专利名称：芪参益气滴丸在制备改善心肌纤维化和心肌肥厚的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于医药应用领域，具体涉及芪参益气滴丸在制备改善心肌纤维化和心肌肥厚的药物中的应用。
背景技术：
芪参益气滴丸(缩写为QSYQ)是天士力集团独家研制的治疗心血管疾病的现代中药，目前已经上市。芪参益气滴丸是以现代科技提取黄芪、丹参、三七、降香中的有效成分精制而成的滴丸制剂，是中医传统理论和现在制剂技术结合的结晶。芪参益气滴丸能够显著改善心肌损伤、心功能减退的各种症状，具有剂量小、服用方便、溶出速度快、可直接经粘膜吸收入血、生物利用度高、疗效高及无胃肠刺激、无明显毒副作用的特点，适用于慢性心功能不全、心肌炎及后遗症、心肌梗塞恢复期、心肌纤维化。临床前药效学试验表明，芪参益气滴丸可以使心肌梗塞犬的梗塞范围缩小，缺血性心电图改善，血清酶CK和LDH活性降低，血浆ET和TXB2水平降低，6-Keto-PGFl α活性和6-Keto-PGFl α /ΤΧΒ2比值升高；可使心肌缺血再灌注损伤大鼠的梗塞范围缩小，SOD活性增加。本品可使大鼠体外血栓长度缩短，重量减轻，并可使血浆及全血粘度降低；可使高脂血症家兔的TC、TG、LDL-C、VLDL-C水平降低，HDL-C水平升高，使主动脉TC含量和肝脏 TG及MDA含量降低；并可使花生四烯酸和胶原诱导的血小板聚集率降低；犬血流动力学试验表明，本品可通过扩张冠脉血管使冠脉流量增加，使心肌耗氧指数降低；在不增加左室做功情况下，使心搏出量和心输出量增加等。心肌肥厚是心肌细胞对持续性负荷增加的一种适应性反应。初期的心肌肥大有一定代偿意义，但心肌肥大引起的心肌肥厚及心肌重构最终可导致心力衰竭，并已成为引起心血管疾病发病率和死亡率显著升高的独立危险因素。心肌纤维化是心肌重构的主要表现之一。心肌组织由心肌细胞和间质细胞构成， 而间质细胞主要是成纤维细胞，它能够合成胶原，可以重新进入细胞周期，进行有丝分裂。 心肌内胶原主要由心脏成纤维细胞合成，成纤维细胞同时分泌胶原酶，心脏组织中胶原代谢非常活跃。因而，胶原合成和分解代谢的失衡会造成心脏结构和功能的异常。心肌重塑的关键是与心肌过载和损伤相关分子的激活，以往证据证明转化生长因子(transforming growth factor beta, TGF-β )是与组织修复和心肌纤维化发展有关的一个重要的细胞因子，在哺乳动物体内，它有3种亚型，TGF-β 1，TGF-β 2，andTGF-β 3。 TGF-β 1可被血管紧张素II上调，TGF-β 1诱导产生心肌纤维化。在心肌纤维化发生、发展过程中具有促进肌性成纤维细胞的转化，促进胶原基因表达，促进细胞外基质合成与沉积等作用。此外，在心肌肥厚和心衰的心肌内TGF-βΙ的表达是增强的。因此，TGF-βΙ有可能直接参与了导致心衰的心脏重塑过程。小鼠心脏在压力过负荷的情况下发生了一过性炎症反应，伴随有细胞因子与趋化因子的上调和巨噬细胞的聚集。炎性因子的上调刺激了 TGF-β上调，而TGF-β 1可促进心肌纤维化的形成。以往的研究表明，黄芪的有效成分对心肌纤维化还具有一定抑制作用，其作用可能与抑制TGF-β 1表达相关。而丹参主要活性成分对心肌肥厚具有显著的改善作用。另外， 还有研究显示，丹参和三七都能够抑制大鼠肝纤维化。在左心室肥厚发生后，芪参益气滴丸是否可以改善心肌纤维化等尚不清楚。本研究用压力超负荷建立大鼠心肌肥厚模型，观察QSYQ后给药对心肌纤维化的改善作用。在缩窄大鼠升主动脉(Ascending aortic stenosis, AAS)后第4周末，用超声心动图检测左心室壁厚度，取左心室壁厚度超过假手术组20%的大鼠，分别灌胃给予生理盐水(AAS+NS， 4ml/kg/d)或 QSYQ (AAS+QSYQ，4ml/kg/d,含 QSYQ 0. 8g/kg/d)，连续给药 4 周。假手术组分别灌胃给予等量的生理盐水(Sham+NS)或QSYQ (Sham+QSYQ)，连续给药4周。在第8周末， 用激光多普勒血流量扫描仪测量心脏表面血流量；测量心脏体重指数；测量心肌组织学和超微结构的变化；用天狼猩红胶原染色法测量胶原含量；进行CD68和心肌细胞中转化生长因子-1 (Transforming growth factor beta 1,TGF-β 1)的免疫组化染色。在压力负荷引起的大鼠左心室肥厚发生后(第4周)，QSYQ可以显著地抑制左心室舒张末期室壁厚度和心脏体重指数的增加，增加左心室射血分数和缩短分数，减少心肌纤维化范围。同时，QSYQ 还可以抑制大鼠心肌组织中⑶68和TGF-β 1的表达。本研究发现，在压力负荷引起的大鼠左心室肥厚发生后，QSYQ的后给药可以抑制心肌的进一步肥大，改善心肌纤维化。
发明内容
本发明的目的在于提供芪参益气滴丸在制备改善心肌纤维化的药物中的应用。本发明还提供芪参益气滴丸在制备抑制心肌的进一步肥大的药物中的应用。本发明所述应用是在左心室肥厚发生后，芪参益气滴丸可以改善心肌纤维化。本发明所述应用是在左心室肥厚发生后，可以显著地抑制左心室舒张末期室壁厚度和心脏体重指数的增加，增加左心室射血分数和缩短分数，减少心肌纤维化范围。本发明所述应用是芪参益气滴丸可以抑制大鼠心肌组织中⑶68和TGF-β 1的表达。本发明所述应用是在压力负荷引起的左心室肥厚发生后，芪参益气滴丸的后给药可以抑制心肌的进一步肥大，改善心肌纤维化。本发明所述芪参益气滴丸，可以根据现有技术制备，也可以从市场上购买，符合药用标准即可。本发明的应用，可以通过口服芪参益气滴丸应用，口服时可以日服三次，每次1-20 粒。本发明的应用，对于慢性心功能不全、心肌炎及后遗症、心肌梗塞恢复期、心肌纤维化的病人，可以改善症状，延缓病情的进一步发展，通过体质的恢复逐渐缓解和改善病情，从而使疾病得到有效的治疗。本发明的应用，可以通过口服芪参益气滴丸应用，口服时一个疗程可以是20 天-30天，优选4周为一疗程，通过每天服用1. 5g完成。本发明提供了以下试验，用以说明芪参益气滴丸的应用。
材料与方法1.药品和试剂QSYQ (天津天士力制药股份有限公司提供，批号090108)，常温下保存。于试验前用生理盐水配成适当浓度(200mg/ml)，用于灌胃给药。QSYQ的生产严格按照现代化的标准，有标准化的质量控质体系控制产品的质量。复合麻醉剂配制水合氯醛4. 25g(北京东方龙顺化学合成技术开发中心， XKB-OO1-0101-002 II )，硫酸镁2. 12g(科密欧试剂，分析纯，XKB-201-00129)，溶于 51. 95ml 蒸馏水中，备用。再将886mg戊巴比妥钠(北京鼎国生物技术有限责任公司，Lot :77A10201) 溶于14. 25ml无水乙醇(北京化工厂，批号20090826)之中，然后加入前溶液，充分混勻， 再加入33.8ml 1，2-丙二醇(北京化工厂，批号20080629)，混勻制成复合麻醉剂。用量 3ml/kg。2.实验仪器超声心动图检测仪VEV0770，多伦多，加拿大；激光多普勒血流量灌注成像系统激光多普勒血流量仪，PeriScan, PERIMED，瑞士 ；显示器，LXM-LI508，联想，中国；小动物呼吸机:ALC_V8，上海奥利特生物科技有限公司，中国；
冷光源SJ8038HA2，SANJUN,中国；电子分析天平CP64，Startorius，德国；透射电镜JEM-1230，JEOLLtd.，日本；体视显微镜XTL_500，南京盛光光电医疗仪器有限责任公司，中国；Digitalsight :DS-5M_U1，NIKON,日本；手术器械及消耗品大直剪、小直剪、弯镊、直镊、3-0丝线、银夹、扩胸器、3/8弯针、一次性注射器。3.动物实验中所有动物研究均经北京大学医学部伦理委员会同意并依据有关规定执行。选择雄性SD大鼠，体重95-105g，由北京大学医学部实验动物中心提供，合格证号 SCXK (京)2006-0001。置于相对清洁、22°C恒温环境中，通风、通光良好，分笼饲养，给予标准饲料，实验前禁食12小时，自由饮用水。4.心肌肥厚模型的建立SD大鼠，复合麻醉剂(3ml/kg)腹腔注射麻醉，仰卧固定于手术台，行气管插管。插管另一端连于小动物呼吸机行加压呼吸(呼吸比1 1，呼吸频率75次/min，潮气量12mL/ kg)。电推剪胸部去毛，皮肤消毒，胸正中切口，打开胸腔。在胸腺下方分离升主动脉，将升主动脉用内径为0. 9mm的银夹使该部位动脉形成环形狭窄，然后逐层缝合胸部切口，缝合皮部。假手术组除不用银夹狭窄升主动脉外，其余操作步骤相同[81]。术后大鼠饲养于清洁级动物实验室内，连续3日腹腔内注射20万单位青霉素。5.分组及给药方法5. 1 分组手术后第4周末，手术组和假手术组大鼠经超声心动图检测，左心室室壁厚度与同期假手术组相比厚度增加20%以上视为造模成功，随后将造模成功的31只大鼠随机分
5为手术+生理盐水组(AAS+NS，η = 16)，手术+QSYQ组(AAS+QSYQ，η = 15)。假手术组随机分为假手术+生理盐水组(Sham+NS, η = 10)，假手术+QSYQ组(Sham+QSYQ, η = 10)。 8周后，在存活的大鼠中各组随机选取9只动物用于其他参数的测量。见表1。
表1各组参数检测中使用动物数目
权利要求
1.芪参益气滴丸在制备改善心肌纤维化的药物中的应用。
2.芪参益气滴丸在制备抑制心肌的进一步肥大的药物中的应用。
3.芪参益气滴丸在制备改善心肌纤维化同时抑制心肌的进一步肥大的药物中的应用。
4.权利要求1-3任何一项的应用，其特征在于，所述应用是在左心室肥厚发生后，改善心肌纤维化。
5.权利要求1-3任何一项的应用，其特征在于，所述应用是在左心室肥厚发生后，抑制左心室舒张末期室壁厚度和心脏体重指数的增加，
6.权利要求1-3任何一项的应用，其特征在于，所述应用是在左心室肥厚发生后，增加左心室射血分数和缩短分数。
7.权利要求1-3任何一项的应用，其特征在于，所述应用是芪参益气滴丸通过抑制心肌组织中⑶68和TGF-β 1的表达进行的。
8.权利要求1-3任何一项的应用，其特征在于，所述应用是在压力负荷引起的左心室肥厚发生后，芪参益气滴丸的后给药抑制心肌的进一步肥大，改善心肌纤维化。
全文摘要
本发明涉及芪参益气滴丸在制备改善心肌纤维化和心肌肥厚的药物中的应用，芪参益气滴丸是以现代科技提取黄芪、丹参、三七、降香中的有效成分精制而成的滴丸制剂，本发明的目的在于提供芪参益气滴丸在制备改善心肌纤维化，抑制心肌的进一步肥大的药物中的应用的药物中的应用，本发明所述应用是在左心室肥厚发生后，芪参益气滴丸可以改善心肌纤维化，本发明所述应用是在左心室肥厚发生后，可以显著地抑制左心室舒张末期室壁厚度和心脏体重指数的增加，增加左心室射血分数和缩短分数，减少心肌纤维化范围。
文档编号A61K36/537GK102370699SQ20101025062
公开日2012年3月14日 申请日期2010年8月11日 优先权日2010年8月11日
发明者刘育英, 常昕, 李彦川, 胡白和, 韩晶岩 申请人:天津天士力制药股份有限公司