水丁香萃取物用于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物的用途
【专利摘要】本发明公开了一种水丁香萃取物用于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物中的用途及一种水丁香萃取物用于制备治疗阿兹海默症的组合物的应用。利用水丁香萃取物作为活性成分，可以制备得增强记忆功能及延缓神经退化的医药组合物或食品组合物供阿兹海默症患者使用。
【专利说明】水丁香萃取物用于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物的用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物,具体而言,本发明涉及一种水丁香萃取物用于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物的用途。
【背景技术】
[0002]随着全球人口迈向高龄化,阿兹海默症(Alzheimer, s disease)也成为许多国家面临的问题，据研究估计，全世界约有超过2，400万人罹患此疾病。而当阿兹海默症的病情越来越严重时，病患在生活各方面都需要他人的协助，如盥洗、进食及如厕等。由于阿兹海默症患者需要人日夜看护，因此病患亲友的生活往往也受到很大的影响。
[0003]阿兹海默症在目前仍没有准确诊断和有效治疗的方法，也因此全球的科学家无不致力于研究开发新的药物或疗程。
[0004]因此，仍需要增强记忆功能及延缓神经退化的医药组合物或食品组合物。
【发明内容】
[0005]本发明提供一种水丁香萃取物于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物的新颖用途。
[0006]本发明提出一种水丁香萃取物用于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物的用途。`
[0007]本发明还提出一种水丁香萃取物用于制备治疗阿兹海默症的组合物的应用。
[0008]在一方面，本发明提供一种增强记忆功能及延缓神经退化的组合物，其包含有效量的水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物。
[0009]本发明提供一种治疗阿兹海默症的组合物，包含有效量的水丁香萃取物。
[0010]根据本发明，该水丁香萃取物可为水丁香水萃取物或水丁香醇类萃取物。
[0011]本发明的增强记忆功能及延缓神经退化的组合物可为医药组合物或食品组合物。
[0012]并且，该组合物为医药组合物，且包含有效量的水丁香萃取物及一医药可接受的载体。
[0013]在本发明的一具体实施例中，该水丁香萃取物是以包含下列步骤的方法制备:(a)以一工作液体萃取水丁香，得水丁香萃取液及残余物；(b)分离该残余物 '及(C)以一干燥制程干燥该水丁香萃取液得到该水丁香萃取物。
[0014]其中，在步骤(C)的后更包含一步骤(d)，以该工作液体回溶该水丁香萃取物，且该水丁香萃取物的浓度介于0.005%至0.5%。
[0015]其中，在步骤(a)中以该工作液体萃取水丁香4~12小时。
[0016]其中，该工作液体的温度为2~10°C。
[0017]其中，在步骤(a)中以该工作液体萃取水丁香4~12小时后，更加热10~60分钟。[0018]其中，在步骤(b)之后更包含一步骤(bl)，其将分离出的该水丁香残渣浸置于另一萃取工作液体中，并对该萃取工作液体进行加热与过滤，以产生一水丁香二次萃取液，然后再将该水丁香二次萃取液溶入该水丁香萃取液中。
[0019]其中，该加热的温度为50~100°C。
[0020]其中，该水丁香萃取物为水丁香乙醇萃取物。
[0021]采用本发明，可以利用水丁香萃取物作为活性成分，配合本领域的公知技术，制备得增强记忆功能及延缓神经退化的医药组合物或食品组合物供阿兹海默症患者使用。
[0022]无须进一步的阐述， 申请人:相信本领域技术人员基于前述说明即可利用本发明至最广的程度。因此，可以理解以下的说明仅仅是作为示例说明之用，而非以任何方式限制其余的公开内容。
【专利附图】
【附图说明】
[0023]图1显示了水丁香萃取物的浓度与果蝇学习记忆之间的关系；
[0024]图2显示了水丁香萃取物的浓度与小鼠记忆功能之间的关系(对象认知实验)'及
[0025]图3显示了水丁香萃取物的浓度与小鼠记忆功能之间的关系(架高式T字迷宫测试)。
【具体实施方式】
[0026]除非另有指明，所有在此处使用的技术性和科学性术语具有如同本发明所属【技术领域】的技术人员一般所了解的意义。
[0027]本文所使用的“一”一词，如未特别指明，是指至少一个(一个或一个以上)的数量。
[0028]本发明公开了水丁香萃取物于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物的新颖用途及水丁香萃取物用于制备治疗阿兹海默症的组合物的应用。本领域技术人员可以利用水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物的增强记忆功能及延缓神经退化的活性,利用水丁香萃取物作为活性成分，配合本领域的公知技术，制备得增强记忆功能及延缓神经退化的医药组合物或食品组合物供阿兹海默症患者使用。
[0029]根据本发明，水丁香萃取物可为水丁香水萃取物或水丁香醇类萃取物，其可借由本领域中公知的天然物或草药萃取方法萃取而得。例如，可将水丁香浸置于一工作液体进行萃取，该工作液体较佳为无毒且安定性佳的溶剂。在本发明特定具体实施例中，该水丁香水萃取物是为乙醇萃取物。
[0030]在本发明的一具体实施例中，该水丁香萃取物是以包含下列步骤的方法制备:(a)以一工作液体萃取水丁香(Ludwigia octovalvis),得水丁香萃取液及残余物；(b)分离该残余物 '及(C)以一干燥制程干燥该水丁香萃取液得到该水丁香萃取物。在另一具体实施例中，该方法更包含:(d)以该工作液体溶解该水丁香萃取物，使该水丁香萃取物的浓度介于0.005%至0.5%。根据本发明的特定具体实施例，在步骤(a)以该工作液体萃取水丁香.4~12小时，其中该工作液体的温度为2~10°C。在另一具体实施例中，在步骤(a)以该工作液体萃取水丁香4~12小时后，更加热10~60分钟。此外，在步骤(a)中，可将水丁香磨碎后再进行萃取。在本发明的部分具体实施例中，在步骤(a)将水丁香浸置于工作液体萃取一段时间后后，更将该萃取工作液体加热至50~100°C进一步萃取。当工作液体为醇类时，可使用隔水加热。在本发明的一具体实施例中，步骤(b)是利用离心过滤分离该残余物。根据本发明，步骤(C)中的干燥制程可使用本领域所公知的方法，例如，冷冻干燥或减压浓缩。根据本发明的特定具体实施例，在步骤(b)的后更包含:(bl)以一工作液体萃取该残余物，加热及过滤后得一水丁香二次萃取液，然后将该水丁香二次萃取液溶入该水丁香萃取液中。
[0031]本发明提供一种增强记忆功能及延缓神经退化的组合物，其包含有效量的水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物。本发明还提供一种治疗阿兹海默症的组合物,包含有效量的水丁香萃取物。
[0032]在本文中所使用的“有效量”一词是指对于受试者具有增强记忆功能及延缓神经退化效果的水丁香萃取物的量，不论是单一投予或是与其它活性物质共同投予。如同本领域技术人员所知，治疗有效量会随着投予途径、赋形剂使用量以及与其它活性物质的共同给予的变化而改变。
[0033]在本文中所使用的“治疗”一词是指治愈、舒缓、减轻、改变、改善疾病、疾病症状或阻止疾病的进程。
[0034]在本文中所使用的“延缓神经退化” 一词是指缓解、减轻或改善神经退化的症状，包括但不限于记忆功能降低或衰退，例如，缓解阿兹海默症所造成的记忆功能降低或衰退。
[0035]本发明的组合物可为医药组合物或食品组合。本发明的医药组合物或食品组合物可借由本发明所属【技术领域】中所普遍知悉的操作方法，将水丁萃取物与现有的载剂、稀释齐?、溶剂、着色剂、抗氧化剂、惰性物质及/或其它添加剂调配成锭剂、胶囊、粉剂、粒剂、冲剂、饮料、健康食品或食品添加剂。
[0036]用于口服的组合物 可为任何适于口服的形式，例如但不限于，溶液、悬浮液、锭剂、丸剂、胶囊或粉末。若为锭剂，则可包含已知的赋形剂，例如乳糖或玉米淀粉。润滑剂，例如硬脂酸镁，也可通常性添加。若为胶囊型式，可使用的稀释剂包括乳糖或玉米淀粉。若为水溶液或乳化剂型式，有效成分可悬浮、乳化或溶于油层中。可进一步选择性地添加甜味剂、风味剂或着色剂。
[0037]在一方面，本发明提供一种增强记忆功能及延缓神经退化的医药组合物，其包含有效量的水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物。
[0038]医药组合物中可另外含有医药可接受的载体。本文所使用的“医药可接受的载体”一词是指是指任何公知类型的无毒固体、半固体或液体的填充剂、稀释剂、包胶囊材料、调配物辅助剂或赋形剂。医药可接受的载体是在所用的剂量及浓度下，对接受者无毒性，且可与该调配物的其它成分相容。医药可接受的载体一般均可由公众轻易取得。此外，医药可接受的辅助物质，诸如，PH调节及缓冲剂、渗透压调节剂、安定剂、湿润剂及类似物，亦皆可由公众取得。
[0039]适当的载体包括但不限于水、葡萄糖、甘油、盐水、乙醇及其组合。载体可含有额外的试剂，诸如，湿润及乳化剂、PH缓冲剂或佐剂，其可增强该调配物的有效性。局部性载体包括液体石油、棕榈酸异丙酯、聚乙二醇、乙醇(95%)、溶于水中的聚氧乙烯单月桂酸酯(5%)或是溶于水中的十二烷基硫酸钠(5%)。可视需要加入其它材料，诸如，抗氧化剂、保湿剂、粘度稳定剂及类似试剂。
[0040]另一方面，根据本发明的组合物较佳为食品组合物，其可为保健食品或机能性食品O
[0041]本发明的组合物可经由任何现有的方法施用。例如，可将呈注射液剂的本发明医药组合物施用于动物体。
[0042]此外，本发明的组合物较佳是经由口服投递，借由消化是统与循环是统的传递，而将根据本发明的组合物运送至欲作用的位置。
[0043]本发明的其它特征将会经由以下各个实例中及权利要求书清楚呈现。所属【技术领域】的技术人员可了解本发明具有各种实施方法，下述实例仅用以说明而非作为本发明的限制。
[0044]实例1:水丁香萃取物的制备
[0045]首先，将水丁香磨碎后以2~10°C的低温于萃取工作液体中浸置4~12小时，然后将以50~100°C的温度加热10~60分钟，得水丁香萃取液及残余物。工作液体是为水或乙醇溶液。然后，利用离心过滤分离出残余物。接着，将分离出的残余物浸置于另一萃取工作液体中，并将此萃取工作液体以50~100°C的温度加热10~60分钟后进行离心过滤，以产生一水丁香二次萃取液，然后再将水丁香二次萃取液溶入水丁香萃取液中。的后，利用一干燥制程将水丁香萃取液干燥为一水丁香萃取物；其中，当萃取工作液体为水时，可使用冷冻干燥法，而当萃取工作液体为乙醇溶液时，可使用减压浓缩法。最后，以萃取工作液体回溶水丁香萃取物，使水丁香萃取物的浓度为0.005至0.5%。
[0046]实例2:水丁香萃取物增进记忆功能
[0047]以果妮学习记忆实验(Pavlovianolfactory associative learning & memory)进行水丁香萃取物对记忆功能的影响，主要是利用果蝇嗅觉厌恶学习的方式，教导果蝇记忆气味与轻微电击刺激之间的关联性:在果蝇闻到一个气味的同时给予电击，的后这只果蝇闻到这个味道时就会逃跑，这样就得到一个选择正确的分数，藉以依据此检测来判断学习记忆功能。将果蝇飼养在25°C的环境下，并将果蝇分成四组，对照组的喂食食物所含水丁香萃取物浓度为0%，实验组的喂食食物所含水丁香萃取物浓度分别为0.005%、
0.01%及0.1%，于第20天时对果蝇进行学习记忆功能的实验。每次实验前先将各组果蝇放置于未含食物的空管，每组的果蝇约为100只(雄雌混合)，并在实验前30分钟预先放置于暗房内。本实验所使用的气味分别为3-辛醇(3-Octanol ；3-0ct)和4-甲基环己醇(4-Methylcyclohexanol ;4_MCH),分别以比例1.5:1000及1:1000溶于矿物油中，其皆属果蝇厌恶的气味。为了避免果蝇的趋旋光性影响实验结果，实验在暗房进行。首先，使果蝇暴露在第一种气味3-0CT中60秒，在暴露于3-0CT的期间内是以1.5秒的电击(强度为70伏特)与3.5秒的休息交替循环，紧接着休息45秒后再将果蝇暴露在另一个气味4-MCH中60秒，并在暴露于4-MCH的其间内不给予电击。休息30秒后，让果蝇进行两分钟T字迷宫(Τ-maze)实验，测试其对两种气味的选择:在T字迷宫的两端分别设有3-0CT与4-MCH的气味，然后使果蝇进入T字迷宫，测试果蝇对3-0CT与4-MCH两种气味的选择，据以判断出果蝇的记忆功能。记忆指数的计算方式是将选择味道4-MCH的果蝇数量减掉选择味道3-0CT的果蝇数量，除以果蝇总数并乘100%。以上述第一步的方式将两种气味条件(电击)交换再进行一次实验，然后将两次的实验结果平均得平均的记忆指数。结果如图1所示，对照组的记忆指数低于40%，水丁香萃取物浓度为0.005%的组别的记忆指数较高但低于60%，而水丁香萃取物浓度为0.01%的组别与0.1%的组别记忆指数更高(超过60%)，且以水丁香萃取物浓度0.01%的组别的记忆指数最高。
[0048]实例3:水丁香萃取物延缓神经退化
[0049]以3个月大的早衰小鼠(senescence-accelerated mouse prone-8，SAMP8,以下简称小鼠)进行实验，在小鼠的饮水中加入水丁香萃取物，于3~4个月后进行记忆力测试；实验所使用的小鼠寿命短且会有记忆力缺失，为合适的阿兹海默症(神经退化)的实验动物模式。小鼠记忆实验首先是在三天的训练期间内将饮用0%与0.01%水丁香萃取物的小鼠个别放置于开放空间盒(20x20x10英吋)内，使小鼠习惯开放空间盒；然后，于训练期间内将两个不同的训练对象放置于开放空间盒内，允许小鼠在5分钟内探索两个不同的训练物件。于一段时间后再进行记忆力测试时，小鼠被放置到相同的开放空间盒内，并将训练期间所使用的其中一个训练对象替换为新对象，允许小鼠自由探索5分钟，并记录小鼠探索训练对象及新对象所花费的时间。而物件认知指数是由小鼠探索训练对象或新对象的时间除以探索训练对象及新对象的时间总和并乘100%。如图2所示，在训练期间结束后一小时进行记忆力测试时，饮用0%与0.01%水丁香萃取物的小鼠，其对新对象的对象认知指数皆明显远多于训练对象的对象认知指数，即新物件的探索时间大于训练物件的探索时间，显示训练后一小时内，两组小鼠(0%与0.01%)都可区分训练对象及新对象。而训练后两小时进行记忆力测试时，仅饮用0.01%水丁香萃取物的小鼠可区分训练对象及新对象，意即小鼠记得训练物件，花在训练物件上的探索时间较少，进而得到较低的对象认知指数，而对于未见过的新物件较为好奇，花在新物件上的探索时间较多，进而得到较高的对象认知指数。相对的，饮用0%水丁香萃取物的小鼠则无法辨别训练对象与新对象之间的差异，训练对象与新对象的对象认知指数相近。上述实验显示水丁香萃取物确实可有效增强早衰小鼠的记忆能力。
[0050]此外，利用架高的T字迷宫进行小鼠的记忆能力测试，此T字迷宫相对称的二端是开放的空间(无侧壁)，而另一端则为封闭空间(周围三侧有侧壁)。将小鼠分为饮用含有
0.01%水丁香萃取物的实验组，以及饮用未含有水丁香萃取物浓度的对照组。然后将两组小鼠放置于T字迷宫的封闭端，让小鼠自由探索5分钟，小鼠若于5分钟内离开封闭端即终止训练，30秒后再次将小鼠置于T字迷宫的封闭端，让小鼠自由探索5分钟，如此重复数次训练直到小鼠5分钟的时间都未离开T字迷宫的封闭端，小鼠因此习得封闭端相对于开放端为更安全的区域。在训练结束24小时后，对小鼠进行记忆力测试，如图3所示，实验组的小鼠停留在封闭端的时间平均约230秒，而对照组的小鼠停留在封闭端的时间平均约120秒。由上述结果可知，由于实验组的小鼠在经过24小时后仍记得T字迷宫的封闭端较安全，因此停留在封闭端的时间较长，而对照组的小鼠记忆则较差，因此不会刻意停留在封闭端，而对T字迷宫展开重新探索。
[0051]当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员可根据 本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明权利要求的保护范围。
【权利要求】
1.一种水丁香萃取物用于制备增强记忆功能及延缓神经退化的组合物的用途。
2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于，该水丁香萃取物为水丁香水萃取物或水丁香醇类萃取物。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，该组合物为医药组合物，且包含有效量的水丁香萃取物及一医药可接受的载体。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，该水丁香萃取物的制备包括以下步骤: (a)以一工作液体萃取水丁香，得水丁香萃取液与残余物； (b)分离该残余物；以及 (c)利用一干燥工艺干燥该水丁香萃取液得到该水丁香萃取物。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，在步骤(c)的后更包含一步骤(d)，以该工作液体回溶该水丁香萃取物，且该水丁香萃取物的浓度介于0.005%至0.5%。
6.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，在步骤(a)中以该工作液体萃取水丁香4~12小时。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，该工作液体的温度为2~10°C。
8.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，在步骤(a)中以该工作液体萃取水丁香4~12小时后，更加热10~60分钟。
9.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，在步骤(b)之后更包含一步骤(bl)，其将分离出的该水丁香残渣浸置于另一萃取工作液体中，并对该萃取工作液体进行加热与过滤，以产生一水丁香二次萃取液，然后再将该水丁香二次萃取液溶入该水丁香萃取液中。
10.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该加热的温度为50~100°C。
11.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，该水丁香萃取物为水丁香乙醇萃取物。
12.—种水丁香萃取物用于制备治疗阿兹海默症的组合物的应用。
13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，该水丁香萃取物为水丁香水萃取物或水丁香醇类萃取物。
14.根据权利要求13所述的用途，其特征在于，该组合物为医药组合物，且包含有效量的水丁香萃取物及一医药可接受的载体。
15.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，该水丁香萃取物的制备包括以下步骤: (a)以一工作液体萃取水丁香，得水丁香萃取液与残余物； (b)分离该残余物；以及 (c)利用一干燥工艺干燥该水丁香萃取液得到该水丁香萃取物。
16.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，在步骤(c)的后更包含一步骤(d)，以该工作液体回溶该水丁香萃取物，且该水丁香萃取物的浓度介于0.005%至0.5%。
17.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，在步骤(a)中以该工作液体萃取水丁香4~12小时。
18.根据权利要求17所述的用途，其特征在于，该工作液体的温度为2~10°C。
19.根据权利要求17所述的用途，其特征在于，在步骤(a)中以该工作液体萃取水丁香4~12小时后，更加热10~60分钟。
20.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，在步骤(b)之后更包含一步骤(bl)，其将分离出的该水丁香残渣浸置于另一萃取工作液体中，并对该萃取工作液体进行加热与过滤，以产生一水丁香二次萃取液，然后再将该水丁香二次萃取液溶入该水丁香萃取液中。
21.根据权利要求19所述的用途，其特征在于，该加热的温度为50~100°C。
22.根据权利要求13所述的用途，其特征在于，该水丁香萃取物为水丁香乙醇萃取物。
23.一种增强记忆功能及延缓神经退化的组合物，其特征在于，包含水丁香萃取物。
24.一种治疗阿兹海默症的组合物，其特征在于，包含水丁香萃取物。
【文档编号】A61P25/28GK103565857SQ201210545122
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2012年12月14日 优先权日:2012年7月20日
【发明者】林哲豪 申请人:日观实业股份有限公司