专利名称：一种曼陀罗子总黄酮提取制备方法
技术领域：
本发明涉及茄科植物种子总黄酮提取制备方法，尤其涉及一种曼陀罗子总黄酮提
取制备方法。
背景技术：
曼陀罗子为茄科植物曼陀罗Datura stramoni皿L.的干燥成熟种子。秋季果实 成熟时割下果枝，打下种子晒干。呈肾形，略扁，长3 4mm，宽2. 5 3. 2mm。表面黑色或 棕黑色，具有隆起的网纹，遍布小凹点。种脐为于一侧，平坦。横切面外种皮撑类方形，常 为底和侧面增厚。内层为数列切线延长的棕色薄壁细胞。外胚乳细胞呈扁矩形，切线延长， 在种皮内层与外胚之间夹有颓废层。内胚乳细胞多角形，较大，内含脂肪油滴及蛋白粒。气 微，味辛辣。其曼陀罗全草入药，具有镇咳平喘、麻醉止痛、祛风除湿的功效，能治哮喘、银屑 病、惊痛、风湿痹痛、疮疡疼痛、脱肛、泻痢等多种疾病。曼陀罗花治疗银屑病效果十分显著。 曼陀罗是重要的麻醉药，可制作外科手术麻醉剂。而曼陀罗种子具有镇静，止痛，安神，止 咳，平喘的功能，主治关节骨痛，胃痛腹痛，咳嗽气喘。曼陀罗子的药效跟其总黄酮类成分有 很大的关系，由于其生理活性较强，应用广泛，因此选择性好，操作简单的提取纯化方法，分 离曼陀罗有效成分，是一项很有意义的工作。 中药中黄酮类化合物的提取制备方法有冷浸法，水提法，醇提法，水提法和醇提法 一般要求回流加热。冷浸法和水提法的提取效率低；醇提法的提取率高，但耗费溶剂，且提 取杂质高。
发明内容
针对现有曼陀罗子中总黄酮的提取与纯化方法上存在的不足之处，本发明提供一 种全新的曼陀罗子中总黄酮的提取制备方法，主要用重量分数O. 5 5% NaOH水溶液和树 脂对曼陀罗子进行柱提纯，采用这种方法，降低了有机溶剂在整个提纯过程中的应用，防止 了有机溶剂对最终产物的影响，本发明方法纯化曼陀罗子，获得纯化的曼陀罗子总黄酮含 量>55%。且重现性好，树脂可重复使用。 本发明所述的技术方案如下一种曼陀罗子总黄酮树脂提取制备方法，由以下具 体步骤组成 1)取粉碎的曼陀罗子，加入药材质量10 30倍体积量的提取剂，先浸泡10 20 小时，然后回流提取2 8小时，收集提取液，过滤。优选以药材质量15 20倍体积量的 提取剂用量，浸泡15小时，回流提取4 5小时。 2)将步骤1得到的提取液浓縮到10mg/ml，选用HPD-400或HPD-600或AB-8或 D101大孔树脂，上样，上样吸附0. 1 2. 0小时，先水洗，水洗体积为1BV 4BV，水洗流速 为lBV/h 4BV/h，然后用乙醇洗脱，洗脱用乙醇体积分数为30% 80%，洗脱量为1BV 4BV，洗脱速度为lBV/h 4BV/h。优选工艺条件为HPD-600或D101大孔树脂进行纯化，上 样吸附时间为1. 0小时，水洗体积为2BV 3BV，水洗流速为2BV 3BV，洗脱用乙醇浓度为
340 % 60%，乙醇洗脱量为2BV 3BV，乙醇洗脱速度为2BV/h 3BV/h。3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓縮，5(TC 6(TC真空干燥，得干燥的纯化产品。 本发明提供的一种曼陀罗子的总黄酮提取制备方法步骤l所采用的提取剂为
0. 5 5% NaOH水溶液。优选0. 5 1 % NaOH水溶液。其优点是，低浓度的NaOH水溶液比
水溶液提取黄酮类化合物的提取效率高，而且较之有机溶剂法提取节省溶剂。 本发明提供的一种曼陀罗子的总黄酮提取制备方法步骤1的回流状态为减压条
件下采用微波加热。微波加热功率为50W 500W，优选100W 200W。其优点是，微波加
热对黄酮类活性成分的损害少，加压条件下微波加热的提取效率高。 本发明方法纯化曼陀罗子，获得纯化的曼陀罗子总黄酮含量>55%。且重现性好，
树脂可重复使用。
本发明具有以下优点 1.本发明提供的曼陀罗子总黄酮提取制备方法操作简单、快捷；
2.所选的大孔树脂具有吸附量大、解吸率大的功能；
3.以乙醇为溶剂和洗脱剂，价廉、无毒。
具体实施例方式
为了更好理解本发明的技术方案，以下通过具体的实施例进一步详细描述。
实施例l 1)取粉碎的曼陀罗子100g，加入药材质量IO倍体积量的O. 5% NaOH水溶液，先浸
泡10小时，然后微波加热，功率为150W，减压回流提取4小时，收集提取液，过滤； 2)将步骤1得到的过滤液浓縮到10mg/ml，选用HPD-600大孔树脂纯化，上样吸附
0. 5小时，先用1BV蒸馏水水洗，水洗流速为2BV/h，再用体积分数40%乙醇溶液为洗脱剂洗 脱，洗脱量为3BV，洗脱速度为2BV/h ; 3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓縮，5(TC真空干燥，得干燥的纯化产品4. 83g，黄酮 含量为59.1%。
实施例2 1)取粉碎的曼陀罗子100g，加入药材质量15倍体积量的1 % NaOH水溶液，先浸泡
15小时，然后微波加热，功率为200W，减压回流提取3小时，收集提取液，过滤； 2)将步骤1得到的过滤液浓縮到10mg/ml，选用D-101大孔树脂纯化，上样吸附
1. 0小时，先用2BV蒸馏水水洗，水洗流速为3BV/h，再用体积分数60%乙醇溶液为洗脱剂洗 脱，洗脱量为2BV，洗脱速度为3BV/h ; 3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓縮，55t:真空干燥，得干燥的纯化产品4. 76g黄酮 含量为55. 2%。
实施例3 1)取粉碎的曼陀罗子100g，加入药材质量20倍体积量的3% NaOH水溶液，先浸泡 20小时，然后微波加热，功率为150W，减压回流提取5小时，收集提取液，过滤；
2)将步骤1得到的过滤液浓縮到10mg/ml，选用AB-8大孔树脂纯化，上样吸附1. 5 小时，先用1BV蒸馏水水洗，水洗流速为2BV/h，再用体积分数70X乙醇溶液为洗脱剂洗脱， 洗脱量为1BV，洗脱速度为lBV/h ;
3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓縮，5(TC真空干燥，得干燥的纯化产品4. 27g，黄酮 含量为56.7%。
实施例4 1)取粉碎的曼陀罗子100g，加入药材质量18倍体积量的2% NaOH水溶液，先浸泡 12小时，然后微波加热，功率为180W，减压回流提取3小时，收集提取液，过滤；
2)将步骤1得到的过滤液浓縮到10mg/ml，选用HPD-400大孔树脂纯化，上样吸附 1. 0小时，先用4BV蒸馏水水洗，水洗流速为4BV/h，再用体积分数30%乙醇溶液为洗脱剂洗 脱，洗脱量为4BV，洗脱速度为3BV/h ; 3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓縮，6(TC真空干燥，得干燥的纯化产品4. 62g，黄酮 含量为58. 4%。
实施例5 1)取粉碎的曼陀罗子100g，加入药材质量18倍体积量的体积分数为50%乙醇溶 液，先浸泡10小时，然后微波加热，功率为IOOW，减压回流提取4小时，收集提取液，过滤；
2)将步骤1得到的过滤液浓縮到10mg/ml，选用D-101大孔树脂纯化，上样吸附 1. 0小时，先用2BV蒸馏水水洗，水洗流速为2BV/h，再用体积分数50%乙醇溶液为洗脱剂洗 脱，洗脱量为2BV，洗脱速度为3BV/h ; 3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓縮，55t:真空干燥，得干燥的纯化产品4. 62g，黄酮 含量为55.7%。
实施例6 1)取粉碎的曼陀罗子100g，加入药材质量15倍体积量的1 % NaOH水溶液，先浸泡 15小时，电热套加热，减压回流提取4小时，收集提取液，过滤； 2)将步骤1得到的过滤液浓縮到10mg/ml，选用D-101大孔树脂纯化，上样吸附 1. 0小时，先用3BV蒸馏水水洗，水洗流速为3BV/h，再用体积分数60%乙醇溶液为洗脱剂洗 脱，洗脱量为2BV，洗脱速度为lBV/h ; 3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓縮，6(TC真空干燥，得干燥的纯化产品5.01g，黄酮 含量为59. 8%。
权利要求
一种曼陀罗子总黄酮提取制备方法，其特征是步骤为1)取粉碎的曼陀罗子，加入药材质量10～30倍体积量的提取剂，先浸泡10～20小时，然后回流提取2～8小时，收集提取液，过滤；2)将步骤1得到的提取液浓缩到10mg/ml，选用HPD-400或HPD-600或AB-8或D101大孔树脂，上样，上样吸附0.1～2.0小时，先水洗，水洗体积为1BV～4BV，水洗流速为1BV/h～4BV/h，然后用乙醇洗脱，洗脱用乙醇体积分数为30％～80％，洗脱量为1BV～4BV，洗脱速度为1BV/h～4BV/h；3)收集步骤2的乙醇洗脱液，浓缩，50℃～60℃真空干燥，得干燥的纯化产品。
2. 如权利要求1所述的曼陀罗子总黄酮提取制备方法，其特征是步骤1所采用的提 取剂为重量分数0. 5 5% NaOH水溶液。
3. 如权利要求1所述的曼陀罗子总黄酮提取制备方法，其特征是步骤1的回流状态 为减压条件下采用微波加热。
4. 如权利要求1所述的曼陀罗子总黄酮树脂纯化方法，其特征是获得纯化的曼陀罗子总黄酮含量>55%。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，涉及提供一种全新的曼陀罗子中总黄酮的提取制备方法，主要用重量分数0.5～5％NaOH水溶液和树脂对曼陀罗子进行柱提纯，采用这种方法，降低了有机溶剂在整个提纯过程中的应用，防止了有机溶剂对最终产物的影响，本发明方法纯化曼陀罗子，获得纯化的曼陀罗子总黄酮含量＞55％。且重现性好，树脂可重复使用。
文档编号A61P25/20GK101780175SQ20091023009
公开日2010年7月21日 申请日期2009年11月13日 优先权日2009年11月13日
发明者段洪东, 王世潇 申请人:日照金禾生化集团有限公司