一种长链脂肪乳注射用药物组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种改善了稳定性的长链脂肪乳注射用药物组合物及其制备方法。该组合物含注射用大豆油、注射用中链甘油三酸酯、注射用卵磷脂、注射用甘油、注射用-亚麻酸和注射用水。其制备方法包括油相制备、水相制备、初乳制备、均质匀化、滤膜过滤、灌装和灭菌等步骤。本发明在制备长链脂肪乳注射用药物组合物过程中通过加入辅助乳化剂-亚麻酸并优化制备工艺，增强了体系的乳化能力，减小了乳粒粒径且粒径稳定，从而克服了乳液出现漂油、乳粒变大等现有技术缺陷；而且减少了均化次数，提高了生产产能，降低了产品甲氧基苯胺值，提高了组合物的稳定性和安全性。
【专利说明】一种长链脂肪乳注射用药物组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明是属于药物制剂领域，具体涉及一种长链脂肪乳注射用药物组合物及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 脂肪乳是肠外营养中的主要成分之一。静脉输注脂肪乳主要有两方面的作用：提 供必需脂肪酸和作为机体能量来源。1961年，瑞典科学家Wretlind等成功使用大豆油、卵 磷脂和甘油等物质首次制成脂肪乳剂，并且应用于临床静脉输注，取得满意效果。随后在英 国、法国、德国、日本和美国等国家相继有同类产品问世，相当数量的临床研究显示脂肪乳 剂有很好的有效性和安全性。在国内，于80年代末期开始研制和生产脂肪乳剂，经过近20 余年的临床应用，证实其性能与进口产品相似。
[0003] 脂肪乳进人血循环后，乳剂颗粒与血浆脂蛋白相互作用，获得载脂蛋白C II和载 脂蛋白E ;然后在血管内皮细胞上脂蛋白脂肪酶（LPL)的作用下发生水解，释放出游离脂肪 酸（FFA)，其残骸由肝脏经低密度脂蛋白受体（LDI - R)和LDI - R相关蛋白（LRP)等途径 清除。FFA被组织细胞摄取，参与细胞膜等结构组成以及机体多种代谢。脂肪乳的代谢受多 种因素的调节和影响，主要包括其自身颗粒大小及其组成成分以及机体的状态（膳食、疾 病等）。脂肪乳颗粒直径越大，其血液清除越快。
[0004] 长链脂肪乳（long - chain triacylglycerol, LCT)为含12?18个碳原子的长链 甘油三酯，主要来源于大豆油和红花油，以卵磷脂为乳化剂，少量甘油调节渗透压。从1961 年Wretlind等研制成功，至今临床已安全使用超过40年，仍为目前最常用的脂肪乳注射 液。长链脂肪乳不仅能为机体提供能量，也提供了生物膜和生物活性物质所必需的不饱和 脂肪酸。
[0005] 由于来源于大豆油的长链脂肪乳能提供过量的多不饱和脂肪酸（PUFA)，致使脂 肪酸的构成出现异常，增加脂质过氧化，并造成二十碳类衍生物的生成失衡。为了克服这 一缺陷，人们又开发出以橄榄油为基础的另一种长链脂肪乳一橄榄油脂肪乳（Olive Oil Emulsion)，即长链脂肪乳（00)。
[0006] 长链脂肪乳（00)由80%的橄榄油和20%的大豆油构成，其脂肪酸构成为73%的 单不饱和脂肪酸、11%多不饱和脂肪酸和16%的饱和脂肪酸，添加大豆油的目的是弥补单 纯橄榄油所致的必需脂肪酸不足。
[0007] CN101797227A提供了一种长链脂肪乳注射液（C14?C24)及其制备方法。其脂 肪乳注射液由活性成份注射用大豆油、乳化剂、等渗调节剂、金属离子螯合剂及注射用水所 组成。制备方法是在惰性气体环境下，向加热的注射用大豆油中加入乳化剂、辅助乳化剂， 高速搅拌均匀作为油相；将等渗调节剂、金属离子螯合剂加入适量的注射用水中混匀后过 滤成水相；在高速搅拌下，将油相和水相混合并继续高速搅拌成初乳，并调节初乳的pH至 9. 0?10. 0,加注射用水至IOOOmL,混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，过滤后，灌装、通 氮、加塞、乳盖、灭菌、冷却后即得。
[0008] 但是，现有长链脂肪乳注射液的稳定性欠佳，在加热灭菌和保存过程中会随着温 度的变化和时间的推移出现大油脂颗粒。另一方面，各种输液药剂通常都会混合使用，将长 链脂肪乳注射液与其他注射液混合后也容易发生乳剂被破坏、油脂颗粒变大、相分离等各 种问题。因此，对现有长链脂肪乳注射液的稳定性进行改善已成为刻不容缓的问题。
[0009] 目前的制备工艺均质次数多，药液乳粒较大，药液中对人体有害的甲氧基苯胺含 量较高，生产周期较长，能耗大，影响产量、产能的发挥。其中，药液乳粒大小、分布以及乳粒 稳定是影响稳定性的重要原因。
【发明内容】
[0010] 鉴于上述情况，本发明人为了提供一种改善了稳定性的长链脂肪乳注射用药物组 合物及其制备方法，进行了各种尝试，最后发现可通过在油相中加入α -亚麻酸，在生产过 程中调整温度、时间以及均质条件，则可以增强乳化能力，减小乳粒粒径，提高乳粒稳定性， 降低甲氧基苯胺值，减少均化次数，提高生产产能。
[0011] 本发明提供一种长链脂肪乳注射用药物组合物，它包含注射用橄榄油、注射用大 豆油、注射用卵磷脂、注射用甘油、油酸钠和注射用水。
[0012] 本发明提供的药物组合物，还包含辅助乳化剂。
[0013] 本发明提供的药物组合物，包含辅助乳化剂α-亚麻酸。
[0014] 该长链脂肪乳注射用药物组合物中各组分的含量是：注射用橄榄油100?200克 /升，注射用大豆油20?50克/升，注射用卵磷脂10?16克/升，注射用甘油15?40克 /升，注射用α-亚麻酸〇. 12?0.4克/升，油酸钠0.2?0.5克/升，注射用水（补足至 全量）。
[0015] 进一步地，该组合物中各组份的含量是：注射用橄榄油160克/升，注射用大豆油 40克/升，注射用卵磷脂12克/升，注射用甘油22. 5克/升，注射用α -亚麻酸〇. 16克/ 升，油酸钠〇. 3克/升，注射用水（补足至全量）。
[0016] 本发明还提供这种长链脂肪乳注射用药物组合物的制备方法，具体如下：
[0017] (1)在氮气保护下，称取处方量橄榄油和大豆油，搅拌混合均匀，经0. 22 μ m聚丙 烯滤芯过滤后加热至60?80°C，加入卵磷脂和α -亚麻酸，快速搅拌至均匀分散，制备得油 相；
[0018] (2)另取注射用水加入处方量甘油混匀并经0. 22 μ m聚醚砜滤芯过滤，按处方量 加入油酸钠并搅拌至全部溶解，再用lmol/L氢氧化钠溶液调节pH值至约10. 0?11. 0,制 备成甘油水溶液（水相），温度维持在60?70°C ;
[0019] (3)在氮气保护及快速搅拌下，将步骤（1)所得油相缓慢加入步骤（2)制备的甘油 水溶液（水相）中，混合均匀形成初乳，温度维持在50?60°C ;
[0020] (4)将制备的初乳用均质机均质，先经160bar低压均质一次，再经600bar高压均 质4?6次，每次均质温度控制在45?55°C ;
[0021] (5)检验合格后，乳液经3 μ m聚丙烯折叠式滤芯过滤，灌装于输液瓶中，通入氮 气，加丁基胶塞，乳盖密封，置旋转式灭菌器中，117°C灭菌30min，即得。
[0022] 发明人研究发现，当α-亚麻酸用量小于0. 12g/L时，乳液出现轻微的漂油，乳粒 有变大趋势；当α -亚麻酸用量> 〇. 16g/L时，可获得足够稳定的乳粒。
[0023] 由于长链脂肪乳注射液（00)的初乳制备温度与产品的质量和稳定性有密切的关 系，因此，本发明通过将初乳液温度控制在50?60°C，保证了不对成品的pH值、酸值、过氧 化值、溶血磷脂造成不良影响，且如此获得的产品经光照与60°C放置10天后，各项指标均 符合质量标准。
[0024] 本发明中用均质机对初乳液进行均质的优选条件为，先经160bar低压均质一次， 再经600bar高压均质4?6次，每次均质温度控制在45?55°C。长链脂肪乳注射液（00) 的乳粒大小及分布与产品在贮存期的稳定性有着密切的关系，而高压均质次数是决定乳粒 大小和分布的关键因素之一，本发明的方法通过选择适当的均质压力和均质方式，获取了 所需的乳粒大小及分布，改善了生产工艺，克服了目前的制备工艺中存在的均质次数多、药 液乳粒较大、药液中对人体有害的甲氧苯胺含量较高、生产周期较长、能耗大、产量及产能 发挥不佳等诸多问题，同时也使产品的稳定性和安全性得到了提高。
[0025] 本发明产品涉及相关质量指标的检测方法如下：
[0026] 1.乳粒粒径测定
[0027] 取本品，用激光散射粒度仪测定（中国药典2010年版二部附录IX E第三法）。质 控标准：平均粒径不得大于0. 5μ--，90%的粒径应在Ιμ--以下，且不得检出大于5μπ?的乳 粒。
[0028] 2.酸值测定
[0029] 照中国药典2010年版二部附录W H的方法测定。质控标准：应不大于1. 0。
[0030] 3.过氧化值测定
[0031] 取冰醋酸一氯仿（6:4)混合液60ml，置250ml碘瓶中，通氮气10分钟，密塞。精 密量取本品5ml，迅速加入瓶中，轻轻振摇，加碘化钾饱和溶液0. 5ml，密塞，振摇1分钟，力口 新沸过的冷水IOOml与淀粉指示液2ml，用硫代硫酸钠滴定液（0.01mol/L)滴定至紫蓝色 消失，并将滴定的结果用空白试验校正。消耗的硫代硫酸钠滴定液（0.01m 〇l/L)不得过 I. Oml0
[0032] 4.甲氧基苯胺值测定
[0033] 精密量取本品10mL，置250ml圆底烧瓶中，加入无水乙醇20mL，于60°C水浴真空旋 转蒸发除去水分。自"加入无水乙醇20mL"起，依法重复操作三次除尽水分。残渣加20% 异丙醇的异辛烷溶液溶解并移至25mL量瓶中，加上述溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤 液作为供试品溶液。取供试品溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010版二部附录 IV A)，在350nm的波长处，以20%异丙醇的异辛烷溶液作空白，测得吸光度为A。。
[0034] 精密量取供试品溶液5ml置具塞试管中，再精密加入0. 25% 4-甲氧基苯胺的冰醋 酸溶液（临用新配）lmL，加塞，振摇，避光放置10?30分钟（不超过30分钟）；另精密量 取20%异丙醇的异辛烷溶液5ml代替供试品溶液，同法操作，制成试剂空白溶液。以试剂空 白溶液作空白，在350nm处测得的吸光度为A。按下式计算：
[0035] 甲氧基苯胺值=25X (I. 2XA - AtlV(VXB)
[0036] 式中V为供试品的取样量，mL ;B为供试品中油的标示量，g/mL ;1. 2为加入4-甲 氧基苯胺的冰醋酸溶液后的溶液稀释因子。质控指标：甲氧基苯胺值应不大于5。
【具体实施方式】
[0037] 下面将通过实施例对本发明作进一步的描述，这些描述并不是对本
【发明内容】
作进 一步的限定。本领域的技术人员应理解，对本
【发明内容】
所作的等同替换，或相应的改进，仍 属于本发明的保护范围之内。
[0038] 实施例1长链脂肪乳注射用药物组合物的制备
[0039] 处方：注射用橄榄油160克，注射用大豆油40克，注射用卵磷脂12克，注射用甘油 22. 5克，注射用α -亚麻酸〇. 16克，油酸钠0. 3克，注射用水按补足最终体积IL的全量加 入。
[0040] 制备方法：在氮气保护下，称取处方量橄榄油和大豆油，搅拌混合均匀，经 0. 22 μ m聚丙烯滤芯过滤后加热至60?80°C，加入卵磷脂和α -亚麻酸，快速搅拌至均匀 分散，制备得油相；另取注射用水加入处方量甘油混匀并经〇. 22 μ m聚醚砜滤芯过滤，按 处方量加入油酸钠并搅拌至全部溶解，再用lmol/L氢氧化钠溶液调节pH值至约10. 0? 11. 0,制备成甘油水溶液（水相），温度维持在60?70°C ;在氮气保护及快速搅拌下，将上 述油相缓慢加入到制备好的水相中，混合均匀形成初乳，温度维持在50?60°C ;然后将制 备的初乳用均质机均质，先经160bar低压均质一次，再经600bar高压均质4?6次，每次 均质温度控制在45?55°C ;最后，将均质后乳液经3 μ m聚丙烯折叠式滤芯过滤，灌装于输 液瓶中，通入氮气，加丁基胶塞，乳盖密封，置旋转式灭菌器中，117°C灭菌30min，即得。
[0041] 实施例2长链脂肪乳注射用药物组合物的制备
[0042] 处方：注射用橄榄油130克，注射用大豆油35克，注射用卵磷脂10. 5克，注射用甘 油18克，注射用α -亚麻酸〇. 13克，油酸钠0. 25克，注射用水按补足最终体积IL的全量 加入。
[0043] 制备方法：按实施例1的步骤进行。
[0044] 实施例3长链脂肪乳注射用药物组合物的制备
[0045] 处方：注射用橄榄油110克，注射用大豆油28克，注射用卵磷脂10. 5克，注射用甘 油16克，注射用α -亚麻酸〇. 13克，油酸钠0. 25克，注射用水按补足最终体积IL的全量 加入。
[0046] 制备方法：按实施例1的步骤进行。
[0047] 实施例4长链脂肪乳注射用药物组合物的制备
[0048] 处方：注射用橄榄油180克，注射用大豆油40克，注射用卵磷脂15克，注射用甘油 38克，注射用α -亚麻酸〇. 32克，油酸钠0. 4克，注射用水按补足最终体积IL的全量加入。 [0049] 制备方法：按实施例1的步骤进行。
[0050] 实施例5长链脂肪乳注射用药物组合物的制备
[0051] 处方：注射用橄榄油100克,注射用大豆油20克，注射用卵磷脂10克，注射用甘油 15克，注射用α -亚麻酸〇. 12克，油酸钠0. 2克，注射用水按补足最终体积IL的全量加入。
[0052] 制备方法：按实施例1的步骤进行。
[0053] 实施例6长链脂肪乳注射用药物组合物的制备
[0054] 处方：注射用橄榄油200克，注射用大豆油50克，注射用卵磷脂16克，注射用甘油 40克，注射用α -亚麻酸〇. 4克，油酸钠0. 5克，注射用水按补足最终体积IL的全量加入。
[0055] 制备方法：按实施例1的步骤进行。
[0056] 试验例
[0057] 试验例1不同α-亚麻酸用量对乳粒稳定性的影响
[0058] 以乳液pH值、乳粒粒径、外观（漂油）为评价指标（α -亚麻酸作为辅助乳化剂，主 要起到稳定乳粒、增强磷脂乳化效果，同时考虑到添加 α -亚麻酸可能会对乳液PH值产生 影响，因此选择了这几个评价指标），分别加入不同用量的α -亚麻酸为助乳化剂，按本发 明制备工艺配制脂肪乳注射液，将所得样品分别在光照（4500±5001χ)和60°C条件下放置 10天，考察各项指标的变化。结果表明：所配制样品经光照或60°C加速10天后，当α-亚麻 酸用量<0. 12g/L时，乳液出现轻微的漂油，乳粒有变大趋势；当α-亚麻酸用量>〇. 16g/ L时，可获得足够稳定的乳粒，因此选取0. 12?0.4g/L的α-亚麻酸加量比较合适；经60°C 放置10天后，所有处方的pH值均没有明显的下降，说明加入适量的α-亚麻酸不会明显 地影响乳液的PH值；按上述处方配制的样品经生物学检测，其异常毒性和过敏、溶血、局部 刺激等试验均符合标准要求，经化学检测，其含量、pH、游离脂肪酸、细菌内毒素等指标均合 格。
[0059] 试验例2不同初乳温度对乳剂稳定性的影响
[0060] 考察了不同初乳温度（50、60、70°C )对注射乳剂稳定性的影响，结果表明，不同初 乳制备温度对成品的PH值、酸值、过氧化值、溶血磷脂影响不大，经光照与60°C放置10天 后，各项指标均符合质量标准。结合生产实际，初乳的制备温度定为50?60°C。
[0061] 试验例3不同均质压力与次数对样品的pH值及乳粒的影响
[0062] 长链脂肪乳注射用药物组合物的乳粒大小及分布与产品在贮存期的稳定性有着 密切的关系，而高压均质次数是决定乳粒大小和分布的关键因素之一，因此，我们按实施例 1的处方和主要制备步骤，考察了不同均质压力（低压160bar，高压500、600、700bar)对乳 剂pH值、外观（漂油）、乳粒粒径及分布。结果表明，要达到相同的粒径分布，均质压力越 低所需循环次数越多，采用均质压力（500bar)时，需要循环6次以上，才无漂油，且检测不 到大于1 μ m的粒子；经高压（600bar或700bar)制成初乳后经1?2次均质，乳粒大小和 分布已基本符合要求（平均粒径为300nm左右），但液面有漂油现象，需经高压均质3次或 以上，漂油才会消失；选用高压600bar匀化4?6次，其制备的成品乳粒可满足质量标准要 求。
[0063] 试验例4本发明产品与现有技术产品甲氧基苯胺值的比较
[0064] 在本发明实施例1处方中，去掉α-亚麻酸，其余组份均保持不变，按背景 技术制备样品，同本发明实施例1样品以及市售品（批号：12Ι05Ν30) -起，进行光照 (45001^±5001^)、高温高湿（601：，湿度75%±5%)和中低温交替试验（2?81：放置2 天、40°C放置2天；交替重复3次）等影响因素试验，分别测定甲氧基苯胺值，结果见下表1。 [0065] 表1本发明产品与现有技术产品甲氧基苯胺值的比较
[0066]
【权利要求】
1. 一种长链脂肪乳注射用药物组合物，其特征在于：它包含注射用橄榄油、注射用大 豆油、注射用卵磷脂、注射用甘油、油酸钠和注射用水。
2. 如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它还包含辅助乳化剂。
3. 如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于：所述辅助乳化剂为注射用 0L.-亚麻酸。
4. 如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于其中各组份含量为：注射用橄榄油 100?200克/升，注射用大豆油20?50克/升，注射用卵磷脂10?16克/升，注射用甘 油15?40克/升，注射用α -亚麻酸0. 12?0.4克/升，油酸钠0.2?0.5克/升，注射 用水(补足至全量)。
5. 如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于其中各组份含量为：注射用橄榄油160 克/升，注射用大豆油40克/升，注射用卵磷脂12克/升，注射用甘油22. 5克/升，注射 用tt -亚麻酸0. 16克/升，油酸钠0. 3克/升，注射用水(补足至全量)。
6. 权利要求1?5任一所述的长链脂肪乳注射用药物组合物的制备方法，其特征在于 包括以下步骤： (1) 在氮气保护下，称取处方量橄榄油和大豆油，搅拌混合均匀，经0. 22 μ?聚丙烯滤 芯过滤后加热至60?80°C，加入卵磷脂和-亚麻酸，快速搅拌至均匀分散，制备得油相； (2) 另取注射用水加入处方量甘油混匀并经0. 22 km聚醚砜滤芯过滤，按处方量加入 油酸钠并搅拌至全部溶解，再用lmol/L氢氧化钠溶液调节pH值至约10. 0?11. 0,制备成 甘油水溶液(水相)，温度维持在60?70°C ; (3 )在氮气保护及快速搅拌下，将步骤（1)所得油相缓慢加入步骤（2 )制备的甘油水溶 液(水相）中，混合均匀形成初乳，温度维持在50?60°C ; (4)将制备的初乳用均质机均质，先经160bar低压均质一次，再经600bar高压均质 4?6次，每次均质温度控制在45?55°C ; (5 )检验合格后，乳液经3 μη聚丙烯折叠式滤芯过滤，灌装于输液瓶中，通入氮气，力口 丁基胶塞，乳盖密封，置旋转式灭菌器中，117°C灭菌30min，即得。
【文档编号】A61K47/12GK104288210SQ201410483846
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年9月22日 优先权日:2014年9月22日
【发明者】陶建林, 余悦东, 冯卫, 左玲玲 申请人:辽宁海思科制药有限公司