专利名称：抗菌促愈创伤敷料的制备方法
技术领域：
本发明属于创伤治疗中的敷料功能构建技术，具体涉及一种抗菌促愈创伤敷料的制备方法。
背景技术：
创口或手术后的敷料包扎在烧伤整形美容外科甚为重要，有时手术的成败在很大程度上与伤口感染、愈合时间直接相关。为此采用具有抗菌促愈作用功能的创伤敷料对烧伤整形治疗意义重大。采用生物合成的细菌纤维素作为治疗皮肤损伤、褥疮、溃疡的敷料，或者制成组织器官的表膜等商品已经出现。但目前由单一的细菌纤维素材料作为敷料，仅具有覆盖伤口，发炎时能吸收渗出物，保持伤口湿的环境等功能(Microbialcellulose-the natural power to heal wound，Biomaterials，2006，27，145-15.)。近年来，不少敷料在使用前或使用时都加入了药物成分，而成为药物性敷料。目前市售的抗菌药物敷料在使用过程中不能对药物进行有效地控释。而添加具有伤口促愈作用的透明质酸敷料多以吸附形式掺入敷料中，游离态的透明质酸在使用保存和使用过程中存在着易降解问题(交联透明质酸膜的特性与生物相容性的初步研究，中国生化药物杂志，2006，27，25- .)。
发明内容
本发明的目的在于提供一种弹性好，透气性高，杀菌能力强，促愈性能优的抗菌促愈型伤口敷料的制备方法。实现本发明目的的技术解决方案为本发明抗菌促愈创伤敷料的制备方法，包括以下步骤第一步，将湿态絮状细菌纤维素漂洗后加入到碱溶液中加热处理，再用酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，加入还原剂并在搅拌条件下反应，然后漂洗所得产物并脱除水分；第三步，采用透明质酸溶液对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱水并加入交联剂，然后对细菌纤维素和透明质酸溶液进行交联反应，制得细菌纤维素和透明质酸复合材料；第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤后再用乙醇溶液洗涤，脱除水分和乙醇；第五步，在高弹透性无纺布背面涂高黏胶作为敷料外层，将第四步产物平整、均勻的分散于敷料外层，使之与敷料外层复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料，。本发明与现有技术相比，其显著优点(1)采用动态细菌纤维素为模板，通过一维化学还原法制备出纳米银的粒径较小，抗菌能力强；( 采用动态发酵法制备絮状细菌纤维素与透明质酸进行交联改性，有利于形成高保湿、带有伤口修复因子创口促愈作用的复合材料，同时接支后的透明质酸可以稳定保存和使用；C3)由于采用生物相容性好的透明质酸/细菌纤维素等作为基体材料，植入抗菌能力强的纳米银后，制备出的敷料具有抗菌促愈之功效可在皮肤烧伤和整形外科手术中获得应用。
附图是实施实例1过程中制备出纳米银粒子电镜照片。
具体实施例方式下面结合附图对本发明作进一步详细描述。本发明抗菌促愈创伤敷料的制备方法，包括以下步骤第一步，将湿态絮状细菌纤维素漂洗后加入到碱溶液中加热处理，再用酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；细菌纤维素为动态发酵法制备，碱溶液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠一种或几种的混合，碱溶液浓度为-4%。第二步，将第一步所得产物置于银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，加入还原剂并在搅拌条件下反应，然后漂洗所得产物并脱除水分；银盐为硝酸银或2-乙基己酸银，银盐与细菌纤维素的用量质量比为0.01 1-0.1 1，在搅拌条件下反应的时间为2-6小时，还原剂为抗坏血酸溶液、硼氰化钾、硼氰化钠、甲醛的一种或几种的混合。第三步，采用透明质酸溶液对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱水并加入交联剂，然后对细菌纤维素和透明质酸溶液进行交联反应，制得细菌纤维素和透明质酸复合材料；透明质酸溶液浓度为0. 05-5.0%，透明质酸分子量为105-107，交联剂为碳化二亚胺类，如1- (3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐或N，N- 二环己基碳化二亚胺，交联剂的用量为纤维素量的0. 5-5%,反应温度为 20-80°C，反应时间 I-Mh。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤后再用乙醇溶液洗涤，脱除水分和乙醇；用去离子水洗涤的次数为1-5次，用乙醇溶液洗涤的次数为1-3次。第五步，在高弹透性无纺布背面涂高黏胶作为敷料外层，将第四步产物平整、均勻的分散于敷料外层，使之与敷料外层复合在一起；高弹透性无纺布可为细菌纤维素膜、壳聚糖膜、聚乙烯薄膜或含蜡纸，高黏胶为聚硅氧烷、水凝胶或软粘合热熔胶。第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。实施实例1 第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入氢氧化钠碱溶液90°C 保温3h，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 005mol/L的AgN03银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入抗坏血酸还原银离子，室温下反应3小时，漂洗产物并脱除体系中80%水分；第三步，采用浓度为3%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中 80%的水分，加入2%碳化二亚胺交联剂，在30°C时反应Mh。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在细菌纤维素膜涂聚硅氧烷黏胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。实施实例2 第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入氢氧化钾碱溶液90°C 保温3h，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 008mol/L的AgN03银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入硼氰化钾还原银离子，室温下反应6小时，漂洗产物并脱除体系中70%水分；第三步，采用浓度为2. 5%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中70%的水分，加入2% 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺交联剂，在30°C时反应 24h。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在壳聚糖膜涂聚硅氧烷黏胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。实施实例3 第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入10%氢氧化钠碱溶液90°C 保温3h，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 008mol/L的AgN03银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入硼氰化钠还原银离子，室温下反应6小时，漂洗产物并脱除体系中70%水分；第三步，采用浓度为2. 5%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中70%的水分，加入2%碳化二亚胺交联剂，在40°C时反应18h。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在细菌纤维素膜涂聚硅氧烷黏胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。实施实例4
第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入10%碳酸钠碱溶液90°C保温池，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 006mol/L的2_乙基己酸银银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入甲醛还原银离子，室温下反应6小时，漂洗产物并脱除体系中50%水分；第三步，采用浓度为3. 0%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中70%的水分，加入5% 1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐交联剂，在50°C 时反应》1。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在细菌纤维素膜涂水凝胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。实施实例5:第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入5%碳酸钠钾溶液90°C保温3h，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 01mol/L的AgN03银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入抗坏血酸还原银离子，室温下反应 6小时，漂洗产物并脱除体系中60%水分；第三步，采用浓度为4. 0%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中70%的水分，加入4%碳化二亚胺交联剂，在60°C时反应他。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在细菌纤维素膜涂水凝胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。实施实例6 第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入5%氢氧化钾溶液90°C保温3h，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 01mol/L的AgN03银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入抗坏血酸还原银离子，室温下反应 6小时，漂洗产物并脱除体系中60%水分；第三步，采用浓度为5. 0%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中60%的水分，加入4%碳化二亚胺交联剂，在80°C时反应Ih。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在含蜡纸涂水凝胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。实施实例7 第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入5%氢氧化钠溶液90°C保温3h，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 03mol/L的AgN03银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入抗坏血酸还原银离子，室温下反应 6小时，漂洗产物并脱除体系中70%水分；第三步，采用浓度为4. 0%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中70%的水分，加入4%碳化二亚胺交联剂，在70°C时反应池。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在聚乙烯薄膜涂水凝胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。实施实例8 第一步，将湿态絮状细菌纤维素预处理，即漂洗后加入氢氧化钠溶液90°C保温3h，再用醋酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于0. 04mol/L的AgN03银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，机械搅拌条件下加入抗坏血酸还原银离子，室温下反应 6小时，漂洗产物并脱除体系中70%水分；第三步，采用浓度为1. 0%透明质酸对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱除体系中70%的水分，加入2% N, N-二环己基碳化二亚胺交联剂，在80°C时反应池。第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤3次后再用乙醇溶液洗涤1次， 脱除水分和乙醇。第五步，在聚乙烯薄膜涂软粘合热熔胶作为敷料外层，将第四步产物平整，均勻的分散于敷料外层，复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。结合附图，由制片可以看出，在此条件下可制备出2nm均勻的银粒子。本发明在通过细菌纤维素分子与银离子配位作用，通过还原剂还原银离子制备粒径小、分布均勻的纳米银后，采用化学交联法，把具有伤口修复作用的透明质酸接支在细菌纤维素分子上，形成细菌纤维素/透明质酸载银复合体系。细菌纤维素/透明质酸载银复合材料可用于抗菌促愈医用敷料等领域。
权利要求
1. 一种抗菌促愈创伤敷料的制备方法，其特征在于包括以下步骤 第一步，将湿态絮状细菌纤维素漂洗后加入到碱溶液中加热处理，再用酸溶液进行中和，然后用去离子水洗涤直至中性；第二步，将第一步所得产物置于银盐溶液中浸渍，然后过滤分离得固状物，再用去离子水洗涤后，加入还原剂并在搅拌条件下反应，然后漂洗所得产物并脱除水分；第三步，采用透明质酸溶液对第二步所得产物进行浸泡处理后，脱水并加入交联剂，然后对细菌纤维素和透明质酸溶液进行交联反应，制得细菌纤维素和透明质酸复合材料； 第四步，将第三步产物过滤分离，用去离子水洗涤后再用乙醇溶液洗涤，脱除水分和乙第五步，在高弹透性无纺布背面涂高黏胶作为敷料外层，将第四步产物平整、均勻的分散于敷料外层，使之与敷料外层复合在一起；第六步，将第五步制得产品进行切割，单片分装后采用钴60进行灭菌，即得抗菌促愈创伤敷料。
2.根据权利要求1所述的抗菌促愈创伤敷料的制备方法，其特征在于第一步中细菌纤维素为动态发酵法制备，碱溶液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠一种或几种的混合，碱溶液浓度为_4%。
3.根据权利要求1所述的抗菌促愈创伤敷料的制备方法，其特征在于第二步中银盐为硝酸银或2-乙基己酸银，银盐与细菌纤维素的用量质量比为0.01 1-0.1 1，在搅拌条件下反应的时间为2-6小时，还原剂为抗坏血酸溶液、硼氰化钾、硼氰化钠、甲醛的一种或几种的混合。
4.根据权利要求1所述的抗菌促愈创伤敷料的制备方法，其特征在于第三步中透明质酸溶液浓度为0. 05-5. 0 %，透明质酸分子量为105-107，交联剂为碳化二亚胺类，交联剂的用量为纤维素量的0. 5-5%，反应温度为20-80°C，反应时间1-Mh。
5.根据权利要求1所述的抗菌促愈创伤敷料的制备方法，其特征在于第四步中用去离子水洗涤的次数为1-5次，用乙醇溶液洗涤的次数为1-3次。
6.根据权利要求1所述的抗菌促愈创伤敷料的制备方法，其特征在于第五步中高弹透性无纺布可为细菌纤维素膜、壳聚糖膜、聚乙烯薄膜或含蜡纸。
7.根据权利要求1所述的抗菌促愈创伤敷料的制备方法，其特征在于第五步中的高黏胶为聚硅氧烷、水凝胶或软粘合热熔胶。
全文摘要
本发明公开了一种抗菌促愈创伤敷料的制备方法。包括以下步骤将动态发酵法制得的絮状细菌纤维素进行预处理后，采用原位化学还原法在细菌纤维素表面均匀植入纳米银获得细菌纤维素纳米银复合材料。将细菌纤维素纳米银复合材料置于透明质酸溶液中浸渍，将吸附透明质酸的细菌纤维素进行脱水后，采用碳化二亚胺进行交联反应，形成细菌纤维素/透明质酸负载纳米银复合材料。该复合材料兼有控释杀菌剂控制伤口感染和细胞与基质间相互作用促进伤口愈合作用。本发明通过细菌纤维素/透明质酸负载纳米银制备复合膜，发挥细菌纤维素基体的高柔韧性、肌肤良好的附着性的同时具有对伤口抗菌促愈作用，可用于制备多功能药物性创伤敷料从而加速伤口修复。
文档编号A61L15/22GK102210884SQ201010139908
公开日2011年10月12日 申请日期2010年4月7日 优先权日2010年4月7日
发明者何浩明, 孙东平, 杨加志, 汪信 申请人:南京理工大学