设对照组给等体积生理盐水。60分钟后，将小鼠置于55。C的热板上，记录其足底接触热板到出现舔足、踢后腿或跳跃的时间，作为痛阈指标。表1.小鼠醋酸扭体实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2.丹参酮IIa的镇痛试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实施例4:总丹参酮提取物对小鼠的镇痛作用试验取实施例1中得到的总丹参酮提取物，口服给药，应用于小鼠醋酸扭体实验、福尔马林实验和热板实验，结果如表3所示。表3.总参酮提取物镇痛试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>权利要求1、丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用。2、权利要求1所述丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用，其特征在于，所述丹参酮类化合物为丹参酮I、丹参酮IIa、隐丹参酮、二氢丹参酮或新丹参酮。3、权利要求1所述丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用，其特征在于，所述总丹参酮提取物为从植物或中草药中提取得到的含有一种或多种丹参酮类化合物的提取物，其中总丹参酮的含量为5090%。4、权利要求1所述丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用，其特征在于，所述总丹参酮提取物为从丹参中提取得到的含有一种或多种丹参酮类化合物的提取物，其中总丹参酮的含量为5090%。5、权利要求1至4任一项所述丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用，其特征在于，所述药物以一种或多种丹参酮类化合物、或总丹参酮提取物作为活性成分，单独应用，或者加上药学上可接受的赋形剂制成的口服或非口服制剂。全文摘要本发明公开了丹参酮类化合物及总丹参酮提取物在制备镇痛药物中的应用。参酮类化合物选自丹参酮类化合物为丹参酮I、丹参酮IIa、隐丹参酮、二氢丹参酮或新丹参酮；总丹参酮提取物是以植物或中草药，如丹参中提取的含有一种或多种丹参酮类化合物的提取物，其中总丹参酮的含量为50～90％。经动物试验表明，这些物质具有镇痛作用，可以用于制备镇痛药物。文档编号A61K31/343GK101491516SQ20081003310公开日2009年7月29日申请日期2008年1月25日优先权日2008年1月25日发明者具本澈,君杨,宁马申请人:爱思开生物医药科技(上海)有限公司