专利名称：：肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及药物制剂领域，特别是用于治疗乙型肝炎、重型肝炎和重度黄疸型肝炎的肝细胞靶向注射用苦参素纳米粉针剂及其制备方法。
背景技术：
：苦参素是中药苦参、山豆根和苦豆子的主要有效成分，研究证实治疗慢性乙型肝炎效果显著，具有直接抑制乙型肝炎病毒复制的作用，能有效抑制肝细胞异常凋亡，同时阻断和减轻肝纤维化程度，并对重型肝炎及重度黄疸型肝炎有一定疗效。主要指标优于或等同于a干扰素，但价格比干扰素低得多。苦参素现有剂型主要有注射剂(粉针、水针以及输液)和口服制剂(片、胶囊、软胶囊)。苦参素注射剂存在着半衰期短和在靶器官(肝脏)分布量少的问题药物进入体内后消除迅速，健康人的T1/2P仅为130.4min;原型药物及其代谢物主要分布于肾脏，进入肝脏的量非常小。为了保证疗效，临床上给药剂量较高，这样会增加药物的不良反应。口服制剂使用方便，但约86.8%的苦参素会在肠道菌群作用下，代谢为疗效相对较低、副作用较大的苦参碱，使治疗效果下降。纳米制剂由于主要被网状内皮系统摄取，并迅速进入肝实质细胞，使药物高选择性地分布于肝脏，、从而降低毒副作用和提高疗效，是实现肝脏靶向的有效手段。同时还兼具缓释作用，因而是实现苦参素对肝脏靶向治疗和减缓释放、延长半衰期的最佳选择之一。此外，类脂材料还具有保护肝细胞和免疫佐剂活性的作用。这样从靶向给药、免疫调节和保护肝细胞三方面三管齐下，不仅可以提高疗效，还可以减少给药剂量，降低毒副作用。
发明内容本发明的目的是提供一种具有肝细胞耙向作用的注射用苦参素纳米粉针。与非纳米制剂(如水溶液)相比，应能减缓药物的释放，延长药物体内停留时间，并使药物趋向并集中于肝脏，提高疗效。本发明注射用苦参素纳米粉针剂，由苦参素1份，硬脂酸0.22份，注射用卵磷脂14份，甘草次酸02份，表面活性剂02份，冻干辅料26份组成。制备方法为苦参素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有机溶剂，加热，形成有机相。将油相在搅拌下缓慢滴入至水相中，并在加热状态下搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液。该胶体溶液在冰浴下用冰水分散并搅拌，用微孔滤膜过滤，形成均匀纳米级分散体。加入冻干辅料，混匀超声，冻干保存即得。肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法的水分散液粒径为50450nm，苦参素包封率为2085%。为解决上述问题，提供如下技术方案。肝细胞靶向注射用苦参素纳米粉针剂，包括苦参素1份，硬脂酸0.22份，注射用卵磷脂14份，甘草次酸02份，表面活性剂02份，冻干辅料26份组成。其中表面活性剂选择泊洛沙姆或吐温80、PEG10006000。冻干辅料选择甘露醇，和/或右旋糖酐、乳糖，较好的选择为苦参素l份，硬脂酸0.41.2份，注射用卵磷脂2.83.6份，甘露醇35份。冻干辅料选择甘露醇，和/或右旋糖酐、乳糖；表面活性剂选择泊洛沙姆或吐温80、PEG10006000。肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法为苦参素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有机溶剂，加热，形成有机相。将油相在搅拌下缓慢滴入至水相中，并在加热状态下搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液。该胶体溶液在冰浴下用冰水分散并搅拌，用微孔滤膜过滤，形成均匀纳米级分散体。加入冻干辅料，混匀超声，冻干保存即得。较好的制备方法中，有机溶剂采用乙醇，有机相与水相分别加热至5060°C，搅拌速度为8001400rpm，506(TC保温搅拌浓縮，形成的胶体溶液分散于04。C的水中，并在冰浴下搅拌分散。用0.22um的微孔滤膜过滤，加入甘露醇作为冻干骨架，并冻干保存即得。本发明的制备方法，具体步骤如下(1)苦参素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有机溶剂，加热，形成油相。(2)将表面活性剂，甘草次酸溶于热水，形成水相。(3)将步骤1所得油相在搅拌下缓慢滴入至步骤2所得水相中，并在加热状态下搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液。(4)将步骤3所得胶体溶液在冰浴下用冰水分散并搅拌，用微孔滤膜过滤，形成均匀纳米级分散体。(5)将冻干辅料加入至步骤4所得分散体，混匀超声，冻干保存即得。肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法水分散液的粒径为50450nm，苦参素包封率为2085%。本发明肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂，与非纳米制剂(如水溶液)相比，药物释放减缓，制得的制剂具有肝细胞趋向性。本发明通过制剂学手段，减缓药物的释放，延长苦参素在体内的停留时间，并使药物趋向并集中于肝脏，提高疗效，并制备简单，不仅具有缓释作用，而且可增加药物在体内滞留时间，具有较好的趋肝作用，发挥更好的疗效。图1为本发明制备流程示意2为本发明电镜3为本发明粒径分布4为本发明药物释放曲线图5为本发明大鼠尾静脉注射100mg/ml后的药-时曲线图具体实施方式实施例1A.苦参素lgB.卵磷脂3.6gC.硬脂酸0.4gD.甘露醇4g搅拌速度1000rpm搅拌温度60°C滴入速度0.lml/min分散液温度04°C称取苦参素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加热溶解，搅拌下缓慢滴入至加热保温的水中，搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液，用冰水分散，形成SLN悬液，0.22p微孔滤膜过滤，加甘露醇混匀，定容至100ml，超声，冻干后保存。获得的苦参素纳米冻干粉针加水分散后，粒径分布范围为104士34nm，表面电位-32.6mV，包封率为81%。采用透析法进行体外释放研究，释放时间长达12小时，8小时时释放约80%。大鼠尾静脉给药100mg/kg后，体内过程符合二室开放模型，与水溶液相比，苦参素在体内吸收和消除减慢，生物利用度增加；药物自中央室的消除明显减缓，药物向组织分布的量增加；体内清除速率显著降低，药物在体内循环时间延长(见表l)。表1大鼠尾静脉注射苦参素水溶液和苦参素-SLN的药动学参数<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>小鼠尾静脉给药100mg/kg后，与水溶液相比，药物在肝和血中的分布有明显提高。肝脏的趋向性增强，肝脏的相对靶向指数为360%，对心、脾、肺、肾、血的相对耙向指数降低，表明减少了药物在其他器官的分布(见表2)。表2小鼠尾静脉注射苦参素水溶液和苦参素SLN后组织中的药物分布<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>以上结果可见，实施例l制备的苦参素纳米粉针具缓释作用，可增加药物在体内时间，具较好的趋肝作用。实施例2(2-18号)肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法(见表3)。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>具体步骤如下称取苦参素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加热溶解，搅拌下缓慢滴入至加热保温的水中，搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液，用冰水分散，形成SLN悬液，0.22ii微孔滤膜过滤，加甘露醇混匀，定容至100ml，超声，冻干后保存。制备的肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的粒径(见表4)。表4制备的肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的粒径<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>实施例3(1925号)肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法(见表5)。表5肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>称取A、B、C，加乙醇10ml，加热溶解，搅拌下缓慢滴入至含有E的加热保温的水中，搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液，用冰水分散，形成SLN悬液，0.22P微孔滤膜过滤，加D混匀，定容至100ml，超声，冻干后保存。实施例4(2628号)肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法(见表6)表6肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法No.A苦参素(g)B卵磷脂(g)c硬脂酸(g)D甘露醇(g)260.43.60.442723.60.442843.60.44称取苦参素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加热溶解，搅拌下缓慢滴入至加热保温的水中，搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液，用冰水分散，形成SLN悬液，0.22p微孔滤膜过滤，加甘露醇混匀，定容至100ml，超声，冻干后保存。例(2628号)包封率分别为90.0%，76%，51%。表明载体的量增加可增加包封率。实施例5(2934号)肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法(见表7)表7肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂的制备方法A苦参素B卵磷脂C硬脂酸D冻干辅料No.(g)(g)(g)2913.60.4甘露醇lg3013.60.4甘露醇2g3113.60.4乳糖2g3213.60.4乳糖4g3313.60.4右旋糖酐2g3413.60.4右旋糖酐4g称取苦参素、卵磷脂、硬脂酸，加乙醇10ml，加热溶解，搅拌下缓慢滴入至加热保温的水中，搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液，用冰水分散，形成SLN悬液，0.22"微孔滤膜过滤，加甘露醇混匀，定容至100ml，超声，冻干后保存。权利要求1.一种肝细胞靶向注射用苦参素纳米制剂，它由苦参素1份，硬脂酸0.2～2份，注射用卵磷脂1～4份，甘草次酸0～2份，冻干辅料2～5份，表面活性剂0～2份组成，2、根据权利要求1所述的苦参素纳米粉针制剂，其特征在于冻干辅料选择甘露醇，和/或右旋糖酐、乳糖。3、根据权利要求1所述的苦参素纳米粉针制剂，其特征在于表面活性剂选择泊洛沙姆或吐温80、PEG10006000。4、根据权利1所述的苦参素纳米制剂的制备方法，其特征包括以下步骤(1)苦参素、注射用卵磷脂、硬脂酸，溶于有机溶剂，加热，形成油相。(2)将表面活性剂，甘草次酸溶于热水，形成水相。(3)将步骤1所得油相在搅拌下缓慢滴入至步骤2所得水相中，并在加热状态下搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液。(4)将步骤3所得胶体溶液在冰浴下用冰水分散并搅拌，用微孔滤膜过滤，形成均匀纳米级分散体。(5)将冻干辅料加入至步骤4所得分散体，混匀超声，冻干保存即得。5、根据权利4所述的苦参素纳米制剂的制备方法，其水分散液的粒径为50450nm，苦参素包封率为2085%。6、根据权利1或4所述的苦参素纳米制剂，与非纳米制剂如水溶液相比，药物释放减缓，制得的制剂具有肝细胞趋向性。全文摘要本发明涉及药物制剂领域，特别是用于治疗乙型肝炎、重型肝炎和重度黄疸型肝炎的肝细胞靶向注射用苦参素纳米粉针剂及其制备方法。本发明注射用苦参素纳米粉针剂，由苦参素，硬脂酸，注射用卵磷脂，甘草次酸，表面活性剂，冻干辅料组成。经溶解，加热，形成有机相，并在加热状态下搅拌蒸发溶剂，形成胶体溶液。再经搅拌，过滤，形成均匀纳米级分散体，加入冻干辅料，混匀超声，冻干保存。通过制剂学手段，减缓药物的释放，延长苦参素在体内的停留时间，并使药物趋向并集中于肝脏，提高疗效。本发明制备简单，具有缓释作用，而且可增加药物在体内滞留时间，具有较好的趋肝作用，疗效显著。文档编号A61P1/00GK101264079SQ20081006139公开日2008年9月17日申请日期2008年4月25日优先权日2008年4月25日发明者放刘,周芝芳,孙洁胤,郑晓亮申请人:浙江省医学科学院