专利名称：增强抗体依赖性细胞的细胞毒性的方法
增强抗体依赖性细胞的细胞毒性的方法相关申请的交叉引用
本申请要求2010年4月21日提交的U.S.S.N.61/326，406的权益，其内容全文经此引用并入本文。公开领域
本公开的实施方案涉及提高用于治疗癌症和其它细胞疾病的治疗性单克隆抗体的细胞毒性的方法。公开背景
单克隆抗体(MAbs)已经在各种恶性肿瘤中表现出临床效力。单克隆抗体现在常用作用于治疗和/或预防癌症、自体免疫性疾病、血栓形成、炎症和感染的治疗剂。但是，有一些低抗体活性情况导致对癌症、自体免疫性疾病、炎症和感染的治疗作用不足。这样不足的药物作用可能导致治疗所需的剂量和成本提高。在这些情况下，增强单克隆抗体的治疗活性是重要的目标。治疗性单克隆抗体优选能发挥抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)，特别是在用于治疗癌症或其它细胞疾病时。也就是说，治疗性MAbs优选对它们的靶细胞，如靶癌细胞或淋巴细胞发挥细胞毒性效应。这样的抗体通过它们的Fe结构域结合至靶细胞表面上的抗原上，结合至效应细胞，如NK细胞和巨噬细胞的表面上的Fe受体上，由此在靶细胞上施加破坏。这种机制是抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)。或者，抗体通过经由Fe结构域活化补体来破坏细胞。这被称作补体依赖性细胞毒性(CDC)。经由Fe结构域发挥的这种抗体活性被称作效应子活性(effector activity)。
为增强抗体的效应子功能以增强它们的治疗活性，已作出各种尝试。几种类型的效应细胞，如单核细胞、嗜中性粒细胞和自然杀伤(NK)细胞具有结合免疫球蛋白的Fe部分的表面受体。用于诱发对靶细胞的ADCC的效应细胞包括人白细胞、巨噬细胞、单核细胞、活化嗜中性粒细胞和可能活化的自然杀伤(NK)细胞和嗜酸性粒细胞。优选的效应细胞表达FcyRI并包括例如单核细胞和活化嗜中性粒细胞。已发现Fe Y RI的表达通过干扰素Y(IFN-y )上调。这种增强的表达提高单核细胞和嗜中性粒细胞对靶细胞的细胞毒性活性。Fe受体是在有助于免疫系统的保护功能的某些细胞(包括自然杀伤细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞和肥大细胞)的表面上发现的蛋白质。Fe受体结合到附着在受感染细胞、入侵病原体或癌细胞上的抗体上。它们的活性刺激吞噬或细胞毒性细胞以通过抗体介导的吞噬作用或ADCC破坏微生物、受感染细胞或癌细胞。一些病毒如黄病毒(flaviviruses)使用Fe受体以助于它们通过被称作抗体依赖性感染增强的机制感染细胞。Fe受体参与ADCC过程。例如，在ADCC过程中，自然杀伤(NK)细胞表面上的Fe YRIII受体刺激NK细胞以从它们的颗粒中释放细胞毒性分子以杀死抗体覆盖的靶细胞。有几种不同类型的Fe受体，它们根据它们识别的抗体类型分类。一组IgG Fe受体FcyRs属于免疫球蛋白总科并且是用于诱发调理(涂布)微生物的吞噬作用的最重要的Fe受体。它们在白细胞上表达并由3个截然不同的类别构成:Fe Y R1、Fc Y RII (Fe Y RIIa和Fe Y RIIb) ,FcyRIII (Fcy RIIIa和Fe y RIIIb)。该受体也通过它们对IgG的亲和力区分。Fe y RI显示对IgG的高亲和力，而Fe Y RII和Fe Y RIII表现出较弱的亲和力。Fe y RIIa和Fe YRIIIa是分别在单核细胞/巨噬细胞和单核细胞/巨噬细胞/NK细胞上表达的活化Fe Y Rs并可触发人靶的细胞毒性。已识别出两种功能Fe Y R基因多态性——Fe YR3a_V158F和Fe YR2a_H131R，它们影响IgG的结合，改变ADCC功能并影响临床肿瘤反应。Fe Y R2a-H131R多态性位于细胞外配体结合域。其在氨基酸位置131具有组氨酸(H)或精氨酸(R)等位基因。FcyR2a-131H/H基因型在体外检测中对人IgG2具有较高亲和力。Fe Y R3a-V158F多态性编码在氨基酸位置158的缬氨酸(V)或苯丙氨酸(F)。体外研究表明，Fe Y R3a V等位基因具有比F等位基因高的对人IgGl的结合亲和力，表明带有Fe Y R3a V等位基因的免疫效应细胞更有效介导ADCC (Zhang 等人，J.0f Clinical Oncology, 25: 3712-3718，2007)。进一步需要改进单克隆抗体的治疗效力。需要增强抗体的效应子功能，例如增强抗体的ADCC和/或⑶C功能。在本说明书通篇(包括上文的相关技术描述)中，其中描述的任何和所有公开可得的文献，包括任何和所有美国专利，明确地全文经此引用并入本文。上文的相关技术描述无论如何无意承认其中描述的任何文献，包括待审美国专利申请，是本公开的实施方案的现有技术。此外，本文中的与所述产物、方法和/或装置相关的任何缺点的描述无意限制所公开的实施方案。实际上，本公开的实施方案可包括所述产物、方法和/或装置的某些特征而不承受它们的所述缺点。公开概述
本公开涉及增强治疗抗体在细胞疾病，如癌症和免疫细胞介导疾病或失调症的治疗中的ADCC活性的方法。通常，可以通过治疗抗体与式I的ADCC增强剂分子的共同给药来增强治疗抗体的ADCC活性:
权利要求
1.提高接受治疗性单克隆抗体治疗的对象中的抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)的方法，包括给予所述对象治疗性单克隆抗体和足以提高ADCC的量的ADCC增强剂分子，其中所述ADCC增强剂分子由下列结构表示:
2.权利要求1的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(批咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂$ -4-基)}-N，N-二丙基甲酰胺。
3.权利要求1的方法，其中所述治疗性单克隆抗体是治疗性抗-CD20单克隆抗体、治疗性抗_Her2单克隆抗体或治疗性抗-EGFR单克隆抗体。
4.权利要求1的方法，其中所述治疗性单克隆抗体是利妥昔单抗、曲妥单抗、西妥昔单抗或帕尼单抗。
5.权利要求1的方法，进一步包括给予所述对象治疗有效量的一种或多种化疗剂。
6.权利要求1的方法，其中所述对象具有FeY R多态性或KRAS突变。
7.权利要求1的方法，其中所述对象之前被确定为对治疗抗体的治疗无反应。
8.权利要求1的方法，其中所述对象具有受损的ADCC功能。`
9.权利要求1的方法，其中所述ADCC增强剂分子在所述治疗抗体的给药之前、同时或之后给药。
10.提高治疗性抗_ErbB2单克隆抗体的临床效力的方法，包括给予需要其的对象治疗性抗_ErbB2单克隆抗体以及ADCC增强剂分子。
11.权利要求10的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(卩比咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂:| -4-基)}-Ν，Ν-二丙基甲酰胺。
12.权利要求10的方法，其中所述单克隆抗-ErbB2是曲妥单抗。
13.权利要求12的方法，进一步包括给予所述对象治疗有效量的一种或多种化疗剂。
14.治疗乳腺癌的方法，包括给予需要其的对象治疗性抗_ErbB2单克隆抗体以及ADCC增强剂分子。
15.权利要求14的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(批咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂: -4-基)}-Ν，Ν-二丙基甲酰胺。
16.权利要求14的方法，其中单克隆抗体是曲妥单抗。
17.权利要求16的方法，进一步包括给予所述对象治疗有效量的一种或多种化疗剂。
18.提高治疗性抗-CD20单克隆抗体的临床效力的方法，包括给予需要其的对象治疗性抗-CD20单克隆抗体以及ADCC增强剂分子。
19.权利要求18的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(批咯烷基羰基)苯基]_(3Η_苯并[f]氣杂$ 基)}-N, N-二丙基甲酰胺。
20.权利要求18的方法，其中所述单克隆抗-CD20是利妥昔单抗。
21.治疗B-细胞紊乱的方法，包括给予需要其的对象治疗性抗-CD20单克隆抗体以及ADCC增强剂分子。
22.权利要求21的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(批咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂箪-4-基)}-N，N-二丙基甲酰胺。
23.权利要求21的方法，其中所述单克隆抗-CD20是利妥昔单抗。
24.权利要求21的方法，其中所述B-细胞紊乱是淋巴瘤、白血病或类风湿性关节炎。
25.提高治疗性抗-EGFR单克隆抗体的临床效力的方法，包括给予需要其的对象治疗性抗-EGFR单克隆抗体以及ADCC增强剂分子。
26.权利要求25的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(卩比咯烷基羰基)苯基]_(3H_苯并[f]氮杂慕_4_基)}-N, N-二丙基甲酰胺。
27.权利要求25的方法，其中所述单克隆抗-EGFR是西妥昔单抗。
28.权利要求27的方法，进一步包括给予所述对象治疗有效量的一种或多种化疗剂。
29.权利要求25的方法，其中所述单克隆抗-EGFR是帕尼单抗。
30.权利要求25的方法，其中所述对象具有KRAS突变。
31.治疗表达EGFR 的转移性结肠直肠癌的方法，包括给予需要其的对象治疗性抗-EGFR单克隆抗体以及ADCC分子。
32.权利要求31的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(批咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂革-4-基)}-N，N-二丙基甲酰胺。
33.权利要求31的方法，其中所述单克隆抗-EGFR是西妥昔单抗。
34.权利要求33的方法，进一步包括给予所述对象治疗有效量的一种或多种化疗剂。
35.权利要求31的方法，其中所述单克隆抗-EGFR是帕尼单抗。
36.治疗表达EGFR的头颈癌的方法，包括给予需要其的对象治疗性抗-EGFR单克隆抗体以及ADCC增强剂分子。
37.权利要求36的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(卩比咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂$ -4-基)}-N，N-二丙基甲酰胺。
38.权利要求36的方法，其中所述单克隆抗-EGFR是西妥昔单抗。
39.权利要求36的方法，进一步包括给予所述对象治疗有效量的一种或多种化疗剂。
40.治疗突变癌的方法，包括给予需要其的对象治疗性单克隆抗体以及ADCC增强剂分子。
41.权利要求40的方法，其中所述ADCC增强剂分子是{2-氨基-8-[4-(卩比咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂苯-4-基)} -N，N- 二丙基甲酰胺。
42.权利要求40的方法，其中所述治疗性单克隆抗体是西妥昔单抗。
43.权利要求40的方法，其中所述治疗性单克隆抗体是帕尼单抗。
44.权利要求40的方法，其中所述KRAS突变癌是结肠直肠癌。
45.包含ADCC增强剂分子和治疗抗体的组合物。
46.权利要求45的组合物，其中所述ADCC增强剂分子是2-氨基-8-[4-(卩比咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂革-4-基)}-N，N-二丙基甲酰胺。
47.权利要求45的组合物，其中所述治疗抗体选自利妥昔单抗、曲妥单抗、西妥昔单抗和帕尼单抗。
48.包含{2-氨基-8-[4-(吡咯烷基羰基)苯基]-(3H-苯并[f]氮杂$-4-基)} -N, N- 二丙基甲酰胺的药盒。
49.权利要求32的药盒，进一步包含一种或多种选自利妥昔单抗、曲妥单抗、西妥昔单抗和帕尼单抗的治疗性单克隆抗体。
50 .权利要求33的药盒，进一步包含一种或多种化疗剂。
全文摘要
本申请涉及提高接受治疗性单克隆抗体治疗的对象中的抗体依赖性细胞的细胞毒性的方法。在一些实施方案中，提供给予需要其的对象治疗抗体以及ADCC增强剂分子的方法。
文档编号A61K39/395GK103209696SQ201180030466
公开日2013年7月17日 申请日期2011年4月21日 优先权日2010年4月21日
发明者R.赫什伯格 申请人:文蒂雷克斯药品公司