载有BMP的明胶‑海藻酸钙核壳结构缓释微球及其制备方法与流程

文档序号:11901427阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种载有BMP的明胶-海藻酸钙核壳结构缓释微球,其特征在于:所述核壳结构缓释微球由内到外依次包括内核层和外包覆层,所述内核层主要由均匀分散有骨形态发生蛋白的明胶微球组成,所述内核层外包覆的外包覆层主要由海藻酸钙组成。

2.根据权利要求1所述的载有BMP的明胶-海藻酸钙核壳结构缓释微球,其特征在于,该核壳结构缓释微球是表面光滑的球形体,且该核壳结构缓释微球的平均粒径为95-120μm;每毫克所述核壳结构缓释微球上骨形态发生蛋白的载药量为25-35微克。

3.一种如权利要求1或2所述的载有BMP的明胶-海藻酸钙核壳结构缓释微球的制备方法,包括以下步骤:

(11)先制备空白明胶微球,具体步骤包括:配置明胶溶液置于水浴中预热,将预热的明胶溶液逐滴滴加到液体石蜡中,边滴加边搅拌,滴加完后继续搅拌均匀,然后迅速转入冰水浴中进行处理,再加入交联剂交联,交联完成后用洗涤液进行洗涤,得到淡黄色微球;再置于低温环境下继续固化一段时间,最后用洗涤液再次充分洗涤,过筛,分装;

(12)将步骤(11)制备得到的空白明胶微球作为原料,并与海藻酸钠溶液混合制备明胶/海藻酸钠空白核-壳结构缓释微球;

(13)将步骤(12)制备得到的明胶/海藻酸钠空白核-壳结构缓释微球加入到骨形态发生蛋白的PBS缓冲溶液中,充分震荡后,得到载有BMP的明胶-海藻酸钙核壳结构缓释微球。

4.一种如权利要求1或2所述的载有BMP的明胶-海藻酸钙核壳结构缓释微球的制备方法,包括以下步骤:

(21)先制备载有BMP的明胶微球,具体步骤包括:配置明胶溶液置于水浴中预热,将预热的明胶溶液逐滴滴加到液体石蜡中,边滴加边搅拌,滴加完后继续搅拌均匀,然后迅速转入冰水浴中进行处理,再加入骨形态发生蛋白或者其PBS缓冲溶液,然后加入交联剂交联,交联完成后用洗涤液进行洗涤,得到淡黄色微球;再置于低温环境下继续固化一段时间,最后用洗涤液再次充分洗涤,过筛,分装;

(22)将步骤(21)制备得到的载有BMP的明胶微球作为原料,并与海藻酸钠溶液混合,制备得到载有BMP的明胶-海藻酸钙核壳结构缓释微球。

5.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,所述水浴中预热的温度控制在40℃-60℃,预热时间为7-15min;所述冰水浴的温度控制在5℃以下,冰水浴中进行处理的时间控制在15-25min。

6.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,所述明胶溶液的浓度为0.1-0.3g/ml,所述液体石蜡中含有1%-5%质量分数的斯潘80;所述交联剂为戊二醛,交联反应时间为1-3h;所述洗涤液为丙酮-水混合溶液,低温环境下继续固化的时间为12-36h。

7.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,与海藻酸钠溶液混合的具体操作步骤如下:

先配制海藻酸钠溶液作为水相待用;再配制含有斯潘80、吐温80的异辛烷溶液作为油相,在油相中加入所述空白明胶微球或载有BMP的明胶微球,搅拌均匀,置于水浴锅中预热,然后高速乳化,再将海藻酸钠溶液逐滴加入油相中,边滴加边搅拌,搅拌充分后,逐滴加入CaCl2溶液继续搅拌均匀,得到的微球用乙醇溶液充分洗涤,室温干燥,过筛,分装。

8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述海藻酸钠溶液的质量浓度为0.5%-2%;所述油相中含有1%-5%质量分数的斯潘80;所述油相中含有0.1%-0.5%质量分数的吐温80;所述水相、油相的体积比为1:1-1:6;所述CaCl2溶液的质量浓度为2%-8%。

9.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述水浴锅中预热的温度为35℃-60℃,预热时间为7-15min;所述高速乳化的时间控制在7-15min,加入所述CaCl2溶液后继续搅拌均匀的时间为30min-3h。

10.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,所述海藻酸钠的用量与所述空白明胶微球或载有BMP的明胶微球的质量比为5:1~15:1;所述骨形态发生蛋白的PBS缓冲溶液中骨形态发生蛋白浓度为100μg/ml-300μg/ml,加入微球的质量为50-100mg;所述骨形态发生蛋白与明胶、海藻酸钠的总质量之比为1:160-1:1000。

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