红细胞生成素产生促进剂的制作方法

红细胞生成素产生促进剂的制作方法
【专利摘要】本发明提供了肾性贫血的治疗剂及/或预防剂。而且，本发明提供了红细胞生成素产生促进剂。本发明提供了包含ALA类的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂。进一步，本发明提供了包含ALA类的红细胞生成素产生促进剂。
【专利说明】红细胞生成素产生促进剂

【技术领域】
[0001] 本发明涉及红细胞生成素产生促进剂。更具体而言，本发明涉及包含ALA类的红 细胞生成素产生促进剂。
[0002] 本发明还涉及针对红细胞生成素产生能力降低所引起的贫血、典型地为肾性贫血 的治疗剂及/或预防剂。更具体而言，本发明涉及包含ALA类的贫血的治疗剂及/或预防 剂。

【背景技术】
[0003] 肾脏为产生红细胞生成素的主要器官，而红细胞生成素主要在肾脏的肾小管间质 细胞中产生。
[0004] 红细胞生成素为由165个氨基酸组成的激素（荷尔蒙）之一。红细胞生成素于造 血组织中与红细胞前体细胞上的受体结合，而促进红细胞前体细胞的增殖与分化。如此一 来，红细胞生成素便可调节红细胞的产生。
[0005] 平时，通过血液中的氧气分压来调整红细胞生成素的产生，由此亦可调整红细胞 的产生。而且，如发生贫血时，肾脏为了进行造血而增加红细胞生成素的产量，结果使血液 中的红细胞生成素上升。
[0006] 然而，因肾脏疾病等导致肾脏中的红细胞生成素的产量下降时，尽管发生贫血，血 液中的红细胞生成素也不会上升，仍会引发红细胞的产生受抑制的病状；此种病状即为肾 性贫血。亦即，肾性贫血是主要由"因肾脏疾病等导致肾脏中的红细胞生成素（ΕΡ0)的产量 下降"所引起而产生的贫血。在肾脏病当中，尤其为慢性肾脏病时，由于肾功能缓慢下降，所 以未必会引起肾性贫血。然而，在肾脏病当中，若为肾衰竭等急性肾疾病时，已知发生肾性 贫血的机率很高。此外，亦可看到许多由与肾脏病的发病完全无关的红细胞生成素产量的 下降所引发的贫血。因此，肾疾病，尤其为慢性肾脏病与包含肾性贫血的红细胞生成素下降 所引起的贫血并非为相同的发病机制。
[0007] 作为肾性贫血的症状的特征，可例举如气喘、心悸、眩晕、食欲不振、疲劳感。
[0008] 此外，对于肾衰竭持续恶化的患者，已知会并发尿毒症。尿毒症是一种因肾功能下 降导致尿素等废物残留于血液中的病状。尿毒症患者会并发各种症状，而肾性贫血的症状 亦为其中之一。
[0009] 作为治疗此种肾性贫血的方法，已经开发有ESA(红细胞造血刺激因子制 剂，erythrocyte hematopoietic stimulating factor preparation),并已实用化。作为 ESA的实例，可例举（1)红细胞生成素、（2)红细胞生成素的衍生物、（3)其他可刺激红细胞 生成素受体的化合物等。
[0010] 此外，日本的肾性贫血的治疗方针基于以下准则（非专利文献1)来进行：
[0011] 1)当诊断确定肾性贫血、并满足施用基准时，应开始进行ESA(红细胞造血刺激因 子制剂）疗法（积极推荐）。
[0012] 2)应并用造血所需的铁剂的施用（积极推荐）。
[0013] 3)对于维持血液透析（hemodialysis :HD)患者，致力于透析液的净化，并进行充 分的透析（积极推荐）。
[0014] 4)对于伴有营养失调、炎症的患者，应对这些进行积极治疗（积极推荐）。
[0015] 如上述准则所示，在日本国内，ESA被推荐作为肾性贫血治疗剂的第一选择药。
[0016] 然而，已知肾性贫血患者的一部分对ESA疗法显示出抗性。关于对ESA疗法产生 低反应性的机制，迄今仍有许多有不清楚的点。作为此种对ESA疗法呈低反应性的原因之 一，认为主要原因在于TNF-α、IL-6等炎症性细胞因子的血中浓度增加。炎症性细胞因子 是指，引起活体内的各种炎症症状的病因因子（causative factor)。还已知炎症性细胞因 子会缩短红细胞寿命。还已知炎症性细胞因子会降低红细胞生成素产生细胞所产生的红细 胞生成素的产量。因此，炎症性细胞因子被认为是引起贫血的原因物质。
[0017] 另外，就ESA疗法其副作用而言，有发生血栓症或心肌梗塞等的风险。近来，亦有 恶性肿瘤的不良预后的报道。
[0018] 此外，ESA疗法如上述，仅为一种对症疗法，并没有使红细胞生成素产生细胞所产 生的红细胞生成素的产量下降恢复等作用。
[0019] 而且，ESA通常难以进行经口施用，从用药依从性（compliance)观点来说亦存有 问题。
[0020] 【现有技术文献】
[0021] 【非专利文献1】慢性肾脏病患者的肾性贫血治疗的准则


【发明内容】

[0022] 【发明所要解决的问题】
[0023] 本发明提供了细胞的红细胞生成素产生促进剂，并提供了通过与ESA(红细胞造 血刺激因子制剂）等对症疗法药剂不同的新颖途径，来治疗及/或预防贫血，尤其是肾性贫 血的方法。
[0024]【用以解决问题的手段】
[0025] 本发明的发明人等深入研究的结果，出乎意料地发现ALA类可抑制红细胞生成素 产生细胞所产生的红细胞生成素的产量下降。
[0026] 这表示ALA类对于红细胞生成素产量下降所引起的贫血的根本治疗及预防是有 效的。
[0027] 如上所述，肾性贫血是典型的红细胞生成素的产量下降所引起的贫血，即由肾脏 内的红细胞生成素产生细胞所产生的红细胞生成素的产量下降所生成的病状。因此，以下 将红细胞生成素的产量下降所引起的贫血作为代表性的贫血，对"肾性贫血"进行叙述，但 作为本发明对象的贫血并不限于肾性贫血。
[0028] 本发明可针对肾性贫血的更根本原因进行治疗。
[0029] 更具体而言，本发明的发明人等深入研究的结果，出乎意料地发现ALA类可抑制 由炎症性细胞因子或尿毒症毒素引起的红细胞生成素产生细胞所产生的红细胞生成素的 产量的下降。
[0030] 关于贫血与ALA的关系，已知ALA对于防止仔猪的贫血是有效的（参照日本专利 第4754731号公报）。已报道仔猪的贫血是因造血无法赶上急速的生长所引起，且作为造血 所需的化合物之一，添加ALA是有效的。该作用机制是"ALA为活体内的内在物质，且ALA 转化为血红素以增强血红蛋白"。然而，这与"ALA类可抑制红细胞生成素产生细胞所产生 的红细胞生成素的产量下降"的本发明的机制完全无关。
[0031] 此外，本发明的发明人等获得了以下见解，如已经提交但未公开的申请中所公开 的。此外，对于这些（申请）中的几个，将其作为本申请的优先权的基础申请。
[0032] S卩，本发明的发明人等发现ALA类的癌性贫血的改善效果。然而，这被认为是癌特 异性溶血反应的抑制所致。此外，本发明人等亦发现ALA类的慢性肾脏病的改善、预防效 果。然而，其直接改善肾脏的过滤能力，与"可抑制红细胞生成素产生细胞所产生的红细胞 生成素的产量的下降"的本发明的机制完全无关。且，本发明的发明人等还发现ALA类的败 血症的治疗、预防效果。然而，其是基于抑制炎症性细胞因子的产生自身的效果，与"可抑制 红细胞生成素产生细胞所产生的红细胞生成素的产量的下降"的本发明的机制完全无关。
[0033] 如此，"可抑制红细胞生成素产生细胞所产生的红细胞生成素的产量下降"的本发 明的特征，由常规的现有技术或作为发明人等的先前申请的未公开的申请是无法想到的。 而且，有关"ALA类为何对红细胞生成素产生能力的改善有效"的准确的机制的阐明是今后 的课题。
[0034] 亦即，本发明有关红细胞生成素产生促进剂，其含有以下式（I)表示的化合物或 其盐，
[0035] [化学式1]
[0036] R^NHCH^OCH^H^OOR2 (I)
[0037] (式中，R1表示氢原子或酰基，R2表示氢原子、直链或支化烷基、环烷基、芳基或芳 烧基）。
[0038] 本发明还有关促进红细胞生成素的产生的方法，其特征在于：
[0039] 将治疗上有效量的以下式（I)所示的化合物或其盐针对对象进行施用，
[0040] [化学式2]
[0041] R^NHCH^OCH^H^OOR2 (I)
[0042] (式中，R1表示氢原子或酰基，R2表示氢原子、直链或支化烷基、环烷基、芳基或芳 烧基）。
[0043] 本发明还有关红细胞生成素的产量下降所引起的贫血的治疗剂及/或预防剂，其 含有以下式（I)表示的化合物或其盐，
[0044] [化学式3]
[0045] R1 NHCH2C0CH2CH2C00R2 (1)(式中，R 1表不氢原子或酰基，R2表不氢原子、直链或 支化烷基、环烷基、芳基或芳烷基）。
[0046] 于此，红细胞生成素的产生的下降可能由炎症性细胞因子或尿毒症毒素所引起。
[0047] 各上式⑴中，
[0048] R1可选自由氢原子、碳数1?8的烷酰基、及碳数7?14的芳酰基组成的组，且
[0049] R2可选自由氢原子、直链或支化的碳数1?8的烷基、碳数3?8的环烷基、碳数 6?14的芳基、及碳数7?15的芳烷基组成的组。
[0050] 本发明的红细胞生成素的产生的下降所引起的贫血的治疗剂及/或预防剂可进 一步含有一种或二种以上的含金属的化合物。该含金属的化合物可为含有选自由铁、镁、及 锌组成的组的金属的化合物。
[0051] 本发明的红细胞生成素的产生的下降所引起的贫血的治疗剂及/或预防剂中，该 贫血可为肾性贫血。
[0052] 【发明的效果】
[0053] 通过使用本发明的红细胞生成素产生促进剂，可促进红细胞生成素产生细胞所进 行的红细胞生成素的产生。由此的结果，其对于红细胞生成素的产生的下降所引起的贫血， 典型地为肾性贫血的根本治疗及预防是有效的。
[0054] 亦即，本发明提供了肾性贫血的治疗剂及/或预防剂。
[0055] 此外，本发明中，"治疗"不仅包括完全治愈肾性贫血，还包括改善肾性贫血的症 状。对于"预防"，亦同样不仅包括完全不产生肾性贫血的症状，还包括使未施用本发明的预 防剂可能产生的肾性贫血的症状缓解。
[0056] 通过使用本发明的红细胞生成素产生促进剂，可抑制红细胞生成素产生细胞所产 生的红细胞生成素的产量的下降，并可治疗及/或预防贫血，尤其是肾性贫血。
[0057] 如此，本发明提供了通过与ESA (红细胞造血刺激因子制剂）等对症疗法药剂不同 的新颖途径，来治疗及/或预防肾性贫血的方法。
[0058] 而且，本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂可代替ESA疗法、或与ESA疗法并 用来使用，从而可减少单独使用ESA疗法时所产生的副作用。
[0059] 此外，本发明提供了红细胞生成素产生促进剂。
[0060] 通过使用本发明的红细胞生成素产生促进剂，可促进红细胞生成素产生细胞所进 行的红细胞生成素的产生。

【专利附图】

【附图说明】
[0061] 图1表示在以6种不同的条件培养可产生红细胞生成素的肝癌细胞（HEP3B细 胞）24小时后，在培养上清液中所含的红细胞生成素浓度的测定结果的图表。

【具体实施方式】
[0062] 本发明中，肾性贫血是主要由"因肾脏疾病等导致肾脏中的红细胞生成素的产量 下降"所引起而产生的贫血。于此，肾脏中的红细胞生成素的产生的下降，亦包括由炎症性 细胞因子或尿毒症毒素所引起的红细胞生成素的产生的下降。此处尿毒症毒素包括硫酸吲 哚酌' (indoxyl sulfate)等。
[0063] 作为本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂，只要其是含有ALA类的肾性贫血 的治疗剂及/或预防剂则没有特别限制。
[0064] 此外，作为本发明的红细胞生成素产生促进剂，只要其是含有ALA类的红细胞生 成素产生促进剂则没有特别限制。
[0065] 本说明书中，ALA类是指ALA或者其衍生物或它们的盐。
[0066] 本说明书中，ALA意指5-氨基乙酰丙酸。ALA亦称为δ-氨基乙酰丙酸，为氨基酸 的1种。
[0067] 作为ALA衍生物，可例示以下式（I)表示的化合物。式（I)中，R1表示氢原子或酰 基，R2表示氢原子、直链或支化烷基、环烷基、芳基或芳烷基。此外，式（I)中，ALA相当于R1 及R2为氢原子的情况。
[0068] [化学式4]
[0069] R1-NHCH2C0CH2CH2C00R 2 (1)
[0070] ALA类只要在活体内，以式（I)的ALA或其衍生物的状态作为有效成分而发挥作用 即可，亦能以由活体内的酶分解的前体药物（前体）的形式进行施用。
[0071] 作为式（I)的R1的酰基，可例举甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰 基、异戊酰基、三甲基乙酰基、己酰基、辛酰基、节基羰基（benzylcarbonyl)等直链或支化 的碳数1?8的烷酰基、或苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基等碳数7?14的芳酰基。
[0072] 作为式（I)的R2的烧基，可例举甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、 叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基、辛基等直链或支化的碳数1?8的烷基。
[0073] 作为式（I)的R2的环烷基，可例举环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛 基、环十二烷基、1-环己烯基等可存在饱和、或一部分不饱和键的碳数3?8的环烷基。
[0074] 作为式（I)的R2的芳基，可例举苯基、萘基、蒽基、菲基等碳数6?14的芳基。
[0075] 作为式（I)的R2的芳烷基，芳基部分可例示与上述芳基相同的基团，烷基部分亦 可例示与上述烷基相同的基团，具体可例举苄基、苯乙基、苯丙基、苯丁基、二苯甲基、三苯 甲基、萘甲基、萘乙基等碳数7?15的芳烷基。
[0076] 作为优选的ALA衍生物，可例举其中R1为甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基等的化 合物。此外，作为优选的ALA衍生物，可例举其中上述R 2为甲基、乙基、丙基、丁基、戊基等 的化合物。此外，作为优选的ALA衍生物，可例举上述R1与R 2的组合为（甲酰基与甲基）、 (乙酰基与甲基）、（丙酰基与甲基）、（丁酰基与甲基）、（甲酰基与乙基）、（乙酰基与乙 基）、（丙酰基与乙基）、（丁酰基与乙基）各组合的化合物。
[0077] ALA类当中，作为ALA或其衍生物的盐，可例举药理学上可接受的酸加成盐、金属 盐、铵盐、有机胺加成盐等。作为酸加成盐，可例示如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、 硝酸盐、硫酸盐等各无机酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、甲苯磺酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、乳 酸盐、酒石酸盐、乙醇酸盐、甲磺酸盐、丁酸盐、戊酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、苹 果酸盐等各有机酸加成盐。作为金属盐，可例示锂盐、钠盐、钾盐等各碱金属盐、镁盐、钙盐 等各碱土金属盐、铝、锌等各金属盐。作为铵盐，可例示铵盐、四甲基铵盐等烷基铵盐等。作 为有机胺盐，则可例示三乙胺盐、哌啶盐、吗啉盐、甲苯胺盐等各盐。此外，这些盐在使用时 亦能以溶液形式使用。
[0078] 以上的ALA类当中，最优选地为ALA、及ALA甲基酯、ALA乙基酯、ALA丙基酯、ALA 丁基酯、ALA戊基酯等各种酯类、以及它们的盐酸盐、磷酸盐、硫酸盐。其中，作为特别优选 的，可例示ALA盐酸盐、ALA磷酸盐。
[0079] 上述ALA类可通过例如化学合成、利用微生物生产、利用酶生产等公知方法来制 造。此外，上述ALA类可形成水合物（hydrate)或溶剂合物，亦可单独或适当组合2种以上 来使用ALA类。
[0080] 本发明的红细胞生成素产生促进剂、或本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂 优选以在不发生过多症的范围，进一步含有含金属的化合物；作为所述含金属的化合物，只 要未对本发明的效果造成损害，则可有利地使用金属化合物。作为本发明的含金属的化合 物的金属部分，可例举铁、镁、锌、镍、钒、钴、铜、铬、钥，但优选为铁、镁、锌，其中作为更优选 的可例示铁。
[0081] 作为铁化合物，可例举柠檬酸亚铁、柠檬酸亚铁钠、柠檬酸铁钠、柠檬酸铁铵、焦 磷酸铁、血红素铁（(heme iron)、右旋糖酐铁、乳酸铁、葡萄糖酸亚铁、二乙三胺五乙酸铁 钠、二乙三胺五乙酸铁铵、乙二胺四乙酸铁钠、乙二胺五乙酸铁铵、三亚乙基四胺铁、二羧甲 基谷氨酸铁钠、二羧甲基谷氨酸铁铵、乳铁蛋白铁、转铁蛋白铁、氯化铁、三氧化二铁、铁叶 绿酸钠 （sodium iron chlorophyllin)、铁蛋白铁、富马酸亚铁、焦磷酸亚铁、含糖氧化铁 (saccharated iron oxide)、乙酸铁、草酸铁、琥拍酸亚铁、琥拍酸朽1檬酸铁钠、硫酸铁、硫 酸甘氨酸铁（iron glycine sulfate)等，其中优选为柠檬酸亚铁、柠檬酸亚铁钠。
[0082] 作为锌化合物，可例举氯化锌、氧化锌、硝酸锌、碳酸锌、硫酸锌、二乙三胺五乙酸 锌二铵、乙二胺四乙酸锌二钠、锌原卟啉、含锌的酵母。
[0083] 上述含金属的化合物可分别使用1种或2种以上，作为含金属的化合物的施用量， 相对于ALA类的施用量，以摩尔比计，可例举0. 01?10倍量，优选为0. 1?5倍量，更优选 为0. 2?2倍量。
[0084] 本发明的红细胞生成素产生促进剂、或本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂 所含有的ALA类及含金属的化合物，可作成包含ALA类及含金属的化合物的组合物来施用、 或各自单独施用，但在各自单独施用时，优选的是同时施用它们。然而，严格说来，即便为非 同时，为使ALA类及含金属的化合物的施用能够发挥相加效果或协同效果，亦可于两者间 未隔开相当间隔之下来进行。
[0085] 作为本发明的红细胞生成素产生促进剂、或本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预 防剂的施用路径，可例举亦包含舌下施用的经口施用、或者吸入施用、包含静脉滴注的静 脉内施用、使用泥罨剂（poultice)等的经皮施用、坐药、或利用鼻胃管、鼻肠管、胃造口管 (gastrostomy tube)或是肠造口管的强制性肠道营养法（enteral nutrition)所进行的施 用等非经口施用等，但一般为经口施用。
[0086] 于此，施用的对象典型地为人类，但宠物、实验动物、家畜等非人类动物的情况亦 包含在内。
[0087] 作为本发明的红细胞生成素产生促进剂、或本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预 防剂的剂型，可根据上述施用路径来适当决定，可例举注射剂、点滴剂（infusions)、片剂、 胶囊剂、细粒剂、散剂、液剂、溶于糖浆等的水剂、泥罨剂、坐药剂等。
[0088] 为制备本发明的红细胞生成素产生促进剂、或本发明的肾性贫血的治疗剂及/或 预防剂，可视需求添加药理学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、添加剂、崩解剂、结合剂、被 覆剂、润滑剂、光滑剂（gliding agent)、光泽剂（glossing agent)、增味剂、甜味剂、增溶 齐?、溶剂、凝胶剂、营养剂等，具体可例示水、生理食盐水、动物性脂肪及油、植物油、乳糖、淀 粉、明胶、结晶性纤维素、树胶（gum)、滑石、硬脂酸镁、羟丙基纤维素、聚烷撑二醇、聚乙烯 醇、甘油。此外，以水溶液形式制备本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂、或本发明的 红细胞生成素产生促进剂时，为防止ALA类的分解，需留意勿使水溶液呈碱性，若其呈碱性 时，亦可通过去除氧气来防止分解。
[0089] 作为本发明的红细胞生成素产生促进剂、或本发明的肾性贫血的治疗剂及/或预 防剂的量、频率、时间，将因肾性贫血患者的年龄、体重、症状等而异，但作为优选施用量的 实例，以ALA磷酸盐换算，可例举成人每人lmg?3000mg/日，优选为2mg?lOOOmg/日，更 优选为3mg?700mg/日。使用其他ALA类时，亦可通过进行摩尔换算来计算优选施用量。 而且，上述优选施用量的范围仅为例示，并非予以限定。
[0090] 作为施用频率，可例示一日一次?多次的施用或通过静脉滴注等所进行的连续施 用。施用时间亦可基于能诊断出血液中的Hb(血红蛋白）值、或红细胞生成素浓度等的肾 性贫血的指标，根据该【技术领域】的药理学者或临床医师已知的方法来确定。
[0091] 将本发明的红细胞生成素产生促进剂作为肾性贫血的治疗剂及/或预防剂使用 时，可与其他现有的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂组合来使用。作为现有的肾性贫血的 治疗剂及/或预防剂的实例，可例举ESA疗法中所使用的ESA(红细胞造血刺激因子制剂） 等。作为此种ESA(红细胞造血刺激因子制剂）的非限定实例，可举出Epoetina (商标）、 EpoetinP (商标）、Darbepoetina (商标）等重组人体红细胞生成素制剂（rHu红细胞生 成素）。认为这些药剂与ALA的肾性贫血治疗剂及/或预防剂相关的机制于根本上各自不 同，因而有相加效果，且依情况，有协同效果。
[0092] 本说明书中所使用的用语，除非特别定义，否则是用以说明特定的实施方案，并非 用来限定本发明。
[0093] 此外，本说明书中所使用的用语"包含（含有）"，除根据文中前后逻辑应做明显不 同的理解的情况以外，均意指"记述的事项（构件、步骤、要素、数字等）存在"，且不排除"除 此之外的事项（构件、步骤、要素、数字等）存在"。
[0094] 只要没有不同的定义，此处所使用的所有用语（含技术用语及科学用语）与本发 明所属的领域的技术人员所广泛理解的意思是相同的。此处所使用的用语，只要没有明示 不同的定义，否则应解释为具有与本说明书及相关【技术领域】中的含义一致的含义，不应就 理想化或过度形式化的意义来解释。
[0095] 以下将参照实施例对本发明更详细进行说明。然而，本发明可通过各种方面而具 体化，不应以限定于此处所记载的实施例来解释。
[0096]【实施例】
[0097]〈实施例1 :针对红细胞生成素产生能力降低的细胞施用ALA类后的红细胞生成素 产生能力的改善效果的测定〉
[0098] 通过在低氧条件下培养红细胞生成素产生细胞，在人为产生红细胞生成素的状态 下添加炎症性细胞因子、或尿毒症毒素，而使红细胞生成素产生细胞的红细胞生成素产生 能力降低。
[0099] 作为炎症性细胞因子，采用TNF-a。此外，作为尿毒症毒素，则采用硫酸吲哚酚。 硫酸吲哚酚一般被认为是尿毒症毒素的病因物质（causative substance)，亦是尿毒症相 关标记当中最常使用的。此外，硫酸吲哚酚在体内是衍生自色氨酸的吲哚在肝脏经硫酸化 所合成的物质。如此，通过添加炎症性细胞因子、或尿毒症毒素，红细胞生成素的产量下降 的状态便为模拟的肾性贫血的状态。而且，本发明的发明人等发现，通过在所述状态下施用 ALA类，可抑制红细胞生成素的产生的下降。
[0100] 本实施例中，使用为在不同的培养条件下可产生I?VI组的红细胞生成素的肝 癌细胞的HEP3B细胞（ATCC公司）。首先，作为全部6组所共同的培养步骤，对12孔板的 每孔（well)约30万个HEP3B细胞进行培养。作为培养条件，使用添加有10% FCS/PC-SM 的RPMI1640培养基，于37°C、20%氧气条件下进行培养。培养24小时后，分作以下I? VI的培养条件，进一步培养24小时。此外，以下作为TNF-α，使用人重组TNF-a(human recombinant TNF_a)(rhTNF-a ;Rochc)〇
[0101] 【表1】
[0102]

【权利要求】
1. 红细胞生成素产生促进剂，所述红细胞生成素产生促进剂含有以下式（I)表示的化 合物或其盐， [化学式1] R'-NHCH^OCH^^COOR2 (1)式中，R1表示氢原子或酰基，R2表示氢原子、直链或支化 烷基、环烷基、芳基或芳烷基。
2. 促进红细胞生成素的产生的方法，其特征在于： 将治疗上有效量的以下式（I)所示的化合物或其盐针对对象进行施用， [化学式2] R'-NHCH^OCH^^COOR2 (1)式中，R1表示氢原子或酰基，R2表示氢原子、直链或支化 烷基、环烷基、芳基或芳烷基。
3. 由红细胞生成素的产生的下降所引起的贫血的治疗剂及/或预防剂，所述治疗剂及 /或预防剂含有以下式（I)表示的化合物或其盐， R'-NHCH^OCH^^COOR2 (1)式中，R1表示氢原子或酰基，R2表示氢原子、直链或支化 烷基、环烷基、芳基或芳烷基。
4. 如权利要求3所述的贫血的治疗剂及/或预防剂，其中， R1选自由氢原子、碳数1?8的烷酰基、及碳数7?14的芳酰基组成的组， R2选自由氢原子、直链或支化的碳数1?8的烷基、碳数3?8的环烷基、碳数6?14 的芳基、及碳数7?15的芳烷基组成的组。
5. 如权利要求3或4所述的贫血的治疗剂及/或预防剂，其中，所述治疗剂及/或预防 剂进一步含有一种或二种以上的含金属的化合物。
6. 如权利要求5所述的贫血的治疗剂及/或预防剂，其中，所述含金属的化合物为含有 选自由铁、镁、及锌组成的组的金属的化合物。
7. 如权利要求5所述的贫血的治疗剂及/或预防剂，其中，所述金属化合物为含有铁的 化合物。
8. 如权利要求3所述的贫血的治疗剂及/或预防剂，其中，所述红细胞生成素的产生的 下降是由炎症性细胞因子或尿毒症毒素所引起。
9. 如权利要求3至8中任一项所述的贫血的治疗剂及/或预防剂，其中，所述贫血为肾 性贫血。
10. 如权利要求9所述的肾性贫血的治疗剂及/或预防剂，其中，所述化合物或其盐通 过促进红细胞生成素的产生来治疗及/或预防所述肾性贫血。
【文档编号】A61K31/197GK104105482SQ201280060344
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2012年10月5日 优先权日:2011年10月12日
【发明者】田中彻, 中岛元夫, 高桥究, 阿部高明 申请人:思佰益药业股份有限公司, 国立大学法人东北大学