一种三七总皂苷及其制备方法、制剂和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种三七总皂苷及其制备方法、制剂和应用，三七总皂苷包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1，人参皂苷Rg1与人参皂苷Rb1的重量比为1:0.9~1.1。制备方法包括将原料三七粉碎成粗粉；加入重量比8~12倍量60~80%的乙醇，回流提取2~4次，每次1~2h；每次提取后粗滤，合并粗滤液，然后进行精滤；精滤液浓缩至相对比密度1.3～1.5，即得到所述的三七总皂苷。将三七总皂苷制备成散剂或颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、注射剂。三七总皂苷在制备预防和/或治疗缺血性脑血管病药物中的应用。本发明控制三七总皂苷的人参皂苷Rg1与人参皂苷Rb1的重量比在1:0.9~1.1的范围内。该三七总皂苷能够减小脑缺血/再灌注引起的脑梗死面积，以及改善脑缺血再灌注引起的神经行为障碍。
【专利说明】—种三七总皂苷及其制备方法、制剂和应用
【技术领域】
[0001]本发明属于中药提取物【技术领域】，具体涉及一种三七总皂苷及其制备方法、制剂和应用。
【背景技术】
[0002]缺血性脑血管病，是指由于各种原因导致的脑血管痉挛、脑供血不足、脑血栓、脑栓塞等疾病，致使脑血管功能障碍，尤其以脑血管堵塞最多。脑缺血能够引起离子平衡丧失、兴奋性氨基酸的过度释放、氧化应激增加、细胞凋亡并最终导致脑组织坏死。该病在现实生活中的发病率、致残率和致死率都很高，已经成为严重危害人类健康的疾病之一。[0003]三七为五加科植物，别名田七、山漆、金不换、血参、参三七等。性温，味甘、微苦；归肝经、胃经、心经、肺经、大肠经。具有止血、散血、定痛功效。一般用于治疗跌扑瘀肿、胸痹绞痛、症瘕、血瘀经闭、痛经、产后瘀阴腹痛、疮痈肿痛等症。现代研究表明:三七的主要活性成分是三七总皂苷(PNS)，三七总皂苷包括人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl、三七皂苷Rl等多种活性成分，其中人参皂苷Rbl的含量最高，人参皂苷Rgl次之。三七具有促进血液细胞新陈代谢，平衡调节血液细胞；双向调节中枢神经，提高脑力，增强学习和记忆能力；增强机体免疫功能，抗肿瘤；止血、活血化瘀；保肝、抗炎；延缓衰老等。三七总皂苷在心血管疾病、免疫、内分泌和中枢神经系统中的药理学活性有报道(Ng，TB.Pharmacologicalactivity of sanchi ginseng (Panax notoginseng).J Pharm Pharmacol, 2006, 58 (8):1007-1019.)。但迄今为止，用三七总皂苷在预防和/或治疗脑缺血方面的作用未见报道。
【发明内容】
[0004]本发明的第一目的在于提供一种三七总皂苷，第二目的在于提供该三七总皂苷的制备方法，第三目的在于提供该三七总皂苷的制剂，第四目的在于提供该三七总皂苷的应用。
[0005]本发明的第一目的是这样实现的，所述的三七总皂苷包括人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl，所述的人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:0.9^1.1。
[0006]作为优选技术方案，所述的人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:1。
[0007]本发明的第二目的是这样实现的，包括原料处理、回流提取、过滤浓缩步骤，具体为:
A、原料处理:将原料三七粉碎成粗粉；
B、回流提取:加入重量比8~12倍量60-80%的乙醇，回流提取2~4次，每次f2h ；
C、过滤浓缩干燥:每次提取后粗滤，合并粗滤液，然后进行精滤；精滤液浓缩至相对比密度1.3~1.5，即得到所述的三七总皂苷。
[0008]本发明的第三目的是这样实现的，将所述的三七总皂苷制备成散剂，或者在所述的三七总皂苷中加入药学上接受的辅料制备成颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液或注射剂。[0009]本发明的第四目的是这样实现的，所述的三七总皂苷在制备预防和/或治疗缺血性脑血管病药物中的应用。
[0010]本发明采用新的方法控制三七总皂苷的核心成份，使人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比控制在1:0.9^1.1的范围内。以该三七总皂苷进行试验，发现三七总皂苷能够减小脑缺血/再灌注引起的脑梗死面积，以及改善脑缺血再灌注引起的神经行为障碍，即，对于预防和/或治疗缺血性脑血管病起作用。
【专利附图】
【附图说明】
[0011]图1为三七总皂苷改善脑缺血再灌注小鼠的神经行为障碍(与Sham组相比，#< 0.001，与 MCAO 组相比，* < 0.01)；
图2为三七总皂苷减小缺血再灌注引起的脑梗死面积。
【具体实施方式】
[0012]下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或改进，均落入本发明的保护范围。
[0013]本发明所述的三七总皂苷，包括人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl，所述的人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:0.9~1.1。
[0014]作为优选实施方式，所述的人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:1。
[0015]本发明所述三七总皂苷的制备方法，包括原料处理、回流提取、过滤浓缩步骤，具体为:
A、原料处理:将原料三七粉碎成粗粉；
B、回流提取:加入重量比8~12倍量60-80%的乙醇，回流提取2~4次，每次f2h ；
C、过滤浓缩干燥:每次提取后粗滤，合并粗滤液，然后进行精滤；精滤液浓缩至相对比密度1.3~1.5，即得到所述的三七总皂苷。
[0016]作为优选实施方式:
A步骤所述的粗粉为20-80目。
[0017]B步骤中加入乙醇的量为重量比10倍量的70%乙醇。
[0018]B步骤所述的回流提取3次,每次1.5h。
[0019]C步骤所述的精滤为膜法过滤，滤膜的孔径为0.1~IOMffl ;所述的浓缩为常压浓缩或减压浓缩，采取冷冻干燥、薄膜浓缩或喷雾干燥等方法进行浓缩。
[0020]本发明所述的三七总皂苷制备成散剂，或者所述的三七总皂苷加入药学上接受的辅料制备成颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液或注射剂。
[0021]所述的辅料包括药学领域常规的填充剂、稀释剂、粘合剂、赋形剂、吸收促进剂、填充剂、表面活性剂和稳定剂等，必要时还可加入香味剂、色素和甜味剂等。可以加入一种或多种药物上可接受的辅料。
[0022]本发明所述的三七总皂苷在制备预防和/或治疗缺血性脑血管病中的应用。
[0023]实施例1
将原料三七粉碎成20目的粗粉，取粗粉10kg，其中加入60%的乙醇80kg ;回流提取2次，每次Ih ;每次提取后用滤网粗滤，合并粗滤液；以0.1Mffl的膜精滤，得到的精滤液在常压条件下采用常压干燥法浓缩至，浓缩至相对比密度1.3，即得到所述的三七总皂苷。
[0024]经测定，制备的三七总皂苷中人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:0.9。
[0025]实施例2
将原料三七粉碎成80目的粗粉，取粗粉15kg，其中加入80%的乙醇180kg ;回流提取4次，每次2h ;每次提取后用滤袋粗滤，合并粗滤液；以IOMffl的膜精滤，得到的精滤液在减压条件下采用减压干燥法浓缩至，浓缩至相对比密度1.5，即得到所述的三七总皂苷。
[0026]经测定，制备的三七总皂苷中人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:1.1。
[0027]实施例3
将原料三七粉碎成50目的粗粉，取粗粉10kg，其中加入70%的乙醇IOOkg ;回流提取3次，每次1.5h ;每次提取后用滤袋粗滤，合并粗滤液；以IOMffl的膜精滤，得到的精
滤液在减压条件下采用冷冻干燥法浓缩至，浓缩至相对比密度1.5，即得到所述的三七总皂苷。
[0028]经测定，制备的三七总皂苷中人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:1。
[0029]实施例4
取实施例1制备的三七总皂苷进行包装，制备成散剂。
[0030]实施例5 取实施例2制备的三七总皂苷加入药学上接受的辅料制备成颗粒剂。
[0031]实施例6
取实施例3制备的三七总皂苷加入药学上接受的辅料制备成胶囊剂。
[0032]实施例7
取实施例1制备的三七总皂苷加入药学上接受的辅料制备成片剂。
[0033]实施例8
取实施例2制备的三七总皂苷加入药学上接受的辅料制备成丸剂。
[0034]实施例9
取实施例3制备的三七总皂苷加入药学上接受的辅料制备成口服液。
[0035]实施例10
取实施例1制备的三七总皂苷加入药学上接受的辅料制备成注射剂。
[0036]实施例11
1.材料和方法
1.1实验动物
雄性C57BL/6小鼠，体重25-30g (购自重庆医科大学)。
[0037]1.2 试剂
采用实施例3制备的三七总皂苷，用生理盐水溶解，40mg/kg腹腔注射两天。2，3，5_氯化三苯基四氮唑(TTC)购自Sigma。
[0038]1.3 方法
脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注方法:腹腔注射戊巴比妥钠(50mg/kg)将小鼠麻醉。仰卧位将小鼠四肢用胶带固定，在颈部沿中线剪开皮肤，钝性分离皮下组织，分离到气管前肌后，沿右侧胸锁乳突肌向下分离肌肉和筋膜，分离出右侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。在CCA近心端和ECA远心端各挂一根线，将血管结扎。再在CCA挂一根线，以备后面固定线栓用。用眼科剪在CCA剪一个倾斜的切口(眼科剪与血管约成45度角)，这样在血液刚流出时仍能看到上翻的血管切口。用眼科镊夹紧栓线从CCA插入，并插进ICA，至栓线标记到分叉处停止，固定栓线。缝合伤口，放在20-25°C的环境中饲养，两小时后将线栓拔出，再灌注24小时。进行神经行为学评分后颈椎脱白处死，取脑进行TTC染色。
[0039]小鼠被随机分成6组，即假手术Sham组，MCAO模型组，Rgl给药组，Rbl给药组，Rgl/Rbl给药组和三七总皂苷(PNS)给药组，每组6只。药物腹腔注射两天，每天两次，手术前I小时再给药一次，Sham组和MCAO模型组在同一时间腹腔注射生理盐水。
[0040]1.4神经行为学评分
再灌注24小时后，按Longa评分法对脑缺血模型进行评分。该评分办法分5个等级，如下述:
O分:正常，无神经功能缺损；
I分:对侧(即左侧)前爪不能完全伸展，轻度神经功能缺损；
2分:行走时，小鼠向对侧转圈，中度神经功能缺损；
3分:行走时，小鼠身体向对侧倾倒，重度神经功能缺损； 4分:不能自发行走，有意识丧失。
[0041]1.5 TTC 染色
将小鼠颈椎脱臼处死，取脑，去除嗅球、小脑和脑干后，冠状切成6片进行TTC染色，37°〇避光孵育30 min，梗死面积呈白色。
[0042]2.结果
2.1三七总皂苷改善了 MCAO引起的神经学行为障碍；
2.2三七总皂苷减小了 MCAO引起的脑梗死面积,但作用程度不一。
[0043]3.结论
三七总皂苷具有预防和/或治疗缺血性脑血管病的作用。
【权利要求】
1.一种三七总皂苷，包括人参皂苷Rgl、人参皂苷Rbl，其特征在于所述的人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:0.9~1.1。
2.根据权利要求1所述的三七总皂苷，其特征在于所述的人参皂苷Rgl与人参皂苷Rbl的重量比为1:1。
3.—种权利要求1或2所述三七总皂苷的制备方法，其特征在于包括原料处理、回流提取、过滤浓缩步骤，具体包括: A、原料处理:将原料三七粉碎成粗粉； B、回流提取:加入重量比8~12倍量60-80%的乙醇，回流提取2~4次，每次f2h ； C、过滤浓缩干燥:每次提取后粗滤，合并粗滤液，然后进行精滤；精滤液浓缩至相对密度1.3^1.5，即得到所述的三七总皂苷。
4.根据权利要求3所述的三七总皂苷制备方法，其特征在于A步骤所述的粗粉为20~80目。
5.根据权利要求3所述的三七总皂苷制备方法，其特征在于B步骤中加入乙醇的量为重量比10倍量的70%乙醇。
6.根据权利要求3所述的三七总皂苷制备方法，其特征在于B步骤所述的回流提取3次，每次1.5h。
7.根据权利要求3所述的三七总皂苷制备方法，其特征在于C步骤所述的过滤为膜法精滤，滤膜的孔径为0.f IOMffl;所述的浓缩为常压浓缩或减压浓缩，采取冷冻干燥、薄膜浓缩或喷雾干燥等方法进行浓缩。`
8.—种权利要求1或2所述的三七总皂苷制剂，其特征在于将所述的三七总皂苷制备成散剂。
9.一种权利要求1或2所述的三七总皂苷制剂，其特征在于所述的三七总皂苷中加入药学上接受的辅料制备成颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液或注射剂。
10.一种权利要求1或2所述的三七总皂苷在制备预防和/或治疗缺血性脑血管病中的应用。
【文档编号】A61P25/00GK103877134SQ201210561300
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2012年12月21日 优先权日:2012年12月21日
【发明者】白洁, 杨兆祥, 曾宪思, 普俊学, 周小爽, 龚云麒, 罗富城 申请人:昆明制药集团股份有限公司