专利名称：一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法及专用设备的制作方法
技术领域：
本发明属于富血小板高浓度血浆(PRP)提取方法及专用设备技术领域，具体为一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法及专用设备。
背景技术：
富血小板高浓度血浆(Platelet Rich Plasma，PRP)，是通过离心血液而得到的含高浓度的血小板血浆。人体的血小板在高浓度状态下，能够产生具有细胞粘合功能的蛋白质(fibrin, fibronectin & vitronectin),中文名称:纤维连接蛋白、纤粘蛋白，并且当pH值从7.0-7.2降到6.5-6.7时，添加适当的氯化钙，可以促进血小板大量分泌有促进伤口、组织愈合及细胞再生的9种生长因子，所以PRP也叫做“富含生长因子血浆”。PRP具有迅速止血、止痛、加速伤口愈合的作用，可极大程度减轻术后疤痕的形成。另外，由于PRP从患者自身血液中提取，经提取富集处理后，可用于相关疾病的治疗，因而来源丰富，取材方便，制备方法简单而且可以让身体吸收。自身PRP使用能避免病毒传播和免疫排斥的问题出现。因此从上世纪九十年代中期开始，被广泛应用于各种外科手术、心脏手术以及整形手术，目前亦广泛用于医学美容方面。所以PRP的提取质量，是影响其功能和效果的关键因素。
目前，PRP制备方法已明显简化，在普通条件下于手术室即可以制备，但在离心过程中必须保持无菌，并且在没有血小板溶解或破坏的高浓度下分离，不同的PRP仪制备的PRP结果不同。有些PRP仪不能产生足够数量的、促进愈合的浓缩的血小板，这可以解释许多关于使用PRP无效的研究。真正的PRP应是自体的，因异体血小板没有活力，且不能分泌生物活性生长因子，其细胞膜亦是抗原，可刺激机体产生抗体。PRP制备方法大致分为两类。一类通过手工操作，利用离心机等简单仪器在普通血库条件下制备，易于开展，但操作步骤较为繁琐。另一种方法为使用专门的血液分离仪器自动分离制备PRP，此法简单迅速，可将分离后剩下的血液成分及时回输到患者体内，但这容易激活血小板，使PRP的质量下降，最终导致治疗效果不佳。
发明内容
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种操作简单的快速提取富血小板高浓度血浆的方法及专用设备的技术方案，采用该提取方法收率高，富血小板高浓度血浆的质量好，显著提高了治疗效果。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于包括以下步骤:
1)用抽血管将血液从患者身上抽取到抽血管中，抽血管中先注入抗凝剂,抗凝剂和全血的体积为1:8-10 ;所述的抗凝剂由10%柠檬酸钠和9096EDTA构成；
2)再用移浆管把血液从抽血管中移到离心管中，然后在离心管加入凝集剂，使其形成凝胶，凝集剂和全血的体积为1:8-9，所述的凝集剂由10%氯化钙和90%凝血酶构成；再将离心管放进离心机，以转速2500-3500rpm离心4_6分钟,血液分为3层,底层为沉降系数最大的红细胞，最上层为上清液即乏血小板血浆，两者交界处有一薄层，该薄层为富血小板血浆层；
3)然后提取上清液和富血小板血浆层，尽量避免抽取红细胞，改变离心力再次离心，以转速1200-1800rpm离心8_12分钟，血液分为2层，上层为上清液，下层为富血小板血浆层，把离心管中总体积3/4 -4/5的上层清液去掉，剩下的即为富血小板高浓度血浆。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于:将获得的富血小板高浓度血浆进一步浓缩，再次离心分离，转速以1000-1400rpm离心10-15分钟，把离心管中总体积1/4 -1/5的上层去掉，剩下的即为浓缩的富血小板高浓度血浆。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于步骤2)中:离心机的转速2800-3000rpm，离心时间为5分钟。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于步骤3)中:离心机的转速1400-1600rpm，离心时间为9-10分钟。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于包括离心管、移浆管、抽血管；
所述的离心管包括管体，管体顶部配合设置密封盖，密封盖上设置入口，管体中上部设置细颈；
所述的移浆管由套管、推杆配合构成，推杆前端配合设置密封圈，推杆通过密封圈与套管内壁密封滑动配合，套管前端设置接口 ；
所述的抽血管主体由一中空套管组成，中空套管最上端设置凸出的把手，把手上设置两个或三个连接口； 使用时，移浆管的接口与抽血管 的连接口连接，将抽血管中的血液抽到移浆管中，然后再将移浆管的接口与离心管的入口连接，推动推杆将血液移到离心管中。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:管体中上部的细颈外壁上配合设置安全翼。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:管体下部外壁上套接设置保护套。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:管体壁体中下部设置控制参考线，壁体顶部设置总量控制线。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:所述的套管管壁上设置刻度线。所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:所述的中空套管表面设置刻度标记。所述的EDTA为乙二胺四乙酸，是一种重要的络合剂。EDTA用途很广，可用作彩色感光材料冲洗加工的漂白定影液，染色助剂，纤维处理助剂，化妆品添加剂，血液抗凝剂，洗涤剂，稳定剂，合成橡胶聚合引发剂，EDTA是螯合剂的代表性物质。能和碱金属、稀土元素和过渡金属等形成稳定的水溶性络合物。所述的10%柠檬酸钠是指IOOmL溶液中含有IOg柠檬酸钠，9096EDTA是指IOOmL溶液中含有90gEDTA，10%氯化钙是指IOOmL溶液中含有IOg氯化钙，90%凝血酶是指IOOmL溶液中含有90g凝血酶。
上述一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法及专用设备，其操作简单，提取方法收率高，制得的富血小板高浓度血浆中含更高浓度的白细胞，极大程度降低感染机率，所以医生不在手术室就可以对患者进行美容注射治疗，使用安全、方便，治疗效果显著；且该专用设备结构简单，使用方便，在医生办公室里或手术室里一个小时内就可以制作出富含高浓度血小板及生长因子的富血小板高浓度血浆，解决了其它方法制作周期长、容易感染、血小板浓度低、达不到最大的有效性、以及制作的硬件设施及地点受到严格限制等缺点。
图1为本发明中涉及的离心管的结构示意 图2为本发明中涉及的移浆管的结构示意 图3为本发明中涉及的抽血管的结构示意 图4为本发明中涉及的专用设备的使用状态参考图一；
图5为本发明中涉及的专用设备的使用状态参考图二；
图中:1-离心管、2-移浆管、3-抽血管、101-入口、102-密封盖、103-总量控制线、104-管体、105-细颈、106-控制参考线、107-安全翼、108-保护套、201-推杆、202-套管、203-刻度线、204-接口、301-连接口、302-把手、303-刻度标记、304-中空套管。
具体实施例方式以下结合说明书附图对本发明作进一步说明。如图所示，该快速提取富血小板高浓度血浆的方法，包括以下步骤:
1)用抽血管3将血液从患者身上抽取到抽血管3中，抽血管3中先注入抗凝剂，抗凝剂和全血的体积为1:8-10 ;所述的抗凝剂由10%柠檬酸钠和9096EDTA构成；
2)再用移浆管2把血液从抽血管3中移到离心管I中，然后在离心管I加入凝集剂，使其形成凝胶，可起粘结作用，同时将生长因子限制在凝集块内不易流失，有利于其发挥作用，且容易成形；凝集剂和全血的体积为1:8-9，所述的凝集剂由10%氯化钙和90%凝血酶构成；再将离心管I放进离心机，以转速3000rpm离心4_6分钟，血液分为3层，底层为沉降系数最大的红细胞，最上层为上清液即乏血小板血衆(platelet-poor plasma, ppp),两者交界处有一薄层(buffy coat)，一般肉眼不易看出，该薄层为富血小板血浆层；
3)然后提取上清液和富血小板血浆层，尽量避免抽取红细胞，改变离心力再次离心，以转速1200-1800rpm离心8_12分钟，血液分为2层，上层为上清液，下层为富血小板血浆层，把离心管1中总体积3/4 -4/5的上层清液去掉，剩下的即为富血小板高浓度血浆。在上述方法步骤2)中离心机的转速2500 rpm >2600 rpm、2800 rpm、3200 rpm或3500rpm,步骤3)中1200 rpm> 1400 rpm> 1600 rpm或1800rpm,其它步骤同上，也能取得本发明所述的有益效果。想要获得浓缩的富血小板高浓度血浆，可将获得的富血小板高浓度血浆进一步浓缩，再次离心分离，转速以1000-1400rpm离心10-15分钟，把离心管I中总体积1/4 -1/5的上层去掉，剩下的即为浓缩的富血小板高浓度血浆，可以使血小板浓度进一步提高至全血的16倍。上述快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，包括离心管1、移浆管2、抽血管3。所述的离心管I包括管体104，管体104顶部配合设置密封盖102，密封盖102上设置入口 101，管体104中上部设置细颈105，采用细颈105后，可以更加精确的提取血沉棕黄层；管体104中上部的细颈105外壁上配合设置安全翼107，增强了细颈105的强度，大大降低了细颈105被破坏的几率。管体104下部外壁上套接设置一层软的保护套108，保护套108起到防滑和保护管体104的双重作用。管体104壁体中下部设置控制参考线106，壁体顶部设置总量控制线103，PRP在各个阶段的分离后，可以根据用量合理的控制。所述的离心管一般设置成15ml，最上端设有15ml的总量控制线103，在总量控制线103下可以精确的控制离心管为15ml的血液总量，上端设置密封盖102，保证了无菌的效果，在盖上开一个入口101，允许移浆管2前端的插入，本离心管I适用于各种离心机，适应性强。所述的移浆管2由套管202、推杆201配合构成，推杆201前端配合设置密封圈，推杆201通过密封圈与套管202内壁密封滑动配合，这样在拉动或推动推杆201的时候，利用空气压力差，将血液从套管202内推出或抽取到套管202中。套管202前端设置接口 204。所述的套管202管壁上设置刻度线203，轻易的知道抽取或推出的血液或血浆总量。所述的抽血管3主体由一中空套管304组成，中空套管304可容纳从患者中抽取的血液，中空套管304最上端设置凸出的把手302，把手302上设置两个或三个连接口 301。所述的中空套管304表面设置刻度标记303，可按需要的总量从患者身上抽取相应的血液。使用时，移浆管2的接口 204与抽血管3的连接口 301连接，将抽血管3中的血液抽到移浆管2中，然后再将 移浆管2的接口 204与离心管I的入口 101连接，推动推杆201将血液移到离心管I中。
权利要求
1.一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于包括以下步骤: 1)用抽血管(3)将血液从患者身上抽取到抽血管(3)中，抽血管(3)中先注入抗凝剂，抗凝剂和全血的体积为1:8-10 ;所述的抗凝剂由10%柠檬酸钠和9096EDTA构成； 2)再用移浆管(2)把血液从抽血管(3)中移到离心管(I)中，然后在离心管(I)加入凝集剂，使其形成凝胶，凝集剂和全血的体积为1:8-9，所述的凝集剂由10%氯化钙和90%凝血酶构成；再将离心管(I)放进离心机，以转速2500-3500rpm离心4_6分钟，血液分为3层，底层为沉降系数最大的红细胞，最上层为上清液即乏血小板血浆，两者交界处有一薄层，该薄层为富血小板血浆层； 3)然后提取上清液和富血小板血浆层，尽量避免抽取红细胞，改变离心力再次离心，以转速1200-1800rpm离心8_12分钟，血液分为2层，上层为上清液，下层为富血小板血浆层，把离心管(I)中总体积3/4 -4/5的上层清液去掉，剩下的即为富血小板高浓度血浆。
2.如权利要求1所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于:将获得的富血小板高浓度血浆进一步浓缩，再次离心分离，转速以1000-1400rpm离心10-15分钟，把离心管(I)中总体积1/4 -1/5的上层去掉，剩下的即为浓缩的富血小板高浓度血浆。
3.如权利要求1所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于步骤2)中:离心机的转速2800-3000rpm，离心时间为5分钟。
4.如权利要求1所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法，其特征在于步骤3)中:离心机的转速1400-1600rpm，离心时间为9-10分钟。
5.如权利要求1所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于包括离心管(I)、移浆管(2)、抽血管(3)； 所述的离心管(I)包括管体(104)，管体(104)顶部配合设置密封盖(102)，密封盖(102)上设置入口(101)，管体(104)中上部设置细颈(105)； 所述的移浆管(2)由套管(202)、推杆(201)配合构成，推杆(201)前端配合设置密封圈，推杆(201)通过密封圈与套管(202)内壁密封滑动配合，套管(202)前端设置接口(204)； 所述的抽血管(3)主体由一中空套管(304)组成，中空套管(304)最上端设置凸出的把手(302)，把手(302)上设置两个或三个连接口(301)； 使用时，移浆管(2)的接口(204)与抽血管(3)的连接口(301)连接，将抽血管(3)中的血液抽到移浆管(2)中，然后再将移浆管(2)的接口(204)与离心管(I)的入口(101)连接，推动推杆(201)将血液移到离心管(I)中。
6.如权利要求5所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:管体(104)中上部的细颈(105)外壁上配合设置安全翼(107)。
7.如权利要求5所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:管体(104)下部外壁上套接设置保护套(108)。
8.如权利要求5所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:管体(104)壁体中下部设置控制参考线(106)，壁体顶部设置总量控制线(103)。
9.如权利要求5所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:所述的套管(202 )管壁上设置刻度线(203 )。
10.如权利要求5所述的一种快速提取富血小板高浓度血浆的专用设备，其特征在于:所述 的中空套管(304 )表面设置刻度标记(303 )。
全文摘要
一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法及专用设备，属于富血小板高浓度血浆提取方法及专用设备技术领域。包括1)将血液从患者身上抽取到注入抗凝剂的抽血管中；2)再用移浆管把血液移到离心管中，加入凝集剂，将离心管放进离心机，以转速2500-3500rpm离心4-6分钟；3)然后提取上清液和富血小板血浆层，以转速1200-1800rpm离心8-12分钟，把离心管中总体积3/4-4/5的上层清液去掉，剩下的即为富血小板高浓度血浆。上述一种快速提取富血小板高浓度血浆的方法及专用设备，其操作简单，提取方法收率高，制得的富血小板高浓度血浆质量好，显著提高了治疗效果；且该专用设备结构简单，使用方便。
文档编号A61M1/38GK103212125SQ20131011071
公开日2013年7月24日 申请日期2013年4月1日 优先权日2013年4月1日
发明者周建明, 文勇 申请人:浙江康慈医疗科技有限公司