专利名称：含聚合物与磷脂的纳米载药系统及其制备方法
技术领域：
本发明涉及纳米医学领域，特别是涉及一种含聚合物与磷脂的纳米载药系统及其制备方法。
背景技术：
传统的已经研究出多种可以携载药物的传输体系，其中，以聚合物纳米颗粒和纳米脂质体为代表的两类主流纳米载体能高效包裹和传输药物，已成为各国科学家的研究热点。以聚合物纳米颗粒和纳米脂质体为代表的两类主流纳米载体具有很多优点，已经解决了很多难题，如难溶性药物的溶解性问题、药物缓释的问题等。但传统的聚合物纳米载体或纳米脂质体载体普遍存在靶向性不高，药载率(药物质量与载体质量比)受限的问题。
发明内容
基于此，有必要提供一种具有靶向性且药载率较高的含聚合物与磷脂的纳米载药系统及其制备方法。一种含聚合物与磷脂的纳米载药系统，包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物、磷脂、药物及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性聚合物；其中，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物包覆所述药物形成所述纳米载药系统的内核；所述磷脂环绕于所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面形成所述纳米载药系统的中间层；所述二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于所述磷脂中间层中形成所述纳米载药系统的外层，所述叶酸作为靶向配体。一种含聚合物与磷 脂的纳米载药系统的制备方法，包括如下步骤配制浓度范围为f5mg/mL的聚乳酸-羟基乙酸共聚物乙腈溶液及浓度范围为r5mg/mL的药物甲醇溶液，将所述药物甲醇溶液与所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物乙腈溶液按照体积比为5:10(Γ20:100的比例混合后得到含药物和聚乳酸-羟基乙酸共聚物的混合液；将磷脂与二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性聚合物溶于氯仿与甲醇的混合溶液中，然后加入到乙醇水溶液中，并加热至65°C，得到磷脂与线性聚合物的混合液，其中，磷脂的浓度为lmg/mL，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸的浓度为25mg/mL，氯仿与甲醇的体积比为9:1，乙醇水溶液中乙醇的质量分数为4% ；将所述含药物和聚乳酸-羟基乙酸共聚物的混合液按照体积比为f1. 2:3飞的比例逐滴加入所述磷脂与线性聚合物的混合液中，并于65°C条件下搅拌得到所述含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其中，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物包覆所述药物形成所述纳米载药系统的内核，所述磷脂环绕于所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面形成所述纳米载药系统的中间层，所述二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于所述磷脂中间层中形成所述纳米载药系统的外层，提供聚乙二醇外壳及叶酸靶向配体。在其中一个实施例中，所述药物为多烯紫杉醇。在其中一个实施例中，所述磷脂为大豆卵磷脂。在其中一个实施例中，所述中间层为单层磷脂结构。在其中一个实施例中，所述含聚合物与磷脂的纳米载药系统的粒径大小为80 150nm。上述含聚合物与磷脂的纳米载药系统具备聚合物及纳米脂质体的综合优势。聚乳酸-羟基乙酸共聚物对疏水性药物具有较高的药载率，并且可以控制疏水性药物在体内缓慢释放。而磷脂环绕于聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面上使得聚乳酸-羟基乙酸共聚物具有较长的半衰期，且不易团聚。根据相似相容的原理，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺与磷脂中间层具有较强的结合力，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于磷脂中间层中形成外层，提供PEG外壳及叶酸靶向配体；PEG外壳使得纳米载药系统具备空间稳定性、静电稳定性以及长循环等特点；同时不需复杂的方式就能偶联靶向叶酸配体，从而使得上述纳米载药系统具有靶向性，特别是对乳腺癌具有靶向性。此外，聚乳酸-羟基乙酸共聚物、磷脂以及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸有良好的生物相容性，可生物降解并通过正常的生理途径吸收或排出体外。且上述制备方法简便易行，便于操作推广；制备得到的含聚合物与磷脂的纳米载药系统具有生物相容性性好、生物降解可控且降解产物毒性低、易实现靶向控制释放、易于表面功能化等优点。
图1为一实施方式的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的示意
图2为实施例1中制备的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的电镜图。
具体实施例方式下面结合附图及具体实施例对载药纳米胶束及其制备方法进行进一步的说明。如图1所示，一实施方式的含聚合物与磷脂的纳米载药系统，包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、磷脂、药物及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸(DSPE-PEG-Folate)线性聚合物；其中，聚乳酸-羟基乙酸共聚物包覆药物形成纳米载药系统的内核；磷脂环绕于聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面形成纳米载药系统的中间层；二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于磷脂中间层中形成纳米载药系统的外层，用于提供聚乙二醇外壳及叶酸靶向配体。此外，本实施方式还提供一种含聚合物与磷脂的纳米载药系统的制备方法，包括如下步骤步骤S110，配制浓度范围为f5mg/mL的聚乳酸-羟基乙酸共聚物乙腈溶液及浓度范围为f5mg/mL的药物甲醇溶液，将药物甲醇溶液与聚乳酸-羟基乙酸共聚物乙腈溶液按照体积比为5:10(Γ20:100的比例混合后得到含药物和聚乳酸-羟基乙酸共聚物的混合液。步骤S120，将磷脂与二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性聚合物溶于氯仿与甲醇的混合溶液中，然后加入到乙醇水溶液中，并加热至65°C，得到磷脂与线性聚合物的混合液，其中，磷脂的浓度为lmg/mL，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸的浓度为25mg/mL，氯仿与甲醇的体积比为9:1，乙醇水溶液中乙醇的质量分数为4%。实施例步骤S130，将含药物和聚乳酸-羟基乙酸共聚物的混合液按照体积比为Γ1. 2:3飞的比例逐滴加入磷脂与线性聚合物的混合液中，并于65°C条件下搅拌得到含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其中，聚乳酸-羟基乙酸共聚物包覆药物形成纳米载药系统的内核；磷脂环绕于聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面形成纳米载药系统的中间层；二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于磷脂中间层中形成纳米载药系统的外层，提供聚乙二醇外壳及叶酸靶向配体。在本实施方式中，药物为多烯紫杉醇。多烯紫杉醇是FDA批准的紫杉烷类抗癌药物，在过去的几十年中逐渐成为最重要的抗癌化合物，是紫杉烷类第二代抗癌药的代表。但多烯紫杉醇难溶于水，生物利用率低、副作用强、无靶向性等是其一直未能解决的难题。而含聚合物与磷脂的纳米载药系统能解决上述难题，为多烯紫杉醇类药物提供一种有效的传输平台。可以理解，药物也可以是其他种类的疏水性药物，如阿霉素、顺钼、氟尿嘧啶、甲氨喋呤或喜树碱等。磷脂为大豆卵磷脂，磷脂中间层是由大豆卵磷脂形成的单层结构。可以理解，磷脂也可以是其他种类的磷脂，如……。在本实施方式中，含聚合物与磷脂的纳米载药系统的平均粒径大小为8(Tl50nm，能快速有效的在生物组织间传输。上述含聚合物与磷脂的纳米载药系统具备聚合物及纳米脂质体的综合优势。聚乳酸-羟基乙酸共聚物对疏水性药物具有较高的药载率，并且可以控制疏水性药物在体内缓慢释放。而磷脂环绕于聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面上使得聚乳酸-羟基乙酸共聚物具有较长的半衰期，且不易团聚。根据相似相容的原理，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺与磷脂中间层具有较强的结合力，二硬脂酰 磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于磷脂中间层中形成外层，提供PEG外壳及叶酸靶向配体；PEG外壳使得纳米载药系统具备空间稳定性、静电稳定性以及长循环等特点；同时不需复杂的方式就能偶联靶向叶酸配体，从而使得上述纳米载药系统具有靶向性，特别是对乳腺癌具有靶向性。此外，聚乳酸-羟基乙酸共聚物、磷脂以及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸有良好的生物相容性，可生物降解并通过正常的生理途径吸收或排出体外。且上述制备方法简便易行，便于操作推广；制备得到的含聚合物与磷脂的纳米载药系统具有生物相容性性好、生物降解可控且降解产物毒性低、易实现靶向控制释放、易于表面功能化等优点。以下为具体实施例部分实施例1取适量多烯紫杉醇溶于甲醇中，得到浓度为2mg/mL的多烯紫杉醇溶液；取适量PLGA溶于乙腈中，得到浓度为2mg/mL的PLGA溶液；取适量大豆卵磷脂和DSPE-PEG-FoLate分别溶于氯仿与甲醇混合液中，得到浓度为lmg/mL的大豆卵磷脂和25mg/mL的DSPE-PEG-FoLate，其中，氯仿与甲醇的体积比为9:1。然后取100 μ L多烯紫杉醇溶液与ImLPLGA乙腈溶液超声混合，得到含多烯紫杉醇与PLGA的混合液。取4. 8 μ L DSPE-PEG-FoLate溶液与180 μ L大豆卵磷脂溶液加入到3mL乙醇水溶液中，加热至65°C并搅拌3分钟，得到磷脂混合液，其中，乙醇水溶液中乙醇的质量分数为
4% ο将1.1mL上述含多烯紫杉醇与PLGA的混合液逐滴加入至3.1SmL上述磷脂混合液中连续搅拌反应2小时，期间允许溶剂挥发，即得具有叶酸靶性、平均粒径为8(Tl50nm的含聚合物与磷脂的纳米载药系统。如图2所示为实施例1制备的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的电镜图。电镜图表明实施例1制备的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的粒径比较均匀。实施例2取适量多烯紫杉醇溶于甲醇中，得到浓度为2mg/mL的多烯紫杉醇溶液；取适量PLGA溶于乙腈中，得到浓度为2mg/mL的PLGA溶液；取适量大豆卵磷脂和DSPE-PEG-FoLate分别溶于氯仿与甲醇混合液中，得到浓度为lmg/mL的大豆卵磷脂和25mg/mL的DSPE-PEG-FoLate，其中，氯仿与甲醇的体积比为9:1。然后取50 μ L多烯紫杉醇溶液与ImLPLGA乙腈溶液超声混合，得到含多烯紫杉醇与PLGA的混合液。取4. 8 μ LDSPE-PEG-FoLate溶液与180 μ L大豆卵磷脂溶液加入到6mL乙醇水溶液中，加热至65°C并搅拌3分钟，得到磷脂混合液，其中，乙醇水溶液中乙醇的质量分数为
4% ο将1. 05mL上述含多烯紫杉醇与PLGA的混合液逐滴加入至6.1SmL上述磷脂混合液中连续搅拌反应2小时，期间允许溶剂挥发，即得具有叶酸靶性、平均粒径为8(Tl50nm的含聚合物与磷脂的纳米载药系统。
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实施例3取适量多烯紫杉醇溶于甲醇中，得到浓度为lmg/mL的多烯紫杉醇溶液；取适量PLGA溶于乙腈中，得到浓度为lmg/mL的PLGA溶液；取适量大豆卵磷脂和DSPE-PEG-FoLate分别溶于氯仿与甲醇混合液中，得到浓度为lmg/mL的大豆卵磷脂和25mg/mL的DSPE-PEG-FoLate，其中，氯仿与甲醇的体积比为9:1。然后取200 μ L多烯紫杉醇溶液与ImLPLGA乙腈溶液超声混合，得到含多烯紫杉醇与PLGA的混合液。 取4. 8 μ L DSPE-PEG-FoLate溶液与180 μ L大豆卵磷脂溶液加入到3mL乙醇水溶液中，加热至65°C并搅拌3分钟，得到磷脂混合液，其中，乙醇水溶液中乙醇的质量分数为
4% ο将1. 2mL上述含多烯紫杉醇与PLGA的混合液逐滴加入至3.1SmL上述磷脂混合液中连续搅拌反应2小时，期间允许溶剂挥发，即得具有叶酸靶性、平均粒径为8(Tl50nm的含聚合物与磷脂的纳米载药系统。实施例4取适量多烯紫杉醇溶于甲醇中，得到浓度为5mg/mL的多烯紫杉醇溶液；取适量PLGA溶于乙腈中，得到浓度为2mg/mL的PLGA溶液；取适量大豆卵磷脂和DSPE-PEG-FoLate分别溶于氯仿与甲醇混合液中，得到浓度为lmg/mL的大豆卵磷脂和25mg/mL的DSPE-PEG-FoLate，其中，氯仿与甲醇的体积比为9:1。然后取50 μ L多烯紫杉醇溶液与ImLPLGA乙腈溶液超声混合，得到含多烯紫杉醇与PLGA的混合液。取4· 8μ L DSPE-PEG-FoLate与180 μ L大豆卵磷脂溶液加入到4mL乙醇水溶液中，加热至65°C并搅拌3分钟，得到磷脂混合液，其中，乙醇水溶液中乙醇的质量分数为4%。
将1. 05mL上述含多烯紫杉醇与PLGA的混合液逐滴加入至4.1SmL上述磷脂混合液中连续搅拌反应2小时，期间允许溶剂挥发，即得具有叶酸靶性、平均粒径为8(Tl50nm的含聚合物与磷脂的纳米载药系统。实施例5取适量多烯紫杉醇溶于甲醇中，得到浓度为5mg/mL的多烯紫杉醇溶液；取适量PLGA溶于乙腈中，得到浓度为5mg/mL的PLGA溶液；取适量大豆卵磷脂和DSPE-PEG-FoLate分别溶于氯仿与甲醇混合液中，得到浓度为lmg/mL的大豆卵磷脂和25mg/mL的DSPE-PEG-FoLate，其中，氯仿与甲醇的体积比为9:1。然后取100 μ L多烯紫杉醇溶液与ImLPLGA乙腈溶液超声混合，得到含多烯紫杉醇与PLGA的混合液。取4. 8 μ L DSPE-PEG-FoLate溶液与180 μ L大豆卵磷脂溶液加入到3mL乙醇水溶液中，加热至65°C并搅拌3分钟，得到磷脂混合液，其中乙醇水溶液中乙醇的质量分数为
4% ο将1.1mL上述含多烯紫杉醇与PLGA的混合液逐滴加入至3.1SmL上述磷脂混合液中连续搅拌反应2小时，期间允许溶剂挥发，即得具有叶酸靶性、平均粒径为8(Tl50nm的含聚合物与磷脂的纳米载药系统。以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构 思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
权利要求
1.一种含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其特征在于，包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物、磷脂、药物及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性聚合物；其中，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物包覆所述药物形成内核；所述磷脂环绕于所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面形成中间层；所述二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于所述磷脂中间层中形成外层，所述叶酸作为靶向配体。
2.如权利要求1所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其特征在于，所述药物为多烯紫杉醇。
3.如权利要求1所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其特征在于，所述磷脂为大豆卵磷脂。
4.如权利要求1所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其特征在于，所述中间层为单层磷脂结构。
5.如权利要求1所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其特征在于，所述含聚合物与磷脂的纳米载药系统的平均粒径为8(Tl50nm。
6.一种含聚合物与磷脂的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，包括如下步骤 配制浓度范围为f5mg/mL的聚乳酸-羟基乙酸共聚物乙腈溶液及浓度范围为f5mg/mL的药物甲醇溶液，将所述药物甲醇溶液与所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物乙腈溶液按照体积比为5:10(T20:100的比例混合后得到含药物和聚乳酸-羟基乙酸共聚物的混合液； 将磷脂与二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性聚合物溶于氯仿与甲醇的混合溶液中，然后加入到乙醇水溶液中，并加热至65°C，得到磷脂与线性聚合物的混合液，其中，磷脂的浓度为lmg/mL，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸的浓度为25mg/mL，氯仿与甲醇的体积比为9:1，乙醇水溶液中乙醇的质量分数为4% ； 将所述含药物和聚乳酸-羟基乙酸共聚物的混合液按照体积比为广1. 2:3飞的比例逐滴加入所述磷脂与线性聚合物的混合液中，并于65°C条件下搅拌得到所述含聚合物与磷脂的纳米载药系统，其中，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物包覆所述药物形成所述纳米载药系统的内核，所述磷脂环绕于所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面形成所述纳米载药系统的中间层，所述二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于所述磷脂中间层中形成所述纳米载药系统的外层，提供聚乙二醇外壳及叶酸靶向配体。
7.如权利要求6所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述药物为多烯紫杉醇。
8.如权利要求6所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述磷脂为大豆卵磷脂。
9.如权利要求6所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述磷脂中间层为单层结构。
10.如权利要求6所述的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述含聚合物与磷脂的纳米载药系统的平均粒径为8(Tl50nm。
全文摘要
本发明涉及一种含聚合物与磷脂的纳米载药系统，包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物、磷脂、药物及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性聚合物；其中，聚乳酸-羟基乙酸共聚物包覆药物形成内核；磷脂环绕于聚乳酸-羟基乙酸共聚物表面形成中间层；二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸线性化合物以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺穿插于磷脂中间层中形成外层，提供聚乙二醇外壳及叶酸靶向配体。上述含聚合物与磷脂的纳米载药系统具备聚合物及纳米脂质体的综合优势，具有生物相容性性好、生物降解可控且降解产物毒性低、易实现靶向控制释放、易于表面功能化等优点。此外，本发明还提供一种简便易行的含聚合物与磷脂的纳米载药系统的制备方法。
文档编号A61P35/00GK103040724SQ201210563118
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月22日 优先权日2012年12月22日
发明者蔡林涛, 郑翠芳, 郑明彬, 龚萍, 赵鹏飞 申请人:中国科学院深圳先进技术研究院