专利名称：九节茶提取物在降低流感病毒易感性上的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，是天然植物提取物及其应用领域，涉及九节茶提取物用于降低机体对流感病毒易感性的新用途。
背景技术：
流感是人类面临的主要公共健康问题之一，严重的威胁人类的健康。流感病毒能够通过空气传播，引起呼吸道感染、病毒性肺炎、支气管炎等并发症，甚至导致死亡。其实，人们面对流感病毒的来袭时表现出很大的机体差异性，这是因为流感的发病机制受到流感病毒和宿主两个因素的影响。因此，寻找改善和降低机体对流感病毒易感性的药物在防治病毒感染方面具有重要的临床意义。 人们知道，随着现代生活方式的转变，人们面临着越来越多的环境变化压力，来自工作和生活所引起的身心疲劳，使得亚健康状态人群逐年增加。至今为止的研究证明，身心疲劳不仅影响到机体的神经-内分泌系统的正常生理功能，也能够诱发机体免疫力低下，引起对流感病毒的易感性，结果会导致对病毒的感染率与死亡率的增加。九节茶为金粟兰科草珊瑚(Sarcandra glabra (Thunb. ) Nakai)植物的地上部分，具有清热凉血，驱风通络的功效。中国药品部颁标准中药成方制剂第九册中收载的由九节茶单味药材的水提物制备而成的纯中药制剂-清热消炎宁胶囊，临床上用于流行性感冒，咽喉炎，肺炎，细菌性痢疾，急性胃肠炎，阑尾炎，烧伤，疮疡脓肿，蜂窝组织炎等疾病的治疗，已上市多年，疗效确切。近年来的一些实验结果确认，九节茶提取物具抗应激和免疫调节等功能，显示有较好的开发应用价值。但至今为止对九节茶提取物在降低机体对流感病毒易感性研究尚未见到任何报道，同时对九节茶提取物在预防、减轻和治疗对流感病毒易感性及并发症等应用方面也没有知识产权上的有效的保护。本发明旨在提供一种以九节茶提取物为原料，以医药品及组成物为使用范围的预防、减轻和治疗对流感病毒易感性及并发症等应用方面的活性物质。确切说，本发明是通过九节茶提取物能够显著改善拘束负荷诱发的小鼠对病毒易感性及相关炎症等药效指标中得以确认的。本发明目的是提供一种以九节茶提取物为原料，通过改善机体状态、降低对病毒的易感性，用于预防、减轻和治疗流感病毒感染及并发症等相关临床症状的药品、及其组成物。
发明内容
本发明的目的旨在提供以九节茶提物为原料用于制备降低机体对流感病毒易感性的药物及组成物。本发明所使用的九节茶提取物为金粟兰科草珊瑚植物的地上生长部分，经水提乙醇沉淀后得到的沉淀物，再通过干燥后获取的活性提取物。经分析证明，该100克提取物中含有鞣质8 20克，异嗪皮啶0. 02 0. I克。本发明通过动物体内实验证明九节茶提取物具有显著降低机体对流感病毒易感性的作用。该作用是通过对拘束负荷小鼠感染甲型HlNl流感病毒FMl株的实验模型中得以确认的。我们在评价九节茶提取物在动物对流感病毒易感性的影响时发现，九节茶提取物能够改善病毒感染应激小鼠的健康状态，和提高肺组织中的SP-A、SP-D及IFITM 3 mRNA水平，并且能够下调ICAM-I mRNA水平，有助于机体有效的清除流感病毒和促进健康恢复。此外，我们在九节茶提取物对流感继发性肺炎的作用效果中发现，该提取物能明显的改善流感病毒引起的肺炎症状和炎症细胞浸润，血清中的NO水平也得到一定的控制，并通过抑制NF- K B向细胞核内聚集，显著抑制了肺组织中的iNOs、IL-I ^和TNF- a mRNA水平，有效的缓解肺炎症状，降低了流感病毒感染的应激小鼠发病率和死亡率。基于上述结果，确认了本发明所述的九节茶提取物的新用途。
图I是九节茶提取物对病毒感染的应激负荷小鼠肺组织病理学的影响(Bar = 0. Imm)图2是九节茶提取物对病毒感染的应激负荷小鼠肺组织中核内NF-k B P65蛋白水平的影响
实施例一.九节茶提取物的制备方法取干燥的九节茶药材10kg，整理后加水煎煮2次，每次加10倍量水煎煮2小时，煎液过滤,合并2次滤液，将滤液浓缩成浸膏，搅拌下加乙醇，静置，离心得上清液，再加乙醇，静置后得到的沉淀物经真空干燥，真空干燥后获得的九节茶提取物用于本研究。鉴于九节茶提取物是以药品或药品组成物作为最终产品开发，故从安全性角度考虑提取溶剂尽量选择食用水、乙醇或者含水乙醇为宜。本发明对醇沉静置时间没有特定限制，提取方法可以采用加热提取、超声提取、微波提取等多种，也可多种方法结合起来应用。提取时间从30分钟到24小时范围都可以。实施例二 九节茶提取物对病毒感染的应激负荷小鼠发病率和死亡率的影响实验动物采用雄性，体重13-16g的SPE级4周龄昆明小鼠(KM mice)，购自广东省医学实验动物中心，许可证号SCXK (粤)2008-0002。小鼠饲料购自广东省医学实验动物中心。实验动物在清洁级层流架中饲养，环境温度空调控制为23±2°C，相对湿度为75±10%，照明时间12h/d(7:00-19:00)。实验动物随机分为正常组、病毒组、模型组(拘束+病毒)、阳性药物组(拘束+病毒+利巴韦林，50mg/kg/day)、九节茶提取物低剂量组(拘束+病毒+九节茶提取物，250mg/kg/day)，九节茶提取物高剂量组(拘束+病毒+九节茶提取物，500mg/kg/day),每组9 11只。各实验组于拘束前I天开始给药，连续给药10天。除正常对照组及病毒组外，其余各组均在给药的第2天将小鼠置于通风良好的50mL尖底聚丙烯塑料离心管中拘束18h(15:00-9:00)。小鼠拘束负荷后恢复3天，在乙醚轻度麻醉下，以2XLD5Q的HlNl FMl流感病毒液滴鼻感染，30 ii L/只，同时空白对照组小鼠滴鼻同量的生理盐水。从感染病毒当天开始连续观察21天，并记录小鼠体重，死亡数目以及死亡时间。实验数据以Mean土 S.E. M表示，应用SPSS 19. 0软件进行数据处理，生存率采用SurvivalAnalysis程序中Kaplan-Meier方法进行统计学分析,其他数据均采用ANOVA检验进行统计学分析，P < 0. 05有统计学意义。结果如表一，表二所示，拘束负荷之后感染小鼠的发病率可达到100%，而不经拘束的小鼠发病率为80%。此外，实验结果证明拘束负荷小鼠的发病时间明显提前，死亡率显著增加。而连续灌胃给予九节茶提取物10天，小鼠健康状态得到明显的改善,发病率和死亡率均有所降低。
表一九节茶提取物对病毒感染小鼠发病率的影响
权利要求
1.九节茶提取物用于制备预防、减轻或治疗机体对流感病毒易感性的药用用途。
2.九节茶提取物用于制备预防、减轻或治疗机体因流感病毒易感性所继发的肺炎等呼吸系统炎症过程，及肺功能障碍等疾病的药用用途。
3.九节茶提取物用于制备预防、减轻或治疗机体因流感病毒易感性所引起的诸多临床症状的药用用途。
4.根据权利要求1、2或3所述的用途，其特征在于所述的九节茶提取物为原料可用于预防和改善因机体对流感病毒易感性起因的各种其他临床症状的医药品及其组成物。
5.根据权利要求1、2或3所述的用途，其特征在于所述的九节茶提取物为采用金粟兰科草珊瑚(Sarcandra glabra(Thunb. )Nakai)的地上部分为原料,经水提乙醇沉淀法得到的沉淀物，干燥后的活性提取物，其中100克活性提取物中含有鞣质8 20克，含有异嗪皮啶 0. 02-0. I 克。
6.九节茶提取物的制备也应包括原料直接粉碎化、或采用热水、加压热处理、高温饱和水蒸汽处理、酶处理、或水与低级醇类、极性溶剂的一种或二种以上的任意混合溶剂进行提取小分子化合物或大分子沉淀物质。
7.根据权利要求1、2或3所述的用途，其特征在于所述的九节茶提取物的使用量0.01%至100%重量比范围。
全文摘要
九节茶提取物的新用途，属于医药领域。本发明提供一种药材九节茶经水提乙醇沉淀及干燥后的活性提取物。该100克提取物中含有鞣质5～20克，含有异嗪皮啶0.02～0.1克。本发明是基于九节茶提取物降低甲型H1N1流感病毒FM1株感染拘束应激负荷小鼠的发病率和死亡率，以及该提取物能够显著地降低流感病毒负荷小鼠肺组织病毒量和炎症因子作用的实验结果中得以确认和证明的。本发明用于制备降低机体对流感病毒易感性的应用、缓解因机体易感病毒继发的肺炎等呼吸系统炎症过程，及肺功能障碍等的临床症状。具体为该提取物能够有效地预防、减轻或治疗流感病毒易感机体出现的病毒感染引起的诸多临床症状。
文档编号A61P11/00GK102793731SQ20121023402
公开日2012年11月28日 申请日期2012年7月6日 优先权日2012年7月6日
发明者何蓉蓉, 曹会娟, 李怡芳, 栗原博, 严志标, 彭红英, 陆颂规, 江涛, 陈雪华 申请人:广州白云山敬修堂药业股份有限公司