专利名称：包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种包含中药提取物的药物组合物及其制备方法，具体涉及一种包含 人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
高血压是我国常见的心血管疾病，其患病率高，心、脑、肾、四肢等血管并发症导致 的死亡率和病残率又位列各类疾病之首，对人类健康危害极大。目前，高血压及其相关的血 管并发症的治疗主要依赖于西药，以中药为主进行高血压治疗尚未取得突破性进展。因此， 如何发展祖国传统医学，利用我国特有资源开发中医药在高血压等心脑血管疾病治疗上的 应用已经势在必行。丹参和人参均是我国的常用中药，它们作为治疗心脑血管疾病的药物具有广泛的 临床用药基础和悠久的临床用药历史，且疗效显著。现代药理学研究表明丹参总酚酸具有 改善心肌收缩功能、扩张血管、降低血压、提高冠状动脉和脑动脉血流量、抑制血小板聚集、 提高细胞耐缺氧能力等作用；人参总皂苷具有活血化淤、降低心肌耗氧量、提高大脑供氧 量、促进大脑神经发育等多种重要生理活性。但是，迄今为止，尚没有对由丹参和人参制成 的药物组合物对血管的药理作用及其机制进行过系统的研究。
发明内容
因此，本发明人在已知的人参和丹参治疗心脑血管疾病的作用的基础上，对包含 人参提取物和丹参提取物的组合物在制备扩张血管药物中的应用及其制备方法进行了研允。本发明提供了一种包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物的制备方法，其包 括以下步骤(1)将人参用60% (体积/体积)乙醇水溶液加热回流，提取液回收乙醇后过大 孔吸附树脂，分别用水、20% (体积/体积)和60% (体积/体积)乙醇水溶液洗脱，收集 60% (体积/体积)乙醇水溶液洗脱的部分，除去溶剂即得人参总皂苷提取物；(2)将丹参用水加热提取，提取液中加入乙醇至乙醇体积为提取液体积的80%， 静置后滤过，滤液回收乙醇后通过大孔吸附树脂，分别用水和40% (体积/体积)乙醇水溶 液洗脱，收集40% (体积/体积)乙醇水溶液洗脱的部分，除去溶剂即得丹参总酚酸提取 物；(3)将人参总皂苷提取物与丹参总酚酸提取物按照重量比为0. 1 10 0. 1 10混合。在上述制备方法中，优选地，将人参用60% (体积/体积)乙醇水溶液加热回流提 取4次，每次的60% (体积/体积)乙醇水溶液的重量分别为人参重量的6、4、4和4倍，提 取时间每次均为0.5小时。优选地，60% (体积/体积)乙醇水溶液洗脱的部分经浓缩、喷 雾干燥得到人参总皂苷提取物。
在上述制备方法中，优选地，将丹参用去离子水在80°C下加热提取3次，水的重量 分别为丹参重量的8、6和6倍，提取时间分别为1小时、0. 5小时和0. 5小时。优选地，丹参 提取液在60°C以下减压浓缩，冷却后加95% (体积/体积)乙醇水溶液至乙醇体积为提取 液体积的80%。在上述制备方法中，步骤(1)中使用的大孔吸附树脂可以为非极性或弱极性大孔 吸附树脂，优选为HPD-100型大孔吸附树脂。步骤(2)中使用的大孔吸附树脂可以为非极 性或弱极性大孔吸附树脂，优选为AB-8型大孔吸附树脂。本发明还提供了上述制备方法制备的药物组合物。药物组合物还可以包括药学上 可接受的载体和/或赋形剂。所述药物组合物优选为口服制剂。本发明还提供了上述药物组合物在制备扩张血管的药物中的用途。其中，上述药 物组合物具有实现四乙胺(tetraethylammonium，TEA)敏感的钾离子通道开放的功能。包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物对血管具有直接的调节作用。本发明 采用血管离体灌流技术，以排除活体实验中各种神经、体液因素对其扩张血管作用的影响。 结果发现，丹参总酚酸、人参总皂苷及它们组合物对大鼠离体胸主动脉血管环均具有舒张 作用，而且该组合物对KCl预收缩的血管环的舒张作用显著优于丹参总酚酸和人参总皂苷 两个单味药组，该协同作用与包含丹参总酚酸和人参总皂苷的药物组合物能够开放TEA敏 感的钾离子通道有关。根据上述结果可知，包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物具 有钾离子通道开放剂的药理作用特点，因此可以松弛平滑肌，特别是血管平滑肌，适用于降 低血压、抗心绞痛等血管性疾病。本发明的有益效果如下(1)对传统中药人参和丹参进行了深度开发，拓展了人参和丹参的药用范围；(2)阐明了 TEA敏感的钾离子通道的开放是包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物 组合物扩张血管的重要作用机理之一，同时也是人参总皂苷与丹参总酚酸配伍产生协同作 用的重要体现；(3)利用包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物扩张血管的作用，将其用于 各类血管性疾病的治疗。
以下，结合附图来详细说明本发明，其中图1显示了人参总皂苷(EPG)、丹参总酚酸(ESM)及它们的组合物对氯化钾预收缩 的内皮完整的大鼠离体胸主动脉环张力的影响；图2显示了人参总皂苷(EPG)、丹参总酚酸(ESM)及它们的组合物对氯化钾预收缩 的内皮去除的大鼠离体胸主动脉环张力的影响；图 3 显示了 四乙胺(tetraethylammonium，TEA)、格列本脲(glibenclamide, Gli) 预处理后对人参总皂苷(EPG)使氯化钾预收缩的内皮去除的大鼠离体胸主动脉环产生的 舒张效应的影响；图 4 显示了 四乙胺(tetraethylammonium，TEA)、格列本脲(glibenclamide, Gli) 预处理后对丹参总酚酸(ESM)使氯化钾预收缩的内皮去除的大鼠离体胸主动脉环产生的 舒张效应的影响；
图 5 显示了 四乙胺(tetraethylammonium，TEA)、格列本脲(glibenclamide, Gli) 预处理后对包含人参总皂苷和丹参总酚酸(EPG+ESM)的组合物使氯化钾预收缩的内皮去 除的大鼠离体胸主动脉环产生的舒张效应的影响；图6显示了无钙液处理后对人参总皂苷(EPG)、丹参总酚酸(ESM)及它们的组合 物(EPG+ESM)对苯肾上腺素(Phenyl印hrine，ΡΕ)预收缩的内皮去除的大鼠离体胸主动脉 环产生的舒张效应的影响；图7显示了无钙液处理后对人参总皂苷(EPG)、丹参总酚酸(ESM)及它们的组合物 (EPG+ESM)对氯化钾预收缩的内皮去除的大鼠离体胸主动脉环产生的舒张效应的影响。
具体实施例方式下面结合具体实施例详细描述本发明，但这些实施例仅是示例性的，并不对本发 明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下 可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的 保护范围内。实施例1 包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物的制备向人参饮片中加入60% (体积/体积)乙醇水溶液加热回流提取4次，加醇溶液 的重量依次为人参饮片重量的6、4、4和4倍，提取时间每次均为0. 5小时。合并提取液，回 收乙醇后过HPD-100型大孔吸附树脂，先用6倍柱体积量的水洗脱后，继而依次用8倍柱体 积量的20% (体积/体积)和6倍柱体积量的60% (体积/体积)乙醇水溶液分别进行 洗脱，收集60% (体积/体积)乙醇水溶液的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，即得人参总皂苷提取 物。向丹参饮片中加入去离子水，80°C加热提取3次，其加水重量依次为丹参饮片重 量的8、6和6倍，提取时间每次分别为1小时、0. 5小时和0. 5小时。合并滤液，600C以下减 压浓缩，冷却后加95% (体积/体积)乙醇水溶液至含醇量达终溶液体积的80%，静置12 小时，滤过，回收乙醇并浓缩，通过AB-8型大孔吸附树脂，用约药材重量5倍体积的去离子 水洗至流出液无糖反应，继而用约药材重量的8倍体积的40% (体积/体积)乙醇水溶液 洗脱，收集40% (体积/体积)乙醇水溶液的洗脱液，从色带下来开始收集洗脱液，直至洗 脱液加三氯化铁、铁氰化钾试剂不变绿并无沉淀为止。减压回收乙醇，喷雾干燥，即得丹参 总酚酸提取物。以1 1的重量比将制得的人参总皂苷和丹参总酚酸混合即可。实施例2 人参总皂苷的含量测定实施例1中制备的人参总皂苷提取物中的8种主要活性成分的含量测定方法如 下混合对照品溶液的制备分别精密称定人参皂苷Rg1、人参皂苷R6、人参皂苷Rg2、 人参皂苷Rb1、人参皂苷R。、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rd对照品适量，加甲醇 制成浓度分别为 Rg1 (0. 488mg/ml)，Re (0. 260mg/ml)，Rg2 (0. 163mg/ml)，Rb1 (0. 656mg/ml)， Rb2 (0. 310mg/ml)，Rc (0. 454mg/ml)，Rb3 (0. 101mg/ml)禾Π Rd (0. 164mg/ml)的混合对照品溶 液。同法制成人参皂苷Rh1 (0. 406mg/ml)对照品溶液。供试品溶液的制备取人参总皂苷12. 5mg，精密加入50% (体积/体积)甲醇水溶液20ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再次称定重量，用50% (体积/体积) 甲醇水溶液补足减失的重量，0. 22 μ m膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动 相A，以水为流动相B进行梯度洗脱；流速为lml/min ；柱温30°C ；蒸发光散射检测器；理论 塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。测定法采用Waters symmetry C18色谱柱，乙腈(A)-水(B)梯度洗脱:0_32min， 19-23% (体积 / 体积)B ；33-50min, 23-29% (体积 / 体积)B ；50_70min，29-30% (体积 / 体积)B ；70-95min,30-39% (体积 / 体积)B，温度:30°C，流速:1.0ml/min。进样量 10 μ 1， 采用电雾室检测器(CAD)进行检测，计算结果见表1。表1人参总皂苷中8种主要活性成分的含量测定
权利要求
1.一种包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物的制备方法，其包括以下步骤(1)将人参用60%(体积/体积)乙醇水溶液加热回流，提取液回收乙醇后过大孔吸 附树脂，分别用水、20% (体积/体积)和60% (体积/体积)乙醇水溶液洗脱，收集60% (体积/体积)乙醇水溶液洗脱的部分，除去溶剂即得人参总皂苷提取物；(2)将丹参用水加热提取，提取液中加入乙醇至乙醇体积为提取液体积的80%，静置 后滤过，滤液回收乙醇后通过大孔吸附树脂，分别用水和40% (体积/体积)乙醇水溶液洗 脱，收集40% (体积/体积)乙醇水溶液洗脱的部分，除去溶剂即得丹参总酚酸提取物；(3)将人参总皂苷提取物与丹参总酚酸提取物按照重量比为0.1 10 0. 1 10混合。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将人参用60%(体积/体积)乙醇 水溶液加热回流提取4次，每次的60% (体积/体积)乙醇水溶液的重量分别为人参重量 的6、4、4和4倍，提取时间每次均为0. 5小时。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述60%(体积/体积)乙醇 水溶液洗脱的部分经浓缩、喷雾干燥得到人参总皂苷提取物。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的制备方法，其特征在于，将丹参用去离子水在 80°C下加热提取3次，水的重量分别为丹参重量的8、6和6倍，提取时间分别为1小时、0. 5 小时和0. 5小时。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述丹参提取液在 60°C以下减压浓缩，冷却后加95% (体积/体积)乙醇水溶液至乙醇体积为提取液体积的 80%。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用的 大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂，优选为HPD-100型大孔吸附树脂。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中使用的 大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂，优选为AB-8型大孔吸附树脂。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的制备方法制备的药物组合物。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可 接受的载体和/或赋形剂。
10.根据权利要求8或9所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为口服制剂。
11.根据权利要求8至10中任一项所述的药物组合物在制备扩张血管的药物中的用途。
12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述药物组合物具有实现四乙胺敏感 的钾离子通道开放的功能。
全文摘要
本发明提供一种包含人参总皂苷与丹参总酚酸的药物组合物及其制备方法，该制备方法包括将人参用60％(体积/体积)乙醇水溶液加热回流，提取液回收乙醇后过大孔吸附树脂，分别用水、20％(体积/体积)和60％(体积/体积)乙醇水溶液洗脱，收集60％(体积/体积)乙醇水溶液洗脱的部分，除去溶剂即得人参总皂苷提取物；将丹参用水加热提取，提取液中加入乙醇至乙醇体积为提取液体积的80％，静置后滤过，滤液回收乙醇后通过大孔吸附树脂，分别用水和40％(体积/体积)乙醇水溶液洗脱，收集40％(体积/体积)乙醇水溶液洗脱的部分，除去溶剂即得丹参总酚酸提取物；将人参总皂苷提取物与丹参总酚酸提取物按照重量比为0.1～10∶0.1～10混合。
文档编号A61P9/12GK102100737SQ20091024252
公开日2011年6月22日 申请日期2009年12月17日 优先权日2009年12月17日
发明者屠鹏飞, 张可, 马旭, 马治中 申请人:北京大学