专利名称：复方板蓝根口服液的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及复方板蓝根口服液的质量控制方法，特别涉及复方板蓝根口服液的含
量测定方法。
背景技术：
复方板蓝根口服液为已上市品种，标准号为YBZ02732006，具有清热解毒、凉血的 功能，用于温病发热、出斑、风热感冒、咽喉肿烂、流行性乙型脑炎、肝炎、腮腺炎，抗病毒作 用为其主要药理作用。本品由板蓝根和大青叶两味药材经水提醇沉制成，板蓝根和大青叶 为常用抗病毒中药，板蓝根含有机酸类、生物碱类、木脂素类、苷类、氨基酸等多种成分，包 括靛蓝、靛玉红、腺苷、表告依春、落叶松树脂等，大青叶含有机酸、靛蓝、靛玉红、菘蓝苷、色 胺酮、喹唑酮、异牡荆素、落叶松树脂等化合物。复方板蓝根口服液质量标准中以靛玉红为 指标成分进行含量控制，但靛玉红既无抗病毒作用，也无抗内毒素作用，且其为脂溶性成 分，在水提制剂中含量较低，作为质控指标意义不大。 近年来，国内学者研究发现板蓝根所含的表告依春有很强抗病毒作用徐丽华等 用鸡胚法将从板蓝根总生物碱中分离得到的3种单体化合物靛玉红、2，4(1H，3H)喹唑二酮 和表告依春作抗流感病毒实验，并同时作总生物碱提取物和水提液、醇提液实验，以血凝效 价为指标，进行抗病毒活性检测。结果显示水提液、醇提液、总生物碱液和表告依春液有明 显的抗流感病毒作用，喹唑二酮抗病毒作用较弱，而靛玉红无抗流感病毒作用。而且表告依 春的水溶性很好，在水提制剂中含量较高，适合作为板蓝根水提制剂的质量控制指标。
发明内容
本发明目的在于提供一种复方板蓝根口服液的含量测定方法。 复方板蓝根口服液的含量测定方法如下 复方板蓝根口服液的含量测定方法采用高效液相色谱法。 高效液相色谱法包括色谱条件与系统适用性试验，对照品溶液的制备，供试品溶 液的制备和表告依春的含量测定步骤。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇_磷酸二 氢盐缓冲液(碱液调节P朋.8 7. 5) (4 12 : 96 88)为流动相；紫外检测器。
对照品溶液的制备精密称取表告依春对照品适量，加甲醇_水(0 100 : 100 0)制成一定浓度的对照品溶液，即得。 供试品溶液的制备精密量取本品，加水稀释5 50倍，用微孔滤膜(0.45iim)滤 过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 20 ii 1，注入液相色谱仪，测 定，即得。 流动相中的磷酸二氢盐可以是磷酸二氢钠、磷酸二氢钾等，磷酸二氢盐的浓度可 以是0. 005mol/L 0. 04mol/L，所述的碱液可以是氢氧化钠、氢氧化钾等配制的溶液，浓度范围是0. 005mol/L 0. 04mol/L。所述的紫外检测器可选用的检测波长较佳的范围是230nm 250nm。
所述的一定浓度的对照品溶液，浓度范围为2 ii g/ml 40 ii g/ml。
下面实验例用于进一步说明本发明的技术方案和技术效果。
实验例复方板蓝根口服液的含量测定 仪器安捷伦1200高效液相色谱仪，安捷伦化学工作站；十八烷基硅烷键合硅胶 色谱柱(安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C18 4. 6 X 250mm)，安捷伦EP-C18保护柱；TU_1901 紫外可见分光光度计；BP211D电子天平。 试药表告依春化学对照品(含量测定用，批号111753-200601，中国药品生物制 品检定所)，纯度经检查符合含量测定用化学对照品的技术要求，含量为99.3% ;甲醇(色 谱纯)，水(哇哈哈纯净水)，磷酸二氢钠(分析纯)，氢氧化钠(分析纯)。
样品复方板蓝根口服液及缺板蓝根药材的阴性对照样品。 对照品溶液的制备精密称取表告依春对照品9. 69mg，置100ml量瓶中，加甲醇-水 (10 : 90)使溶解并稀释至刻度，摇匀(0. 0969mg/ml);精密量取lml置10ml量瓶，加甲 醇-水(10 : 90)至刻度，摇匀，即得(9. 69 ii g/ml)。 供试品溶液的制备精密量取本品2ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔 滤膜(0. 45 m)滤过，取续滤液，即得。 阴性样品溶液的制备阴性样品溶液是按处方比例称取缺板蓝根的药材，按制法制 成缺板蓝根的阴性样品，再取此阴性样品按上述"供试品溶液的制备"方法制备阴性样品溶 液。 试验条件色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(安捷伦ZORBAX Eclipse Plus
C184. 6X250mm)，安捷伦EP-C18保护柱；流动相甲醇_0. Olmol/L磷酸二氢钠缓冲液(氢
氧化钠试液调节pH7. 2) (7 : 93);流速1. Oml/min ;检测波长240nm。 分别精密吸取表告依春对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各10iU，注入液
相色谱仪，测定。此条件下表告依春与其它组分达到基线分离，分离度R〉 1. 5，理论塔板数
按表告依春计算大于3000，表告依春保留时间约为12分钟。阴性样品溶液在色谱相应位置
无吸收峰，可见阴性无干扰。 考察了甲醇-0. Olmol/L磷酸二氢钠缓冲液(氢氧化钠试液调节pH7. 2)不同的流 动相比例及甲醇-O. Olmol/L磷酸二氢钠缓冲液(氢氧化钠试液调节pH) (7 : 93)不同的 流动相pH值，结果流动相比例为(4 12 : 96 88) ， pH值为6. 8 7. 5时，表告依春均 能较好分离。还考察了不同比例的甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0. 1%磷酸、乙腈_0.2%磷酸 等流动相，结果分离均不理想。 方法学验证结果对照品纯度检查以峰面积归一化法计算含量为99. 3% ，符合含 量测定要求，测定时按100%计算。线性关系考察回归方程为A = 7154. 3C-22. 73， r =
0. 9999。表明表告依春进样量在0. 01938 0. 3876 y g范围内线性关系良好，并且直线通过 原点，可用单点外标法进行测定和计算。对应的对照品浓度为1. 938 ii g/ml 38. 76 y y g/ ml。精密度试验平均值为649. 9，RSD为0. 11%，表明精密度较好。稳定性试验峰面积平 均值为824. 8，RSD为0. 59%，表明供试品溶液在9h内稳定性较好。重复性试验平均值为
1. 53mg/支，RSD为0. 42% ，表明方法重复性较好。加样回收率试验平均回收率为99. 7% ，
4RSD为0. 77%，表明方法回收率较好。
具体实施例如下 实施例1复方板蓝根口服液含量测定方法 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲液(氢氧化钠试液调节pH7.2) (7 : 93)为流动相；检测波 长240nm。 对照品溶液的制备精密称取表告依春对照品适量，加甲醇-水(10 : 90)制成 每lml含10iig的溶液，即得。 供试品溶液的制备精密量取本品2ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔 滤膜(0. 45 ii m)滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ii 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。实施例2复方板蓝根口服液含量测定方法 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0. Olmol/L磷酸二氢钾缓冲液(氢氧化钾试液调节pH6. 8) (4 : 96)为流动相；检测波 长250nm。 对照品溶液的制备精密称取表告依春对照品适量，加甲醇制成每lml含10i! g的 溶液，即得。 供试品溶液的制备精密量取本品2ml，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔 滤膜(0. 45 ii m)滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5iU，注入液相色谱仪，测定，即 得。实施例3复方板蓝根口服液含量测定方法 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲液(氢氧化钠试液调节pH7.5) (12 : 88)为流动相；检测波 长230nm。 对照品溶液的制备精密称取表告依春对照品适量，加水制成每lml含10 ii g的溶 液，即得。 供试品溶液的制备精密量取本品lml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔 滤膜(0. 45 ii m)滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 ii 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。
权利要求
一种复方板蓝根口服液中表告依春的含量测定方法，其特征在于，测定表告依春的方法采用的是高效液相色谱法。其测定方法包括以下步骤色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(碱液调节pH6.8～7.5)(4～12∶96～88)为流动相；紫外检测器。对照品溶液的制备精密称取表告依春对照品适量，加甲醇-水(0～100∶100～0)制成一定浓度的对照品溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品，加水稀释5～50倍，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2. 如权利要求l的含量测定方法，其特征在于，流动相中的磷酸二氢盐可以是磷酸二 氢钠、磷酸二氢钾等，磷酸二氢盐的浓度可以是0. 005mol/L 0. 04mol/L，所述的碱液可以 是氢氧化钠、氢氧化钾等配制的溶液，浓度范围是0. 005mol/L 0. 04mol/L。
3. 如权利要求1的含量测定方法，其特征在于，所述的紫外检测器检可选用的检测波 长较佳的范围是230nm 250nm。
4. 如权利要求l的含量测定方法，其特征在于，所述的一定浓度的对照品溶液，浓度范 围为2 ii g/ml 40 ii g/ml。
全文摘要
本发明公开一种复方板蓝根口服液的质量控制方法，采用的是高效液相色谱法，此方法精密度、稳定性、重现性良好，能够有效地控制复方板蓝根口服液的产品质量。
文档编号A61K36/315GK101703552SQ20091011456
公开日2010年5月12日 申请日期2009年11月18日 优先权日2009年11月18日
发明者梁山丹, 程雪, 莫少红, 陈晓军 申请人:广西汇科药物研究有限责任公司