弹性纤维形成促进剂的制作方法

专利名称：弹性纤维形成促进剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及将作为多糖类的岩藻依聚糖(fucoidan)作为有效成分的弹性纤维形成促进剂。更详细而言，本发明涉及将低分子岩藻依聚糖作为有效成分的弹性纤维形成促进剂。
背景技术：
岩藻依聚糖为硫酸多糖的一种，大多包含在来自藻类、棘皮动物的粘质物中。其主要含有由a 1-2、a 1-4键将数十至数十万个L-岩藻糖(6_脱氧半乳糖)连接而成的化合物，平均分子量约为20万左右。已知岩藻依聚糖的结构由于作为来源的藻类或其生育环境等不同而具有多样性， 其分为含有葡糖醛酸的U-岩藻依聚糖、仅由硫酸化岩藻糖形成的F-岩藻依聚糖和含有半乳糖的G-岩藻依聚糖等。另一方面，已报告了将岩藻依聚糖水解而使其低分子化的方法。例如，对岩藻依聚糖进行酸水解的方法(专利文献I);在不从外部添加酸的情况下，对岩藻依聚糖进行水解，得到低聚糖的方法(专利文献2);以及用酶对岩藻依聚糖进行水解的方法(专利文献3)
坐寸o另外，对于岩藻依聚糖的生理作用，除了抗炎作用、血液凝固作用、防止胆固醇沉积的作用、抗肿瘤作用、抗癌作用等以外，还已知其针对过敏在生理学、生化学上的作用(专利文献4)等。专利文献I :日本特开平7-215990号公报专利文献2 日本特开2002-226496号公报专利文献3 日本特开2000-236889号公报专利文献4 :日本特开平11-21247号公报

发明内容
本发明发现了目前尚未知的低分子岩藻依聚糖的新的生理活性，其目的在于提供适合的用途。本发明人为了解决上述课题进行了深入的研究，结果发现低分子岩藻依聚糖具有弹性纤维形成促进能力，从而完成了本发明。对于上述弹性纤维形成促进剂而言，上述低分子岩藻依聚糖的重均分子量可为700 30000。上述低分子岩藻依聚糖的重均分子量更优选为约1000以上、进一步优选为约1500以上。重均分子量优选为约30000以下、更优选为约20000以下、进一步优选为约15000以下。没有特别的限定，可以为1800 12000的范围。上述低分子岩藻依聚糖优选为来自选自属于褐壳藻目(Ralfsiales)、网地藻目(Dictyotales)、索藻目(Chordariales)、萱藻目(Scytosiphonales)、马鞭藻目(Cutleriales)、毛头藻目(Sporochnales)、酸藻目(Desmarestiales)、海带目(Laminariales)、铁打菜目(Ishigeales)、墨角藻目(Fucales)、水云目(Ectocarpales)、网管藻目(Dictyosiphonales)、管皮藻目(Syringodermatales)、黑顶藻目(Sphacelariales)、线翼藻目(Tilopteridales)、Ascoseirales 目、墨角藻目(Fucales)、和Durvilaeales目的褐藻类中的至少I种褐藻类。本发明还涉及含有上述任一种弹性纤维形成促进剂的弹性纤维形成促进用组合物。上述弹性纤维形成促进用组合物相对于总量可含有低分子岩藻依聚糖0. 000001 99重量％。低分子岩藻依聚糖的含量更优选为0. 00001 30重量％、进一步优选为0. 0001 10重量％、特别优选为0. 001 5重量％。上述弹性纤维形成促进用组合物可以为化妆品。
上述弹性纤维形成促进用组合物可以为食品。本发明另外还涉及重均分子量为700 30000的低分子岩藻依聚糖在制造弹性纤维形成促进剂中的应用。本发明另外还涉及重均分子量为700 30000的低分子岩藻依聚糖在弹性纤维形成促进剂中的使用方法。上述低分子岩藻依聚糖可为来自选自属于褐壳藻目(Ralfsiales)、网地藻目(Dictyotales)、索藻目(Chordariales)、萱藻目(Scytosiphonales)、马鞭藻目(Cutleriales)、毛头藻目(Sporochnales)、酸藻目(Desmarestiales)、海带目(Laminariales)、铁打菜目(Ishigeales)、墨角藻目(Fucales)、水云目(Ectocarpales)、网管藻目(Dictyosiphonales)、管皮藻目(Syringodermatales)、黑顶藻目(Sphacelariales)、线翼藻目(Tilopteridales)、Ascoseirales 目、墨角藻目(Fucales)、和Durvilaeales目的褐藻类中的至少一种褐藻类。根据本发明，可提供以低分子岩藻依聚糖作为有效成分的弹性纤维形成促进剂。进而，可提供含有这样的弹性纤维形成促进剂的弹性纤维形成用组合物，其可提供化妆品或食品。


图I是在利用培养细胞进行的体外评价中，通过荧光发色显示的未添加岩藻依聚糖(对照照片上)、添加了低分子岩藻依聚糖(照片中)和添加了高分子岩藻依聚糖(照片下)的情况下的弹性纤维形成的照片。图2是将图I的照片中的各个样品的荧光量数值化而成的曲线图。
具体实施例方式皮肤、血管、肺等特定的脏器、韧带等的弹力提高或维持不仅通过细胞、还通过包括细胞外基质在内的组织结构来确保。细胞相对于伸缩等对外部强度的耐受性较弱，因此在细胞周围形成细胞外基质，从而确保了组织的形状。作为细胞外基质，有胶原蛋白纤维、粘多糖(透明质酸、角质素硫酸、硫酸乙酰肝素、软骨素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素等)、弹性纤维(弹性纤维)等。虽然胶原蛋白纤维、粘多糖相对于外部强度无法伸缩，但是弹性纤维具有即使拉伸也能够复原的特性、即弹性，在需要伸缩功能的动脉、肺、皮肤的组织中弹性纤维是重要的因子。可认为弹性纤维是弹性蛋白在微纤维这样的纤维的周围进行沉积 交联而形成的。弹性纤维的代谢回转非常慢，因此，产生因年龄的增加等导致弹性纤维劣化、断裂的结果，或者由于从炎症细胞分泌的蛋白酶等外在的要因而导致的弹性纤维劣化、断裂的结果，皮肤的松弛，动脉硬化，肺非正常增大而导致的肺气肿等。在动脉中，弹性纤维占大动脉的质量的一半左右，吸收脉压(收缩期压-扩张期压)。若弹性纤维的功能降低，则动脉变成硬的血管，脉压上升。脉压的上升会使心脏病的预后恶化。期待弹性纤维能够再生的状态或疾病有肺气肿、血管损伤、皮肤松弛症、创伤、弹性纤维劣化(例如由年龄增加或紫外线引起的劣化、皮肤的松弛)、皮肤粗糙、动脉硬化、大 动脉瘤、加龄黄斑变性症、会阴疝气、肛门疝气、脑底动脉瘤、消化管运动障碍、褥疮等，利用本发明的弹性纤维形成促进剂，能够改善、预防需要弹性纤维的伸缩功能的疾病或状态。本发明所述的弹性纤维形成促进能力是指在微纤维的周围促进弹性蛋白进行沉积、交联的能力，不管其促进的程度如何，只要与不实施这种处置的情况相比，呈弹性蛋白的沉积在某种程度上得到促进的状态即可。本发明中，发现了低分子岩藻依聚糖具有促进这样的弹性纤维形成的作用，从而提供以低分子岩藻依聚糖作为有效成分的弹性纤维形成促进剂。本发明所述的岩藻依聚糖是从褐藻类、棘皮动物(日文有棘動物)中提取的粘着物中包含的硫酸多糖的一种，基本上以L-岩藻糖-4-硫酸的1，2_结合为主。也存在L-岩藻糖-4-硫酸的1，3-结合、1，4_结合等，除此以外，作为糖构成成分，多数情况包括葡糖醛酸等糖醛酸、半乳糖、木糖、鼠李糖、甘露糖等中性糖，其组成因海藻种类不同而具有多样性。在发明中，“低分子岩藻依聚糖”或“岩藻依聚糖的低分子量部分”这样的用语以相同的意思加以使用。而且，这些用语在含有硫酸化岩藻糖作为构成成分的含硫酸化岩藻糖的多糖中典型地指重均分子量为700 30000的岩藻依聚糖。优选排除10万以上的分子量的部分的岩藻依聚糖，没有特别限定。这样的重均分子量为700 30000的范围内的岩藻依聚糖具有优异的弹性纤维形成促进能力。作为低分子岩藻依聚糖，还可以直接用于医药品、非药品、化妆品、食品、其他常用于市售的物品中。本发明所述的分子量、平均分子量是重均分子量，是指利用GPC(凝胶渗透色谱法)测定，通过聚苯乙烯换算所算出的值。即，将试样溶解在25mM Tris-HCl缓冲液(含150mM的NaCl、pH7.5)中，制备lmg/mL的被测溶液，将其静置一晚后，用0. 45 y m的薄膜过滤器进行过滤，将得到的滤液用柱子进行溶出。柱子利用Superdex peptide10/300GL(10mmI. D. X30cm，流量:0. 4ml/min、柱温 40°C、注入量 100 y 1、GE HEALTHCARE 公司制)和 Superdex 200 10/300GL(10mm I. D. X 30cm,流速0. 4ml/min 柱温 40°C、注入量100 yl、GEHEALTHCARE公司制)，利用上述缓冲液进行平衡，达到平衡后，注入被测溶液，将试样溶出，由溶出时间确定重均分子量，制备发挥本发明的效果的弹性纤维形成促进剂。检测利用差示折射计(RI)进行。对于本发明的低分子岩藻依聚糖，更详细而言，岩藻依聚糖的峰位重均分子量优选为约700以上、更优选为约1000以上、进一步优选为约1500以上。另外，重均分子量优选为约30000以下，更优选为约20000以下、进一步优选为约15000以下。只要在上述范围内，就能够得到本发明的充分的效果。没有特别的限定，可以在1800 12000的范围。
这样的低分子岩藻依聚糖可以从选自动物、植物、真菌、单细胞生物、原生生物和原核生物中的一种或二种以上中提取，也可以通过合成制得。典型而言，可从海藻类或棘皮动物类中获得，但没有限定。低分子岩藻依聚糖例如可通过从以分子量区分的从天然海藻类等中提取的岩藻依聚糖成分中仅选择低分子岩藻依聚糖的方法而获得。或者，针对从天然材料中进行提取的方法进行探讨，在能够将所提取的岩藻依聚糖成分低分子量化的情况下，可直接使用这样的成分。以下，对本发明的内容详细地进行说明。作为用于本发明的、提取低分子岩藻依聚糖的原料的来源，例如可举出海藻类或棘皮动物类，但是其中，特别优选使用褐藻类。在此，褐藻类是指属于褐藻纲的海藻，优选为来自选自属于褐壳藻目(Ralfsiales)(其中的 Heterochordaria abietina、Endoplura aurea)、网地藻目(Dictyotales)(其中的 Dictyopteris divaricata、D ictyopteris latiuscula、Dictyopteris prolifera、Dictyopteris undulate、Dictyota dichotoma、DictyotaIinearis^Dilophus okamurai、Chlanidophora repens、Pachydictyon coriaceum、Padinaarborescens、Padina crassa、Spatoglossum crassum、Spatoglossum pacificum、Zonariadiesingiana)、索藻目(Chordariales)(其中的 Papenfussiella kuromo、Tinocladiacrassa、Leathesia difformis、Petrospongium rugosum、Chordaria flagelliformis、Nemacystus decipiens)、萱藻目(Scytosiphonales)(其中的 Colpomenia bullosa、Colpomenia phaeodactyla、 Colpomenia sinuosa、 Hydroclathrus clathratus、MyelopHycus caespitosus、Endarachne binghamiae、Petalonia fascia、Scytosiphoncanaliculatus、Scytosiphon lomentaria)、马鞭藻目(Cutleriales)(其中的 Culeriacylindrica)、毛头藻目(Sporochnales)(其中的 Carpomiltra cabrerae)、酸藻目(Desmarestiales)(其中的 Desmarestia ligulata、Desmarestia tabacoides)、海带目(Laminariales)(其中的 Undaria pinnatifida、Chorda filum、Costaria costata、Ecklonia cava、Ecklonia kurome、Eisenia bicyclis、Laminaria Japonica、Laminariareligiosa、Alaria crassifolia)、铁打菜目(Ishigeales)(其中的 Ishige okamuraiYendo、Ishige foliacea)、墨角藻目(Fucales)(其中的 Cystophyllum hakodatensis、Cystoseira prolifera^CystophylIum sisymbrioides、Sargassum ammophilum、Sargassumconfusum、Sargassum fulvellum、Cystophyllum fusiforme、Sargassum giganteifoium、Sargassum hemiphyllum、 Sargassum horneri、 Sargassum serratifolium、 Sargassummuticum、 Sargassum nigrifolium、 Sargassum okamurae、 Sargassum patens、 Sargassumpiluliferum、 Sargassum ringgoldianum、 Sargassum thunbergii、 Sargassum yamadae、Sargassum yamamotoi、Sargassum yendoi、Turbinaria ornata)、水云目(Ectocarpales)(特别是属于Ectocarpaceae科的褐藻)、网管藻目(Dictyosiphonales)、管皮藻目(Syringodermatales)、黑丁页藻目(Sphacelariales)、线翼藻目(Tilopteridales)、Ascoseirales目、墨角藻目(Fucales)JfIDurvilaeales目的褐藻类中的至少I种褐藻类或者2种以上的组合，以上括号中表示学名，以下同。更具体而言，作为用于得到低分子岩藻依聚糖的褐藻类，例如可例示选自属于海带目的学名为 Saccharina sculpera(日文方 2 > )、Laminaria Japonica、Laminaria religiosa、Laminaria angustata、Laminaria cichorioides、Laminariaongipes、Saccharina gyrata、Fucus vesiculosus、Nemacystus decipiens、Cladosiphonokamuranus、Undaria pinnatifida、Ecklonia kurome、Eisenia bicyclis、Eckloniacava、Lessonia nigrescens、Ascophyllum nodosum、Giant kelp 等，属于索藻目的学名为 dosiphon okamuranus、Chordaria flagelliformis、Papenfussiella kuromo、Sphaerotrichia divaricata、Tinocladia crassa 等，属于墨角藻目的学名为 Fucusvesiculosus>Pelvetia wrightii Yendo、Sargassum ringgoldianum、Sargassum horneri、Cystophyllum hakodatensis、Sargassum confusum、Sargassum thunbergii 等，属于网地藻目的学名为Dictyota dichotoma、Dictyopteris divaricata等褐藻类中的至少I种或者2种以上的组合。优选使用Saccharina sculpera、Laminaria Japonica、Laminaria religiosa、Laminaria angustata、Laminaria cichorioides、Laminariaongipes、Saccharina gyrata、Fucus vesiculosus、Nemacystus decipiens、Cladosiphonokamuranus>Undaria pinnatifida>Ecklonia kurome、Eisenia bicyclis、Ecklonia cava、Lessonia nigrescens>AscophyIIum nodosum、Giant kelp 等属于海带目的褐藻类，特别优选使用 Saccharina sculpera。上述低分子岩藻依聚糖可以以从天然物中提取的提取液的形式直接使用粗产物，·还可以使用从粗产物中仅对低分子岩藻依聚糖进行分离精制而得的产物。作为得到低分子岩藻依聚糖的方法，没有特别限定，可采用通常的提取法。例如只要为海藻类，就没有限定，典型而言，可通过用粉碎机等将Saccharinasculpera(学名)细切，并将由此而得的粉碎物利用将水或有机溶剂单独或组合而得的溶剂进行提取、溶解或悬浊而制得。作为有机溶剂，可举出甲醇、乙醇、I-丙醇、2-丙醇、I- 丁醇、2-丁醇等醇类，醋酸甲酯、醋酸乙酯等酯类，丙酮等酮类，甲醛、二甲基亚砜等。进而，在酸、碱的条件下进行提取。作为酸，可举出盐酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，或者醋酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸、蚁酸、丙酸等有机酸。作为碱，优选使用碱性无机盐，可例示出氢氧化钾、氢氧化钠等。另外，在粉碎后，为了清洗、脱脂和/或脱色，可以使用单独或组合有机溶剂和/或水而得的溶剂进行处理。作为低分子岩藻依聚糖的提取物的提取条件，还可使用室温或常温的溶剂，还可使用“已加热的溶剂”、“已加温的溶剂”。具体而言，在提取溶剂为水的情况下，提取时的温度只要为溶剂的沸点以下即可，没有特别限定，由于还存在基于加压热水进行提取的方法的情况，因此，优选为约0 200°C、更优选为约20 130°C。另外，反应时间也没有特别限定，但优选设定为数秒 数天即可，更优选设定为30分钟 6小时即可。溶剂的种类和浓度、反应温度以及反应时间根据本发明的分解物的生成量、分解物的聚合度适当地进行选择即可。如果在上述范围，则能够充分地提取具有弹性纤维形成能力的成分。没有特别的限定，若举出详细的一例，则例如在制造低分子岩藻依聚糖的分解物时，用切割机将Saccharina sculpera (学名)粉碎后,为了进行脱色和/或脱脂,而使其在75%乙醇中悬浊，搅拌3小时后，用滤纸过滤，得到残渣。在残渣中加入水，在95°C以上的条件下处理10小时后，将处理液冷却至室温，添加乙醇以使最终浓度达到30%。将该处理液在室温下静置约24小时，通过离心分离进行固液分离。在得到的上清液中添加0. 5N盐酸，在低温下静置24小时，将所生成的沉淀利用离心分离除去，在所得到的上清中加入0. 5N氢氧化钠，调整至PH7后，将离心分离而得的上清液冷冻干燥，得到低分子岩藻依聚糖。进而,举出另外的制备例将Saccharina sculpera (学名)500g进行细切,用10升的80%乙醇清洗后，利用内径40cm的容器，在50升的含有ImM氯化钾的10%乙醇中，在25°C下以每I分钟120次旋转的速度搅拌2天，提取岩藻依聚糖，将提取物利用网眼32 μ m的不锈钢金属网过滤，制备低分子岩藻依聚糖溶液。将制得的低分子岩藻依聚糖溶液冷冻干燥，得到低分子岩藻依聚糖粉末。在本发明中，还可以直接将如上所述提取的提取液用作低分子岩藻依聚糖，但是在含有有机溶剂的情况下，优选通过减压蒸馏等将有机溶剂除去。另外，在本发明中，含有低分子岩藻依聚糖的提取液可以使用液状的提取物，但是根据需要，也可以通过进行减压干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等干燥处理而使液体成分减少或除去，从而使用成为浓缩液状、半固体形状、固体形状或粉末状的提取物。或者，在本发明中，还可对提取液所含的岩藻依聚糖或低分子岩藻依聚糖进行精制。在对岩藻依聚糖进行精制的情况下，在精制后还可通过对含有高分子量部分的岩藻依 聚糖进行酸处理、或酶处理，而使含有高分子量部分的岩藻依聚糖低分子化。还可通过从精制后的F-、U-或G-岩藻依聚糖中分出低分子量部分而得到。例如,可利用Saccharina sculpera(学名)制备岩藻依聚糖,从该岩藻依聚糖中分离含葡糖醛酸的岩藻依聚糖与不含葡糖醛酸的岩藻依聚糖。另外，可制备硫酸化岩藻半乳聚糖(Sulfated fucogalactan ;硫酸化7 3力' 9々夕 > )。可从这些精制后的岩藻依聚糖中分离低分子量部分而用于本发明。作为从粗产物对岩藻依聚糖或低分子岩藻依聚糖进行分离精制的方法，没有特别限定，例如有如下方法添加西吡氯铵等季铵盐，使岩藻依聚糖或低分子岩藻依聚糖沉淀，利用醇溶液进行清洗的方法；利用使用DEAE纤维素等阴离子交换树脂等的色谱法的方法。在利用阴离子交换色谱法的方法中，还优选通过过滤等对得到的提取液进行处理，然后用于阴离子交换色谱法。所使用的阴离子交换树脂没有特别限定。作为阴离子交换树脂的活性基，例如优选为DEAE(二乙基氨基乙基)、QAE〔二乙基(2-羟基丙基)氨基乙基〕、Q(或TEAE)(三乙基氨基乙基)、二甲基(2-羟基乙基)氨基甲基、PAB对氨基苄基)、AE(氨基乙基)、GE(胍基乙基)等，可使用具有上述活性基的阴离子交换树脂。作为阴离子交换树脂的载体，例如可使用纤维素系物质、右旋糖酐系物质、Sepharose系物质、苯乙烯二乙烯苯聚合物、亲水性乙烯基聚合物等合成聚合物系物质等，还可使用带任何载体的阴离子交换树脂。作为组合上述活性基与载体而得的市售的阴离子交换树脂，例如有DEAE-SEPHAROSE 系、DEAE-SEPHACEL 系、DEAE-SEPHADEX 系、QAE-SEPHADEX、Q-SEPHAR0SEFAST FLOW系(以上由PHARMACIA公司制)、DEAE-BI0GEL系、AG系(以上由BIO-RAD公司制)、DEAE_T0Y0PEARL 系、TSK GEL T0Y0PEARL 系(以上由东曹公司制)、DEAE_CELLULOFINE系(生化学工业公司制)、DOffEX系(DOW CHEMICAL公司制)、TEAE-CELLULOSE (SELVA公司制)、AMBERLI TE 系(由 Rohm and Haas 公司制)等。作为得到低分子岩藻依聚糖的方法，还可进一步例示出将以提取物形式得到的岩藻依聚糖、精制岩藻依聚糖用于尺寸排除色谱法等。没有特别限定，在本发明中，还优选制备将分子量10万以上的部分排除的低分子岩藻依聚糖。在这种情况下，例如可通过利用安装有排除分子量10万的H0L0FIBER的超速过滤机进行分子量分级而进行排除。另外，在本发明中，在岩藻依聚糖中还可含有岩藻依聚糖的盐。作为岩藻依聚糖的盐，例如可例示出碱金属盐、碱土类金属盐、有机碱等的盐，可举出钠、钾、钙、镁、氨，或者二乙醇胺、乙二胺等的盐。上述盐例如可通过公知的方法将存在于岩藻依聚糖等的硫酸基、羧基变换成盐而得到。进而，可举出氨、甲胺、二甲胺、三甲胺、二环己胺、三(羟甲基)氨基甲烷、N，N-双(羟乙基)哌嗪、2-氨基-2-甲基-I-丙醇、乙醇胺、N-甲基葡糖胺、L-葡糖胺等胺的盐；或者赖氨酸、S-羟基赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的盐等。另外，例如还可举出盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等矿酸的盐；甲烷磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、醋酸、丙酸、酒石酸、富马酸、马来酸、苹果酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、桂皮酸、乳酸、乙醇酸、葡糖醛酸、抗坏血酸、烟酸、水杨酸等有机酸的盐；或者天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸的盐等。根据使用的目的，优选为在药理学上被许可的盐，但是在用于弹性纤维形成的体 外的实验的情况下并不限于此。或者，本发明的低分子岩藻依聚糖可以含有盐的溶剂合物或水合物。将本发明的低分子岩藻依聚糖作为有效成分的弹性纤维形成促进剂可用于预防、治疗或改善期待弹性纤维再生的状态或疾病，例如肺气肿、肺纤维症、血管损伤、皮肤松弛症、创伤、弹性纤维劣化(例如因年龄增加或紫外线而引起)、皮肤固化症、皮肤粗糙、动脉硬化、大动脉瘤、加龄黄斑变性症、会阴疝气、肛门疝气、脑底动脉瘤、消化管运动障碍、褥疮等，除此以外，还可用于预防、改善皮肤的松弛、褶皱这样的美容目的。另外，本发明的弹性纤维形成促进剂还可用作具有弹性纤维的再生能力的细胞的培养用试药等。进而，在人工皮肤、皮肤模型、人工血管等人工组织的制作中发挥作用。进而，还可考虑针对尚未充分弄清楚的弹性纤维本身的研究中的应用，在非常广泛的范围中有用。本发明的弹性纤维形成剂可以医药品、非药品、食品、化妆品等可广泛地利用的任意制剂或组合物的形态供于使用，优选为可作为功能性食品或化妆品加以利用的制剂或组合物。含本发明的弹性纤维活性促进剂的组合物在采用医药品、非药品、食品、化妆品中的任一种形态的情况下，低分子岩藻依聚糖的含量优选为O. 000001 99重量％、更优选为O. 00001 30重量％、进一步优选为O. 0001 10重量％、特别优选为O. 001 5重量％。将本发明用于医药品或健康食品等食品的用途时的低分子岩藻依聚糖的给药量相对于干燥重量，优选对于成人I天而言设为O. 0001 10g/kg左右、更优选对于成人I天而言设为O. 0001 2000mg/kg。如果在上述范围，则能够改善、预防需要弹性纤维的伸缩的功能的疾病或状态。内服用方式作为本发明的有效成分的低分子岩藻依聚糖还可与在药学上被许可的载体配合，制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂等固体制剂，或者糖浆剂、注射剂等液状制剂，从而经口或非经口地给药。进而，可举出坐剂、贴剂、吸入剂、点滴剂、经皮吸收剂、经黏膜吸收剂。上述制剂可以含有常规方法的添加剂。作为在药学上被许可的载体，可使用惯用的各种有机或无机载体物质作为制剂原料，可配合固体制剂中的赋形剂、润滑剂、结合剂、崩解剂；液体制剂中的溶剂、溶解助剂、悬浊剂、等张剂、缓冲剂、无痛化剂等。另外，根据需要还可使用防腐剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂等制剂添加物。作为赋形剂的优选的例子，例如可举出D-山梨醇、甘露醇、木糖醇等糖醇，葡萄糖、白糖、乳糖、果糖等糖类，结晶纤维素、羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素钠、磷酸氢钙、小麦淀粉、水稻淀粉、玉米淀粉、马铃薯淀粉、糊精、β -环糊精、轻质硅酸酐、氧化钛、硅酸铝酸镁、滑石、高岭土等。作为结合剂的优选例，例如可举出甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素等纤维素衍生物，聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、丙烯酸系高分子、明胶、阿拉伯胶、支链淀粉、α化淀粉、琼脂、胺黄树胶、海藻类酸钠、海藻类酸丙二醇酯等。作为崩解剂的优选例，例如可举出淀粉、低取代度羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、羟丙基淀粉、部分α化淀粉等。作为溶剂的优选例，例如可举出注射用水、醇、丙二醇、聚乙二醇、芝麻油、玉米油等。 作为润滑剂的优选例，可举出硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸聚烃氧基酯、棕榈醇、滑石、固化油、蔗糖脂肪酸酯、二甲基聚硅氧烷、蜜蜡、白蜂蜡等。作为溶解助剂的优选例，例如可举出聚乙二醇、丙二醇、D-甘露醇、苯甲酸苄酯、乙醇、三氨基甲烷、胆固醇、三乙醇胺、碳酸钠、柠檬酸钠等。作为悬浊剂的优选例，例如可举出硬酯酰三乙醇胺、月桂基硫酸钠、月桂基氨基丙酸、卵磷脂、杀藻类铵、苄索氯铵、单硬脂酸甘油酯等表面活性剂；例如举出聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素等亲水性高分子等。作为等张剂的优选例，例如可举出氯化钠、甘油、D-甘露醇等。作为缓冲剂的优选例，例如可举出磷酸盐、醋酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐等缓冲液等。作为无痛化剂的优选例，例如可举出苄醇等。作为防腐剂的优选例，例如可举出对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苄醇、苯乙醇、脱氢乙酸、山梨酸等。作为抗氧化剂的优选例，例如可举出亚硫酸盐、抗坏血酸等。在将含有本发明的低分子岩藻依聚糖的弹性纤维形成促进剂制成固体制剂的情况下，作为制造这种制剂的方法，如果包括将低分子岩藻依聚糖与制剂原料混合而制造固体制剂的工序，则没有特别限定，可使用公知的方法。可例示出如下方法将含有低分子岩藻依聚糖和制剂原料的制剂组合物进行混炼，使其通过网筛，从而将成型的挤出造粒物粉碎、整粒的方法；在上述制剂组合物中加入混炼水，利用立式造粒机进行成型，在搅拌造粒后，利用COMIL研磨机进行粉碎 过筛的方法，以及利用辊式加压机将上述制剂组合物压缩后，利用辊式造粒机进行粉碎过筛的方法；搅拌造粒后进行流动干燥的方法。另外，例如在通过直接打片进行制造的情况下，在将含有低分子岩藻依聚糖和制剂原料的制剂组合物混合后，直接投入到打片机中进行打片即可。皮肤外用剂方式将本发明的低分子岩藻依聚糖作为有效成分的弹性纤维形成促进剂可以以医药品、非药品的形态，以皮肤外用剂的形态、或者以化妆品的形态使用。在上述外用剂的形态中，除了添加低分子岩藻依聚糖外，在不损害本发明的效果的范围内，还可与能够在外皮用剂(化妆品、非药品、医药品)中添加的公知的基剂或载体一起混合而形成组合物。除此以外，在这样的外皮用剂中例如可配合表面活性剂、油分、醇类、保湿剂、增稠剂、防腐剂、抗氧化剂、螯合剂、PH调整剂、稳定剂、分散剂、香料、着色剂、色素、珍珠光泽赋予剂、血行促进成分、保湿成分、紫外线吸收成分、紫外线散射成分、清洗成分、抗菌成分、收敛成分、维生素类、氨基酸类、抗老化成分、抗炎症成分、美白成分、角质软化成分、细胞赋活成分、水等。添加剂可以单独使用I种，或者组合使用2种以上。对于将本发明的低分子岩藻依聚糖作为有效成分的弹性纤维形成促进剂，可采用医药品、化妆品或非药品的公知的形态，例如可举出液体剂、悬浊剂、乳剂、膏剂、软膏剂、凝胶剂、涂剂、洗剂、气雾剂、粉末剂、泥罨剂、使药液浸渗在无纺布等片材中的片材剂、唇棒这样的棒剂等。其中，优选以液体剂、悬浊剂、乳剂、膏剂、软膏剂、凝胶剂、洗剂、凝胶剂的形态使用。通过形成所述的形态，能够充分地发挥弹性纤维形成效果。另外，作为比化妆品组合物更详细且具体的形态，可举出化妆水、乳液、乳霜、美容·液、防晒用化妆品、面膜、护手霜、身体乳液、身体乳霜这样的基础化妆品；洗面奶、卸妆产品、身体香波、洗发香波、护发素这样的清洗用化妆品；粉底、隔离霜、唇霜、口红、腮红这样的化妆用化妆品；沐浴乳等。<基剂或载体>作为基剂或载体，可举出流动石蜡、角鲨烷、凝胶化烃(Plastibase等)、地蜡、α-烯烃低聚物、轻质流动石蜡这样的烃；甲基聚硅氧烷、交联型甲基聚硅氧烷、高聚合甲基聚硅氧烷、环状硅酮、烷基改性硅酮、交联型烷基改性硅酮、氨基改性硅酮、聚醚改性硅酮、聚甘油改性硅酮、交联型聚醚改性硅酮、交联型烷基聚醚改性硅酮、硅酮·烷基链共改性聚醚改性硅酮、硅酮·烷基链共改性聚甘油改性硅酮、聚醚改性支链硅酮、聚甘油改性支链硅酮、丙烯酸硅、苯基改性硅酮、硅酮树脂这样的硅酮油；乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素这样的纤维素衍生物；聚乙烯吡咯烷酮；角叉菜胶；聚乙烯丁酸酯；聚乙二醇；二噁烷；丁二醇己二酸聚酯；豆蘧酸异丙酯、辛基十二醇肉豆蘧酸酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸棕榈酯、异壬酸异壬酯、四2-乙基己酸季戊四醇酯这样的酯类；糊精、麦芽糖糊精这样的多糖类；乙醇、异丙醇这样的低级醇；乙二醇单甲醚、乙二醇单乙醚、乙二醇单丙醚、二乙二醇单甲醚、二乙二醇单乙醚、二乙二醇单丙醚、二乙二醇单丁醚、丙二醇单乙醚、丙二醇单丙醚、二甘醇单乙醚、二甘醇单丙醚这样的二醇醚；聚乙二醇、丙二醇、1，3_ 丁二醇、丙三醇、异丙二醇等多元醇；水等水系基剂等。基剂或载体可以单独使用I种或组合使用2种以上。作为抗氧化剂，可举出二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、山梨酸、亚硫酸钠、抗坏血酸、异抗坏血酸、L-半胱氨酸盐酸盐等。作为表面活性剂，例如可举出失水山梨糖醇单异硬脂酸酯、失水山梨糖醇单月桂酸酯、失水山梨糖醇单棕榈酸酯、失水山梨糖醇单硬脂酸酯、双甘油失水山梨糖醇五-(2-乙基己酸)酯、双甘油失水山梨糖醇四-(2-乙基己酸)酯这样的失水山梨糖醇脂肪酸酯类；单硬脂酸丙二醇酯这样的丙二醇脂肪酸酯类；聚氧乙烯固化蓖麻油40(HC0_40)、聚氧乙烯固化蓖麻油50(HC0-50)、聚氧乙烯固化蓖麻油60(HC0-60)、聚氧乙烯固化蓖麻油80等固化蓖麻油衍生物；聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇单月桂酸酯(Polysorbate20)、聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇单硬脂酸酯(Polysorbate60)、聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇单油酸酯(Polysorbate80)、聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇异硬脂酸酯这样的聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯类；聚氧乙烯单椰油脂肪酸甘油酯；甘油烷基醚；烷基葡糖苷；聚氧乙烯十六烷基醚这样的聚氧化烯烷基醚；硬脂酰胺、油胺这样的胺类；聚氧乙烯·甲基聚硅氧烷共聚物、月桂基PEG-9聚二甲基硅氧乙基二甲基硅氧烷、PEG-9聚二甲基硅氧乙基二甲基硅氧烷这样的硅酮系表面活性剂等。作为增稠剂，例如可举出瓜尔胶、刺槐豆胶、角叉菜胶、黄原胶、羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧基乙烯基聚合物、丙烯酸甲基丙烯酸烷基酯共聚物、聚乙二醇、膨润土、(丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸Na)共聚物、(丙烯酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮)共聚物等。作为保存剂，可举出苯甲酸、苯甲酸钠、脱氧乙酸、脱氧乙酸钠、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸苄酯、对羟基苯甲酸甲酯、苯氧基乙醇等。作为pH调节剂，可举出无机酸(盐酸、硫酸等)、有机酸(乳酸、乳酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、琥珀酸、琥珀酸钠等)、无机盐基(氢氧化钾、氢氧化钠等)、有机盐基(三乙醇胺、二异丙醇胺、三异丙醇胺等)等。·作为螯合剂，可举出EDTA · 2钠盐、EDTA 钙· 2钠盐等。作为稳定剂，可举出聚丙烯酸钠、二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚等。添加剂可单独使用I种或组合使用2种以上。<其他的有效成分>本发明的外用组合物在不损害本发明的效果的范围内可含有其他的有效成分。作为有效成分的具体例，例如可举出保湿成分、抗炎症成分、抗菌成分、维生素类、肽或其衍生物、氨基酸或其衍生物、细胞赋活成分、抗老化成分、血行促进成分等。作为保湿成分，可举出甘油、1，3-丁二醇、丙二醇、聚乙二醇、双甘油、海藻类糖这样的多元醇；透明质酸钠、肝素类似物质、软骨素硫酸钠、胶原蛋白、弹性蛋白、角蛋白、几丁质、壳聚糖这样的高分子化合物；甘油、天冬氨酸、精氨酸这样的氨基酸；乳酸钠、尿素、批咯烷酮羧酸钠这样的天然保湿因子；神经酰胺、胆固醇、磷脂质这样的脂质；母菊萃取物、金缕梅萃取物、茶萃取物、紫苏萃取物这样的植物提取萃取物等。作为维生素类，可举出dl- α -生育酚、醋酸dl- α -生育酚、琥珀酸dl_ α -生育酚、琥珀酸dl- α -生育酚钙等维生素E类；核黄素、黄素单核苷酸、黄素腺嘌呤二核苷酸、核黄素丁酸酯、核黄素四丁酸酯、核黄素5’ -磷酸酯钠、核黄素四烟酸酯等维生素Β2类；烟酸dl-α-生育酚、烟酸苄酯、烟酸甲酯、烟酸丁氧基乙酯、烟酸1-(4-甲基苯基)乙酯等烟酸类；抗坏血酸原A、抗坏血酸硬脂酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、L-抗坏血酸二棕榈酸酯等维生素C类；甲基橙皮甙、维生素D2、维生素D3等维生素D类；维生素K1、维生素K2等维生素K类、Y-谷维素、二苯甲酰硫胺素、二苯甲酰硫胺素盐酸盐；硫胺素盐酸盐、硫胺素十六烷基盐酸盐、硫胺素硫氰酸盐、硫胺素月桂基盐酸盐、硫胺素硝酸盐、硫胺素单磷酸盐、硫胺素赖氨酸盐、硫胺素三磷酸盐、硫胺素单磷酸酯磷酸盐、硫胺素单磷酸酯、硫胺素二磷酸酯、硫胺素二磷酸酯盐酸盐、硫胺素三磷酸酯、硫胺素三磷酸酯单磷酸盐等维生素BI类；盐酸吡哆醇、乙酸吡哆醇、盐酸吡哆醛、5’ -磷酸吡哆醛、盐酸吡哆胺等维生素B6类；维生素 B12 (cyanocobalamine)、轻钻胺、钻胺素辅酶(deoxyadenosyl cobalamin)等维生素B12类；叶酸、蝶酰谷氨酸等叶酸类；烟酸、烟酰胺等烟酸类；泛酸、泛酸钙、泛酰醇(泛醇)、D-泛醇(D- a > f寸4 > )、D-泛硫乙胺、辅酶A、泛醇乙醚(>卜f 二斤工f >工一亍；Panthenyl ethyl ether)等泛酸类；生物素、匕' 才子 '> >等生物素类；抗坏血酸、抗坏血酸钠、脱氧抗坏血酸、抗坏血酸磷酸酯钠、抗坏血酸磷酸酯镁等抗坏血酸衍生物这样的维生素C类；肉毒碱、阿魏酸、α-硫辛酸、乳清酸等维生素样作用因子等。作为肽或其衍生物，可以举出角蛋白分解肽、水解角 蛋白、胶原蛋白、来源于鱼的胶原蛋白、去端肽胶原蛋白、明胶、弹性蛋白、弹性蛋白分解肽、胶原蛋白分解肽、水解胶原蛋白、羟丙基氯化铵水解胶原蛋白、弹性蛋白分解肽、弹性蛋白分解肽、水解贝壳硬蛋白、丝蛋白分解肽、水解丝、月桂酰水解丝钠、大豆蛋白分解肽、水解大豆蛋白、小麦蛋白、小麦蛋白分解肽、水解小麦蛋白、酪蛋白分解肽、酰基化肽(棕榈酰低聚肽、棕榈酰五肽、棕榈酰四妝等)等。作为氨基酸或其衍生物，可举出甜菜碱(甘氨酸三甲内盐)、脯氨酸、羟基脯氨酸、精氨酸、赖氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、β -丙氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、白氨酸、异白氨酸、缬氨酸、组氨酸、牛磺酸、Y -氨基丁酸、Y -氨基-β -羟基丁酸、肉毒碱、肌肽、肌氨酸等。食品含有本发明的低分子岩藻依聚糖的弹性纤维形成促进剂可以包含在食品或功能性食品中而被提于使用。作为这样的食品或功能性食品，可例示出米饭；荞面、乌冬面、粉丝、中华面、方便面、杯面的各种面类；清凉饮料、碳酸饮料、营养饮料、果实饮料、乳酸饮料、运动饮料等饮料；咖喱粉、炖菜、各种汤类；冰淇淋、冰果子露、刨冰等冷冻点心；糖、小甜饼干、糖果、口香糖、巧克力、糖块、零食、饼干、果冻、果酱、奶油、其他烧果(日文焼菓子)等点心类；鱼糕、鱼肉山芋饼、火腿、香肠等水产·畜产加工食品；加工乳、发酵乳等乳制品；色拉油、天妇罗油、人造黄油、蛋黄酱、起酥油、淡奶油、色拉调料等油脂和油脂加工食品；沙司、色拉调料、大酱、酱油、调料汁等调味料；汤、炖菜、沙拉、家常菜、鱼粉、腌制品；其他各种形态的健康·营养辅助食品等。进而，可以制备含有本发明的弹性纤维形成剂的营养辅助食品(散剂、颗粒剂、软胶囊、硬胶囊、片剂、咀嚼片、速崩片、糖浆、液体剂等)。另外，在宠物等动物用饵中也可以含有本发明的弹性纤维形成剂。在食品中根据需要可加入添加物。作为这样的添加物，例如可举出葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖、山梨糖、甜菊苷、甜茶苷、玉米糖浆、乳糖、甘露醇、糊精、柠檬酸、柠檬酸钠、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、L-抗坏血酸、dl-α -生育酚、异抗坏血酸钠、甘油、丙二醇、甘油脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、失水山梨糖醇脂肪酸酯、阿拉伯胶、角叉菜胶、酪蛋白、明胶、果胶、琼脂、维生素C、维生素B类、维生素E、烟酰胺、泛酸钙、氨基酸类、钙盐类、表面活性剂、色素、香料、保存剂等。在将本发明的低分子岩藻依聚糖作为弹性纤维形成促进剂用于具有弹性纤维的再生能力的细胞培养用试药、人工皮肤、皮肤模型、人工血管等人工组织的制作的情况下，在应用于针对弹性纤维本身进行研究的情况下，也优选直接使用。使用本发明的弹性纤维形成促进剂，可在体外制作人工弹性纤维；也能够应用于针对弹性纤维的研究中。使用本发明的弹性纤维形成促进剂，还能够在体外形成弹性纤维，用于人工弹性纤维的培养用试药、人工皮肤、皮肤模型、人工血管等人工组织的制作中。在应用于这类体外的研究、实施的情况下，还适合直接使用低分子岩藻依聚糖。
本发明的弹性纤维形成促进剂还可含有DANCE表达增强因子(DANCE诱导因子)。可使用DANCE表达增强因子，例如可举出南天藤(Caesalpinia crista)萃取物、四角豆萃取物、植酸及其生理学上被许可的盐、以及L-羟基脯氨酸及其生理学上被许可的盐等DANCE表达增强因子；DANCE表达载体、或DANCE诱导因子表达载体等。应予说明，在将本发明的弹性纤维形成促进剂用于医药用途的情况下，可以以成套的方式使用。具体而言，可举出预先将构成医药组合物的不同的构成成分包装在不同的容器或包装中，在临近使用之前进行混合来使用的方式。作为容器，例如可举出密封的安瓿、试管、管形药瓶、长颈瓶、瓶子、注射器或者它们的类似物。[实施例]
接下来，利用试验例、实施例等对本发明具体地进行说明，但本发明并不限于以下的实施例。〔制造例I〕(岩藻依聚糖的低分子量部分的制造)用切割磨机将Saccharina sculpera (学名)500g切细，为了清洗和/或脱色而使其在10升的80%乙醇中悬浊，搅拌3小时后，用滤纸进行过滤，得到残渣。在残渣中添加50升的精制水，在95°C下处理10小时，然后将处理液冷却至室温，添加乙醇以使最终浓度达到30%。将该处理液在室温下静置24小时，通过离心分离进行固液分离。在得到的上清液中添加O. 5N盐酸，在低温下静置24小时，将产生的沉淀通过离心分离而除去，在得到的上清液中加入O. 5N氢氧化钠，将pH调整至中性附近后，进行离心分离，将由此得到的上清液冷冻干燥，得到低分子岩藻依聚糖。作为分子量的测定方法，通过GPC法将岩藻依聚糖提取液溶解在25mM Tris-HCl缓冲液(含有150mM NaCl, ρΗ7· 5)中，制备lmg/mL的被测溶液，用相同的缓冲液使HPLC柱 Superdex peptide 10/300GL (lOmml. D. X 30cm,流量0. 4ml/min、柱温 40 °C、注入量ΙΟΟμ 1、GEHEALTHCARE 公司制)和 Superdex 20010/300GL (10mm I. D. X 30cm，流速0. 4ml/min柱温40°C、注入量100 μ 1、GE HEALTHCARE公司制)平衡，将被测溶液100 μ L注入到该柱中。根据溶出时间确认在重均分子量1800 12000的范围内。〔比较制造例〕(岩藻依聚糖的高分子量部分的制造)直接利用市售的岩藻依聚糖(TAKARABI0公司制、商品名TaKaRa海藻类萃取物、乙醇提取)。〔试验例I〕无血清下的实验在24孔板的底部放置显微镜盖玻片(从Fisherbrand购入)，在它的上面，在每I孔中播种人皮肤纤维芽细胞7. 5X IO4个，利用次代用培养基(DMEM(Dulbecco’ s ModifiedEagle Medium,从 Invitrogen 购入)、10%牛胚胎血清(FBS、从 JRH Bioscience 购入)、2mM的谷氨酸、100units/mL的盘尼西林、100g/mL的链霉素)，在37°C、5% CO2下进行培养。进而，使用不含血清的弹性纤维形成培养基，即，使用DMEM/F12、2mM的谷氨酸、100units/mL的盘尼西林、100g/mL的链霉素，每I孔中播种人纤维芽细胞7. 5 X IO4个，在于该无血清培养基中加入或者不加入制造例I或比较制造例得到的低分子岩藻依聚糖或高分子岩藻依聚糖0. 0001%的状态下，在37°C、5% CO2下培养4周。4周培养后，进行弹性纤维的荧光免疫染色。详细而言，利用ImL的PBS清洗3次后，使用100%甲醇在_20°C下固定20分钟。进而，利用PBS清洗后，使用含有2% BSA的PBS，在室温下进行I小时的封闭，然后使用抗弹性蛋白多克隆抗体(从Elastin Products Company购入)作为I次抗体,使用Alexa488_抗兔子IgG抗体(从Invitrogen购入)作为2次抗体。将I次抗体在室温下孵化I小时以上后，用PBS清洗，将上述2次抗体在室温下孵化I小时。用PBS清洗后，使用4%多聚甲醛在室温下固定10分钟，再次用PBS清洗，然后使用Hoechst33258(从Dojindo购入)，在室温下反应5分钟,再次用PBS清洗,然后利用Aqua Poly/Mount (从Poluscience购入)将样品固定在载玻片上。观察是利用荧光显微镜DMIRE2 (LEICA) 1X71 (Olympus)进行的。其结果如图I所示。g卩，图I是将作为弹性纤维的弹性蛋白荧光染色而得的图。在本荧光染色法中，在将弹性蛋白染色的同时也将细胞质染色，因此 ，在对照中，发现了斑点状的荧光发色，这是将细胞质染色而得到的，而不是将弹性蛋白染色而得到的。另一方面，对于低分子岩藻依聚糖而言，与对照相同地将细胞质染色为斑点状，但是在整个照片中确认到明显的纤维状的荧光染色。由此确认，低分子岩藻依聚糖具有明显的弹性纤维(弹性纤维)形成促进效果。另外，确认到低分子岩藻依聚糖和对照的细胞数没有变化。进而，为了将荧光量数值化，而利用Image J(用于数值化的图像软件)将荧光量数值化。其结果由图2示出。利用在制造例I中得到的低分子岩藻依聚糖和比较制造例的高分子岩藻依聚糖，对弹性纤维形成促进作用进行比较研究，结果可知制造例I中得到的低分子岩藻依聚糖与比较制造例的高分子岩藻依聚糖相比，显示出更优异的效果。(组合物制备例I)化妆品组合物制备以下的化妆品组合物。处方例中的数值的单位为“重量％”。以下的低分子岩藻依聚糖是来自Saccharina sculpera (学名)的重均分子量为700 30000的低分子岩藻依聚糖。[表 I]SLM低分子-岩藻依聚糖0.5
南天藤萃取物0.5
月见草油0.05
亚油酸0.01
荔枝种子萃取物0.001
玫瑰花瓣萃取物0.001
水解大豆蛋Π0.001
d-δ-生 ff 酸0.01
花青素原0.001
抗坏血酸磷酸钠0.1
1,3-丁二醇7
双付油3
异硬脂酸聚氣乙烯失水山梨糖醉C20EO)0,5
甘油(三-2-乙基己 ) I
三(辛酸/癸酸)甘油酷0.2羟乙基纤维素0.05 羧某乙烯裉聚合物0,1 黄原胶0,1 螯合剂适量 防腐剂(对羟基苯甲酸丙酯、苯氧某乙醇)适量 pH调节剂适量 香料适量
水剩余部分
总计100表2SLM低分子ft激依聚糖O, OOI
四角豆萃取物I
月见草油0.4
荔枝种子萃取物0.2
肌肽0,1
水解大Il蛋白0.5
d-δ-生存酚0,01
烟酰胺1.5
水解胶原蛋H0.05
聚合草叶(Comfrey)萃取物0.1 越桔叶萃取物 0.0001 二甘 Il 3
1,3-丁二醇'10
Ψ-硬脂酸POE失水山梨糖醇(Polysorbate80 )0,8
予戊四醇四酸)！II5
廿油(三-2-乙基己酸) 2
聚+氣乙烯丨 |化蓖麻油0,5
丙烯酸-H1基丙烯酸烷基_共聚物0,25角鲨烷I
甲某聚二甲槔硅氧烷0.1
十甲难环fi硅氧烷0.2
二十二 If0.4
黄原胶0.1
(丙烯酸羟乙_丙烯酰二甲基.1:磺酸钠)共聚物0.8
螯合剤适S防腐剂(对羟S苯甲酸甲酯、对羟*苯甲酸丙醋)适量 pH调节剂适量
香料适量
水剩余部分
总计100
(组合物制备例2)内服组合物在以下的食品组合物的处方例中，岩藻依聚糖的重量为干燥重量。在食品组合物的全部处方中，岩藻依聚糖采用的是乙醇提取物。表3片剂
y;·燄依聚糖IOOoig·
梢酸I OOmg
结纤维索113.5 mg 蔗糖脂肪酸_5mg 茇芽糖30mg 枸橼酸铺50mg
维牛素BIImg
维生素B2OJmg
总#·300mg (I 片)该片剂在I天3餐中每次摄取3片。表4粉末饮料
岩■藻依聚糖0.30g
琼脂I .SOg
乳糖2.70g
枸橼酸0.50g
还原麦芽糖0.495g
抹茶香料0.005g
总计5.5g (I包装袋)该粉末饮料以I日3餐且每次以将I个包装袋溶解在水的方式进行摄取。
权利要求
1.一种弹性纤维形成促进剂，其含有重均分子量为700 30000的低分子岩藻依聚糖作为有效成分。
2.根据权利要求I所述的弹性纤维形成促进剂，其中， 所述低分子岩藻依聚糖来自选自属于褐壳藻目(Ralfsiales)、网地藻目(Dictyotales)、索藻目(Chordariales)、萱藻目(Scytosiphonales)、马鞭藻目(Cutleriales)、毛头藻目(Sporochnales)、酸藻目(Desmarestiales)、海带目(Laminariales)、铁打菜目(Ishigeales)、墨角藻目(Fucales)、水云目(Ectocarpales)、网管藻目(Dictyosiphonales)、管皮藻目(Syringodermatales)、黑顶藻目(Sphacelariales)、线翼藻目(Tilopteridales) >Ascoseirales 目、墨角藻目(Fucales)和Durvilaeales目的褐藻类中的至少一种褐藻类。
3.一种弹性纤维形成促进用组合物，其含有权利要求I或2中任一项所述的弹性纤维形成促进剂。
4.根据权利要求3所述的弹性纤维形成促进用组合物，其中， 相对于总量，含有0. 000001 99重量％的低分子岩藻依聚糖。
5.根据权利要求3所述的弹性纤维形成促进用组合物，其为化妆品。
6.根据权利要求3所述的弹性纤维形成促进用组合物，其为食品。
7.—种重均分子量为700 30000的低分子岩藻依聚糖在制造弹性纤维形成促进剂中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其中， 所述低分子岩藻依聚糖来自选自属于褐壳藻目(Ralfsiales)、网地藻目(Dictyotales)、索藻目(Chordariales)、萱藻目(Scytosiphonales)、马鞭藻目(Cutleriales)、毛头藻目(Sporochnales)、酸藻目(Desmarestiales)、海带目(Laminariales)、铁打菜目(Ishigeales)、墨角藻目(Fucales)、水云目(Ectocarpales)、网管藻目(Dictyosiphonales)、管皮藻目(Syringodermatales)、黑顶藻目(Sphacelariales)、线翼藻目(Tilopteridales) >Ascoseirales 目、墨角藻目(Fucales)和Durvilaeales目的褐藻类中的至少一种褐藻类。
全文摘要
本发明发现岩藻依聚糖的生理活性，并将其用于新的用途。本发明涉及制备含有低分子岩藻依聚糖作为有效成分的弹性纤维形成促进剂。这类岩藻依聚糖优选来自从属于褐壳藻目、网地藻目、索藻目、萱藻目、马鞭藻目、毛头藻目、酸藻目、海带目、铁打菜目、墨角藻目、水云目、网管藻目、管皮藻目、黑顶藻目、网地藻目、线翼藻目、Ascoseirales目、墨角藻目、和Durvilaeales目的组中选择的褐藻类的至少1种。进而本发明还涉及制备含有这类低分子岩藻依聚糖的弹性纤维形成促进用组合物。
文档编号A61K31/737GK102949301SQ20121027994
公开日2013年3月6日 申请日期2012年8月8日 优先权日2011年8月10日
发明者高木恭子, 佐藤康成 申请人:乐敦制药株式会社