土木香总内酯的制备方法
【专利摘要】一种土木香总内酯的优化提纯制备工艺，采用乙醇溶液加热回流提取得到醇浸膏，再将醇浸膏进行一次硅胶柱层析即得到纯度大于90%的土木香总内酯精制品，本发明具有纯度高、提取效率高、工艺简单、成本低廉等优点。
【专利说明】土木香总内酯的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及的是一种生物医药【技术领域】的方法，具体是一种制备具有治疗肠易激综合症(IBS)作用的土木香总内酯的简便方法。
【背景技术】
[0002]土木香为菊科旋覆花属植物土木香Inula helenium L.的干燥根,为一常用中药，具有健脾和胃、调气解郁、止痛安胎的功效。土木香总内酯(主要成分为异土木香内酯、土木香内酯)是其健脾和胃功效的有效成分，用于治疗IBS有显著疗效。
[0003]
异土木香内酯土木香内酯
[0004]然而，土木香化学成分复杂，含有挥发油、脂肪油、菊糖、香豆素等多种成分。因此，如何从土木香中高纯度的土木香总内酯具有重要意义。
[0005]《中国实验方剂学杂志》于2012年6月(18卷第12期)，38-40页，名称为“正交试验法优化土木香根中土木香内酯和异土木香内酯的提取工艺”公开了一种从土木香分离土木香内酯和异土木香内酯的方法，即:土木香用15倍量65%乙醇超声提取2次，每次30min。这种方法需要采用超声提取，而超声提取不适合工厂大规模生产；同时这种提取方法不能保证提取物的纯度与提取率，不利于大量制备高纯度的提取物。
[0006]经过对现有技术的检索发现，中国专利文献号CN102526150，
【公开日】2012_07_04，公开了一种土木香总倍半萜内酯 提取物的制备方法，通过将土木香的干燥根粉碎，经极性有机溶剂提取，提取液加1-3%活性炭脱色，滤过，减压回收试剂，浓缩至含醇量低于10%，用非极性有机溶剂萃取后得到土木香总内酯，再经聚酰胺树脂柱层析分离，收集所需成分，得到土木香总倍半萜内酯提取物。但该技术工艺繁琐，成本较高，不便于进行大规模生产。
[0007]中国专利文献号CN103251666，
【公开日】2013-08-21，公开了一种土木香总倍半萜内酯的制备方法，该方法包括(I) 土木香药材原料用60~90%乙醇回流提取、浓缩，(2)浓缩液通过大孔吸附树脂富集等步骤制得。该技术用乙醇水溶液进行提取，经大孔吸附树脂柱富集后即可得到主要成分土木香内酯和异土木香内酯含量之和为60%-90%的土木香总倍半萜内酯，收率2.5%，极大地提高了中药中有效成分的提取效率。但该技术工艺不稳定，不能确保提取出高纯度的土木香倍半萜内酯，并且成本较高。
【发明内容】
[0008]本发明针对现有技术存在的上述不足，提出一种土木香总内酯的制备方法，该方法具有纯度高、提取效率高、工艺简单、成本低廉等优点。
[0009]本发明是通过以下技术方案实现:本发明采用乙醇溶液加热回流提取得到醇浸膏，再将醇浸膏进行一次硅胶柱层析即得到纯度大于90%的土木香总内酯精制品，本发明具体步骤如下:
[0010]I)先将土木香药材干燥后粉碎成粗粉并用乙醇溶液浸泡；
[0011]2)将浸泡后的药材加热回流并回收溶剂，即得土木香醇浸膏；
[0012]3)将土木香醇浸膏进行硅胶柱层析并回收洗脱液以便反复利用；
[0013]4)收集经硅胶柱层析后所得中的溶剂，并将其中溶质减压干燥后得到纯度大于90%以上的总内酷精制品。
[0014]所述的土木香药材采用干燥的土木香根部。
[0015]所述的浸泡是指:采用浓度为70~95% (v/v)乙醇溶液浸泡6~24h，其用量为8~12倍量(v/w)。
[0016]所述的加热回流过程中采用70-95% (v/v)的乙醇溶液回流I~3小时。
[0017]所述的硅胶柱层析是 指:采用100-200目粒径的硅胶，其用量为:土木香醇浸膏:硅胶1:2~1:3 (w/w);色谱柱径高比为1:2~1:5 ;洗脱剂组成为:石油醚:丙酮(100:2~100:4，v/v);洗脱剂用量为:每克药材使用IOmL~14mL洗脱剂。
技术效果
[0018]与现有技术相比，本发明技术效果包括:
[0019]I)通过采用乙醇溶液加热回流提取得到醇浸膏，再将土木香醇浸膏进行硅胶柱后即得精制土木香总内酯。采用上述方法制备土木香总内酯，纯度高，内酯的含量以异土木香内酯、土木香内酯计算在90%以上；工艺简便，成本低廉；提取率高，可达65%以上。
[0020]2)采用95%乙醇回流提取，去除了糖类等水溶性杂质；经济快捷，同时提高了提取的效率。
[0021]3)采用硅胶柱层析方法进行纯化，采用石油醚-丙酮进行洗脱，除去了油酯、香豆素等脂溶性杂质的干扰；同时，石油醚-丙酮又可回收使用，节约了成本。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]图1为精制土木香总内酯的Agilentl290UPLC图谱；
[0023]图中:1为异土木香内酯；2为土木香内酯，采用的色谱柱为Eclipse Plus C18(1.8 μ m, 2.l*50mm);流动相:乙腈:水(40:60, v/v),流速 0.6mL/min ;检测波长 210nm。
【具体实施方式】
[0024]下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
[0025]本实施例是在以下实施条件和技术要求条件下实施的:[0026]I)干燥的土木香根650g，粉碎成粗粉，加入5200mL70%乙醇，浸泡6h。
[0027]2)将步骤I)中的药材与溶剂，加热回流3h，回收溶剂，即得土木香醇浸膏156.65g，经UPLC检测，纯度(以异土木香内酯、土木香内酯含量之和计算)为8.17%。
[0028]3)将步骤2)中醇浸膏，进行硅胶柱层析，采用100— 200目粒径的硅胶，上样量为样品:硅胶I:2 (w/w)，径高比为1:2，石油醚:丙酮(100:2，V/V)9100mL洗脱，收集洗脱液。
[0029]4)将步骤3)中洗脱液，回收溶剂，减压干燥至恒重，得到总内酯精制品11.13g。经UPLC检测，其纯度(以异土木香内酯、土木香内酯含量之和计算)为91.44%ο
实施例2
[0030]本实施例是在以下实施条件和技术要求条件下实施的:
[0031]I)干燥的土木香根653g，粉碎成粗粉，加入7836mL85%乙醇，浸泡15h。
[0032]2)将步骤I)中的药材与溶剂，加热回流2h，回收溶剂，即得土木香醇浸膏162.34g J^UPLC检测，其纯度(以异土木香内酯、土木香内酯含量之和计算)为7.16%。
[0033]3)将步骤2)中醇浸膏，进行硅胶柱层析，采用100— 200目粒径的硅胶，上样量为样品:硅胶1:2.5 (w/w)，径高比为1:3.5，石油醚:丙酮(100:3，v/v) 7836mL洗脱剂，收集洗脱液。
[0034]4)将步骤3)中洗脱液，回收溶剂，减压干燥至恒重，得到总内酯精制品11.1Sgo经UPLC检测，其纯度(以异土木香内酯、土木香内酯含量之和计算)为92.15%。 实施例3
[0035]本实施例是在以下实施条件和技术要求条件下实施的:
[0036]I)干燥的土木香根650.8g，粉碎成粗粉，加入7809.6mL95%乙醇，浸泡24h。
[0037]2)将步骤I)中的药材与溶剂，加热回流lh，回收溶剂，即得土木香醇浸膏158.86g J^UPLC检测，其纯度(以异土木香内酯、土木香内酯含量之和计算)为7.94%。
[0038]3)将步骤2)中醇浸膏，进行硅胶柱层析，采用100— 200目粒径的硅胶，上样量为样品:硅胶I:3 (w/w),径高比为1:5，石油醚:丙酮(100:4, v/v),6508mL洗脱，收集洗脱液。
[0039]4)将步骤3)中洗脱液，回收溶剂，减压干燥至恒重，得总内酯精制品11.16g。经UPLC检测，其纯度(以异土木香内酯、土木香内酯含量之和计算)为92.12%。
【权利要求】
1.一种土木香总内酯的优化提纯制备工艺，其特征在于，采用乙醇溶液加热回流提取得到醇浸膏，再将醇浸膏进行一次硅胶柱层析即得到纯度大于90%的土木香总内酯精制品O
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，所述方法的具体步骤如下: 1)先将土木香药材干燥后粉碎成粗粉并用乙醇溶液浸泡； 2)将浸泡后的药材加热回流并回收溶剂，即得土木香醇浸膏； 3)将土木香醇浸膏进行硅胶柱层析并收集洗脱液； 4)收集经硅胶柱层析后所得中的溶剂，并将其中溶质减压干燥后得到纯度大于90%以上的总内酷精制品。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征是，所述的土木香药材采用干燥的土木香根部。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征是，所述的浸泡是指:采用浓度为70~95%(v/V)乙醇溶液浸泡6~24h，其用量为8~12倍量(v/w)。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征是，所述的加热回流过程中采用70-95%(v/V)的乙醇溶液回流I~3小时。
6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征是，所述的硅胶柱层析是指:采用100-200目粒径的硅胶，其用量为:土木香醇浸膏:硅胶1:2~1:3 (w/w);色谱柱径高比为1:2~.1:5 ;洗脱剂组成为:石油醚:丙酮(100:2~100:4，v/v);洗脱剂用量为:每克药材使用.1OmL~14mL洗脱剂。
【文档编号】A61K125/00GK103494854SQ201310478897
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年10月14日 优先权日:2013年10月14日
【发明者】李晓波, 王梦月, 张乐 申请人:上海交通大学