一种治疗癌症的中药提取物制剂及其制备方法

专利名称：一种治疗癌症的中药提取物制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗癌症的中药提取物制剂及其制备方法，属于中药 制药的技术领域。
背景技术：
近年来，肺癌、原发性肝癌、结直肠癌、妇科恶性肿瘤等的发病率逐年上 升，已成为严重危害人类健康的最常见的恶性肿瘤，给我们的社会、经济、生活带来诸多不 变。艾迪注射液是本公司发明品种，由人参、黄芪、刺五加和斑蝥4味中药制成，具有清热解 毒、消瘀散结的作用，临床上主要用于原发性肝癌、肺癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科恶性肿 瘤的治疗等，收载于卫生部部颁标准20册。申请人在专利号为03117114. 1《治疗肿瘤的中 药注射制剂及其制作方法》中公开了艾迪注射液的制备工艺采用人参醇、水分提，其余三 味水提，石硫沉淀法处理、醇沉的方法获取有效成分，该方法构成简单，有效药效成分损失 多，收率低，同时容易导致药液中成分变化不稳定，也使得大量具有抗肿瘤作用的多糖成分 没有得到利用。药材的常规提取方法为水提或醇提，但究竟药材适用于水提、醇提还是醇水结合 是需要药学工作者去研究的一个重点，本发明人在工艺研究的过程中惊奇地发现，将斑蝥、 人参、黄芪和刺五加药材分别进行处理，然后再将粗提物进行精制纯化，不仅可以提高单个 药材有效成分的提取效率，降低杂质含量，还能将大量多糖成分保留下来。

发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗癌症的中药提取物制剂及其制备方法。它是以人 参、斑蝥、黄芪和刺五加为原料药材经提取得到的有效成分提取物制备而成的不同的制剂。本发明是这样实现的一种治疗癌症的中药提取物制剂，按照重量份计算，它是用 斑蝥0. 9-2. 1份、人参30-70份、黄芪60-140份、刺五加90-210份按下述方法制成步骤1)斑蝥粉碎，加水煎煮2-4次，合并煎煮液，用氢氧化钠调pH9. 0 10. 0，滤 过，得斑蝥素提取物；步骤2)人参切片，用55% -75%乙醇回流提取2-4次，合并提取液，回收乙醇，得 人参粗提取物备用；刺五加粉碎，用60-80%的乙醇回流提取2-4次，合并提取液，回收乙 醇，得刺五加粗提取物备用；将人参粗提取物与刺五加粗提取物合并，滤过，滤液通过大孔 树脂吸附柱洗脱，洗脱液浓缩，得人参皂苷和刺五加总苷提取物；步骤幻人参、刺五加提取后的药渣与黄芪药材共水煎煮2-4次，合并煎液，滤过， 滤液以石硫沉淀法处理1-3次，所得上清液加入乙醇使含醇量达60-90%，静置，回收乙醇， 得多糖提取物；步骤4)将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取物混合， 加入辅料或者不加辅料，采用不同的方法制备成不同的制剂。准确地说，按照重量份计算，它是用斑蝥1. 5份、人参50份、黄芪100份和刺五加 150份制成的。所述的提取物制剂为水针制剂、输液制剂、粉针制剂或冻干粉针制剂。具体的制备方法为步骤1)斑蝥粉碎为40 60目的细粉，加水煎煮2-4次，每次加6-12倍量的水，提取0. 5-2小时，合并煎煮液，用2%氢氧化钠调pH9. 0 10. 0，滤过，得 斑蝥素提取物；步骤2)人参切片，用55%-75%乙醇浸泡10-14小时，然后回流提取2-4次，每 次6-10倍量、0. 5-2小时，合并提取液，浓缩，回收乙醇，得人参粗提取液；刺五加粉碎，用 60% -80%乙醇回流提取2-4次，每次6-10倍量、0. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇，即得 刺五加粗提取液；将人参粗提取液与刺五加粗提取液合并，滤过，滤液通过大孔树脂吸附 柱，先用水洗至无色，再换用50% -90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，得人参皂苷 和刺五加总苷提取物备用；步骤幻人参、刺五加提取后的药渣与黄芪药材共4-6倍量水煎煮2-4次，每次 0. 5-2小时，合并煎煮液，滤过，滤液以石硫沉淀法处理1-3次，所得上清液加入乙醇使含醇 量达60-90%，静置12- 小时，取上清液减压回收乙醇至无醇味，加注射用水稀释，得多糖 提取物备用；步骤4)将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取物混合， 加入或不加入辅料，按照不同的制备方法分别制成不同的注射制剂。优选的制备方法为步骤1)斑蝥粉碎为40-60目的细粉，加水煎煮3次，每次加9 倍量的水，提取1小时，合并煎煮液，用2%氢氧化钠调pH9.0 10.0，滤过，得斑蝥素提取 物备用；步骤2)人参切片，用65%乙醇浸泡12小时，然后回流提取3次，每次8倍量、1小 时，合并提取液，浓缩，回收乙醇，得人参粗提取液；刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次， 每次8倍量、1小时，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加粗提取液；将人参粗提取液与刺五 加粗提取液合并，滤过，滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用70%乙醇洗脱， 收集乙醇洗脱液，减压浓缩，得人参皂苷和刺五加总苷提取物备用；步骤3)人参、刺五加提取后的药渣与黄芪药材共5倍量水煎煮3次，每次1小时， 合并煎煮液，滤过，滤液以石硫沉淀法处理2次，所得上清液加入乙醇使含醇量达80%，静 置18小时，取上清液减压回收乙醇至无醇味，加注射用水稀释，得多糖提取物备用；步骤4)将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取物混合， 加入或不加入辅料，按照不同的制备方法分别制成不同的注射制剂。本发明中大孔树脂柱是指⑶180柱、DA201柱、DlOl柱，优选DA201柱。其中，水针制剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取 物、多糖提取物合并，加注射用水溶解并灌封于相应容器内，115°C热压灭菌1-2次，每次30 分钟，冷却后，纸浆抽滤，滤液加注射用水稀释，垂熔滤球过滤，灌封，115°C再热压灭菌30 分钟，制备成水针制剂；输液制剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多 糖提取物合并，加注射用水溶解，加入氯化钠、氯化钙、葡萄糖或右旋糖酐调节等渗，灭菌， 制备成输液制剂；粉针制剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多 糖提取物合并，加注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，干燥，制备成粉针制剂；冻干粉针制剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取 物、多糖提取物合并，加注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，冷冻干燥，制备成冻干粉针制剂。与现有技术相比较，本发明采用分别处理的方法，将斑蝥药材采用水提取后碱调 节分离的方法，提高了药物的稳定性，使提取液均一，无溶剂残留；人参、黄芪、刺五加药材 分别进行醇、水提取，并采用大孔树脂与石硫沉淀相结合的处理方式，提高提取物中抗癌有 效成分总苷及多糖的含量，使得到的提取物制剂稳定性好、吸收充分、起效快、疗效高，提高 了艾迪注射液的技术含量，从而提高和保证了产品的质量。本发明是经过大量试验研究而获得的，具体的研究为实验1 提取工艺研究1. 1斑蝥提取工艺1. 1. 1斑蝥提取溶剂的选择斑蝥中所含的主要成分为斑蝥素等，发明人同时选用了氯仿、75%乙醇、水作为溶 媒，以各提取工艺中斑蝥素的提取率作为指标，对不同的提取方法进行比较，结果见下表。
不同溶剂对斑蝥素的提取率
序号提取溶媒斑蝥素提取率及 所得物质性状备 注1氯仿转移率约为50%, 淡黄色油状物， 不溶于水溶于水，有较多油脂状物，不利于制 剂的制作。275%乙醇转移率约为 56.4%，提取液为 淡黄色，较浑浊。率稍差，提取液冋收乙醇后含量不均 一，批间稳定性不好。3水提取，提取液用 2%氢氧化钠调 pH9. 5 10.0转移率约为68%， 提取液淡黄色， 清澈。该方法可用于斑蝥素的提取，提取液 均一，稳定，无溶剂残留，对环境污 染小，生产成本较低由表中结果可以看出，3种溶媒相比较，斑蝥素的提取率相差不大，但水提液均一， 稳定，无溶剂残留，生产成本较低，因此本发明工艺中选用水作为溶媒来提取斑蝥。1. 1.2药材粉碎度的考察样品制备分别称取斑蝥饮片，40 60目斑蝥粉，80 100目斑蝥细粉各30g，同 等加水量煎煮2小时，滤过，分别收集滤液。总固形物得率的测定精密吸取浓缩液20ml置已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于 105°C干燥3小时，置干燥器中冷却0. 5小时，迅速称重，按下试计算干膏率。结果见下表。
总固形物得率(％) =^1^x100%
V1XW式中％为干膏重量，V为定容的体积，Vl为精密吸取的体积，W为煎煮药材的重 量斑蝥素含量测定照中国药典气相色谱法测定。结果见下表。药材粉碎度-斑蝥素含量、总固形物得率表药材性状斑蝥素含量(mg/g药材)总固形物得率(％ )饮片8. 4910. 7(40 60目)粉14. 0715. 8(80 100目)粉14. 1816. 1由表中结果可以看出，斑蝥药材未经粉碎，提取效果差，粉碎后斑蝥素和其他物质 都能较好的溶出，其中40 60目的斑蝥粉与80 100目的粉对于提取结果无大的差别， 实验过程中发现80 100目的斑蝥粉，因为粉体较细，提取后较难过滤，从方便大生产考 虑，选择斑蝥粉碎为40 60目的粉提取。1.1.3提取加水量考察样品制备称取40 60目斑蝥粉30g，共3份，依下表条件加入不同的水量，煎煮 3次，第一次1. 5小时，第二次1小时，第三次0. 5小时，滤过，分别收集滤液。斑蝥素含量和总固形物得率测定方法同1. 3. 1。结果见下表。加水量-斑蝥素含量、总固形物得率表
加水量为药材 倍数4689101214斑蝥素含量 (mg/g药材)10. 3112. 7813. 6514. 3914. 4814. 5314. 55总固形物得率 (%)11.413.815. 617. 117.417. 617. 7当提取水量加大时，斑蝥素的量和总固形物得率并没有较大的增加，所以选择加 水量为6-12倍量，优选9倍量。综合上述结果，斑蝥药材的提取工艺为粉碎为40-60目的细粉，加水煎煮2-4次， 每次加入6-12倍量的水，煎煮0. 5-2小时。优选为粉碎为40-60目的细粉，加水煎煮3次， 每次加9倍量的水，煎煮1小时，合并煎煮液，用2%氢氧化钠调pH9. 0 10. 0，滤过，即得。1.2刺五加提取工艺1.2. 1提取方法选择取刺五加药材，分别采用加水煎煮、乙醇回流两种方法进行提取，以含量、提取液 色泽、澄明度为指标，考察药材的提取率。水提、醇提刺五加效果评价表
工艺色泽含量(mg/L)澄明度水提深棕褐色744浑浊醇提棕红1203澄明结果表明，采用醇提工艺，提取液经处理后澄明度较好、色泽较浅，浅棕红色；而水 提的刺五加在澄明度、色泽、含量等方面均较差，色泽较深，浅褐色。故选择醇提。1. 2. 2提取工艺研究提取溶媒的加入量，提取时间和次数是影响提取工艺的重要因素，以紫丁香苷含 量为指标，对以上参数进行考察，以优选最佳工艺条件。a.乙醇浓度考察样品制备取刺五加药材50g，粉碎，按下表浓度加入乙醇溶液，加热回流3次，每 次1小时，合并回流液，滤过。乙醇浓度考察表
乙醇浓度50%60%70%80%90%含量(mg/L)8531185120612171225表中数据显示，乙醇浓度为60% -80%时紫丁香苷几乎已经提取完全，其中70% 浓度为最佳，比较经济合理。b.提取时间考察取刺五加药材50g共6份，切片，同等乙醇量分别加热回流0. 5、1、1· 5、2、2· 5、3小 时，滤过，定容至一定体积，取样测定。结果如下提取时间考察表
提取时间0. 511. 522. 53含量(mg/L)94510481132117411811183由表中数据可看出，提取2小时后，紫丁香苷含量无明显改变，说明刺五加提取2 小时后，物质的溶出已趋于饱和。考虑到实际生产效率，优选提取时间为1小时。c.乙醇用量的考察样品制备取刺五加药材50g共3份，依下表条件加入不同量70%乙醇，加热回流 3次，每次1小时，滤过，收集滤液。结果如下乙醇用量考察表乙醇量为药材重量的倍 数468101214含量(mg/L)81410271156119412101212紫丁香苷含量随乙醇量的加大而增加，但到一定程度后没有较大变化，所以选择 乙醇用量为药材重量的6-10倍，优选用量为8倍量。综合上述实验结果，决定刺五加药材的提取工艺为用60% -80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提取0.5-2小时。优选为用70%乙醇回流提取3次，每 次加入乙醇8倍量、提取1小时。1. 3人参提取工艺1.3. 1提取方法选择取人参药材，分别采用加水煎煮、乙醇回流、乙醇回流后药渣加水煎煮三种方法进 行提取，以人参总皂苷、提取液色泽、澄明度、过滤难易程度为指标，考察人参总皂苷的提取率。人参提取工艺表
权利要求
1.一种治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于按照重量份计算，它是用斑蝥 0. 9-2. 1份、人参30-70份、黄芪60-140份和刺五加90-210份为原料药材经下述方法提取 得到的有效成分提取物制备而成的不同的制剂步骤1)斑蝥粉碎，加水煎煮2-4次，合并煎煮液，用氢氧化钠调pH9. 0 10. 0，滤过，得 斑蝥素提取物；步骤幻人参切片，用55% -75%乙醇回流提取2-4次，合并提取液，回收乙醇，得人参 粗提取物备用；刺五加粉碎，用60-80%的乙醇回流提取2-4次，合并提取液，回收乙醇，得 刺五加粗提取物备用；将人参粗提取物与刺五加粗提取物合并，滤过，滤液通过大孔树脂吸 附柱洗脱，洗脱液浓缩，得人参皂苷和刺五加总苷提取物；步骤幻人参、刺五加提取后的药渣与黄芪药材共水煎煮2-4次，合并煎液，滤过，滤液 以石硫沉淀法处理1-3次，所得上清液加入乙醇使含醇量达60-90%，静置，回收乙醇，得多 糖提取物；步骤4)将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取物混合，加入 辅料或者不加辅料，采用不同的方法制备成不同的制剂。
2.权利要求1所述的治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于按照重量份计算，它是 用斑蝥1. 5份、人参50份、黄芪100份和刺五加150份制成的。
3.根据权利要求1或2所述的治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于制备方法为步骤1)斑蝥粉碎为40 60目的细粉，加水煎煮2-4次，每次加6-12倍量的水，提取0. 5-2小时，合并煎煮液，用2%氢氧化钠调pH9. 0 10. 0，滤过，得斑蝥素提取物；步骤2)人参切片，用55% -75%乙醇浸泡10-14小时，然后回流提取2-4次，每次 6-10倍量、0. 5-2小时，合并提取液，浓缩，回收乙醇，得人参粗提取液；刺五加粉碎，用 60% -80%乙醇回流提取2-4次，每次6-10倍量、0. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇，即得 刺五加粗提取液；将人参粗提取液与刺五加粗提取液合并，滤过，滤液通过大孔树脂吸附 柱，先用水洗至无色，再换用50% -90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，得人参皂苷 和刺五加总苷提取物备用；步骤幻人参、刺五加提取后的药渣与黄芪药材共4-6倍量水煎煮2-4次，每次0. 5-2 小时，合并煎煮液，滤过，滤液以石硫沉淀法处理1-3次，所得上清液加入乙醇使含醇量达 60-90%，静置12- 小时，取上清液减压回收乙醇至无醇味，加注射用水稀释，得多糖提取 物备用；步骤4)将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取物混合，加入 或不加入辅料，按照不同的制备方法分别制成不同的注射制剂。
4.根据权利要求3所述的中药提取物制剂，其特征在于制备方法为步骤1)斑蝥粉碎为40-60目的细粉，加水煎煮3次，每次加9倍量的水，提取1小时， 合并煎煮液，用2%氢氧化钠调pH9. 0 10. 0，滤过，得斑蝥素提取物备用；步骤2)人参切片，用65%乙醇浸泡12小时，然后回流提取3次，每次8倍量、1小时， 合并提取液，浓缩，回收乙醇，得人参粗提取液；刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次，每 次8倍量、1小时，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加粗提取液；将人参粗提取液与刺五加 粗提取液合并，滤过，滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用70%乙醇洗脱，收 集乙醇洗脱液，减压浓缩，得人参皂苷和刺五加总苷提取物备用；步骤幻人参、刺五加提取后的药渣与黄芪药材共5倍量水煎煮3次，每次1小时，合并 煎煮液，滤过，滤液以石硫沉淀法处理2次，所得上清液加入乙醇使含醇量达80 %，静置18 小时，取上清液减压回收乙醇至无醇味，加注射用水稀释，得多糖提取物备用；步骤4)将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取物混合，加入 或不加入辅料，按照不同的制备方法分别制成不同的注射制剂。
5.按照权利要求1或2所述治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于所述的制剂为 水针制剂、输液制剂、粉针制剂或冻干粉针制剂。
6.按照权利要求5所述的治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于水针剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取 物合并，加注射用水溶解并灌封于相应容器内，115°C热压灭菌1-2次，每次30分钟，冷却 后，纸浆抽滤，滤液加注射用水稀释，垂熔滤球过滤，灌封，115°C再热压灭菌30分钟，制备 成水针制剂。
7.按照权利要求5所述的治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于输液剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取 物合并，加注射用水溶解，加入氯化钠、氯化钙、葡萄糖或右旋糖酐调节等渗，灭菌，制备成 输液制剂。
8.按照权利要求5所述的治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于粉针剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖提取 物合并，加注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，干燥，制备成粉针制剂；
9.按照权利要求5所述的治疗癌症的中药提取物制剂，其特征在于冻干粉针剂的制备方法为将上述斑蝥素提取物、人参皂苷和刺五加总苷提取物、多糖 提取物合并，加注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，冷冻干燥，制备成冻干粉针制 剂。
全文摘要
本发明公开了一种治疗癌症的中药提取物制剂及其制备方法，它由斑蝥、人参、黄芪、刺五加制备而成，本发明采用分别处理的方法，将斑蝥药材采用碱水提取，提高药物的稳定性，使提取液均一，无溶剂残留；人参、黄芪、刺五加药材分别进行醇、水提取，并采用大孔树脂与石硫沉淀相结合的处理方式，提高提取物中抗癌有效成分总苷及多糖的含量，使得到的提取物制剂稳定性好、吸收充分、起效快、疗效高，提高了艾迪注射液的技术含量，从而提高和保证了产品的质量。
文档编号A61K36/481GK102078368SQ20091010289
公开日2011年6月1日 申请日期2009年11月26日 优先权日2009年11月26日
发明者窦啟玲 申请人:贵州益佰制药股份有限公司