专利名称：多功能的偏心介孔二氧化硅核壳纳米粒子的制备方法
技术领域：
本发明属于纳米复合材料技术领域，具体涉及多功能的偏心介孔二氧化硅核壳纳米粒子的制备方法。
背景技术：
近期，将不同类型的功能性纳米颗粒封装在介孔二氧化硅中形成的多功能化纳米材料在多模式的成像和即时诊断治疗中引起了广泛的关注。利用介孔二氧化硅作为基体，不同的功能性组分例如磁性，上转换，等离子纳米颗粒，量子点和荧光分子被包埋在其中形成了中心的多功能核壳纳米组分，而且在被用作输送载体时各种组分的独特功能都被保持，使其具有磁共振和 荧光成像以及将抗癌药物传递到肿瘤部位的能力。其中，通过将成像和药物输送能力结合在一起，使这些多功能的纳米颗粒为临床癌症的诊断和治疗提供了新的机遇。到目前为止，大多数的由功能性的核和介孔二氧化硅壳组成的中心结构的多功能核壳纳米颗粒都是在凝胶溶胶过程中用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)作为模板在核上生成介孔的二氧化硅。例如，Hyeon等人制备了单分散的，能精确控制尺寸的介孔二氧化娃包裹四氧化三铁(Fe3O4OmSiO2)的核壳纳米粒子并用于磁共振,突光成像和药物输送(参考文献:Kim, J.; Kim, H.S.; Lee, N.; Kim, T.; Kim, Η.; Yu, T.; Song,1.C.; Moon, W.K.; Hyeonj T.，Multifunctional Uniform Nanoparticles Composedof a Magnetite Nanocrystal Core and a Mesoporous Silica Shell for MagneticResonance and Fluorescence Imaging and for Drug Delivery, Angew.Chem.Int.Ed.2008, 47，8438-8441)。而Shi等人则制成了介孔二氧化硅包裹上转换荧光棒(NaYF4:Tm/Yb/Gd@mSi02)的核壳纳米粒子用作生物成像(参考文献:Liu，J.; Bu, ff.;Zhang, S.; Chen, F.; Xing, H.; Pan, L.; Zhou, L.; Peng, ff.; Shi, J.ControlledSynthesis of Uniform and Monodisperse Upconversion Core/Mesoporous Silica ShellNanocomposites for Bimodal Imaging.Chem.Eur.J.2012, 18, 2335-2341)。Chen和同事报道了介孔二氧化娃包埋金棒(gold nanorodsimSi02 )的核壳纳米粒子的制备及其作为癌症治疗的平台(参考文献:Zhang，Z.; Wang, L.; Wang, J.; Jiang, X.; Li,X.; Hu, Z.; Ji, Y.; ffu, X.; Chen, C.Mesoporous Silica-Coated Gold Nanorods asa Light-Mediated Multifunctional Theranostic Platform for Cancer Treatment.Adv.Mater.2012, 24, 1418-1423)。但是，为了得到多功能的基于介孔二氧化硅的中心纳米粒子必须要经过一些比较繁杂的步骤，比如需通过使用溶剂或煅烧的方法来除去模板剂CTAB，并且值得注意的是，这样得到的纳米粒子都只呈现中心的核壳结构。此外，近年来，pH响应的聚合物药物输送系统成为了癌症治疗的一种有效的方式，因为这样的纳米粒子能够通过加强的渗透和滞留效应(EPR)被传递到微酸的肿瘤部位，并且大部分都被滞留于酸性的溶酶体中(pH 5.5-6.0)。为了赋予基于介孔二氧化硅的多功能纳米粒子这种pH响应的药物输送能力，不同种类的pH响应的聚合物被修饰在介孔二氧化硅的表面来形成pH响应的控制药物输送系统。比如，Hu等人通过氨基化反应成功将聚丙烯酸(PAA)连接在氨基修饰过的介孔二氧化硅表面上，并将其用作药物载体来构建一个pH响应的控制药物输送系统(参考文献:Yuan，L.; Tang, Q.; Yang, D.;Zhang, J.Z.; Zhang, F.; Huj J.Preparation of pH-Responsive Mesoporous SilicaNanoparticles and Their Application in Controlled Drug Delivery.J.Phys.Chem.C 2011, 115, 9926-9932)。Che等人报道了一种新型的均段聚合物包裹的介孔二氧化硅纳米粒子来载装药物用于pH响应药物输送(参考文献:Xing，L.; Zheng, H.; Cao,Y.; Chej S.Coordination Polymer Coated Mesoporous Silica Nanoparticles forpH-Responsive Drug Release.Adv.Mater.2012，24, 6433-6437)。Yang 和其同事通过蒸懼沉淀聚合法制备了由中心的介孔二氧化娃包裹四氧化三铁(Fe3O4OmSiO2)纳米粒子核和网状的聚甲基丙烯酸(PMAA)壳组成的pH响应组分微球(参考文献:Wen，H.; Guo,J.; Chang, B.; Yang, W.pH-Responsive Composite Microspheres Based on MagneticMesoporous Silica Nanoparticle for Drug Delivery.Eur.J.Pharm.Bi op harm.2012，10.1016/j.ejpb.2012.11.019)。然而，据我们所知，这些多功能的pH响应药物输送系统的载药量低，而且制备PH响应的聚合物壳也涉及到很多繁琐的步骤。而到目前为止，还没有报道将介孔二氧化硅和pH响应的控制药物输送系统通过简单的方法结合在一起形成偏心结构的介孔二氧化硅的多功能纳米粒子，而且只使用一种模板剂既当做介孔产生剂又作为PH响应的控制药物输送系统，从而减少复杂的表面修饰和后处理过程。因此，相对以前的方法，亟需开发一种新的，简单的，通用的方法来制备集较大的载药量，介孔二氧化娃和pH响应控制药物输送能力于一体的多种功能的纳米粒子。
发明内容
本发明的目的是提供一种新型的用聚丙烯酸作为模板和纳米反应器的方法来制备单分散的多功能的介孔二氧化硅纳米粒子。在这种方法中，在PAA模板上生成偏心的介孔二氧化硅纳米簇的同时也将具有PH响应的控制药物输送能力的PAA链包埋在内部，避免了后续处理模板剂PAA和修饰pH响应的聚合物的过程，赋予了纳米粒子pH响应的控制药物输送能力。此方法十分的简单，快捷，操作方便。通过这种方法，本发明制备了一系列结构新颖的介孔二氧化硅纳米簇包覆偏心的功能性核和PAA链的多功能的纳米粒子，并且介孔二氧化硅纳米簇是由许多小的二氧化硅纳米颗粒组成的。这种偏心结构是比较独特的，同时介孔二氧化硅纳米簇的厚度也是能够精确调控的。本发明的方案是:首先，制备十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)分子保护的具有不同功能的纳米颗粒，洗去多余的表面活性剂分子之后在异丙醇中在这些纳米颗粒表面包上一层PAA的聚合物壳。这层偏心的PAA壳就像一个小型的“蓄水池”来捕捉和储存水分子，使其保留在它的网状结构中，因为PAA是一种高吸水性的聚合物。随后加入的正硅酸已酯(TEOS)遇到PAA壳内部中的水分子就水解形成小的二氧化硅纳米粒子进而形成堆积状的介孔二氧化硅壳，同时PAA链就被保留在介孔二氧化硅壳中。在此过程中，PAA壳既作为介孔二氧化硅纳米簇形成的模板，也相当于一个微型的纳米反应器使TEOS的水解反应只发生在其内部。而在这一步中加入与硅烷试剂偶联的荧光分子异硫氰酸荧光素(FITC)并与TEOS发生共缩聚反应固定在二氧化硅上，就赋予纳米颗粒荧光性质。这样就形成了具有荧光分子标记的偏心的多功能的介孔二氧化硅核壳结构的纳米组分。本发明的目的通过下述方案实现:基于聚丙烯酸作为纳米反应器和模板的方法来制备多功能的偏心介孔二氧化娃核壳纳米材料。包括下述步骤:
一、十六烷基三甲基溴化铵CTAB保护的不同功能纳米颗粒的制备方法:
(I)合成CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒:取油酸保护的尺寸为25 nm的四氧化三铁纳米颗粒，按参考文献(参考文献:Kim，J.; Kim, H.S.; Lee, N.; Kim, T.;Kimj H.; Yuj T.; Song, 1.C.; Moon, W.K.; Hyeonj T.，Multifunctional UniformNanoparticles Composed of a Magnetite Nanocrystal Core and a Mesoporous SilicaShell for Magnetic Resonance and Fluorescence Imaging and for Drug Delivery,Angew.Chem.1nt.Ed.2008，47，8438-8441)转化为CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒。具体步骤为将50(T600 PL溶于氯仿中的油 酸保护的四氧化三铁纳米颗粒(10 mg ml/1)加入到0.2 M的CTAB水溶液中并在32 ° C下剧烈搅拌30分钟。然后将溶液升温挥发有机溶剂氯仿，持续搅拌20分钟后冷却到室温。用去离子水洗去多余的CTAB分子2-3次并离心收集得到CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒。(2)合成CTAB保护的上转换荧光纳米棒(NaYF4: Yb/Er/Gd NR):参考文献合成NaYF4: Yb/Er/Gd NR (参考文献:Wang, F.; Han, Y.; Lim, C.S.; Lu, Y.H.; Wang,J.; Xu, J.; Chen, H.Y.; Zhang, C.; Hong, Μ.H.; Liu, X.G., Simultaneous Phaseand Size Control of Up-conversion Nanocrystals through Lanthanide Doping,Nature!^, 463，1061-1065)。具体操作为5 M的氢氧化钠溶液和5 mL乙醇加入到油酸中，然后再加入 2 mL 的 RECl3 (0.2 M, RE=Y, Yb, Er 和 Gd)和 I mL 的 NH4F (2 M)。随后将混合溶液转移到20 mL的反应釜中在200 °(:加热反应2 h。将合成的上转换荧光棒用水和乙醇溶液清洗后溶解于环己烷中，取40(Γ600 μ L与0.2 M的CTAB水溶液混合剧烈的搅拌30 min。在搅拌条件下将混合物升温，使环己烷完全挥发，形成CTAB保护的NaYF4 = Yb/Er/Gd NR。二、PAA包覆偏心的不同功能性纳米颗粒的制备方法:取上述CTAB保护的不同功能的纳米颗粒(CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒，CTAB保护的上转换荧光纳米棒)溶于5 10 mL去离子水中，依次加入40 60 μ L PAA水溶液(0.2 g ml/1)和60 80 μ NH3.H2O(2 Μ)，每次超声半个小时。然后再边搅拌边加入10(Tl20 mL的异丙醇来形成偏心的PAA包覆不同功能性纳米颗粒的核壳纳米粒子。三、荧光标记的偏心的多功能介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法:取15 20 mL上述PAA包覆偏心的不同功能性纳米颗粒，加入2 MNH3.H2O溶液调节溶液的pH值大约为8 9，再加入5 10 μ L FITC-硅烷前驱体和250 750 μ L 20%的正硅酸已酯(TEOS)的异丙醇溶液，其中TEOS的异丙醇溶液每30 min加一次，分五-十次加入。然后，将混合溶液在室温下持续搅拌2Γ48 h。反应完成后，用异丙醇清洗三-五次，完全除去未反应的物质。最后就得到荧光标记的偏心的介孔二氧化硅包覆不同功能性纳米颗粒。所述步骤一中的油酸保护的四氧化三铁纳米颗粒购于ocean公司，颗粒的尺寸约为 25 nm。
所述步骤二中的FITC-硅烷前驱体为异硫氰酸荧光素-(3-氨丙基)三甲氧基硅烷(FITC-APTMS)的异丙醇醇溶液。具体制备方法为:4 mg FITC染料分子加入到ImL异丙醇中，然后加入44 yL APTMS，避光条件反应两天，4 ° C保存。由上述方法制备得到以荧光介孔二氧化硅纳米簇为壳，包裹具有pH响应的控制药物输送能力的PAA链和不同功能性的核(如四氧化三铁纳米颗粒和上转换荧光纳米棒等)的多功能纳米粒子。该纳米粒子分布均匀，分散性好，并具有荧光性质。与传统方法相比本发明具有如下优点:
1、本发明方法简单，快速，操作方便，重复性好，具有通用性，避免了传统方法的复杂的需修饰表面和后处理模板剂的过程。2、本发明得到的纳米颗粒分散性好，结构稳定，得到的偏心结构比较独特，并可依照需要精确地调控纳米粒子的大小，同时没有多余的单独的二氧化硅球的生成。3、本发明的纳米颗粒结合了多种功能，使其既具有中间偏心核的功能，还具有荧光示踪功能，同时由小粒子堆积而成的介孔二氧化硅具有良好的生物相容性。而且二氧化硅壳中间的PAA链在pH响应的控制药物输送方面有很好的应用，使合成的纳米粒子具有很高的载药量，和PH响应的药物缓释能力。4、本发明得到的核壳结构的纳米粒子中的偏心核不仅可以是球形，同时也适用于不同功能的棒状的纳米颗粒。5、本发明各步骤条件简单，温和，自然环保。本发明提供使用聚丙烯酸作为纳米反应器和模板的方法来制备新型多功能偏心结构纳米粒子，方法新颖，通用，条件温和，易于操作，得到的纳米颗粒分散性好，功能齐全，毒副作用小，在生物治疗和临床医学等多个领域有广泛的应用前景。
附图1、为本发明制备得到的偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒的透射电镜 附图2、为本发明制备得到的80 nm偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的透射电镜 附图3、为本发明制备得到的100 nm偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的透射电镜 附图4、为本发明制备得到的130 nm偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的透射电镜 附图5、为本发明制备得到的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的扫描电镜 附图6、为本发明制备得到的荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的荧光 附图7、为本发明制备得到的荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的磁性 附图8、为本发明制备 得到的偏心的PAA包裹的NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒的透射电镜图；附图9、为本发明制备得到的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒透射电镜图的透射电镜 附图10、为本发明制备得到的荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒的上转换荧光 附图11、为阿霉素与偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒相互作用之前(a)和之后(b)的紫外吸收光谱图。
具体实施例方式实施例1:
80 nm荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:
(I)合成CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒:取500 μ L, 10 mg ml/1溶于氯仿中的油酸保护的25 nm四氧化三铁纳米颗粒与10 mL 0.2 M CTAB混合在32 °C下剧烈搅拌30分钟。然后将溶液升温至60 °C挥发有机溶剂氯仿，持续搅拌20分钟后冷却到室温。用去离子水清洗多余的CTAB分子两次并离心收集得到CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒。(2)偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:取步骤(I)制备的CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒加5 mL去离子水并超声分散。依次加入40 μ L PAA水溶液(0.2g ml^WPeO μ L ΝΗ3.Η20溶液(2 Μ)，每次超声半个小时。然后再边搅拌边加入120 mL的异丙醇来形成偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒。(3) 80 nm荧 光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:取步骤(2)制备的偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒15 mL，加入2 MNH3 -H2O溶液调节溶液的PH值为8，再加入5 μ L FITC-硅烷前驱体和250 μ L of 20%的正硅酸已酯(TEOS)的异丙醇溶液，其中TEOS的异丙醇溶液每30 min加一次，分五次加入。然后，将混合溶液在室温下持续搅拌24 h。反应完成后，用异丙醇清洗三次，完全除去未反应的物质，得到荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒。实施例2:
100 nm荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:
(I)合成CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒:具体操作同实施例1中步骤(I)。(2)偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:具体操作同实施例1中步骤⑵。(3) 100 nm荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:取步骤⑵制备的偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒15 mL，加入2MNH3.Η20溶液调节溶液的pH值为8，再加入5 μ L FITC-硅烷前驱体和500 μ of 20%的正硅酸已酯(TEOS)的异丙醇溶液，其中TEOS的异丙醇溶液每30 min加一次，分七次加入。然后，将混合溶液在室温下持续搅拌24 h。反应完成后，用异丙醇清洗三次，完全除去未反应的物质，得到荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒。实施例3:
130 nm荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:
(I)合成CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒:具体操作同实施例1中步骤(I)。
(2)偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:具体操作同实施例1中步骤⑵。(3) 130 nm荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的制备:取步骤⑵制备的偏心的PAA包裹四氧化三铁核壳纳米颗粒15 mL，加入2MNH3.H2O溶液调节溶液的pH值为8，再加入5 μ L FITC-硅烷前驱体和750 μ L of 20%的正硅酸已酯(TEOS)的异丙醇溶液，其中TEOS的异丙醇溶液每30 min加一次，分十次加入。然后，将混合溶液在室温下持续搅拌24 h。反应完成后，用异丙醇清洗三次，完全除去未反应的物质，得到荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒。实施例4:
荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒的制备:
(I)合成CTAB保护的上转换荧 光纳米棒(NaYF4: Yb/Er/Gd NR):取1.5 mL，5 M的氢氧化钠溶液和5 mL乙醇加入到5 mL油酸中，然后再加入2 mL的RECl3 (0.2 M, RE=Y, Yb,Er和Gd)和I mL的NH4F (2 M)。随后将混合溶液转移到20 mL的反应釜中在200 °C加热反应2 h。将合成的上转换荧光棒用水和乙醇溶液清洗后溶解于环己烷中，取500 yL与
0.2 M的CTAB水溶液混合剧烈的搅拌30 min。在搅拌条件下将混合物升温至80 °C，使环己烷完全挥发，用去离子水清洗2次后即得到CTAB保护的NaYF4: Yb/Er/Gd NR。(2)偏心的PAA包裹的NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒的制备:将步骤(I)制备形成CTAB保护的NaYF4: Yb/Er/Gd NR超声分散在5 mL去离子水中。依次加入40 μ L PAA水溶液(0.2 g mL—1)和60 μ NH3.H2O (2 Μ)，每次超声半个小时。然后再边搅拌边加入120 mL的异丙醇来形成偏心的PAA包裹NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒。(3)荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒的制备:取步骤(2)得到的偏心的PAA包覆上转换荧光纳米棒15 mL，加入2 M NH3.H2O溶液调节溶液的pH值为8，再加入5 μ L FITC-硅烷前驱体和500 μ L of 20%的正硅酸已酯(TEOS)的异丙醇溶液，其中TEOS的异丙醇溶液每30 min加一次，分七次加入。然后，将混合溶液在室温下持续搅拌24 h。反应完成后，用异丙醇清洗三次，完全除去未反应的物质，得到荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和NaYF4: Yb/Er/Gd NR核壳纳米颗粒。实施例5:
荧光标记的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒超高载药量的测
定:
(I)阿霉素溶液的吸收强度-浓度的工作曲线的制作:将2 mg ml/1阿霉素储备液作为标准溶液，用去离子水逐渐稀释成一系列浓度为20-100 μg mL—1的溶液，分别测它们的紫外可见吸收光谱，再取480 nm处的吸收强度作为浓度的函数进行作图，最后得到一条呈线性变化的曲线，并以此作为标准工作曲线，通过吸收强度确定阿霉素溶液的浓度。(2)阿霉素的装载:将10 mg mL' 31.5 KL的阿霉素溶液加入到I mg mL—1,1 mL的偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒溶液中，充分混合24小时，然后9000 rpm离心10 min得到装载有阿霉素的纳米粒子。为了评估纳米粒子的载药效率，测定离心上清液中残留的阿霉素在480 nm处的吸收强度，通过与标准曲线比对，确定装载进纳米颗粒中的药物用量。最后测定偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒的载药效率达到89.5%，且载药量为每mg纳米粒子能载阿霉素药物1.26 mg。结果表明此方法合成的纳米颗粒与其它介孔二氧化硅纳米粒子的载药量相比更适合作为抗癌药物的载体。附图11为阿霉素与偏心介孔二氧化硅包裹PAA和四氧化三铁核壳纳米颗粒相互作用之前(a)和之后 (b)的紫外吸收光谱图。
权利要求
1.多功能的偏心介孔二氧化硅核壳纳米粒子的制备方法、其特征是具体步骤如下: 一、十六烷基三甲基溴化铵CTAB保护的不同功能纳米颗粒的制备方法: (I)合成CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒:取油酸保护的尺寸为25 nm的四氧化三铁纳米颗粒，按参考文献:Kim, J.; Kim, H.S.; Lee, N.; Kim, T.; Kim, Η.; Yu,T.; Song, 1.C.; Moon, ff.K.; Hyeon, T., Multifunctional Uniform NanoparticlesComposed of a Magnetite Nanocrystal Core and a Mesoporous Silica Shell forMagnetic Resonance and Fluorescence Imaging and for Drug Delivery, Angew.Chem.1nt.Ed.2008, 47，8438-8441，转化为CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒，具体步骤为将500^600 μ L溶于氯仿中的油酸保护的四氧化三铁纳米颗粒10 mg mL—1加入到0.2 M的CTAB水溶液中并在32 ° C下剧烈搅拌30分钟，然后将溶液升温挥发有机溶剂氯仿，持续搅拌20分钟后冷却到室温，用去离子水洗去多余的CTAB分子2-3次并离心收集得到CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒； (2)合成CTAB保护的上转换荧光纳米棒(NaYF4:Yb/Er/Gd NR):参考文献合成NaYF4:Yb/Er/Gd NR，参考文献:Wang, F.; Han, Y.; Lim, C.S.; Lu, Y.H.; Wang,J.; Xuj J.; Chenj H.Y.; Zhang, C.; Hong, M.H.; Liuj X.G.，Simultaneous Phaseand Size Control of Up-conversion Nanocrystals through Lanthanide Doping,Natare20l0, 463，1061-1065，具体操作为5 M的氢氧化钠溶液和5 mL乙醇加入到油酸中，然后再加入2 mL的RECl30.2 M，RE=Yj Yb，Er和Gd和I mL的NH4F 2 M，随后将混合溶液转移到20 mL的反应釜中在200 °(:加热反应2 h，将合成的上转换荧光棒用水和乙醇溶液清洗后溶解于环己烷中，取40(T600 yL与0.2 M的CTAB水溶液混合剧烈的搅拌30 min,在搅拌条件下将混合物升温，使环己烷完全挥发，形成CTAB保护的NaYF4: Yb/Er/GdNR ； 二、PAA包覆偏心的不同功能性纳米颗粒的制备方法:取上述CTAB保护的不同功能的纳米颗粒=CTAB保护的四氧化三铁纳米颗粒，CTAB保护的上转换荧光纳米棒，溶于5 10 mL去离子水中，依次加入4(Γ60 μ L PAA水溶液0.2 g mL-1和60 80 μ L NH3.H2O 2 Μ，每次超声半个小时，然后再边搅拌边加入10(Tl20 mL的异丙醇来形成偏心的PAA包覆不同功能性纳米颗粒的核壳纳米粒子； 三、荧光标记的偏心的多功能介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法:取15 20mL上述PAA包覆偏心的不同功能性纳米颗粒，加入2 MNH3.H2O溶液调节溶液的pH值为8 9，再加入5 10 μ L FITC-硅烷前驱体和250 750 μ L 20%的正硅酸已酯TEOS的异丙醇溶液，FITC-硅烷前驱体为异硫氰酸荧光素-3-氨丙基三甲氧基硅烷的异丙醇醇溶液，其中TEOS的异丙醇溶液每30 min加一次，分五-十次加入，然后，将混合溶液在室温下持续搅拌24^48 h，反应完成后，用异丙醇清洗三-五次，完全除去未反应的物质，最后就得到荧光标记的偏心的介孔二氧化娃包覆不同功能性纳米颗粒。
2.按照权利要求1所述的方法制备的多功能的偏心介孔二氧化硅核壳纳米粒子。
全文摘要
本发明属于纳米复合材料技术领域，具体涉及多功能的偏心介孔二氧化硅核壳纳米粒子的制备方法。在PAA模板上生成偏心的介孔二氧化硅纳米簇的同时也将具有pH响应的控制药物输送能力的PAA链包埋在内部，避免了后续处理模板剂PAA和修饰pH响应的聚合物的过程，赋予了介孔二氧化硅纳米粒子pH响应的控制药物输送能力。通过这种方法，本发明制备了一系列结构新颖的介孔二氧化硅纳米簇包覆偏心的功能性核和PAA链的多功能的纳米粒子。本发明方法新颖，通用，条件温和，易于操作，得到的纳米颗粒结构独特，分散性好，功能齐全，毒副作用小，在生物治疗和临床医学等多个领域有广泛的应用前景。
文档编号A61K9/14GK103211767SQ201310110678
公开日2013年7月24日 申请日期2013年4月1日 优先权日2013年4月1日
发明者王婷婷, 陈露露, 李鹿, 张凌宇 申请人:长春理工大学