专利名称：：高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及决明子的提取物在制药领域中的应用，尤其是高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用。
背景技术：
：高脂血症是一种常见疾病，是人体脂质代谢失调所致。临床检验为血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)过高；高密度脂蛋白(HDL)趋于下降或低于正常值。高脂血症易诱发冠心病、脑中风、高血压等心血管疾病，还可能引起胆结石、胰腺炎、老年痴呆等疾病。目前，随着经济的快速发展，人们的饮食结构发生很大变化，动物脂肪等高热量食物摄取率增高，再加上生活节奏加快所致的社会心理因素的变化，高脂血症人群增多，心脑血管疾病的发病率升高。现在，临床上西医多采用辛伐他汀、阿托伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀等降脂药(主要降胆固醇，轻度降甘油三酯)进行治疗。虽然这些药物具有降血脂作用，但也有不少副作用，因此医学界正努力开发副作用小的降血脂药物。决明子为豆科植物决明0^5/"0&附^//"丄.或小决明C.tor"丄的干燥成熟种子，为临床常用中药，《神农本草经》将其列为上品。决明子又叫草决明，马蹄决明，假绿豆，全国大部分地区都有栽培，主产安徽、广西、浙江、四川，到秋季果实成熟后采集，将其全株割下晒干，打出种子。种子表面黄绿色，性味甘、苦、咸、微寒。具有清肝明目，润肠通便的作用，现代研究证明决明子具有降血压、降血脂、保肝及抑菌等活性，同时又可作为食品，是保健饮料的良好原料。近年来，临床上已有多种治疗高脂血症的决明子复方制剂，如(1)血脂宁丸，由决明子、山楂、荷叶和制何首乌配伍组方制成的丸剂；(2)血脂灵片由制何首乌、枸杞子、黄精、山楂、决明子配伍组方制成的片剂；(3)降脂宁胶囊由山楂(去核)、制何首乌、决明子、荷叶和泽泻配伍组方而成的胶囊剂；(4)脂欣康颗粒由决明子、荷叶、绞股蓝、泽泻、金银花、苦丁茶和银杏叶配伍组方而成的颗粒剂；(5)降脂排毒胶囊由大黄、决明子、山楂、茵陈、泽泻、栀子、莪术、何首乌和柴胡配伍组方而成4的胶囊剂；(6)降脂通脉胶囊由姜黄、铁线草、泽泻、决明子和三七配伍组方而成的胶囊剂；(7)决明平脂胶囊决明子、茵陈、何首乌、桑寄生、维生素C、维生素B、烟酸。上述的决明子复方制剂有效地治疗高脂血症，取得了满意的效果，但是这些治疗效果是决明子与其他药物配伍产生协同作用下所产生，而不是决明子单味用药所具备的治疗效果。目前，由于制药工业现有的提取方法仍不能将决明子中有效成分提取完全，限制了决明子单方制剂在临床上高脂血症的治疗中的应用。
发明内容本发明的目的是提供高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用。本发明所述的降血脂药物为降低胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和升高高密度脂蛋白的药物。本发明所述的降血脂药物是降低胆固醇的药物。本发明所述的降血脂药物是降低甘油三酯的药物。本发明所述的降血脂药物是降低低密度脂蛋白的药物。本发明所述的降血脂药物是升高高密度脂蛋白的药物。本发明所述的高压连续提取的决明子的提取物由以下方法制得取决明子粉末与乙醇按料液比1:1030混合浸泡3060分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在3090Mpa高压作用下连续通过高压提取器的环形工作间隙，以高速冲击到高压提取器内的碰撞环上，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经浓縮，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。本发明还可以对高压连续提取的决明子的提取物的提取方法作以下改进即决明子与乙醇混合所得的料液在3090Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，有利于进一步提高决明子有效成分的提取率。所述连续循环过程的持续时间在1030min的范围内。最佳连续循环过程的持续时间在2030min范围内。本发明中决明子与乙醇优选的料液比在1:1025的范围内，最佳的料液比则在1:152Q的范围内。本发明高压提取的较佳压力值在4090Mpa范围内，最佳压力值在5080Mpa范围内。本发明中所述的乙醇的浓度为50%90%，其较佳的浓度为60%90%，最佳的浓度为60%80%。经发明人采用高效液相色谱-电喷雾电离质谱联用法(HPLC-ESI-MS")对本发明的决明子提取物进行全成分分析，从本发明的决明子提取物中分离出以下IO种有效成分决明苷B2(分子量920)、决明苷C2(分子量920)、大黄酚-四吡喃葡萄糖苷(分子量902)、大黄酚-l-0-P-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)-e-D-吡喃葡萄糖基-(1—6)-D-吡喃葡萄糖苷(分子量740)、红镰酶素-6-{3-龙胆二糖苷(分子量596)、红镰酶素-1-O-龙胆二糖苷(分子量596)、大黄酚-1-0-e-龙胆二糖苷(分子量578);1，2，6-三羟基-7，8-二甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量330);2-羟基-l，6，7，8-四甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量358);3-甲基-2，8-二羟基-l，6，7-三甲氧基蒽醌(分子量344)。发明人采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行本发明的决明子提取物进行分部萃取，得决明子各化学部位的提取物，进行降血脂药效学研究，发现正丁醇提取物为决明子主要的降血脂有效部位。对决明子的正丁醇提取物采用高速逆流色谱(HSCCC)进行分离纯化，得到5个有效成分1，2，6，8-四羟基-7-甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量316);1，2，6-三羟基-7，8-二甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量330);2-羟基-l，6，7，8-四甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量358);2，6-二羟基-1,7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量344);1，2-二羟基-6，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量344)。本发明的决明子提取物可根据给药途径制备成各种剂型，包括口服制剂和注射制剂。其中口服制剂包括片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、丸剂等。在制备口服制剂时可选用的辅料可以是淀粉、糊精、环糊精、蔗糖、硬脂酸盐等常规填充剂。以下通过实验及其结果来说明采用高压连续提取的决明子提取物作为单方制剂应用于治疗高脂血症的效果。一、关于高压连续提取的决明子提取物的有效成分研究(一)实验材料和实验方法干燥的决明子药材(购于广州药材公司)；仪器LCQAdvantage液-质联用仪(美国ThermoFinnigan公司)，高效液相色谱(HPLC)泵(日本，Jasco公司)，phenomenexODS3柱(250mmx4.6mm);离子阱质谱，6电喷雾接口，工作站及数据处理系统(美国ThermoFinnigan公司)。质谱条件电喷雾电压土5.0Kv;金属毛细管温度200'C;壳气(N2)流量60mL/min;流动注射泵进样，进样量3pL/min;扫描方式正离子，负离子扫描。色谱条件PhenomenexODS3柱(250mmx4.6mm);流动相甲醇-0.4%乙酸溶液梯度洗脱，洗脱时间为90min，0-5min从15:85变化到35:65，5-65min从35:65变化到50:50,65-80min从50:50变化到100:0，100:0再继续保持10min;体积流量0.8mL/min;检测波长254nm;柱温25'C。(二)高压连续提取方法称取决明子粉50g，加入70。/。乙醇1000ml混合浸泡3060分钟，然后将料液送入高压提取器中，料液在60Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形丄作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，所述连续循环的时间持续30min，将经过高压处理的料液取出，过滤，回收乙醇，浓缩得决明子浸膏。(三)高压连续提取的决明子提取物中有效成分的分析取高压连续提取所得到的提取物采用高效液相色谱-电喷雾电离质谱联用法(HPLC-ESI-MS")进行全成分分析，所得的HPLC色谱图(图l)和总正离子流图(图2)根据分子离子峰的荷质比(m/z)及特征碎片进行质谱解析，确认了其中的IO种蒽醌类化合物(表1)。表110种蒽醌类化合物的结构信息和相对保留时间<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>该方法的总黄酮的提取率为1.233%,总蒽醌的提取率为0.089%，总多糖的提取率为10.550/0。二、不同溶剂的萃取物的药效对比实验(一)实验材料雄性SD大鼠84只(合格证SCXK(粵)2003-0002)血脂康胶囊(北京大维信生物科技有限公司，国药准字:Z10950029，批号20080110)胆固醇试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301)高密度脂蛋白试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301)低密度脂蛋白试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301)甘油三酯试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301)高糖高脂饲料配方81%基础饲料，5%胆酸钠，1.5%胆固醇，2%蛋黄粉，3%糖，10%猪油，25g矿物质，50g复方维生素仪器可见光分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)(二)实验方法雄性SD大鼠84只，适应性饲养一周后按体重随机分为7组，每组12只，分别为正常对照组、模型对照组、血脂康对照组(0.11g/kg.d—1)、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、水提取物组，于正式实验第"天喂给高糖高脂饲料进行造模，并给各造模组大鼠肌肉注射四氯化碳植物油混合液(60%植物油，40%四氯化碳)3ml/kg，同时各组给予相应剂量的药物灌胃，正常对照组给予等体积生理盐水，连续8周，血液离心(2000r/min，10min)取血清，检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平，检测结果见表2:表2决明子各提取物对高血脂症小鼠血脂的影响分组nTCTGHDLLDL(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)正常121.49±0.550.72±0.13**1.23士0.22**0.26±0.26**模型组124.03±1.36##0.99±0,19##0.60±0.22##2.41±0.86M血脂康组121.88±0.56**0.79±0.15**0.71±0.45**0.67±0.43**石油醚提取物组123.14±0.49**0.87±0.13**0.81±0.26**0.71±0.56**乙酸乙酯提取物组123.61±0.58**0.94±0.16**0.68±0.35**0.85±0.51**正丁醇提取物组121.62±0.61**0.75±0.14**1.10±0.24**0.34±0.41**水提取物组122.76±0.65**0.81±0.15**0.92±0.35**0.52±0.47**注*P<0.05,##户<0.01与正常组相比；*尸<0.05，**尸<0.01与模型组相比(对应图同)表2的结果表明(l)高脂血症模型组与正常对照组比较，能显著升高TC(户O.Ol)、TG(P<0.05)、LDL(尸O.Ol)，降低HDL，说明本方法造模成功。(2)与高脂血症组相比较，正丁醇提取物能显著降低高脂血症小鼠的TC(PO.01)、TG(PO.05)和LDLOPO.Ol)，升高HDL，其活性较血脂康(阳性药)强；石油醚提取物能显著降低高脂血症小鼠的TC(P<0.05)，降低率为14.97%;水提取物能显著降低高脂血症小鼠的TG(P0.05)，降低率为25.2%。其余各提取物能在一定程度上降低TC和TG,但与模型组比较，差异无显著性意义(P〉0.05)。因此，决明子正丁醇提取物为降血脂有效部位。三、正丁醇提取物中的有效成分分析(一)仪器及试剂GS10A型高速逆流色谱仪(聚四氟乙烯柱，内径L6mm，柱容积230ml，转速0-1000r/min)，8823A-UV紫外检测仪，S-1007A泵，S-型记录仪(北京市新技术应用研究所)，BSZ-160自动部分收集器(上海泸西仪器厂)，电控温水浴加热器(控温范围20-100。C)。Waters600系列高效液相色谱仪、Waters2487检测器、HS色谱数据工作站；计算机辅助相似性评价系统。LCQAdvantage液-质联用仪(美国ThermoFinnigan公司)，高效液相色谱(HPLC)泵(日本，Jasco公司)，PhenomenexODS3柱(250mmx4.6mm);离子阱质谱，电喷雾接口，工作站及数据处理系统(美国ThermoFinnigan公司)。决明子(广州药材公司)；乙醇，乙酸，乙酸乙酯，正己垸等均为分析纯；甲醇为色谱纯；水为去离子水，娃哈哈纯净水(质谱用)。(二)实验方法分离溶剂系统正己垸/乙酸乙酯/甲醇/水=4:1:3:2;分离色谱条件柱容积230ml,流动相流速1.5ml/min，转速750r/min，紫外检测器波长254nm，记录仪灵敏范围2A，量程200mV，纸速60cm/h。(三)实验结果经HSCCC分离后显示有6个主要峰(参见图3)，根据出峰顺序用收集器收集各组分，9根据收集时观察第一个大峰为混合物经HPLC检测发现是极性很接近的几个化合物的混合物，由于极性非常接近以致同时出峰很难分离。组分I，II，III，IV，V经HPLC检测表明均为单一物质且纯度都大于95%。对逆流色谱图上另外的五个主要峰进行了HPLC检领j，五个组分的纯度分别为950/。、98%、96%、95%和96%。各峰收集物的HPLC分析如图4-l4-5所示。对此五个峰成分进行多次收集，并分别进行了质谱分析及质谱碎裂机理的研究发现，这五个成分分别为1，2，6，8-四羟基-7-甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量316);1，2，6-三羟基-7，8-二甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量330);2-羟基-l，6，7，8-四甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量358);2，6-二羟基-l，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量344);1，2-二羟基-6，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量344)。四、不同提取方法的提取物的药效对比实验(一)不同提取方法的提取率的对比实验将干燥的决明子药材粉碎成粉末，分成三组，分别采用以下三种提取方法进行提取并测定总黄酮、总蒽醌和总多糖的提取率①回流提取法称取决明子粉50g，加入70%乙醇1000ml，7CTC提取3.5h，过滤，回收乙醇，浓縮得决明子浸膏；该方法的总黄酮的提取率为0.895%,总蒽醌的提取率为0.071%，总多糖的提取率为9.324%。②超声提取称取决明子粉50g，加入70%乙醇1000ml，在500W的功率下提取40min，过滤，回收乙醇，浓縮得决明子浸膏；该方法的总黄酮的提取率为0.877%，总蒽醌的提取率为0.069%，总多糖的提取率为8.642%。③高压连续提取称取决明子粉50g，加入70%乙醇1000ml混合浸泡3060分钟，然后将料液送入高压提取器中，料液在60Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，所述连续循环的时间持续30min，将经过高压处理的料液取出，过滤，回收乙醇，浓缩得决明子浸膏。该方法的总黄酮的提取率为1.233%，总蒽醌的提取率为0.089%,总多糖的提取率为10.55%。从上述结果可见，高压连续提取的决明子提取物的总黄酮、总蒽醌、总多糖的提取率分别是回流提取的提取物的1.4倍、1.3倍、1.15倍。而回流提取与超声提取得率相近。而且从图57所示的HPLC指纹图谱显示三种提取方法得到的决明子提取物的HPLC指纹图谱中的峰相似，都集中在保留时间10-55min和72-90min，这表明本发明没有改10变决明子中的有效成分。而且在图3中显示决明子含量相同的情况下，本发明的提取物中各峰高均比回流法和超声提取法的高，且提取物中峰数也较多，说明本发明的提取物中的成分多于回流提取的提取物与超声提取的提取物。(二)不同提取方法的提取物的降血脂作用1.1实验材料雄性SD大鼠96只(合格证SCXK(粤)2003-0002)血脂康胶囊(北京大维信生物科技有限公司，国药准字Z10950029，批号20080110);胆固醇试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301);高密度脂蛋白试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301);低密度脂蛋白试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301);甘油三酯试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20080301);高糖高脂伺料配方81%基础词料，5%胆酸钠，1.5%月旦固醇，2%蛋黄粉，3%糖，10%猪油，25g矿物质，50g复方维生素；干燥的决明子药材(购于广州药材公司)；决明子不同提取方法的提取物(自制)；仪器可见光分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)。1.2决明子提取物的制备与第四点的第(一)部分所述的提取方法相同。1.3实验方法雄性SD大鼠96只，适应性饲养一周后按体重随机分为8组，每组12只，分别为正常对照组、模型对照组、血脂康对照组0.11g/kg.d—\高压连续提取高剂量组6.97g/kg.d.1、高压连续提取中剂量组2.31g/kg.d"、高压连续提取低剂量组0.77g/kg.d—、超声提取组2.31g/kg.d";回流提取组2.31g/kg.d—1。于正式实验第一天喂给高糖高脂词料进行造模，并给各造模组大鼠肌肉注射四氯化碳植物油混合液(60%植物油，40%四氯化碳)3ml/kg，同时各组给予相应剂量的药物灌胃，正常对照组给予等体积生理盐水，连续8周，次晨前12小时禁食不禁水，末次灌胃后40分钟，用3%戊巴比妥钠0.12ml/100g麻醉，剖腹、腹主动脉取血，游离肝脏，生理盐水2ml冲洗，拍片、固定于10%的福尔马林待做病理。血液离心(2000r/min，10min)取血清，检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平，动物肝指数，观察大鼠肝脏形态变化。1.4药效测定结果比较1.4.1大鼠肝指数测定结果表3大鼠肝指数测定结果分组n肝指数正常对照组120.031±0.0015*模型对照组120.034±0細3#血脂康对照组120.033±0.0027超声提取组120.036±0.0042"回流提取组120.033±0.0029AA高压连续提取高剂量组120.030±0.0029**高压连续提取中剂量组120.032±0.0034高压连续提取低剂量组120.031±0.0022*注#户<0.05，##P<0.01与正常组相比；*尸<0.05,*<0.01与模型组相比；，<0.05，^尸<0.01与高压提取高剂量组相比；*P<0.05与高压提取低剂量组相比。由表3和图8可见，模型组肝指数明显比正常组要高，高压连续提取各剂量组均有降低血脂的作用，而回流提取组和超声提取组的药效不如高压连续提取各剂量组明显，甚至未见明显降低肝指数效果。而在高压连续提取各剂量组中，高剂量组降低肝指数的效果比低剂量组的效果要明显。1.4.2大鼠血清总胆固斷TC)测定结果表4大鼠血清总胆固醇测定结果分组胆固醇(mmol/L)正常对照组模型对照组血脂康对照组超声提取组回流提取组高压连续提取高剂j高压连续提取中剂J高压连续提取低剂」〖组激组1212121212121212121.49±0.55**4.03±1.36##1.88±0.56**2.16±0.78**1.72±0.65**1.84±0.39**2.37土0.38"1.80±0.61**注V〈0.05，##P<0.01与正常组相比；*P<0.05,**7><0.01与模型组相比由表4和图9可见，各给药组对降低大鼠血清胆固醇都有比较明显效果，其中回流提取组的效果最好，高压连续提取高剂量组和低剂量组次之。1.4.3大鼠高密度脂蛋白(HDL)水平测定结果表5大鼠高密度脂蛋白(HDL)水平测定结果分组nHDL(mmol/L)正常对照组121,23士0.22"模型对照组120.60±0.22##血脂康对照组120.71±0.45超声提取组120.69±0.33*回流提取组120.63±0.16A"高压连续提取高剂il组120,87士0.28"高压连续提取中剂Jt组120.96士0.40"高压连续提取低剂it组121.06±0.41**注#尸<0.05，##P<0.01与正常组相比；*尸<0.05，**尸<0.01与模型组相比；，<0.05与高压提取中剂量组相比；*P<0.05，**P<0.01与高压提取低剂量组相比。从表5和图IO反映的结果看，各给药组都有升高高密度脂蛋白(HDL)水平的效果。超声提取组、回流提取组和血脂康对照组的效果相当。高压连续提取各剂量组对升高大鼠高密度脂蛋白(HDL)水平都有明显的效果，其效果大小依次为高压连续提取高剂量组〈高压连续提取中剂量组〈高压连续提取低剂量组。1.4.4大鼠低密度脂蛋白(LDL)水平测定结果表6大鼠低密度脂蛋白(LDL)水平测定结果分组nLDL(mmol/L)正常对照组120.26±0.26**模型对照组122.41±0.86##血脂康对照组120.67士0.43"超声提取组120.85±0.73**回流提取组120.54±0.41**高压连续提取高剂Jt组120.25±0.18**高压连续提取中剂it组120.56±0.13**13高压连续提取低剂量组120.37±0.30**注*P<0.05，#*P<0.01与正常组相比；*户<0.05，**尸<0.01与模型组相比由表6和图11可见，各给药组对降低大鼠低密度脂蛋白(LDL)都有明显效果。其中，回流提取组、高压连续提取高剂量组、高压连续提取中剂量组和高压连续提取低剂量组的效果均较血脂康对照组明显；而高压连续提取中剂量组与回流提取组效果相当；高压连续提取高剂量组的效果最为显著，将大鼠低密度脂蛋白(LDL)的水平降低至正常水平。1.4.5大鼠血清甘油三酯(TG)含量测定结果表7大鼠血清甘油三酯(TG)含量测定结果分组nTG(mmoI/L)正常对照组120.72±0.13**模型对照组120.99±0.19##血脂康对照组120.79±0.15*超声提取组120.80±0.29*回流提取组120.82±0.28*高压连续提取高剂lt组120.82±0.18*高压连续提取中剂lt组120.84±0.15高压连续提取低剂it组120.78±0.19**注#尸<0.05，##P<0.01与正常组相比；*尸<0.05，**<0.01与模型组由表7和图12可见，各给药组都有降低大鼠血清甘油三酯(TG)含量的效果，而且效果相当。3.3结论由表3、表4、表5、表6、表7及其图812可见，高脂模型组小鼠血清的TC、TG、LDL-C均非常显著高于正常对照组(PO.Ol)，而两组的HDL差别不显著(PX).05)。阳性血脂康对照组能显著地降低TC(PO.05)的含量和极显著地降低LDL-C(PO.01)的含量。这表明本实验所建立的高脂血症小鼠模型是成功的。各给药组对小鼠血清的TC、TG和LDL均有影响，能使其有一定程度的下降，但只有高压连续提取各剂量组对HDL有升高作用。除了在对降低血清甘油三酯(TG)含量方面，回流提取组、超声提取组和高压连续提取各剂量组的效果相当外，对降低小鼠血清的TC和LDL的水平以及升高HDL水平皆以高压连续提取各剂量组效果最为显著。综合本实验及实验结果，高压连续提取的决明子提取物能明显降低血脂的药效，而14且治疗高脂血症的效果明显优于复方制剂一血脂康。从以上结果，可以得出本发明的优点在于(1)从上述药效试验可见，本发明的决明子提取物具有比其他提取方法提取的提取物更强的降血脂的药效，而且其在治疗高脂血症的效果明显优于复方制剂一血脂康，因此可以不需和其他药物配伍，而制备成用于降血脂的决明子单方制剂，并具有明显的降血脂的效果。(2)本发明的决明子提取物中含有的各类成分多于传统的回流提取法和超声提取法所得的决明子提取物中含有的成分(参见图13及表1)。并在本发明的决明子提取物中分离出5种降血脂的新的主要成分1，2，6，8-四羟基-7-甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量316);1，2，6-三羟基-7，8-二甲氧基-3-甲基蒽酉昆(分子量330);2-羟基-l，6，7，8-四甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量358);2，6-二羟基-l，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量344);1，2-二羟基-6，7,8-三甲氧基-3-甲基蒽醌(分子量344)。(3)本发明的决明子提取物是采用高压连续提取方法提取所得，而高压提取器和外界环境有着良好的热交换，在整个提取过程中可维持在室温下进行，因而最大程度地保留了中药材中药理活性物质及各种营养成分的天然结构，避免了因热效应引起的有效成分变性、损失、药理活性降低等问题。图1是高压连续提取的决明子提取物的HPLC色谱图；图2是本发明的决明子提取物的总离子流色谱图3是本发明的决明子提取物的正丁醇提取物的HSCCC分离色谱图4-1是本发明的决明子提取物的正丁醇提取物的HSCCC分离色谱图中峰I收集物的高效液相色谱图；；图4-2是本发明的决明子提取物的正丁醇提取物的HSCCC分离色谱图中峰II收集物的高效液相色谱图4-3是本发明的决明子提取物的正丁醇提取物的HSCCC分离色谱图中峰III收集物的高效液相色谱图4-4是本发明的决明子提取物的正丁醇提取物的HSCCC分离色谱图中峰IV收集物的高效液相色谱15图4-5是本发明的决明子提取物的正丁醇提取物的HSCCC分离色谱图中峰V收集物的高效液相色谱图5是回流提取方法提取的决明子提取物的HPLC指纹图谱；图6是超声提取方法提取的决明子提取物的HPLC指纹图谱；图7是高压连续提取的决明子提取物的HPLC指纹图谱；图8是各试验组的大鼠肝指数的结果柱形图9是各试验组的大鼠血清总胆固醇的结果柱形图IO是各试验组的大鼠高密度脂蛋白水平的结果柱形图11是各试验组的大鼠低密度脂蛋白水平的结果柱形图12是各试验组的大鼠血清甘油三酯的结果柱形图13是高压提取器的局部结构示意图。具体实施例方式下述实施例只是用于对本发明的内容进行阐述，而不是限制，因此在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围内。高压提取器(图13)的结构所述的高压提取器包括高压泵(图中未示出)、设有空腔的阀体84、设有通孔的阀座81、碰撞环82和与高压弹簧连接的阀芯83，阀芯83位于阀体空腔的一端，阀体空腔的另一端安装有阀座81，阀体84上开有液体进口811和液体出口813，高压泵的输出端与阀体84的液体进口811连通，阀体84的液体进口811则与阀座81中的通孔连通，阀座81为凸台结构，其具有肩部，碰撞环82与阀座81同轴固定在阀体84中，碰撞环82位于阀座肩部之端面处，阀座81位于阀体空腔内的端面与阀芯端面之间留有供液体流过的流动间隙，该间隙位于碰撞环82的内壁中部，部分碰撞环与阀芯相套，使两者之间留有碰撞料液的环形工作间隙812，所述阀体84上的液体出口813与环形工作间隙812相连通，用于排出高压破裂后的料液，该环形工作间隙812在0.1lmm的范围内。实施例一-取决明子粉末100g与1000ml70y。乙醇混合浸泡60分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在90Mpa高压作用下连续通过高压提取器的环形工作间隙，以高速冲击到高压提取器内的碰撞环上，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓縮，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。然后取决明子浸膏粉20g，按已知的制片技术和装备制成片剂。实施例二取决明子粉末200g与6000ml7(m乙醇混合浸泡30分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在60Mpa高压作用下连续通过高压提取器的环形工作间隙，以高速冲击到高压提取器内的碰撞环上，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓縮得到决明子提取物的浸膏。然后取决明子浸膏35g，按公知的制颗粒剂的技术和装备制成颗粒剂。实施例三取决明子粉末500g与6000ml60。/。乙醇混合浸泡60分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在50Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，连续循环的时间为15min，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓缩，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。然后取决明子浸膏粉90g，按已知的制片技术和装备制成片剂。实施例四取决明子粉末500g与7500ml80y。乙醇混合浸泡50分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在80Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，连续循环的时间为30min，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓缩，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。然后取决明子浸膏粉82g，按己知的制备颗粒剂的技术和装备制成颗粒剂。实施例五取决明子粉末500g与6000ml50。/。乙醇混合浸泡50分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在70Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，连续循环的时间为20min，使决明子的细胞壁破17裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓縮，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。然后取决明子浸膏粉80g,按已知的制备胶囊剂的技术和装备制成胶囊剂。实施例六取决明子粉末200g与6000111170%乙醇混合浸泡30分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在60Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，连续循环的时间为30min，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓縮，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。然后取决明子浸膏粉40g，按已知的制备胶囊剂的技术和装备制成胶囊剂。实施例七取决明子粉末300g与7500!160%乙醇混合浸泡40分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在30Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，连续循环的时间为25rain，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓缩得到决明子提取物的浸膏。然后取决明子浸膏50g，按已知的制备颗粒剂的技术和装备制成颗粒剂。实施例八取决明子粉末300g与6000ml85。/。乙醇混合浸泡30分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在40Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，以便使决明子的细胞壁经过多次撞击，连续循环的时间为lOmin，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经回收乙醇，浓縮，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。然后取决明子浸膏粉40g，按已知的制备片剂的技术和装备制成片剂。权利要求1、高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用。2、根据权利要求1所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的降血脂药物为降低胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和升高高密度脂蛋白的药物。3、根据权利要求1所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的降血脂药物为降低胆固醇的药物。4、根据权利要求1所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的降血脂药物为降低甘油三酯的药物。5、根据权利要求1所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的降血脂药物为降低低密度脂蛋白的药物。6、根据权利要求1所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的降血脂药物为升高高密度脂蛋白的药物。7、根据权利要求1~6任一所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的决明子提取物含有以下有效成分决明苷B2、决明苷C2、大黄酚-四吡喃葡萄糖苷、大黄酚-1-0-p-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)-e-D-吡喃葡萄糖基-(1—6)-{3-D-吡喃葡萄糖苷、红镰酶素-6-{3-龙胆二糖苷、红镰酶素-1-O-龙胆二糖苷、大黄酚-1-0-e-龙胆二糖苷、3-甲基-2，8-二羟基-l，6，7-三甲氧基蒽醌、1，2，6，8-四羟基-7-甲氧基-3-甲基蒽醌、1，2，6-三羟基-7，8-二甲氧基-3-甲基蒽醌、2-羟基-1，6，7，8-四甲氧基-3-甲基蒽醌、2，6-二羟基-l，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌、1，2-二羟基-6，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌。8、根据权利要求7所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的决明子提取物由以下方法制得取决明子粉末与乙醇按料液比1:1030混合浸泡3060分钟；然后将所得的料液送入高压提取器中，料液在3090Mpa高压作用下连续通过高压提取器的环形工作间隙，以高速冲击到高压提取器内的碰撞环上，使决明子的细胞壁破裂，有效成分扩散于溶剂中；最后取出经高压处理的料液，过滤，去除料渣，滤液经浓縮，干燥得到决明子提取物的浸膏粉。9、根据权利要求8所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的决明子与乙醇混合所得的料液在3090Mpa高压作用下连续循环多次通过高压提取器的环形工作间隙，使决明子的细胞壁经过多次撞击，有利于进一步提高决明子有效成分的提取率；所述连续循环过程的持续时间在1030min的范围内。10、根据权利要求9所述的高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用，其特征是，所述的降血脂药物为片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液或丸剂。全文摘要本发明涉及高压连续提取的决明子提取物在降血脂药物制备中的应用。该高压连续提取的决明子提取物具有比其他提取方法提取的提取物更强的降血脂的药效，而且其在治疗高脂血症的效果明显优于复方制剂一血脂康，因此可以不需和其他药物配伍，而制备成应用于降血脂的决明子单方制剂，并具有明显的降血脂的效果。文档编号A61K36/482GK101549008SQ20091003963公开日2009年10月7日申请日期2009年5月21日优先权日2009年5月21日发明者朱立才,勇梁,藏林泉申请人:华南师范大学