利用egfr抗体细胞毒性剂缀合物治疗抗egfr疗法的肿瘤的方法

利用egfr抗体细胞毒性剂缀合物治疗抗egfr疗法的肿瘤的方法
【专利摘要】本发明涉及EGFR抗体免疫缀合物在抑制已发展了EGFR和/或ALK抗性机制的肿瘤细胞的生长中是有效的鉴定。还公开了给具有抗性肿瘤细胞的患者施用EGFR抗体免疫缀合物的方法。
【专利说明】利用EGFR抗体细胞毒性剂缀合物治疗抗EGFR疗法的肿瘤 的方法
[0001] 发明描述 发明领域
[0002] 本发明涉及EGFR抗体免疫缀合物在抑制已发生EGFR抗性机制的肿瘤细胞的生长 中是有效的鉴定。
[0003] 发明背景
[0004] 表皮生长因子受体（EGFR ;ErbB-l ;HER1)是细胞外蛋白质配体的表皮生长因子 (EGF)家族的细胞表面受体（Herbst RS. Int J Radiat Oncol Bio Phys59:21 (2004))。EGFR 是受体的ErbB家族的成员，是4个密切相关的受体酪氨酸激酶：EGFR、HER2/c-neu (ErbB2)、 HER3(ErbB-3)和HER4(ErbB-4)的亚家族。EGFR活化通过其特异性配体例如表皮生长因 子（EGF)和转化生长因子-a (TGFa)的结合触发。当配体结合时，EGFR经历从无活性 的单体形式至活性同二聚体的转化。此外，EGFR可与ErbB受体家族的另一个成员例如 HER2和HER3配对，以产生活性异二聚体。EGFR二聚化刺激其固有细胞内蛋白酪氨酸激 酶活性，所述活性导致存在于羧基端中的几个酪氨酸残基的自身磷酸化（Downward J.等 人，Nature311:483 (1984))。自身磷酸化随后引发下游信号转导级联，主要地MAPK、Akt和 JNK途径，从而导致DNA合成和细胞增殖。
[0005] EGFR是重要的癌基因。导致组成型活化的EGFR过表达和突变与许多癌症 (包括肺癌、结直肠癌、头颈癌和多形性胶质母细胞瘤）相关（Zhang H.等人，J Clin Investll7:2051 (2007))。该发现导致针对EGFR的抗癌治疗剂的开发。两种小分子酪氨酸 激酶抑制剂（TKI)埃罗替尼（Tarceva)和吉非替尼（Iressa)已被批准用于非小细胞肺癌 (NSCLC)和胰腺癌。此外，两种抗EGFR拮抗性单克隆抗体西妥昔单抗（艾比特思）和帕尼 单抗（Vectibix)已被批准用于头颈鳞状细胞癌（SCCHN)和结直肠癌（CRC)。
[0006] 两种EGFR激酶抑制剂埃罗替尼和吉非替尼例外地作为拥有具有L858R和/或外 显子19缺失EGFR突变的腺癌组织学的NSCLC的单一试剂疗法是有效的（Lynch TJ等人，N EnglJMed350:2129(2004)，PaezJG·等人Science304:1497(2004))。具有这些敏感化EGFR 突变的患者对于这些EGFR激酶抑制剂显示?70 %的反应率，这超过对于常规化学疗法的 反应率。然而，尽管存在显著的初始反应，但这些癌症最终发展抗激酶抑制剂的抗性。一般 而言，抗EGFR疗法的抗性机制可分成3个主要种类：（l)EGFR突变例如EGFRvIII和T790M 突变，⑵导致EGFR下游途径活化的突变例如PIK3CA、RAS和PTEN的突变，和（3)补偿途径 例如MET和IGF1R途径的活化。抗EGFR靶向疗法的抗性的各种机制的发现对下一代EGFR 疗法提出新的挑战。
[0007] 两种EGFR拮抗性抗体西妥昔单抗和帕尼单抗通过配体结合的阻断抑制EGFR信 号转导（Gill 等人，J Biol Chem, 259:7755-7760(1984)，Goldstein 等人，Clin Cancer Res, 1:1311-1318 (1995)，Prewett 等人，Clin Cancer Res, 4:2957-2966 (1998))。西妥昔单 抗治疗改善了对化学疗法不起反应的结直肠癌患者的总体存活率和无进展存活率，并且保 持了其生活质量。然而，西妥昔单抗治疗对于具有在密码子12和13中频繁发现的KRAS突 变的结直肠癌患者无临床益处（Karapetis C等人，N Engl J Med359:1757 (2008))。类似地， 在SCCHN中，EGFR抗体在具有EGFR的外显子2-7缺失突变（EGFRvIII)的癌症中不太有效 (SokJ.等人Clin Cancer Resl2:5064 (2006))。因此，存在对于可克服抗EGFR靶向疗法的 抗性的常见机制的新型癌症治疗的需要。
[0008] 发明概述
[0009] 本发明涉及EGFR抗体免疫缀合物在抑制对抗-EGFR疗法具有抗性的肿瘤细胞的 生长中是有效的鉴定。在特定实施方案中，EGFR抗体免疫缀合物在抑制也具有间变性淋巴 瘤激酶（ALK)抑制剂抗性的肿瘤细胞的生长中是有效的。
[0010] 因此，在一个实施方案中，本发明提供了抑制抗EGFR疗法或难以用EGFR疗法治愈 的表达EGFR的肿瘤细胞的生长的方法，包括将所述肿瘤细胞与有效量的EGFR抗体免疫缀 合物接触。在一个实施方案中，对细胞具有抗性的EGFR疗法选自：埃罗替尼、吉非替尼、拉 帕替尼、BIB2992、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎鲁木单抗、奈昔木单抗和尼妥珠单抗。在另一 个实施方案中，肿瘤细胞的至少一个：（1)包含EGFR编码基因的一个或多个突变；(2)包含 PIK3CA、RAS或PTEN编码基因的一个或多个突变；（3)具有活化的MET或IGF1R途径；(4) 具有间充质组织学或经历上皮-间充质转化；或（5)具有ERBB2基因扩增或增加的HER2蛋 白的产生。在另一个实施方案中，EGFR突变包含EGFRvIII或T790M突变。在另一个实施 方案中，至少一个肿瘤细胞具有例如通过PIK3CA、RAS或PTEN编码基因的突变引起的活化 的EGFR下游途径。在另一个实施方案中，至少一个肿瘤细胞具有活化的替代途径例如：MET 或IGF1R途径。在一个实施方案中，MET活化由MET基因扩增和/或MET配体表达引起。
[0011] 在某些实施方案中，EGFR抗体免疫缀合物在抑制也具有间变性淋巴瘤激酶（ALK) 抑制剂抗性的抗EGFR/EGFR难治性肿瘤细胞的生长中是有效的。在一个实施方案中，肿瘤 细胞的至少一个包含EML4-ALK易位。在另一个实施方案中，肿瘤细胞是非小细胞肺肿瘤。
[0012] 本发明还提供了治疗患者的癌症的方法，包括施用有效量的EGFR抗体免疫缀合 物以抑制所述患者的肿瘤细胞的生长，其中肿瘤细胞的至少一个：（1)包含EGFR编码基因 的一个或多个突变；（2)包含PIK3CA、RAS或PTEN编码基因中的一个或多个突变；（3)具有 活化的MET或IGF1R途径；(4)具有间充质组织学或经历上皮-间充质转化；或（5)具有 ERBB2基因扩增或增加的HER2蛋白的产生。在一个实施方案中，MET活化由MET基因扩增 引起。
[0013] 本发明还提供了治疗患者的癌症的方法，包括（a)鉴定来自所述患者的癌细胞， 所述细胞（1)包含EGFR编码基因的一个或多个突变；（2)包含PIK3CA、RAS或PTEN编码基 因中的一个或多个突变；（3)具有活化的MET或IGF1R途径；或（4)具有间充质组织学或已 经历上皮-间充质转化；或（5)具有ERBB2基因扩增或增加的HER2蛋白的产生；和（b)给 所述患者施用有效量的EGFR抗体免疫缀合物。在一个实施方案中，MET活化由MET基因扩 增引起。在一个实施方案中，癌症是鳞状细胞癌、肺癌、头颈癌或EGFR阳性癌。
[0014] 在一个实施方案中，患者先前已遭受EGFR疗法的失败或正在遭受EGFR疗法的失 败。在另一个实施方案中，疗法包括施用EGFR抗体或EGFR激酶抑制剂。在另一个实施方 案中，EGFR抗体为西妥昔单抗或帕尼单抗。在另一个实施方案中，EGFR激酶抑制剂为埃罗 替尼或吉非替尼。
[0015] 在某些实施方案中，EGFR抗体免疫缀合物在治疗患者的癌症中是有效的，所述患 者包含一个或多个ALK抑制剂抗性肿瘤细胞。在一个实施方案中，肿瘤细胞的至少一个包 含EML4-ALK易位。在另一个实施方案中，肿瘤细胞是非小细胞肺癌。
[0016] 在一个实施方案中，抗体免疫缀合物具有式（A)-(L)-(C)，其中：(A)是特异性结 合EGFR的抗体或其抗原结合片段；(L)是接头；和（C)是细胞毒性剂；并且其中所述接头 (L)将㈧连接于（C)。在另一个实施方案中，EGFR抗体包含SEQ ID NO: 1的重链可变区和 SEQ ID N0:2或3的轻链可变区。在另一个实施方案中，接头选自可切割接头、不可切割接 头、亲水接头和基于二羧酸的接头。在另一个实施方案中，接头是不可切割接头。在另一个 实施方案中，接头选自4-(2-吡啶基二硫代）戊酸N-琥珀酰亚胺基酯（SPP) ;4_(2-吡啶 基二硫代）丁酸N-琥珀酰亚胺基酯（STOB)或4-(2-吡啶基二硫代）-2-磺基丁酸N-琥珀 酰亚胺基酯（磺基-STOB) ;4-(马来酰亚胺甲基）环己烷羧酸N-琥珀酰亚胺基酯（SMCC); 4_(马来酰亚胺甲基）环己烷羧酸N-磺基琥珀酰亚胺基酯（磺基SMCC) ;N-琥珀酰亚胺 基-4-(碘乙酰基）-氨基苯甲酸酯（SIAB) ;N-琥珀酰亚胺基-[(N-马来酰亚胺基丙酰氨 基）-四甘醇]酯（NHS-PEG4-马来酰亚胺）；Ν-(β -马来酰亚胺丙基氧基）琥珀酰亚胺 酯（BMPS);和γ-马来酰亚胺丁酸Ν-琥珀酰亚胺酯（GMBS)。在另一个实施方案中，细胞 毒性剂选自类美登素、类美登素类似物、多柔比星、修饰多柔比星、苯二氮杂萆、紫杉烧、 CC-1065、CC-1065类似物、多卡米星、多卡米星类似物、加利车霉素、多拉司他汀、多拉司他 汀类似物、auristatin、托马霉素衍生物和来普霉素衍生物或试剂的前体药物。在另一个 实施方案中，细胞毒性剂为类美登素。在另一个实施方案中，细胞毒性剂为N(2'）_去乙酰 基-N (2'）- (3-巯基-1-氧代丙基）-美登素（DM1)或N (2'）-去乙酰基-N2- (4-巯基-4-甲 基-1-氧代戊基）_美登素（DM4)。在另一个实施方案中，EGFR抗体免疫缀合物包含含有 SEQ ID NO: 1的重链可变区和SEQ ID N0:2或3的轻链可变区的抗体；接头SMCC和类美登素 DM1。
[0017] 在一个实施方案中，将抗体免疫缀合物与至少一种另外的抗肿瘤试剂一起施用。 在另一个实施方案中，将EGFR抗体免疫缀合物与抗肿瘤剂同时施用。在另一个实施方案 中，以任意时间顺序施用所述EGFR抗体免疫缀合物和抗肿瘤剂。在另一个实施方案中，所 述患者是人。
[0018] 在某些实施方案中，治疗包括本发明的EGFR免疫缀合物和至少一种另外的靶向 疗法的组合施用。有用的靶向疗法的种类包括但不限于例如（1)HER2抑制剂，（2)EGFR抑制 剂（例如，酪氨酸激酶抑制剂或靶向抗-EGFR抗体），（3)BRAF抑制剂，（4) ALK抑制剂，（5) 激素受体抑制剂，（6)mT0R抑制剂，（7) VEGF抑制剂或（8)癌症疫苗。酪氨酸激酶抑制剂对 于EGFR可以是特异性的或可以是多特异性的并且可抑制除EGFR外或除了 EGFR以外的一 种或多种激酶的活性。
[0019] 附图概述
[0020] 图1是描述huEGFR-7R裸露抗体和huEGFR-7R-SMCC-DMl缀合物抗具有L858R和 T790M EGFR突变的NCI-H1975NSCLC肿瘤细胞的细胞毒性活性的线图。
[0021] 图2是描述在50ng/mL肝细胞生长因子（HGF)存在或不存在的情况下埃罗替尼抗 HCC827NSCLC细胞系的细胞毒性活性的线图。
[0022] 图3是描述在50ng/mL HGF不存在（A)或存在（B)的情况下西妥昔单抗、huEGFR-7R 裸露抗体和huEGFR-7R-SMCC-DMl缀合物抗HCC827NSCLC细胞系的细胞毒性活性的线图。
[0023] 图 4 是描述 huEGFR-7R 裸露抗体和 huEGFR-7R-SMCC-DMl 缀合物抗 NCI-H226 ( - 个间充质NSCLC细胞系）的细胞毒性活性的线图。
[0024] 图5描述抗埃罗替尼HCC827NSCLC细胞系的表征。（A)是描述埃罗替尼抗HCC827 细胞系和抗埃罗替尼HCC827-ER细胞系的细胞毒性活性的线图。（B)是亲代HCC827细胞系 和抗埃罗替尼HCC827-ER细胞系的组织学图像。（C)是亲代HCC827细胞系和抗埃罗替尼 HCC827-ER细胞系的Western印迹分析。
[0025] 图6显示描述EGFR、HER3和MET在亲代HCC827细胞系和抗埃罗替尼HCC827-ER 细胞系上的表达的流式细胞术图直方图。
[0026] 图7是描述埃罗替尼抗亲代HCC827细胞系、抗埃罗替尼HCC827-ER和 HCC827-ER-E4细胞系的细胞毒性活性的线图。
[0027] 图8显示在以指定的剂量进行16小时的埃罗替尼处理后亲代HCC827细胞系和抗 埃罗替尼HCC827-ER-E4细胞系的Western印迹分析。
[0028] 图9是描述西妥昔单抗、huEGFR-7R裸露抗体和huEGFR-7R-SMCC-DMl缀合物抗亲 代HCC827细胞系和抗埃罗替尼HCC827-ER-E4细胞系的细胞毒性活性的线图。
[0029] 图10是描述huEGFR-7R-SMCC-DMl缀合物抗具有G12V KRAS突变的SW620结直肠 腺癌细胞系的细胞毒性活性的线图。
[0030] 图11是描述西妥昔单抗、huEGFR-7R裸露抗体和huEGFR-7R-SMCC-DMl缀合物抗 具有H1047R PIK3CA突变的Detroit562头颈鳞状细胞癌（SCCHN)细胞系的细胞毒性活性的 线图。
[0031] 图 12 显示 huEGFR-7R 抗体、huEGFR-7R-SMCC-DMl 缀合物、chKTI-SMCC-DMl 缀 合物、西妥昔单抗和埃罗替尼抗亲代HCC827细胞（A)、抗埃罗替尼HCC827ER细胞（B)和 HCC827EPR细胞（C)的细胞毒性活性。
[0032] 图13显示克里唑替尼和埃罗替尼（A);以及huEGFR-7R抗体、huEGFR-7R-SMCC-DMl 缀合物、chKTI-SMCC-DMl缀合物和西妥昔单抗⑶抗具有EML4-ALK基因易位的 H2228NSCLC腺癌细胞系的细胞毒性活性。
[0033] 发明详述
[0034] 本发明涉及EGFR抗体缀合物在治疗对EGFR疗法（包括未缀合EGFR抗体和/或 ALK抑制剂）具有抗性的肿瘤细胞中是有用的发现。具体地，显示了具有抑制由EGFR途径 驱动的肿瘤细胞生长同时对表达EGFR的正常细胞例如皮肤角质细胞具有有限作用的包含 EGFR抗体的抗体药物缀合物有效地抗EGFR疗法抗性肿瘤。重要地，与其它EGFR抑制剂相 似的单独的EGFR抗体组分在抗对EGFR靶向疗法具有抗性的肿瘤细胞中是无效的。然而， 当偶联至类美登素有效负载时，缀合物令人惊讶地显示强劲的抗对EGFR抑制剂具有不同 抗性机制的肿瘤细胞的活性。
[0035] I.定义
[0036] 为了有利于理解本发明，下面定义了许多术语和短语。
[0037] 〃表皮生长因子受体〃或〃EGFR"是酪氨酸激酶细胞表面受体。术语〃可溶性 EGFR〃或〃sEGFR〃是指包含EGFR的细胞外配体结合结构域的EGFR的部分。更具体地， sEGFR包含成熟 EGFR 的氨基酸 1-619 (Ullrich 等人，Human Epidermal Growth Factor cDNA Sequence and Aberrant Expression of the Amplified Gene in A-431Epidermoid Carcinoma Cells，Nature，第309卷，418-25 (1986))。如本文中所用，〃表皮生长因子受体〃或〃EGFR〃 意欲不仅包括野生型或全长EGFR而且还包括EGFR的所有突变形式，其一些形式在下文中 进行描述。
[0038] "EGFRvIII"意指其中外显子2至7已被缺失从而导致EGFR的细胞外结构域中267 个氨基酸框内缺失的EGFR的变体。EGFRvIII也称为III型突变体、S-EGFR、EGFRde2-7 和 Λ EGFR，并且描述于美国专利 No. 6, 455, 498、6, 127, 126、5, 981，725、5, 814, 317、 5, 710, 010、5, 401，828 和 5, 212, 290 中。
[0039] 〃缺失的EGFR变体〃意指其中一部分细胞外结构域失去以便EGFR信号转导变得 至少部分不依赖于配体的EGFR的缺失变体。
[0040] "ALK抑制剂〃意指作用于具有间变性淋巴瘤激酶（ALK)的变异例如EML4-ALK易 位的肿瘤的抗癌药物。EML4-ALK易位导致EML4-ALK阳性癌症。EML4-ALK阳性癌症是指其细 胞包含DNA的特征性异常构型的原发性恶性肿瘤，其中棘皮动物微管结合蛋白-样4(EML4) 基因融合至ALK基因。该异常基因融合导致在许多情况下似乎促进和维持癌细胞的恶性行 为的蛋白（EML4-ALK)产生。
[0041] 术语〃K-ras突变体〃是指相较于野生型K-ras包含至少一个氨基酸突变的K-ras 蛋白（或指编码这样的K-ras蛋白的核苷酸序列）。K-ras突变体可包括但不限于等位基因 变体、剪接变体、置换变体、缺失变体和插入变体。术语"K-ras突变〃是指相较于野生型序 列K-ras蛋白的序列（或编码这样的K-ras蛋白的核苷酸）中至少一个氨基酸突变。术语 "K-ras突变体肿瘤〃或〃包含（或包括）K-ras突变的肿瘤〃在本文中可互换使用并且是 指其中可在蛋白质或核苷酸水平上检测到K-ras突变的肿瘤细胞的群体。如本文中所用， 术语〃包含（或包括）K-ras突变的癌症〃是指可在蛋白质或核苷酸水平上检测到K-ras突 变的癌细胞群体。K-ras以及EGFR突变可通过本领域技术人员已知的技术和方法来检测， 所述技术和方法包括但不限于基于PCR的测定（例如，聚合酶链式反应-限制性片段长度 多态性（PCR-RFLP)测定、聚合酶链式反应-单链构象多态性（PCR-SSCP)测定、实时PCR测 定、PCR测序、突变体等位基因特异性PCR扩增（MASA)测定）、直接测序、引物延伸反应、电 泳、寡核苷酸连接测定、杂交测定、TaqMan测定、SNP基因分型测定、高分辨率解链测定和微 阵列分析。
[0042] 术语〃激活突变〃是指导致导致蛋白质例如K-ras的组成型激活和信号转导途径 的组成型活化的突变。在一些实施方案中，包含激活突变的K-ras蛋白启动几个途径的组 成型活性，包括但不限于MAP激酶级联和PI3激酶级联。在一些实施方案中，通过K-ras突 变体和信号转导途径的组成型活性显著地促成了恶性表型的几个方面，包括细胞增殖的失 调、受损的分化、减少的细胞凋亡和延长的细胞存活率。
[0043] 短语〃EGFR介导的癌症〃是指特征在于其中EGFR被异常激活至高于正常对应上 皮组织中的水平的上皮肿瘤的癌症。这些更高水平的EGFR活性有利于许多类型的癌症的 肿瘤生长。这样的癌症包括但不限于非小细胞肺癌、乳腺癌、结直肠癌、头颈癌、前列腺癌和 多形性胶质细胞瘤。EGFR的异常活化因受体的过表达、基因扩增、激活突变、受体配体的过 表达和/或EGFR活性的调节剂的丢失而造成。
[0044] 术语〃抗体〃意指免疫球蛋白分子，所述免疫球蛋白分子通过免疫球蛋白分子的 可变区内的至少一个抗原识别位点识别靶例如蛋白质、多肽、肽、碳水化合物、多核苷酸、月旨 质或上述物质的组合并且特异性结合所述靶。如本文中所用，术语〃抗体〃包括完整的多克 隆抗体、完整的单克隆抗体、抗体片段（例如Fab、Fab'、F (ab'）2和Fv片段）、单链Fv (scFv) 突变体、从至少两个完整抗体产生的多特异性抗体例如双特异性抗体、嵌合抗体、人源化抗 体、人抗体、包含抗体的抗原决定部分的融合蛋白和包含抗原识别部位的任何其它修饰免 疫球蛋白分子，只要抗体显示期望的生物活性即可。抗体可以是5个主要种类的免疫球蛋 白：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM(基于它们的分别称为α、δ、ε、Y和μ的重链恒定结构域 的身份）或其亚类（同种型）（例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl和IgA2)的任一种。免 疫球蛋白的不同种类具有不同的公知的亚单位结构和三维构型。抗体可以是裸露的或缀合 至其它分子例如毒素、放射性同位素等。
[0045] 〃阻断〃抗体或〃拮抗剂〃抗体是抑制或减小其结合的抗原例如EGFR的生物活 性的抗体。在一些实施方案中，阻断抗体或拮抗剂抗体大体上或完全抑制抗原的生物活性。 生物活性可减少 10%、20%、30%、50%、70%、80%、90%、95%或甚至100%。
[0046] 如本文中所用，关于抗体的短语〃抑制EGFR活化的能力〃意欲指其对EGFR的结 合导致人EGFR激活和当受体被激活时发生的人EGFR的生物活性的抑制。测量EGFR生物 活性的一个或多个指标，如使用细胞增殖测定、细胞凋亡测定、受体结合测定、受体磷酸化 测定来测定的，或小鼠肿瘤模型可评估抗体抑制EGFR激活的能力。
[0047] 术语〃抗-EGFR抗体〃或〃结合EGFR的抗体〃是指能够以充足的亲和力结合EGFR 以便抗体在靶向EGFR中用作诊断剂和/或治疗剂的抗体。几种抗-EGFR抗体在本领域是 已知的。例如，西妥昔单抗（Ab225)和528Ab描述于美国专利No. 4, 943,533(将其通过引 用并入本文）中。
[0048] 抗-EGFR抗体对无关、非EGFR蛋白的结合的程度可低于抗体对EGFR抗体的结合 的约10%，如例如通过放射免疫测定（RIA)测量的。在某些实施方案中，结合EGFR的抗体 具有彡1 μ M、彡ΙΟΟηΜ、彡10nM、彡InM或彡0. InM的解离常数（Kd)。在其它实施方案中，抗 体以约ΙΟΟηΜ至约0. InM、约10nM至约0. InM或约InM至约0. InM的解离常数结合EGFR。
[0049] 术语〃抗体片段〃是指完整抗体的部分并且是指完整抗体的抗原决定可变区。抗 体片段的实例包括但不限于Fab、Fab'、F (ab'）2和Fv片段、线性抗体、单链抗体和从抗体片 段形成的多特异性抗体。
[0050] "单克隆抗体"是指参与单个抗原决定簇或表位的高度特异性识别和结合的均一 抗体群体。这与通常包括抗不同抗原决定簇的不同抗体的多克隆抗体相反。术语"单克隆抗 体"包括完整和全长单克隆抗体以及抗体片段（例如Fab、Fab'、F(ab'）2、Fv)、单链（scFv) 突变体、包含抗体部分的融合蛋白和包含抗原识别部位的任何其它修饰免疫球蛋白分子。 此外，"单克隆抗体"是指以许多方式制造的这样的抗体，所述方式包括但不限于杂交瘤、噬 菌体选择、重组表达和转基因动物。
[0051] 术语〃人源化抗体〃是指作为包含最少非人（例如，鼠）序列的特异性免疫 球蛋白链、嵌合免疫球蛋白或其片段的非人（例如，鼠）抗体的形式。通常地，人源化 抗体是其中来自互补决定区（CDR)的残基被来自非人物种（例如小鼠、大鼠、仓鼠） 的CDR的残基替代的人免疫球蛋白，其具有期望的特异性、亲和力和能力（Jones等 人，1986,Nature, 321:522-525 ;Riechmann 等人，1988,Nature, 332:323-327 ;Verhoeyen 等人，1988, Science, 239:1534-1536)。在一些情况下，人免疫球蛋白的Fv构架区（FR)残 基用来自非人物种的抗体中的对应残基来替代，所述人免疫球蛋白具有期望的特异性、亲 和力和能力。人源化抗体还可通过Fv构架区中和/或替代的非人残基内的其它残基的置 换来进一步修饰，以改良和最优化抗体特异性、亲和力和/或能力。一般而言，人源化抗体 可包含大体上全部的至少一个，通常2或3个含有全部或大体上全部的对应于非人免疫球 蛋白的CDR区的可变结构域，其中全部或大体上全部FR区是人免疫球蛋白共有序列的FR 区。人源化抗体还可包含至少一部分免疫球蛋白恒定区或结构域（Fc)，通常人免疫球蛋白 的恒定区或结构域。用于产生人源化抗体的方法的实例描述于美国专利5, 225, 539中。
[0052] 抗体的"可变区"是指单独的或组合的抗体轻链的可变区和/或抗体重链的可变 区。重链和轻链的可变区各自由通过3个也称为高变区的互补决定区（CDR)连接的4个构 架区（FR)组成。每一条链中的⑶R通过FR与来自另一条链的⑶R紧密地保持在一起，促 成抗体的抗原结合部位的形成。存在至少两种用于确定CDR的技术：（1)基于跨物种序列 可变性的方法（即，Kabat 等人 Sequences of Proteins of Immunological Interest，（第 5 版，1991，National Institutes of Health, Bethesda Md.));和（2)基于抗原-抗体复合 物的晶体学研究的方法（Al-lazikani 等人（1997) J. Molec. Biol. 273:927-948))。此外，这 两种方法的组合有时在本领域中用于确定CDR。
[0053] 当提及可变结构域中的残基时，通常使用Kabat编号系统（轻链的大致残基1-107 和重链的大致残基 1-113)(例如，Kabat 等人，Sequences of Immunological Interest.第 5 版· Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)) 〇
[0054] 术语"人抗体"意指由由人产生的抗体或具有对应于使用本领域已知的任何技术 制备的由人产生的抗体的氨基酸序列的抗体。该人抗体的定义包括完整或全长抗体、其片 段和/或包含至少一个人重链和/或轻链多肽的抗体，例如，包含鼠轻链和人重链多肽的抗 体。
[0055] 术语"嵌合抗体"是指其中免疫球蛋白分子的氨基酸序列来源于两个或更多个物 种的抗体。通常地，轻链和重链的可变区对应于源自哺乳动物的一个物种（例如，小鼠、大 鼠、兔等）的具有期望的特异性、亲和力和能力的抗体的可变区，然而恒定区与来源于另一 物种（通常人）的抗体的序列同源以避免引发该物种的免疫反应。
[0056] 术语〃表位〃或〃抗原决定簇〃在本文中可互换使用，并且是指能够被特定抗体 识别和特异性结合的抗原的那部分。当抗原是多肽时，表位可从连续氨基酸和通过蛋白质 的三级折叠紧靠在一起的非连续氨基酸形成。从连续氨基酸形成的表位通常在蛋白质变性 后得到保留，然而通过三级折叠形成的表位通常在蛋白质变性后失去。表位通常在独特的 空间构象中包括至少3个，更常见地至少5个或8-10个氨基酸。
[0057] 〃结合亲和力〃通常是指分子（例如，抗体）的单个结合部位与其结合伴侣（例 如，抗原）之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另有所指，否则，如本文中所用，"结 合亲和力"是指反映结合对（例如，抗体和抗原）的成员之间的1:1相互作用的固有结合 亲和力。分子X对于其伴侣Υ的亲和力通常可利用解离常数（Kd)来表示。亲和力可通过 本领域已知的常用方法（包括本文中描述的那些方法）来测量。低亲和力抗体通常缓慢地 结合抗原，并且倾向于容易解离，然而高亲和力抗体通常更快地结合抗原并且倾向于保持 更长久的结合。多种测量结合亲和力的方法在本领域中是已知的，其任一种可用于本发明 的目的。在下文中描述了特定的说明性实施方案。
[0058] "或更好"，当在本文中用于指结合亲和力时，是指分子与其结合伴侣之间更强的 结合。"或更好"，当在本文中指更强结合时，利用更小的Kd数值来表示。例如，具有"0. 6nM 或更好〃的对抗原的亲和力的抗体，抗体对于抗原的亲和力〈〇· 6nM，即0· 59ηΜ、0· 58nM、 0. 57nM等或小于0. 6nM的任意值。
[0059] 〃特异性结合"，其通常意指抗体通过其抗原结合结构域结合表位，以及结合使得 抗原结合结构域与表位之间的一定互补性成为必需。根据该定义，当抗体通过其抗原结合 结构域比其结合随机的无关表位更容易地结合特定表位时，抗体被认为"特异性结合"该表 位。术语"特异性"在本文中用于定量相对亲和力，特定抗体藉以相对亲和力结合特定表 位。例如，抗体"A〃可被认为具有比抗体"B"更高的对于给定表位的特异性，或抗体"A"可 被认为以比其对于相关表位"D"更高的特异性结合表位"C"。
[0060] "优先结合〃，其意指抗体比其对无关的、相似的、同源的或类似的表位的结合更 容易地特异性结合表位。因此，"优选结合"给定的表位的抗体更可能地结合该表位（相比 于对相关表位），即使这样的抗体可与相关表位交叉反应。
[0061] 抗体被认为"竞争性抑制"参照抗体对给定表位的结合，如果其优先结合该表位 至其在一定程度上阻断参照抗体对表位的结合的程度的话。竞争性抑制可通过本领域已知 的任何方法例如竞争性ELISA测定来测定。抗体可被认为竞争性抑制参照抗体对给定的表 位的结合至少90%，至少80%，至少70%，至少60 %或至少50%。
[0062] 如本文中所用，短语〃大体上相似〃或〃大体上相同〃表示两个数值（通常一个 与本发明的抗体相关，另一个与参照/比较抗体相关）之间充分高的相似程度，以便本领域 技术人员可认为在通过所述值（例如，Kd值）测量的生物特征的上下文中两个值之间的差 异很小或无生物和/或统计显著性。所述两个值之间的差异作为参照/比较抗体的值的函 数可小于约50%，小于约40%，小于约30%，小于约20%或小于约10%。两个"大体上相 似的结合亲和力"之间的差异作为参照/比较抗体的值的函数通常小于约10%。
[0063] 如本文中所用，〃不依赖于配体的结合〃表示EGFR结合剂在与EGFR相互作用的 配体不存在的情况下结合人EGFR上的表位的能力。
[0064] "分离的"多肽、抗体、多核苷酸、载体、细胞或组合物是以在自然界中未发现的形 式存在的多肽、抗体、多核苷酸、载体、细胞或组合物。分离的多肽、抗体、多核苷酸、载体、细 胞或组合物包括已被纯化至它们不再以其中它们在自然界中被发现的形式存在的程度的 那些多肽、抗体、多核苷酸、载体、细胞或组合物。在一些实施方案中，分离的抗体、多核苷 酸、载体、细胞或组合物是大体上纯的。
[0065] 如本文中所用，〃大体上纯的〃是指为至少50 %的纯（S卩，不含污染物）、至少90 % 的纯、至少95 %的纯、至少98 %的纯或至少99 %的纯的材料。
[0066] 如本文中所用，术语〃免疫缀合物〃或〃缀合物〃是指连接至细胞结合剂（即， 抗-EGFR抗体或其片段）并且通过通式：C-L-A定义的化合物或其衍生物，其中C =细胞毒 素 ，L =接头，以及A =细胞结合剂或抗-EGFR抗体或抗体片段。免疫缀合物还可通过以反 向顺序表不的通式：A-L-C来定义。
[0067] 〃接头〃是能够将化合物，通常地药物例如类美登素以稳定的共价方式连接至细 胞结合剂例如抗-EGFR抗体或其片段的任何化学部分。接头可在化合物或抗体在其下保持 活性的条件下对酸诱导的切割、光诱导的切割、肽酶诱导的切割、酯酶诱导的切割和二硫键 切割敏感或对这些切割大体上具有抗性。适当的接头在本领域是公知的，包括例如二硫基、 硫醚基、酸不稳定基团、光不稳定基团、肽酶不稳定基团和酯酶不稳定基团。接头还包括带 电荷的接头及其亲水形式，如本文中描述的和本领域已知的。
[0068] 术语〃癌症〃和〃癌性的〃是指或描述其中一群细胞的特征在于不受调节的细胞 生长的哺乳动物的生理状况。癌症的实例包括但不限于腺癌、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤和白 血病。〃肿瘤〃和〃赘生物〃是指一个或多个因过度细胞生长或增殖引起的良性（非癌性 的）或恶性（癌性的）包括癌前期病变的细胞。可被治疗和/或预防的"癌症"或"致瘤 性〃疾病的实例包括腹部、骨、乳腺、消化系统、肝、胰腺、腹膜、内分泌腺（肾上腺、甲状旁 腺、垂体、睾丸、卵巢、胸腺、甲状腺）、眼、头和颈、神经系统（中枢和周围神经系统）、淋巴系 统、骨盆、皮肤、软组织、脾、胸部和泌尿生殖系统中的肿瘤。
[0069] 术语〃癌细胞"、"肿瘤细胞〃及语法等同物是指来源于肿瘤或癌前期病变的细胞 (包括非致瘤性细胞）的总群体，其包括大块的肿瘤细胞群体和致瘤性干细胞（癌症干细 胞）。如本文中所用，当"肿瘤细胞"仅指不存在更新和分化（以将这些肿瘤细胞与癌症干 细胞相区分）的能力的那些肿瘤细胞时，术语"肿瘤细胞"被术语"非致瘤性"修饰。
[0070] 术语〃受试者〃是指将为特定处理的接受者的任何动物（例如，哺乳动物），包括 但不限于人、非人灵长类动物、啮齿类动物等。通常地，术语〃受试者〃和〃患者〃在本文 中指人受试者时可互换使用。
[0071] "与一种或多种其它治疗剂组合地"施用包括同时（一起）施用和以任意顺序连续 施用。
[0072] 术语〃药物制剂〃是指以这样的形式如允许活性成分的生物活性是有效的形式存 在的并且不包含对制剂被施用至的受试者具有不可接受的毒性的另外的组分的制剂。制剂 可以是无菌的。
[0073] 本文中公开的抗体的〃有效量〃是足以进行特别地提及的目的的量。〃有效量〃 可凭经验和以与所述目的相关的常规方式来测定。
[0074] 术语〃治疗有效量〃是指有效地"治疗"受试者或哺乳动物的疾病或障碍的抗体或 其它药物的量。在癌症的情况下，药物的治疗有效量可减少癌细胞的数目；减小肿瘤尺寸； 抑制（即，减慢至一定程度或停止）癌细胞至周围组织的浸润；抑制（即，减慢至一定程度 或停止）肿瘤转移；抑制（至一定程度）肿瘤生长；和/或使与癌症相关的症状的一个或多 个减轻至一定程度。参见本文中的"治疗"的定义。至药物可阻止生长和/或杀死现有癌 细胞的程度，其可以是细胞生长抑制性的和/或细胞毒性的。"预防有效量"是指在剂量上 和进行必需的时间上有效地实现期望的预防结果的量。通常地但非必需地，由于在疾病之 前或早期阶段在受试者中使用预防剂量，因此预防有效量将低于治疗有效量。
[0075] 单词〃标记〃，当在本文中使用时，是指被直接或间接地缀合至抗体以产生"标记 的"抗体的可检测化合物或组合物。标记可以本身可检测的（例如放射性同位素标记或荧 光标记）或，在酶标记的情况下，可催化为可检测的底物化合物或组合物的化学改变。
[0076] "化学治疗剂"是用于治疗癌症（无论作用机制如何）的化合物。
[0077] 术语例如〃治疗〃或〃医疗〃或〃医治〃或〃减轻〃或"缓和"是指治愈、减慢、 减轻诊断的病理状况或障碍的症状和/或停止其进展的治疗措施。因此，需要治疗的那些 受试者包括已患有障碍的那些受试者，易于具有障碍的那些受试者；和将要预防其障碍的 那些受试者。在某些实施方案中，如果患者显示下列的一项或多项则按照本发明的方法成 功地"治疗"受试者的癌症：癌细胞数目的减少或完全不存在；肿瘤尺寸的减小；癌细胞至 周围器官的浸润（包括，例如癌症至软组织和骨的扩散）的抑制或不存在；肿瘤转移的抑制 或不存在；肿瘤生长的抑制或不存在；与特定癌症相关的一个或多个症状的减轻；减少的 发病率和死亡率；生活质量的改善；肿瘤的致瘤性、致瘤频率或致瘤能力的减小；肿瘤中癌 症干细胞的数目或频率的减少；致瘤细胞至非致瘤状态的分化；或作用的一些组合。
[0078] 如本文中所用，短语〃大体上无反应的〃是指在治疗剂施用后显示稳定生长或增 加的生长的肿瘤或癌症。短语可以指在施用治疗剂后显示稳定的疾病或进行性疾病的患 者。当提及对利用治疗剂的治疗具有抗性的肿瘤或癌症时，可使用该短语。如本文中所用， 短语〃对EGFR抑制剂大体上无反应〃是指在施用EGFR抑制剂后显示稳定生长或增加的生 长的肿瘤或癌症。在一些实施方案中，给需要治疗的患者施用EGFR抑制剂，对EGFR抑制剂 "大体上无反应"包括：无癌细胞的数目或持续生长的减少；无肿瘤尺寸的减小；肿瘤尺寸 的增加；无癌细胞至周围器官的浸润（包括例如癌症至软组织和骨的扩散）的抑制，或所述 浸润的继续；无肿瘤转移的抑制或肿瘤转移的继续；无肿瘤生长的抑制，或转移的继续；无 或几乎无与特定肿瘤相关的一个或多个症状的减轻；无或几乎无肿瘤的致瘤性、致瘤频率 或致瘤能力的减小；无或几乎无肿瘤中癌症干细胞的数目或频率的减少；或作用的一些组 合。
[0079] 如本文中所用，对于疗法是"难治疗性"的疾病是最初无反应的，随时间过去变得 无反应的（例如，在3个月内（S卩，可在治疗时或治疗的3个月内观察到疾病进展））或在 中断治疗后不久复发的疾病。在一些实施方案中，对疗法是"难治性的"癌症是其中癌症对 治疗不起反应的癌症。
[0080] 如本文中所用，"抗"疗法的疾病是对疗法无反应的疾病。在一个实施方案中，癌症 可在治疗开始时具有抗性或其可在治疗过程中变得具有抗性。在某些实施方案中，"难治 性〃癌症也称为〃抗性〃癌症。
[0081] 如本公开内容和权利要求中使用的，除非上下文另外明确地指出，否则〃一个/种 (a) 〃、〃一个/种（an) 〃和〃该（the) 〃包括复数形式。
[0082] 应理解无论何处在本文中用语言"包含"描述实施方案，还提供了按照"由……组 成"和/或"基本上由……组成"描述的另外的类似实施方案。
[0083] 术语〃和/或〃，如在短语例如"A和/或B"中所用，意欲包括"A和B〃、〃A或B"、 "A〃和〃B"。同样地，如短语例如"A、B和/或C"中所用，术语〃和/或〃意欲包括下列实 施方案的每一个：A、B和C ;A、B或C ;A或C ;A或B ;B或C ;A和C ;A和B ;B和C ;A(单独 的）；B (单独的）和C (单独的）。
[0084] II. EGFR 抗体
[0085] 特异性结合EGFR(即，"EGFR抗体〃）的抗体或其抗原结合片段可用于产生 在本发明中有用的EGFR免疫缀合物。本发明包括任何类型的EGFR抗体或其EGFR 结合片段、部分或其它抗原结合形式的用途。这些包括例如但不限于各种形式的抗 体及其片段，例如多克隆或单克隆抗体或其抗原结合片段；嵌合的、灵长类动物源 化的、人源化的、全长人抗体或其抗原结合片段；或抗体的表位结合片段例如单链、 Fv、sFv、scFv、Fab、Fab，和 F(ab，）2(Parham,J.Immunol. 131:2895-2902 (1983); Spring 等人,J.Immunol. 113:470-478(1974) ；Nisonoff 等人,Arch. Biochem. Biophys. 89:230-244(1960))。
[0086] 用于产生EGFR免疫缀合物的特别有用的EGFR抗体描述于共同待决的美国申请公 布No. 2012/0156217中。一个这样的抗体huEGFR-7R是包含SEQ ID NO: 1的重链可变区和 SEQ ID N0:2或3的轻链可变区的人源化抗体。
[0087]
【权利要求】
1. 一种抑制表达表皮生长因子受体（EGFR)的肿瘤细胞的生长的方法，所述肿瘤细胞 抗EGFR疗法或难以被EGFR疗法治愈，所述方法包括将所述肿瘤细胞与有效量的EGFR抗体 免疫缀合物接触。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述疗法包括施用EGFR抗体或EGFR激酶抑制剂。
3. 根据权利要求1或2所述的方法，其中所述细胞对其具有抗性的EGFR疗法选自：埃 罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、BIB2992、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎鲁木单抗、奈昔木单抗和 尼妥珠单抗。
4. 根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述肿瘤细胞的至少一个：（1)包含 EGFR编码基因的一个或多个突变；（2)包含PIK3CA、RAS或PTEN编码基因中的一个或多个 突变；（3)具有活化的MET或IGF1R途径；（4)具有间充质组织学或已经历上皮-间充质转 化；或（5)具有ERBB2基因扩增或增加的HER2蛋白的产生。
5. 根据权利要求4所述的方法，其中所述突变的EGFR基因包含EGFRvIII或T790M突 变。
6. 根据权利要求4所述的方法，其中所述至少一个肿瘤细胞包含PIK3CA、RAS或PTEN 编码基因中的一个或多个突变。
7. 根据权利要求4所述的方法，其中所述MET或IGF1R途径被活化。
8. -种治疗患者的癌症的方法，包括施用有效量的EGFR抗体免疫缀合物以抑制所述 患者的肿瘤细胞的生长，其中所述肿瘤细胞的至少一个：（1)包含EGFR编码基因的一个或 多个突变；（2)包含PIK3CA、RAS或PTEN编码基因中的一个或多个突变；（3)具有活化的MET 或IGF1R途径；（4)具有间充质组织学或已经历上皮-间充质转化；或（5)具有ERBB2基因 扩增或增加的HER2蛋白的产生。
9. 一种治疗患者的癌症的方法，包括： (a) 鉴定来自所述患者的肿瘤细胞，所述肿瘤细胞⑴包含EGFR编码基因的一个或多 个突变；（2)包含PIK3CA、RAS或PTEN编码基因中的一个或多个突变；（3)具有活化的MET 或IGF1R途径；或（4)具有间充质组织学或已经历上皮-间充质转化；和 (b) 给所述患者施用有效量的EGFR抗体免疫缀合物。
10. 根据权利要求8或9所述的方法，其中所述癌症是鳞状细胞癌、肺癌、头颈癌或 EGFR阳性癌。
11. 根据权利要求1-4或7-9所述的方法，其中所述MET活化由MET基因扩增引起。
12. 根据权利要求8-11中任一项所述的方法，其中所述患者先前已遭受EGFR疗法的失 败或正在遭受EGFR疗法的失败。
13. 根据权利要求12所述的方法，其中所述疗法包括施用EGFR抗体或EGFR激酶抑制 剂。
14. 根据权利要求13所述的方法，其中所述EGFR抗体是西妥昔单抗或帕尼单抗。
15. 根据权利要求13所述的方法，其中所述EGFR激酶抑制剂是埃罗替尼或吉非替尼。
16. -种用于治疗患者的癌症的方法，包括施用有效量的EGFR抗体免疫缀合物来抑 制所述患者的肿瘤细胞的生长，其中所述肿瘤细胞的至少一个对包括间变性淋巴瘤激酶 (ALK)抑制剂具有抗性的疗法。
17. -种治疗患者的癌症的方法，包括： (a) 鉴定对至少一种ALK抑制剂具有抗性的来自所述患者的肿瘤细胞；和 (b) 给所述患者施用有效量的EGFR抗体免疫缀合物。
18. 根据权利要求16或17所述的方法，其中所述肿瘤细胞的至少一个包含EML4-ALK 易位。
19. 根据权利要求16-18中任一项所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌。
20. 根据权利要求16-19中任一项所述的方法，其中所述ALK抑制剂是克里唑替尼。
21. 根据权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述免疫缀合物具有式 (A) -(L) -(C)，其中： (A)为特异性结合EGFR的抗体或其抗原结合片段； (U为接头；和 (c) 为细胞毒性剂；和 其中所述接头（L)将（A)连接至（C)。
22. 根据权利要求21所述的方法，其中所述EGFR抗体包含SEQ ID NO: 1的重链可变区 和SEQ ID N0:2或3的轻链可变区。
23. 根据权利要求22所述的方法，其中所述接头选自可切割接头、不可切割接头、亲水 接头和基于二羧酸的接头。
24. 根据权利要求23所述的方法，其中所述接头是不可切割接头。
25. 根据权利要求21所述的方法，其中所述接头选自：4-(2-吡啶基二硫代）戊酸N-琥 珀酰亚胺基酯映?）；4-(2-吡啶基二硫代）丁酸^琥珀酰亚胺基酯（31^)或4-(2-吡啶 基二硫代）-2_磺基丁酸N-琥珀酰亚胺基酯（磺基-STOB) ;4-(马来酰亚胺甲基）环己烷 羧酸N-琥珀酰亚胺基酯（SMCC) ;4-(马来酰亚胺甲基）环己烷羧酸N-磺基琥珀酰亚胺基 酯（磺基SMCC) ;N-琥珀酰亚胺基-4-(碘乙酰基）-氨基苯甲酸酯（SIAB) ;N-琥珀酰亚胺 基-[(N-马来酰亚胺基丙酰氨基）-四甘醇]酯（NHS-PEG4-马来酰亚胺）；Ν- ( β -马来酰 亚胺丙基氧基）琥珀酰亚胺酯（BMPS);和γ-马来酰亚胺丁酸Ν-琥珀酰亚胺酯（GMBS)。
26. 根据权利要求21所述的方法，其中所述细胞毒性剂选自类美登素、类美登素类似 物、多柔比星、修饰多柔比星、苯二氮杂?、紫杉烷、CC-1065、CC-1065类似物、多卡米星、多 卡米星类似物、加利车霉素、多拉司他汀、多拉司他汀类似物、auristatin、托马霉素衍生物 和来普霉素衍生物或试剂的前体药物。
27. 根据权利要求26所述的方法，其中所述细胞毒性剂是类美登素。
28. 根据权利要求27所述的方法，其中所述细胞毒性剂是N (2'）-去乙酰 基-N (2'）- (3-巯基-1-氧丙基）-美登素（DM1)或N (2'）-去乙酰基-N2-(4-巯基-4-甲 基_1_氧代戊基）_美登素（DM4)。
29. 根据权利要求1-28中任一项所述的方法，其中所述EGFR抗体免疫缀合物包含含有 SEQ ID NO: 1的重链可变区和SEQ ID NO: 2或3的轻链可变区的抗体；接头SMCC和类美登素 DM1。
30. 根据权利要求1-29中任一项所述的方法，其中将EGFR抗体免疫缀合物与抗肿瘤剂 一起施用。
31. 根据权利要求30所述的方法，其中将EGFR抗体免疫缀合物与抗肿瘤剂同时施用。
32. 根据权利要求30所述的方法，其中以任意时间顺序施用所述EGFR抗体免疫缀合物 和抗肿瘤剂。
33.根据权利要求8-32中任一项所述的方法，其中所述患者是人。
【文档编号】A61K38/00GK104066481SQ201280056769
【公开日】2014年9月24日 申请日期:2012年11月21日 优先权日:2011年11月21日
【发明者】尤利娅托·塞蒂亚迪, 彼得·U·帕克, 托马斯·齐腾登 申请人:伊缪诺金公司