本发明属于兽用生物制品领域,尤其是一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物及其制备方法。
背景技术:
鸡球虫病是一种全球性的原虫病,是对养殖业危害最严重的疾病之一,发病率高达50%-70%,死亡率为20-30%,严重者高达80%。目前应用药物防治外就是用球虫疫苗防控,用抗球虫药物治疗疾病给食品带来的药物残留问题,使肉鸡出口得到困扰,抗球虫药物的生产也是给环保带来很大的困难,导致环境污染;近几年来我国部分地区及各大养殖集团使用抗球虫疫苗,经济实用,利于环保,但是根据球虫生物学特点,球虫要经过体外的孢子生殖过程,必须形成子孢子才具备感染力,才能做成疫苗给健康鸡群进行免疫;而在形成子孢子的过程中,球虫卵囊需要温度、湿度、氧气、能量等条件来完成,目前用的是2.5%重铬酸钾溶液、盐酸聚六亚基胍溶液、氯胺t和氯胺b溶液作为孢子化培养液,但是孢子化率都不高或者孢子化时间过长,所以研制一种能增加球虫卵囊孢子化率的组合物是当务之急。即降低成本,又能提高球虫疫苗生产量。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物,本发明配方组成科学合理,工艺简单,使用方便,成本较低,通过钾、钠离子平衡保持卵囊的完整性;葡萄糖补充卵囊因孢子化过程中减数分裂消耗大量的能量和氧气;氨基酸能加速子孢子与残体的脱离;酵母细胞壁甘露聚糖维持卵囊壁的完整性减少卵囊在振荡器中破裂。
本发明的另一个目的在于提供一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物的制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物,其组合物的组分及其重量%数比为:
而且,该组合物组分及其最优重量%数比分别为:
一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物的制备方法,其制备方法的步骤为:
⑴按照重量配比分别称取葡萄糖、氨基酸、氯化钠、氯化钾、酵母细胞壁甘露聚糖进行粉碎并过200目筛;
⑵将过筛后的葡萄糖、氨基酸、氯化钠、氯化钾、酵母细胞壁甘露聚糖分别放入混合干燥箱中60度减压干燥1小时;
⑶将干燥后的葡萄糖、氨基酸、氯化钠、氯化钾、酵母细胞壁甘露聚糖混合后放入混料罐里,均匀混合25分钟,即得到一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物成品。
本发明的优点及有益效果是:
1.本发明配方组成科学合理,工艺简单,使用方便,成本较低,能够有效提高球虫卵囊孢子化率,提高孢子化卵囊的活力,降低成本,增加疫苗的生产量。
2.本发明通过钾、钠离子平衡保持卵囊的完整性;葡萄糖补充卵囊因孢子化过程中减数分裂消耗大量的能量和氧气;
3.本发明中的氨基酸能加速子孢子与残体的脱离;酵母细胞壁甘露聚糖维持卵囊壁的完整性减少卵囊在振荡器中破裂。
具体实施方式
本发明通过以下实施例进一步详述。需要说明的是:下述实施例是说明性的,不是限定性的,不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
本发明组分中的葡萄糖、氨基酸、氯化钠、氯化钾、酵母细胞壁甘露聚糖均可以在市场上购买得到。
实施例1
一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物,其组合物的组分及其重量分别为:葡萄糖30kg、氨基酸40kg、氯化钠10kg、氯化钾10kg、酵母细胞壁甘露聚糖30kg。
一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物的制备方法,其制备方法的步骤为:
⑴按照重量配比分别称取葡萄糖、氨基酸、氯化钠、氯化钾、酵母细胞壁甘露聚糖进行粉碎并过200目筛;
⑵将过筛后的葡萄糖、氨基酸、氯化钠、氯化钾、酵母细胞壁甘露聚糖分别放入混合干燥箱中60度减压干燥1小时;
⑶将干燥后的葡萄糖、氨基酸、氯化钠、氯化钾、酵母细胞壁甘露聚糖混合后放入混料罐里,均匀混合25分钟,即得到一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物成品。
实施例2
一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物,其组合物的组分及其重量分别为:葡萄糖30kg、氨基酸30kg、氯化钠5kg、氯化钾5kg、酵母细胞壁甘露聚糖30kg。
其制备方法的步骤同实施例1。
实施例3
一种提高球虫卵囊孢子化率的组合物,其组合物的组分及其重量分别为:葡萄糖10kg、氨基酸10kg、氯化钠5kg、氯化钾5kg、酵母细胞壁甘露聚糖10kg。
其制备方法的步骤同实施例1。
临床应用
试验说明:
表1数据说明:从含有球虫卵囊的鸡盲肠中分离新鲜柔嫩艾美尔球虫卵囊、毒害艾美尔球虫、粪便中收取的巨型艾美尔球虫,分别加入2.5%重铬酸钾溶液、1%盐酸聚六亚基胍溶液、1%氯胺t溶液中,浓度分别为50000万/ml置于三角培养瓶中,使培养液深度不超过1cm,用四层纱布盖紧瓶口。放入恒温旋转振荡器中28.5℃、转速为100r/min进行孢子化,在18h、24h、48h、72h查看孢子化率。
表1未使用本发明组合物组
表2数据说明:
从含有球虫卵囊的鸡盲肠中分离新鲜柔嫩艾美尔球虫卵囊、毒害艾美尔球虫、粪便中收取的巨型艾美尔球虫,分别加入2.5%重铬酸钾溶液、1%盐酸聚六亚基胍溶液、1%氯胺t溶液中,三组溶液中分别添加5%的本发明组合物,卵囊浓度分别为50000万/ml置于三角培养瓶中,使培养液深度不超过1cm,用四层纱布盖紧瓶口。放入恒温旋转振荡器中28.5℃、转速为100r/min进行孢子化,在18h、24h、48h、72h查看孢子化率。
表2使用本发明组合物组
结论:通过上述试验结论得出在以上三组培养液中添加本发明组合物不仅能使孢子化时间提前还能大大提高球虫卵囊的孢子化率。