一种止血粉及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及生物医药【技术领域】，尤其是指一种利用止血粉的制作方法，其包括如下步骤：将从南极磷虾壳中提取的壳聚糖与抗菌药物按照质量比为2～4:1，均匀混合，在120℃温度下灭菌后封装。本发明还提供这种止血粉的组分及其含量。本发明使用南极磷虾壳为原料提取壳聚糖作为止血粉的主要成分，从南极磷虾壳中提取的壳聚糖在止血效果方面与普通壳聚糖相比，由于壳聚糖的来源污染较少，壳聚糖品质上有较大的优化，可以提取出高脱乙酰度的原材料，止血效果更好。
【专利说明】—种止血粉及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物医药【技术领域】，尤其是一种利用壳聚糖作为成分之一的止血粉及其制备方法。
【背景技术】
[0002]出血是创伤患者死亡原因之一。快速、有效地控制出血可明显减少其死亡率。单纯的外科手术不能完全控制出血，止血材料的使用可以大大减少出血量。目前，临床上应用较多的局部止血材料主要有粉末类(如沸石、胶原粉末和马铃薯淀粉)、多孔海绵类(明胶海绵、胶原海绵)、氧化再生纤维素和纤维蛋白胶(如速即纱)、止血纱布类等。
[0003]这些止血材料各自有一定的不足之处:明胶胶原材料来自牛皮，由于种属差异而易致变态反应，增加伤口的感染率，尤其是对污染的伤口，故应用受到限制；血纤维蛋白胶源自血液，可能会导致病毒感染；氧化再生纤维素结构松散，对出血点的粘附差，有引起再出血的可能，且止血时间较长，对出血迅猛者效果较差，不适合单独作为伤口止血材料故应用受到限制；多孔沸石和马铃薯淀粉在吸收血液中的水分后会放出大量的热，导致伤口局部坏死、炎症反应等。这些止血材料有些止血效果不确切，有些价格昂贵，有些使用不方便，都存在着一定的缺陷性。
[0004]壳聚糖具有无毒性、无刺激性、良好组织相容性、抗菌、消炎、止血、减少创面渗出和促进创伤组织再生、修复、愈合的作用，易于形成凝胶以及可自然降解的特性，可作为良好的止血材料。但壳聚糖的止血效果与其脱乙酰度有关，一般来源的虾壳蟹壳等很难提取出优质的医用壳聚糖，这就影响了壳聚糖的止血效果。
[0005]现有壳聚糖止血粉存在以下缺点:原料来源差异较大，现有壳聚糖的原料来源主要来自近海虾壳蟹壳，而近海甲壳类动物生活的水域受化工厂直接排放入海的含磷、含氮和含重金属的废水、农田受雨水冲刷入海的农药和未经处理的生活污水污染，对人体健康造成极大的危害。现有壳聚糖在品质上比较低，无法满足高品质医用壳聚糖的需要。
【发明内容】
[0006]为解决上述问题，本发明提供一利用从南极磷虾壳中提取的壳聚糖制作止血粉的方法，其包括如下步骤:
[0007]将从南极磷虾壳中提取的壳聚糖与抗菌药物按照质量比为2~4:1，均匀混合，在120°C温度下灭菌后封装。
[0008]其中，所述 壳聚糖从南极磷虾的提取方法包括如下步骤:
[0009]步骤一:取南极磷虾壳浸没至强碱溶液中煮沸1小时，然后水洗至中性，固液分离后获得第一滤洛;
[0010]步骤二:将所述第一滤渣浸没至盐酸溶液中室温下浸泡1小时，然后水洗至中性，固液分离后获得第二滤渣；
[0011]步骤三:以所述第二滤渣为反应原料，重复所述步骤一操作，获得第三滤渣；[0012]步骤四:以所述第三滤渣为反应原料，重复所述步骤二操作，获得第四滤渣；真空干燥所述第四滤渣；
[0013]步骤五:将所述第四滤渣浸没至强碱溶液中，110°C下加热回流1小时，然后水洗至中性，再进行固液分离；
[0014]重复所述步骤五一次，获得粗制壳聚糖；真空干燥所述粗制壳聚糖；
[0015]步骤六:将干燥后的粗制壳聚糖溶解1% (w/v)的醋酸溶液中形成混合体系；然后调节所述混合体系的PH值为8.5，将析出的固态产物固液分离后，再水洗后进行冷冻干燥，得到产物壳聚糖。
[0016]其中，所述步骤一中南极磷虾壳与所述强碱的质量比为5:3。
[0017]其中，所述步骤一中强碱溶液的浓度为lmol/L ;所述步骤二中盐酸溶液的浓度为2mol/L。
[0018]其中，所述步骤五中强碱溶液的质量浓度为50%。
[0019]其中，所述强碱为NaOH或Κ0Η。
[0020]其中，所述抗菌药物包括硝基呋喃类化合物或硝基咪唑类化合物中的一种或多种。
[0021]本发明还提供这种止血粉，其包括从南极磷虾中提取的壳聚糖以及抗菌药物，所述壳聚糖和抗菌药物的质量比为2:1~4:1。
[0022]其中，所述抗菌药物包括硝基呋喃类化合物或硝基咪唑类化合物中的一种或多种。
[0023]有益效果:
[0024]本发明使用南极磷虾壳为原料提取壳聚糖作为止血粉的主要成分，从南极磷虾壳中提取的壳聚糖在止血效果方面与普通壳聚糖相比，由于壳聚糖的来源污染较少，壳聚糖品质上有较大的优化，可以提取出高脱乙酰度的原材料，止血效果更好。利用该壳聚糖制备出的抗菌止血粉，不仅可以起到止血的效果还可以对伤口还有抗菌效果。
【具体实施方式】
[0025]下面将详细介绍本发明的止血粉及其制备方法。
[0026]这种止血粉的成分是从南极磷虾中提取的壳聚糖与抗菌药物，其具体制备方法如下:
[0027]首先，从南极磷虾中提取壳聚糖。
[0028]步骤一:取南极磷奸壳1Og,加入150ml、lmol/L的氢氧化钠溶液中煮沸I小时，然
后水洗至中性，固液分离后获得第一滤渣。
[0029]步骤二:将所述第一滤渣置于100ml、2mol/L的盐酸溶液中室温(23±2°C )下浸泡I小时，然后水洗至中性，固液分离后获得第二滤渣。
[0030]步骤三:将所述第二滤渣置于100ml、lmol/L的氢氧化钠溶液中煮沸I小时，然后水洗至中性，固液分离后获得第三滤渣。
[0031]步骤四:将所述第三滤渣置于100ml、2mol/L盐酸溶液中室温下浸泡I小时，然后水洗至中性，固液分离后获得第四滤渣，真空干燥所述第四滤渣
[0032]步骤五:将所述第四滤渣质量分数为50%的NaOH浓溶液中，110°C下加热回流I小时进行脱乙酰操作，然后水洗至中性，再进行固液分离。
[0033]重复步骤五的脱乙酰操作一次，获得粗制壳聚糖。然后真空干燥所述粗制壳聚糖。
[0034]步骤六:将真空干燥后的粗制壳聚糖溶解于质量-体积分数为1% (w/v)的醋酸溶液中形成混合体系；然后采用0.lmol/L的NaOH溶液调节所述混合体系的pH值为8.5。此时壳聚糖从混合体系中析出，过滤后获得精制的壳聚糖，水洗后进行冷冻干燥，得到亮白色的产物壳聚糖。
[0035]然后，采用上述从南极磷虾壳中提取的壳聚糖制备止血粉。
[0036]将从南极磷虾壳中提取的壳聚糖与抗菌药物(例如万古霉素)按照质量比为2:1~4:1，均匀混合，使止血粉的粒径均一；然后在120°C温度下灭菌后封装。
[0037]本实施例所采用的抗菌药物可例如为硝基呋喃类化合物或硝基咪唑类化合物中的一种或多种。具体可例如为呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林或甲硝唑、替硝唑等抗生素。
[0038]为进一步说明本发明从南极磷虾获得的壳聚糖具有更优异的止血活性，进行以下对比实验，具体操作如下:
[0039]将从南极磷奸壳 中提取的壳聚糖与sigma壳聚糖做小鼠断尾止血效果对比实验:
[0040]①称取0.1g从南极磷奸壳中提取的壳聚糖粉末(编号I)和0.1gsigma壳聚糖粉末(编号2)，分别置于两个 2ml展示瓶I和展示瓶2中，灭菌备用；
[0041]②取两只同批次的C57BL/6小鼠，称重，量尾长；
[0042]③用手术剪去小鼠尾长的三分之一后，立即将断尾伤口分别插入展示瓶I和展示瓶2中，同时计时。计算血流停止时的小鼠出血量。
[0043]分别进行三组平行实验，求出平均出血量，详见表1。由表1可以看出从南极磷虾壳中提取的壳聚糖的止血效果要比sigma壳聚糖好。这可能是由于南极磷虾是一种深海生物资源，生活的水域不受重金属(比如，砷、铅、汞、镍和银离子等)污染，其磷虾虾壳及体内均不含有害元素。以南极磷虾为原料即从源头优化了壳聚糖的品质，从而可以制备高脱乙酰度的优质壳聚糖，以这种壳聚糖作为止血粉的主要成分，可以有效提高止血粉的止血效果O
[0044]表1从南极磷奸壳提取的壳聚糖与sigma壳聚糖止血效果对比
[0045]
【权利要求】
1.一种止血粉的制作方法，其包括如下步骤: 将从南极磷虾壳中提取的壳聚糖与抗菌药物按照质量比为2~4:1，均匀混合，在120°C温度下灭菌后封装。
2.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述壳聚糖从南极磷虾的提取方法包括如下步骤: 步骤一:取南极磷虾壳浸没至强碱溶液中煮沸I小时，然后水洗至中性，固液分离后获得第一滤渣； 步骤二:将所述第一滤渣浸没至盐酸溶液中室温下浸泡I小时，然后水洗至中性，固液分离后获得第二滤渣； 步骤三:以所述第二滤渣为反应原料，重复所述步骤一操作，获得第三滤渣； 步骤四:以所述第三滤渣为反应原料，重复所述步骤二操作，获得第四滤渣；真空干燥所述第四滤渣； 步骤五:将所述第四滤渣浸没至强碱溶液中， 110°C下加热回流I小时，然后水洗至中性，再进行固液分离； 重复所述步骤五一次，获得粗制壳聚糖；真空干燥所述粗制壳聚糖； 步骤六:将干燥后的粗制壳聚糖溶解1% (w/v)的醋酸溶液中形成混合体系；然后调节所述混合体系的PH值为8.5，将析出的固态产物固液分离后，再水洗后进行冷冻干燥，得到产物壳聚糖。
3.根据权利要求2所述止血粉的制备方法，其特征在于，所述步骤一中南极磷虾壳与所述强碱的质量比为5:3。
4.根据权利要求2所述止血粉的制备方法，其特征在于，所述步骤一中强碱溶液的浓度为lmol/L ;所述步骤二中盐酸溶液的浓度为2mol/L。
5.根据权利要求2所述止血粉的制备方法，其特征在于，所述步骤五中强碱溶液的质量浓度为50%。
6.根据权利要求2~4任一项所述止血粉的制备方法，其特征在于，所述强碱为NaOH或 Κ0Η。
7.根据权利要求1所述止血粉的制备方法，其特征在于，所述抗菌药物包括硝基呋喃类化合物或硝基咪唑类化合物中的一种或多种。
8.—种止血粉，其特征在于，包括从南极磷虾中提取的壳聚糖以及抗菌药物，所述壳聚糖和抗菌药物的质量比为2~4:1。
9.根据权利要求7所述止血粉，其特征在于，所述抗菌药物包括硝基呋喃类化合物或硝基咪唑类化合物中的一种或多种。
【文档编号】A61P31/04GK103690956SQ201310750493
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月31日 优先权日:2013年12月31日
【发明者】赵晓丽, 吴帅, 黄卓瑶, 潘浩波 申请人:深圳先进技术研究院