专利名称：一种制备兰屿樫木总皂苷的方法
技术领域：
本发明属于中药化学领域，涉及一种制备兰屿樫木总皂苷的方法。
背景技术：
兰ill与裡木系棟科(Meliaceae)植物兰ill与裡木應cumingianum DC.,产自台湾兰_，分布于菲律宾，其化学成分主要为三職阜苷类，如兰_樫木苷K (Cumingianoside K)、兰_裡木苷 P (Cumingianoside )、兰_裡木苷 M (Cumingianoside ]\0、兰_裡木苷L(Cumingianoside L)、兰_樫木苷Q(Cumingianoside Q)等,均具有显著的生理活性,呈现一定的细胞毒活性。目前，对兰屿樫木的开发和利用严重不足，另外，还未见大量制备兰屿樫木皂苷的方法报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备兰屿樫木总皂苷的方法，
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种制备兰屿樫木总皂苷的方法，其特征在于包括以下步骤
(I)取兰屿樫木叶50°C左右烘干粉碎，得到原料粉末，然后微波辐射条件下用有机溶剂提取；(2)对提取液减压浓缩回收溶剂后加水成悬浮液，加入大孔树脂吸附，先用水或10-20%的乙醇溶液洗去杂质，再用55-70%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；(3)洗脱液加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，浓缩液加适量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷层；(4)将二氯甲烷层加氧化铝拌样，装入氧化铝层析柱，70-95%乙醇洗脱，收集3-8倍柱体积量的洗脱液，减压回收乙醇至尽，放置过夜，将沉淀物滤出干燥得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷。步骤(I)中所述有机溶剂为乙醇、甲醇或丙酮溶液。步骤(2)中所述大孔吸附树脂选自AB-8、D4020、D101、D103、HP20中的一种。步骤(3)中所述的超滤膜可选管式或中空有机膜，截留分子量为3000-10000 ;所述的纳滤膜可选管式或中空有机膜，截留分子量不大于500。采用本发明方法制备兰屿樫木总皂苷，操作简单，环境污染小、设备投入小，有利于大生产操作。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
将兰屿樫木叶50°C左右烘干粉碎过20目筛，得到兰屿樫木叶粉末，取5kg加入60%乙醇溶液微波辐射条件下提取30min，过滤，提取2次，将提取液合并减压浓缩回收溶剂后加适量水制成悬浮液，过D4020大孔树脂吸附，先用少量水洗脱至洗脱液不浑浊，弃去，再用60%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量5000的中空纤维素超滤膜系统超滤，进口压力控制O. 6MPa，常温过滤，加适量水透析，透过液再加入截留分子量500中空纤维素纳滤膜系统纳滤，浓缩液加适量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷层；(4)将二氯甲烷层加氧化铝拌样，装入氧化铝层析柱，70%乙醇洗脱，收集3倍柱体积量的洗脱液，减压回收乙醇至尽，放置过夜，将沉淀物滤出干燥得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷5. 2g，总皂苷含量为83%。实施例2
将兰屿樫木叶50°C左右烘干粉碎过20目筛，得到兰屿樫木叶粉末，取5kg加入70%甲醇溶液微波辐射条件下提取30min，过滤，提取2次，将提取液合并减压浓缩回收溶剂后加适量水制成悬浮液，过AB-8大孔树脂吸附，先用少量水洗脱至洗脱液不浑浊，弃去，再用60%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量6000的中空纤维素超滤膜系统超滤，进口压力控制O. 5MPa，常温过滤，加适量水透析，透过液再加入截留分子量500管式纤维素纳滤膜系统纳滤，浓缩液加适量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷层；(4)将二氯甲烷层加氧化铝拌样，装入氧化铝层析柱，75%乙醇洗脱，收集5倍柱体积量的洗脱液，减压回收乙醇至尽，放置过夜，将沉淀物滤出干燥得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷5. 4g，总皂苷含量为84%。实施例3:
将兰屿樫木叶50°C左右烘干粉碎过20目筛，得到兰屿樫木叶粉末，取5kg加入50%丙酮溶液微波辐射条件下提取30min，过滤，提取2次，将提取液合并减压浓缩回收溶剂后加适量水制成悬浮液，过DlOl大孔树脂吸附，先用少量20%乙醇洗脱至洗脱液不浑浊，弃去，再用55%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量10000的管式纤维素超滤膜系统超滤，进口压力控制O. 8MPa，常温过滤，加适量水透析，透过液再加入截留分子量500管式纤维素纳滤膜系统纳滤，浓缩液加适量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷层；(4)将二氯甲烷层加氧化铝拌样，装入氧化铝层析柱，80%乙醇洗脱，收集8倍柱体积量的洗脱液，减压回收乙醇至尽，放置过夜，将沉淀物滤出干燥得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷5. lg，总皂苷含量为82%。实施例4:
将兰屿樫木叶50°C左右烘干粉碎过20目筛，得到兰屿樫木叶粉末，取5kg加入75%丙酮溶液微波辐射条件下提取30min，过滤，提取2次，将提取液合并减压浓缩回收溶剂后加适量水制成悬浮液，过D103大孔树脂吸附，先用少量15%乙醇洗脱至洗脱液不浑浊，弃去，再用70%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量8000的管式纤维素超滤膜系统超滤，进口压力控制O. 7MPa，常温过滤，加适量水透析，透过液再加入截留分子量500中空纤维素纳滤膜系统纳滤，浓缩液加适量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷层；(4)将二氯甲烷层加氧化铝拌样，装入氧化铝层析柱，95%乙醇洗脱，收集6倍柱体积量的洗脱液，减压回收乙醇至尽，放置过夜，将沉淀物滤出干燥得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷4. Sg，总皂苷含量为87%。实施例5:
将兰屿樫木叶50°C左右烘干粉碎过20目筛，得到兰屿樫木叶粉末，取5kg加入80%乙醇溶液微波辐射条件下提取30min，过滤，提取2次，将提取液合并减压浓缩回收溶剂后加适量水制成悬浮液，过HP20大孔树脂吸附，先用少量10%乙醇洗脱至洗脱液不浑浊，弃去，再用65%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量3000的中空纤维素超滤膜系统超滤，进口压力控制O. 4MPa，常温过滤，加适量水透析，透过液再加入截留分子量500中空纤维素纳滤膜系统纳滤，浓缩液加适量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷层；(4)将二氯甲烷层加氧化铝拌样，装入氧化铝层析柱，85%乙醇洗脱，收集4倍柱体积量的洗脱液，减压回收乙醇至尽，放置过夜，将沉淀物滤出干燥得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷5. 0g，总皂苷含量为85%
权利要求
1.一种制备兰屿樫木总皂苷的方法，其特征在于包括以下步骤(1)取兰屿樫木叶50°C左右烘干粉碎，得到原料粉末，然后微波辐射条件下用有机溶剂提取；(2)对提取液减压浓缩回收溶剂后加水成悬浮液，加入大孔树脂吸附，先用水或10-20%的乙醇溶液洗去杂质，再用55-70%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；(3)洗脱液加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，浓缩液加适量二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷层；(4)将二氯甲烷层加氧化铝拌样，装入氧化铝层析柱，70-95%乙醇洗脱，收集3-8倍柱体积量的洗脱液，减压回收乙醇至尽，放置过夜，将沉淀物滤出干燥得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷。
2.如权利要求I所述的一种制备兰屿樫木总皂苷的方法，其特征在于步骤(I)中所述有机溶剂为乙醇、甲醇或丙酮溶液。
3.如权利要求I所述的一种制备兰屿樫木总皂苷的方法，其特征在于步骤(2)中所述大孔吸附树脂选自AB-8、D4020、D101、D103、HP20中的一种。
4.如权利要求I所述的一种制备兰屿樫木总皂苷的方法，其特征在于步骤(3)中所述的超滤膜可选管式或中空有机膜，截留分子量为3000-10000 ;所述的纳滤膜可选管式或中空有机膜，截留分子量不大于500。
全文摘要
本发明公开了一种制备兰屿樫木总皂苷的方法，该制备方法包括以下步骤首先对兰屿樫木叶预处理，然后微波辐射条件下有机溶剂提取，对提取液减压浓缩、柱层析分离纯化得到白色粉末，即是兰屿樫木总皂苷。本发明的优点是简便易行，收率高，同时实施本发明可开发兰屿樫木的利用价值。
文档编号A61K36/58GK102626442SQ20121012086
公开日2012年8月8日 申请日期2012年4月24日 优先权日2012年4月24日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司