细菌脂肪酶药物制剂的制作方法

技术领域

本发明涉及用于治疗胰腺功能不全(诸如粘稠物阻塞症或其它胰腺病)的药物制剂。特别是指一种涉及消化酶的液体药物制剂，其不具有包衣，且在胃和十二指肠的恶劣环境中是有活性的。此外，这些液体药物制剂在高温下稳定且可以储存。

背景技术：

有效酶的过度表达或缺少，经常导致代谢或胃肠病。例如，脂肪酶水平的失衡可以造成多种消化病，包括脂肪吸收障碍。对于患有粘稠物阻塞症、慢性胰腺炎和其它胰腺病的患者，会发生脂肪吸收障碍。脂肪吸收障碍的常见后果是腹痛、脂肪泻(脂肪性腹泻)、缺少必需的脂肪酸和脂溶性维生素(例如：A、D、E和K)和全面性发育障碍。

治疗脂肪酶缺乏病的常用方法是口服脂肪酶，大多数产品是基于已经脱脂、干燥和粉碎的猪胰腺。所述产品成分包括多种酶，例如：脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶、酯酶等。

普遍可得到的施用形式通常是用抗胃液的膜包被的片剂、微片剂、微糖衣丸、胶囊剂、散剂和颗粒。这些施用形式的缺点包括，由于患者需要吞咽较大的片剂或胶囊剂而造成患者的不适。特别是在患者不能吞咽片剂(诸如小孩)或需要人工喂药的情况下，这些施用形式的应用非常困难。片剂破碎后不能确保酶在食糜中均一分布，且产物的溶解度低可能导致饲管的阻塞。

在例如EP 0826375或US 2006/0128587中已经描述了消化酶的液体制剂。在这些专利申请中，通过使用添加剂或对酶进行修饰，使酶稳定化。但是，在两种情况下，必须在施用前制备新鲜的酶溶液，这不如制备好的液体制剂方便。此外，应当考虑添加剂对活性物质、有效性和安全性的影响。

现有的胰腺制剂的治疗具有多种缺点。脂肪酶被视作主要的酶。因为的脂肪酶特异性活性低，患者必须每天摄入多达5-10g的量。此外，猪脂肪酶在5-9的pH值范围是有活性的，因而在穿过胃的过程中无活性。

此外，因为脂肪酶对低pH值敏感，因此必须保护脂肪酶活性免受胃中的酸性pH条件影响，例如通过片剂的抗胃液包衣。在少数医学应用中，不希望同时具备的蛋白分解或淀粉分解酶活性。对于患有粘稠物阻塞症的儿童，不需要淀粉酶内容物，而脂肪酶是治疗必需的。对于患有急性胰腺炎或慢性胰腺炎活跃期的患者，蛋白酶是被禁忌的(参见US 5 645 832)。因而，脂肪酶作为单一蛋白的可用性是有利的。在US 5 645 832或US 5 489 530中，已经详细描述了从细菌得到的脂肪酶。除了使得可以得到纯化的单一蛋白以外，细菌脂肪酶的脂肪酶浓度也非常高，因此只需要施用较低的制剂量(约0.2g)。细菌脂肪酶的活性pH值位于3-9之间，因而克服了猪脂肪酶/胰酶的稳定性和活性的限制。这意味着，与市场上经常销售的用于治疗消化障碍的产品相比，应用细菌脂肪酶的脂肪分解作用可以在胃肠道中取得更好的效果。另外，细菌脂肪酶是非动物产品，其避免了可能存在的动物源性病毒感染的风险。

技术实现要素：

本发明提供了一种含有消化酶的液体药物制剂。所述制剂用于治疗患有胰腺功能不全，例如：粘稠物阻塞症或其它胰腺病，的患者。

令人惊奇地发下，没有包衣的脂肪酶在胃和十二指肠的恶劣环境中是有活性的，且所述酶在室温下在水溶液中能稳定几个月。另外，已经发现，细菌脂肪酶能减轻粘稠物阻塞症患者的脂肪泻。

本发明基于在细菌中生产的脂肪酶，且它的生产在US 5 645 832中有清楚的描述。

已经证实，脂肪酶用途是有效治疗患有胰腺炎或粘稠物阻塞症的患者。在排它性应用脂肪酶期间，已经观察到脂肪泻的减轻。没有其它的酶(诸如蛋白酶、淀粉酶或酯酶)存在(实施例1)。

纯的细菌脂肪酶可以具有超过35亿U/g的特异性活性。因为脂肪分解活高性，必须对患者进行较低量形式(即片剂数目或溶液体积)的施用。

本发明提供了脂肪酶作为液体药物制剂，以便克服治疗性消化酶的常见制剂(片剂)的限制特别是在患者不能吞咽片剂(诸如小孩)或需要人工喂药的情况下，常见的施用形式不能使用，或只能在有限程度上使用。

一种液体药物产品，为制备药物的方便剂型、酶在食物中的均一分布、和使用人工喂药提供了可能性。

可以证实，没有包衣的脂肪酶在摄入时在模仿胃的恶劣环境的pH条件下是有活性的(实施例2)。此外，已经证实，该细菌脂肪酶在水溶液中即时在高温下也能稳定至少3个月(实施例3)。不需要如在US 2006/0128587中所述的化学修饰。

本发明包括使用诸如下列的稳定剂的制剂：

-盐

-有机酸

-氨基酸

-去污剂

-糖

-油

-粘度调节剂。

对于液体制剂，所述物质可以为：溶液、溶液/滴剂；悬浮液、悬浮液滴剂。本发明是基于液体施用形式的优点，特指但不仅用于儿童。

液体施用形式可以如下制备：直接地生产脂肪酶的液体溶液，或通过将活性组分脂肪酶溶解在水性或非水性溶剂中，通过把药物悬浮在适当介质中，或通过把药物加入油/水系统的两相之一中。

诸如脂肪酶的溶液、悬浮液和乳剂等施用形式是有用的，有多种原因。它们可以为不同的施用途径而配制：口服药物，插入体腔或外用。可以通过稀释调节剂量，且可以使用例如点滴装置来施用单滴，。液体口服形式可以被容易地施用给不能吞咽片剂、胶囊剂或任何其它固体施用形式的儿童或患者。

脂肪酶溶液是均一混合物，其包括：水剂、芳香水剂、含水酸剂、溶液的药物形式。

脂肪酶悬浮液是指由固体脂肪酶分散在液体中所组成的两相系统。

附图说明

图1示出了用安慰剂或verum治疗期间在患者的粪便中的累积脂肪量。

图2示出了在低pH值(模仿胃中的pH值)条件下的脂肪酶活性。

图3示出了细菌脂肪酶在水溶液中的稳定性。

具体实施方式

实施例1：在用安慰剂或verum治疗期间在患者的粪便中的累积脂肪量(图1)

在粘稠物阻塞症患者的临床研究中，测试了细菌脂肪酶。如图1和下表(其指示患者在安慰剂和verum下的脂肪吸收系数(Coefficient of fat absorption，CFA))所示，在verum下的患者粪便的脂肪量以及脂肪吸收系数中看到显著差异。细菌脂肪酶显著改善了在消化过程中脂肪的再吸收。

实施例2：在低pH值(模仿胃中的pH值)条件下的脂肪酶活性(图2)

将细菌脂肪酶溶解并调节至1.0、2.0、3.0、4.0和5.0的pH值。在15分钟、30分钟和1小时、2小时、4小时和18小时后通过三丁酸甘油酯实验在实验pH值(8.0)下测试了脂肪酶活性。

已经发现，在吞咽时，患有粘稠物阻塞症的患者的胃中的pH值升高至pH4。细菌脂肪酶在这些环境下表现出足够的活性(图2)，而在pH 4下，猪脂肪酶(由胰酶制备)的活性在2小时后下降了85％，在4小时后下降了96％(图中未示出)。

实施例3：细菌脂肪酶在水溶液中的稳定性(图3)

将细菌脂肪酶溶解于水中，并在4℃、室温和40℃下培养。在1周、2周、3周、4周、5周、10周和14周后，测量了活性。没有观察到在该这段期间有显著的活性损失。

本发明包括实施例的描述、权利要求书和附图。