一种卡巴克络止血缓释微球的制备方法
【专利摘要】本发明提供一种卡巴克络止血缓释微球的制备方法，包括如下步骤：将卡巴克络溶于灭菌注射用水中作为内水相备用；将PLGA溶于二氯甲烷中作为油相备用；制备浓度为1％的聚乙烯醇水溶液作为外水相备用；将内水相逐滴滴入油相中，之后采用超声乳化30分钟形成初乳；待初乳稳定后，将初乳滴入外水相中，进行磁力搅拌处理4小时；将上述产品在4-7℃冷藏保存；之后冷冻干燥；收集微球。本发明的卡巴克络止血缓释微球的制备方法提供了一种新的卡巴克络的剂型，制备得到的卡巴克络止血缓释微球在出血处能够长时间稳定的释放，可使卡巴克络在出血部位保持高浓度并较长时间，而在体循环中药物浓度较低，可以大大提高疗效，降低毒副作用。
【专利说明】一种卡巴克络止血缓释微球的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物领域，尤其涉及一种卡巴克络止血缓释微球的制备方法。
【背景技术】
[0002]卡巴克络，俗称；安特诺新；肾上腺色素缩氨脲水杨酸钠；肾上腺色腙；卡巴克络，安络血。促凝血药。其主要用于毛细血管通透性增加所致的出血，如特发性紫癜、视网膜出血、慢性肺出血、 胃肠出血、鼻衄、咯血、血尿、痔出血、子宫出血、脑溢血等。对大量出血和动脉出血疗效较差。卡巴克络为肾上腺素氧化产物肾上腺色素的缩氨脲水杨酸钠盐，无拟肾上腺素作用，因此不影响血压和心率，但能增强毛细血管对损伤的抵抗力，稳定血管及其周围组织中的酸性黏多糖，降低毛细血管的通透性，增强受损毛细血管端的收缩作用，从而缩短止血时间。此外，卡巴克络也可抑制前列腺素El (PCEl)的合成和释放，从而降低毛细血管通透性，阻止致热物质渗出。
[0003]目前的卡巴克络仅有片剂和注射用卡巴克络两种剂型，因此提供一种新的剂型的卡巴克络是本领域技术人员需要解决的问题。
【发明内容】
[0004]为了克服上述的不足，本发明的目的是提供一种新的卡巴克络止血缓释微球的制备方法。
[0005]本发明的技术方案如下:
[0006]一种卡巴克络止血缓释微球的制备方法，包括如下步骤:
[0007]将卡巴克络溶于灭菌注射用水中作为内水相备用；
[0008]将PLGA溶于二氯甲烷中作为油相备用；
[0009]制备浓度为I %的聚乙烯醇水溶液作为外水相备用；
[0010]将内水相逐滴滴入油相中，之后采用超声乳化30分钟形成初乳；
[0011]待初乳稳定后，将初乳滴入外水相中，进行磁力搅拌处理4小时；
[0012]将上述产品在4-7°C冷藏保存；
[0013]之后冷冻干燥；
[0014]收集微球。
[0015]其中，所述PLGA在油相中的浓度为0.15~0.25g/ml。
[0016]其中，所述卡巴克络与所述PLGA的质量份数比为30~40: 100。
[0017]其中于，所述油相的pH为6.0~7.0。
[0018]其中，所述内水相、油相和外水相的体积比为0.2: 1.5: 10。
[0019]其中，所述制备过程均在室温、避光的条件下进行。
[0020]其中，所述内水相滴入所述油相中的滴加速度为lml/3~5s。
[0021]其中，所述初乳滴入所述外水相中的滴加速度为lml/3~5s。
[0022]其中，所述收集微球的方法是首先采用真空泵负压抽吸，然后采用双蒸水洗涤2次，最后在室温避光的条件下干燥，之后过筛即可得到成品微球。
[0023]本发明的有益效果是:本发明的卡巴克络止血缓释微球的制备方法提供了一种新的卡巴克络的剂型，制备得到的卡巴克络止血缓释微球在出血处能够长时间稳定的释放，可使卡巴克络在出血部位保持高浓度并较长时间，而在体循环中药物浓度较低，可以大大提高疗效，降低毒副作用。
【专利附图】
【附图说明】
[0024]为了使本发明的卡巴克络止血缓释微球的制备方法的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体附图及具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。
[0025]图1为本发明的卡巴克络止血缓释微球的制备方法制得的卡巴克络止血缓释微球的释放曲线图；
[0026]图2为本发明的卡巴克络止血缓释微球的制备方法制得的卡巴克络止血缓释微球的30倍的扫描电镜图；[0027]图3为本发明的卡巴克络止血缓释微球的制备方法制得的卡巴克络止血缓释微球的110倍的扫描电镜图。
【具体实施方式】
[0028]下面将结合实施例来详细说明本发明。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0029]一种卡巴克络止血缓释微球的制备方法，包括如下步骤:
[0030]SlOO:将卡巴克络溶于灭菌注射用水中作为内水相备用；
[0031]S200:将PLGA溶于二氯甲烷中作为油相备用；其中PLGA为(聚(乳酸_羟基乙酸)共聚物)；
[0032]S300:制备浓度为I %的聚乙烯醇水溶液作为外水相备用；
[0033]S400:将内水相逐滴滴入油相中，之后采用超声乳化30分钟形成初乳；
[0034]S500:待初乳稳定后，将初乳滴入外水相中，进行磁力搅拌处理4小时；
[0035]S600:将上述样品在4_7°C冷藏保存；
[0036]S700:冷冻干燥；
[0037]S800:收集微球。所述收集微球的方法是首先采用真空泵负压抽吸，然后采用双蒸水洗涤2次，最后在室温避光的条件下干燥，之后过筛即可得到成品微球。
[0038]应当注意的是，步骤S100、S200和S300可以不按上述顺序进行，即本发明对内水相、油相和外水相的制备顺序不做限制。
[0039]本实施例采用PLGA作为缓释微球制剂，PLGA具有良好的生物相容性、优良的可降解能力且无毒。
[0040]其中，所述PLGA在油相中的浓度为0.15~0.25g/ml。
[0041]其中，所述卡巴克络与所述PLGA的质量份数比为为30~40: 100。
[0042]其中，所述油相的pH为6.0~7.0。
[0043]其中，所述内水相、油相和外水相的体积比为0.2: 1.5: 10。
[0044]其中，所述制备过程均在室温、避光的条件下进行。[0045]其中，所述内水相滴入所述油相中的滴加速度为lml/3~5s。
[0046]其中，所述初乳滴入所述外水相中的滴加速度为lml/3~5s。
[0047]实施例一
[0048]原料:卡巴克络粉剂(北京双鹭生物制药有限公司);聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物(PLGA，75/25，粘度:1.0dl/g);聚乙烯醇(PVA，纯度:96 %~98 %，水解度:98%,?合度:1750±50);灭菌注射用水；二氯甲烷等试剂均为分析纯；设备包括UV-2550型紫外分光光度计；DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱；电热恒温水浴箱；梅特勒电子天平；万分之一电光天平；投射电子显微镜；78-1型磁力加热搅拌器；Freezone6型真空冷冻干燥机；SHA-CA型水浴恒温振荡器。以下实施例相同。
[0049]具体制备步骤为:
[0050]SlOO:将卡巴克络0.12g溶于0.2ml灭菌注射用水中作为内水相(Wl)，
[0051]S200:PLGA0.33g溶于1.5ml 二氯甲烷中作为油相(O)；
[0052]S300 =IOml的1%的PVA水溶液作为外水相(W2)；
[0053]S400:将 内水相(Wl)逐滴滴入油相(O)中，超声乳化30min形成初乳(W1/0);本步骤中滴加速度为lml/3s。
[0054]S500:待初乳(W1/0)稳定后，将初乳(W1/0)滴入I %浓度的PVA水溶液中(W2)中，在78-1型磁力加热搅拌器上磁力搅拌挥发4h,磁力搅拌器的速率为500~550r/min ；本步骤中滴加速度为lml/5s。
[0055]S600:将得到的样品在4_7°C的温度下冷冻干燥24h ;本步骤中使用的设备为Freezone6型真空冷冻干燥机；
[0056]S700:采用真空泵负压抽吸,然后采用双蒸水洗漆2次,最后在室温避光的条件下干燥，之后过筛即可得到成品微球。
[0057]制备得到的卡巴克络止血缓释微球的形态与粒径:参见图2和图3，经扫描电镜观察，卡巴克络-PLGA微球表面光滑无孔隙，球形好；形态及粒径大小较均匀。微球粒径为500-750 μ mD
[0058]制备得到的卡巴克络止血缓释微球的载药量:4.94%。
[0059]制备得到的卡巴克络止血缓释微球的包封率:68.1 %。
[0060]制备得到的卡巴克络止血缓释微球的二氯甲烷残留量检测结果:1.09%。
[0061]制备得到的卡巴克络止血缓释微球的体外缓释时间见图1。通过图1可以看出，本发明制备的卡巴克络止血缓释微球在使用过程中缓慢释放，能产生持续长时间的缓释作用，在960h时累计释放85 %，具有显著的缓释作用。
[0062]实施例二
[0063]具体制备步骤为:
[0064]SlOO:将卡巴克络0.09g溶于0.2ml灭菌注射用水中作为内水相(Wl)，
[0065]S200:PLGA0.225g溶于L 5ml 二氯甲烷中作为油相(O)；
[0066]S300: IOml的I %的PVA水溶液作为外水相(W2)；
[0067]S400:将内水相(Wl)逐滴滴入油相(O)中，超声乳化30min形成初乳(W1/0);本步骤中滴加速度为lml/5s。
[0068]S500:待初乳(W1/0)稳定后，将初乳(W1/0)滴入I %浓度的PVA水溶液中(W2)中，在78-1型磁力加热搅拌器上磁力搅拌挥发4h,磁力搅拌器的速率为500~550r/min ；本步骤中滴加速度为lml/3s。
[0069]S600:将得到的样品在4_7°C的温度下冷冻干燥24h ;本步骤中使用的设备为Freezone6型真空冷冻干燥机；
[0070]S700:采用真空泵负压抽吸，然后采用双蒸水洗涤2次，最后在室温避光的条件下干燥，之后过筛即可得到成品微球。 [0071]本实施例得到的卡巴克络止血微球外观形态与实施例一相同。
[0072]实施例三
[0073]具体制备步骤为:
[0074]SlOO:将卡巴克络0.1125g溶于0.2ml灭菌注射用水中作为内水相(Wl)，
[0075]S200:PLGA0.375g溶于L 5ml 二氯甲烷中作为油相(O)；
[0076]S300 =IOml的1%的PVA水溶液作为外水相(W2)；
[0077]S400:将内水相(Wl)逐滴滴入油相(O)中，超声乳化30min形成初乳(W1/0);本步骤中滴加速度为lml/5s。
[0078]S500:待初乳(W1/0)稳定后，将初乳(W1/0)滴入I %浓度的PVA水溶液中(W2)中，在78-1型磁力加热搅拌器上磁力搅拌挥发4h,磁力搅拌器的速率为500~550r/min ；本步骤中滴加速度为lml/3s。
[0079]S600:将得到的样品在4_7°C的温度下冷冻干燥24h ;本步骤中使用的设备为Freezone6型真空冷冻干燥机；
[0080]S700:采用真空泵负压抽吸，然后采用双蒸水洗涤2次，最后在室温避光的条件下干燥，之后过筛即可得到成品微球。
[0081]本实施例得到的卡巴克络止血微球外观形态与实施例一相同。
[0082]以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以权利要求为准。
【权利要求】
1.一种卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: 将卡巴克络溶于灭菌注射用水中作为内水相备用； 将PLGA溶于二氯甲烷中作为油相备用； 制备浓度为I%的聚乙烯醇水溶液作为外水相备用； 将内水相逐滴滴入油相中，之后采用超声乳化30分钟形成初乳； 待初乳稳定后，将初乳滴入外水相中，进行磁力搅拌处理4小时； 将上述产品在4-7°C冷藏保存； 之后冷冻干燥； 收集微球。
2.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述PLGA在油相中的浓度为0.15~0.25g/ml。
3.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述卡巴克络与所述PLGA的质量份数比为30~40: 100。
4.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述油相的pH为6.0~7.0。
5.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述内水相、油相和外水相的体积比为0.2: 1.5: 10。
6.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述制备过程均在室温、避光的条件下进行。
7.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述内水相滴入所述油相中的滴加速度为lml/3~5s。
8.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述初乳滴入所述外水相中的滴加速度为lml/3~5s。
9.根据权利要求1所述的卡巴克络止血缓释微球的制备方法，其特征在于，所述收集微球的方法是首先采用真空泵负压抽吸，然后采用双蒸水洗涤2次，最后在室温避光的条件下干燥，之后过筛即可得到成品微球。
【文档编号】A61K9/16GK103932991SQ201410121301
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年3月28日 优先权日:2014年3月28日
【发明者】王茂强, 段峰, 常中飞, 刘凤永, 宋鹏 申请人:中国人民解放军总医院