一种治疗阴道炎的凝胶剂及其制备方法与流程

本发明涉及中药提取技术领域，具体涉及一种治疗阴道炎的凝胶剂及其制备方法。

背景技术：

阴道炎常见于绝经后的老年妇女，因卵巢功能衰退，雌激素很多水平降低，阴道壁萎缩，粘膜变薄，上皮细胞内糖原含量减少，阴道内Ph值上升，局部抵抗力降低，致病菌父母容易入侵繁殖引起并且炎症。主要症状为阴道分泌物增多及外阴瘙痒、灼热感。检查见阴道呈老年性改变，上皮萎缩，皱襞消失，上皮变平滑、菲薄。阴道粘膜充血，有小出血点，有时见浅表溃疡。目前无特殊治疗方法，一般采用抗生素抑制细菌生长，或使用消毒剂及雌激素制剂，但抗生素长期使用会产生耐药性，雌激素制剂有可能产生致癌作用，市场急需一种行之有效、己被大多数人证实能治疗阴道炎中药。

技术实现要素：

发明目的：为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种治疗阴道炎的凝胶剂及其制备方法。

技术方案：本发明的目的是通过如下的方案实现的：

一种治疗阴道炎的凝胶剂，由下列原料药及辅料重量份配比提取制备而成：取金钗股20份、红三七18份、小鱼仙草15份、滇苦菜28份、白蜡树叶14份、文冠果20份、卡波姆1份、丙二醇20份、乙醇2份、氮酮2份、三乙醇胺3份、蒸馏水250份。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，制备方法为：取金钗股20份、红三七18份、小鱼仙草15份、滇苦菜28份、白蜡树叶14份、文冠果20份，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60℃相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分比达75％，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使用硅胶精制，预先将选定的硅胶装入树脂柱中，同时将所述浓缩液经纯化水稀释后，通过反相硅胶柱，去掉液体中的杂质，收集全部流出液，至出水无色止，所述硅胶比表面为300～500m2/g，孔容为0.70～0.90ml/g，继续浓缩，将浓缩液进行干燥；另取卡波姆加适量蒸馏水充分溶胀，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺调节pH值在4.5-5.5，搅拌均匀，加入中药提取后的干燥物，即得。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，上述制备方法中三次浓缩使用装置，包括罐体，设置在所述罐体上的进料口和设置在所述罐体底部的出料管，在所述出料管上设有出料阀门和过滤器，在所述罐体内设有搅拌轴，在所述搅拌轴上设有搅拌桨，在所述罐体的顶部设有与所述搅拌轴相连接的搅拌电机，在所述罐体内的底壁设有震动腔，在所述震动腔内设有震动板，在所述震动板与所述震动腔之间设有震动器，在所述罐体内的侧壁上设有凹腔，在所述震动板的顶面设有刮板，在所述刮板与所述凹腔之间设有伸缩气缸，所述刮板在所述伸缩气缸的作用下实现对震动板表面的刮擦，在所述震动板的中心设有与所述出料管相连通的出料口。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，上述制备方法中浓缩装置所述震动板与所述震动腔的连接处设有密封金属条，在所述罐体上设有与所述震动器相连接的震动控制器。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，上述制备方法中浓缩装置所述刮板的底部设有金属刮丝层，所述金属刮丝层抵压在所述震动板上，在所述罐体上设有与所述伸缩气缸相连接的伸缩控制按钮。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，上述制备方法中浓缩装置所述罐体内设有水份测试仪，在所述出料管内设有冷却器。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，上述制备方法中干燥使用装置，包括箱体，设置在所述箱体内的物料架和设置在所述箱体顶部的进风管和出风管，其特征在于：在所述箱体的侧壁内设有与所述进风管相连通的进风通道，在所述箱体的侧壁上设有与所述进风通道相连通的风孔，所述出风管穿过所述箱体的顶壁连通箱体内与箱体外部，在所述箱体的侧壁内还设有调温腔和灭菌腔，在所述调温腔内设有电加热块，所述进风通道穿过所述调节腔和灭菌腔设置，在所述箱体的底壁内设有旋转腔，在所述旋转腔内设有旋转电机，所述旋转电机的主轴与所述物料架相连接，在所述物料架内设有震动凹槽，在所述物料架的顶面设有盛放板，在所述盛放板与所述震动凹槽之间设有震动装置。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，上述制备方法中干燥使用装置所述震动装置包括驱动电机，设置在所述驱动电机主轴上的偏心轮，所述偏心轮的轮边抵压在所述盛放板的底面中心，在所述盛放板的底部与所述震动凹槽的底壁之间设有拉簧，所述拉簧以所述偏心轮为中心对称设置。

所述治疗阴道炎的凝胶剂，上述制备方法中干燥使用装置所述箱体内设有温度传感器，在所述箱体的侧壁内设有与所述温度传感器相连接的驱动器，所述驱动器与所述电加热块的控制端相连接，在所述箱体上还设有箱门。

所述治疗阴道炎的凝胶剂在制备抑制人纤维肉瘤HT-1080细胞增殖药物中的应用。

金钗股为兰科钗子兰属植物柱叶钗子兰Luisia teretifolia Gaudich.,以全草入药。清热解毒，截疟，催吐。用于扁桃体炎，咽喉炎，恶性疟疾，中耳炎，骨折。

红三七为蓼科植物支柱蓼的根茎。散血，止血，行气，调经。治跌打损伤，劳伤吐血，便血，崩漏，月经不调。

小鱼仙草，拉丁学名为Mosla dianthera(Buch.-Ham.ex Roxb.)Maxim.，是唇形科石荠宁属一年生草本植物。茎高至1米，呈四稜形。叶卵状披针形或菱伏披针形，总状花序生于主茎及分枝的顶部，小坚果灰褐色，近球形。花、果期在5-11月。以全草入药，夏秋采收，洗净，鲜用或晒干，具有多种医药价值。祛风发表，利湿止痒。用于感冒头痛，扁桃体炎，中暑，溃疡病，痢疾；外用治湿疹，痱子，皮肤瘙痒，疮疖，蜈蚣咬伤。取半阴干的全草烧烟可以熏蚊。本发明以全草入药。

滇苦菜为菊科苦苣菜属植物苦苣菜Sonchus oleraceus L.,以全草入药。清热解毒，凉血止血。用于肠炎，痢疾，急性黄疸型传染性肝炎，阑尾炎，乳腺炎，口腔炎，咽炎，扁桃体炎，吐血，衄血，咯血，便血，崩漏；外用治痈疮肿毒，中耳炎。

白蜡树叶为木犀种植物白蜡树的树叶，调经，止血生肌。

文冠果，拉丁名Xanthoceras sorbifolia Bunge，为无患子科植物文冠果的木材或枝叶，甘，平。祛风除湿。本发明以枝叶入药。

有益效果：本发明金钗股、白蜡树叶为君药，清热解毒，红三七、小鱼仙草为臣药，散血，止血，行气，调经，滇苦菜、文冠果为佐使药，凉血止血，全方治疗阴道炎效果明显。本发明中的浓缩设备结构简单、操作便捷，其设有震动板和震动器，而还设有刮板和与所述刮板相连接的伸缩气缸，可有效防止罐体底部结块，一定程度上可大大提高加热效率，有效解决了传统技术中药浓缩设备中容易出现底部结块而影响加热效率的技术不足，使用稳定性好且适用性强，药物的有效成分稳定不被破坏。本干燥设备结构简单、操作简单快捷，其采用箱体侧壁进行送风，并增设了电加热块，可以根据箱内的温度进行调节，从而保证了干燥温度的稳定性，而且设有旋转电机和震动装置，可以在加热的同时对盛放板进行旋转和震动，从而可防止药局部干燥，从而一定程度上可以提高干燥的效率，解决了传统技术的干燥装置干燥效率低的技术不足。并且发现治疗阴道炎的凝胶剂在制备抑制人纤维肉瘤HT-1080细胞增殖药物中的应用。

附图说明

为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中：

图1为本发明浓缩装置的结构示意图。

图2为本发明干燥装置的结构示意图。

具体实施方式

以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

取金钗股20份、红三七18份、小鱼仙草15份、滇苦菜28份、白蜡树叶14份、文冠果20份，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60℃相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分比达75％，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使用硅胶精制，预先将选定的硅胶装入树脂柱中，同时将所述浓缩液经纯化水稀释后，通过反相硅胶柱，去掉液体中的杂质，收集全部流出液，至出水无色止，所述硅胶比表面为300m2/g，孔容为0.90ml/g，继续浓缩，将浓缩液进行干燥；另取卡波姆加适量蒸馏水充分溶胀，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺调节pH值在4.5，搅拌均匀，加入中药提取后的干燥物，即得。

见图1：所述治疗阴道炎的凝胶剂的制备方法，上述三次浓缩使用装置，包括罐体1，设置在所述罐体1上的进料口2和设置在所述罐体1底部的出料管3，在所述出料管3上设有出料阀门4和过滤器5，在所述罐体1内设有搅拌轴6，在所述搅拌轴6上设有搅拌桨7，在所述罐体1的顶部设有与所述搅拌轴6相连接的搅拌电机8，在所述罐体1内的底壁设有震动腔9，在所述震动腔9内设有震动板10，在所述震动板10与所述震动腔9之间设有震动器11，通过震动器可以使震动板震动，从而可有效防止药物颗粒集结在震动板上，从而可防止药物颗粒在震动板上结块，在所述罐体1内的侧壁上设有凹腔12，在所述震动板10的顶面设有刮板13，在所述刮板13与所述凹腔12之间设有伸缩气缸14，可以根据需要控制伸缩气缸，使刮板在震动板的表面刮动，从而将部分集结在震动板表面的药物颗粒刮动，所述刮板13在所述伸缩气缸14的作用下实现对震动板10表面的刮擦，在所述震动板10的中心设有与所述出料管3相连通的出料口15。

在所述震动板10与所述震动腔9的连接处设有密封金属条16，在所述罐体上设有与所述震动器相连接的震动控制器17。

在所述刮板的底部设有金属刮丝层18，所述金属刮丝层抵压在所述震动板上，在所述罐体上设有与所述伸缩气缸相连接的伸缩控制按钮19。

在所述罐体内设有水份测试仪21，在所述出料管内设有冷却器20。

见图2：所述治疗阴道炎的凝胶剂的制备方法，上述干燥使用装置，包括箱体1，设置在所述箱体1内的物料架2和设置在所述箱体1顶部的进风管3和出风管4，在所述箱体1的侧壁内设有与所述进风管3相连通的进风通道5，在所述箱体1的侧壁上设有与所述进风通道5相连通的风孔6，进风孔设置在侧壁上，可以保证通风的均匀性，而且可以大大提高与药物的接触面积，所述出风管4穿过所述箱体1的顶壁连通箱体1内与箱体1外部，在所述箱体1的侧壁内还设有调温腔7和灭菌腔8，在所述调温腔7内设有电加热块9，设有电加热块可以根据需要对进风管的温度进行调节，保证干燥温度的稳定性，所述进风通道5穿过所述调节腔7和灭菌腔8设置，在所述箱体1的底壁内设有旋转腔10，在所述旋转腔10内设有旋转电机11，所述旋转电机11的主轴与所述物料架2相连接，在所述物料架2内设有震动凹槽12，在所述物料架2的顶面设有盛放板13，在所述盛放板13与所述震动凹槽12之间设有震动装置14。

所述震动装置14包括驱动电机141，设置在所述驱动电机141主轴上的偏心轮142，所述偏心轮142的轮边抵压在所述盛放板13的底面中心，在所述盛放板13的底部与所述震动凹槽12的底壁之间设有拉簧15，所述拉簧以所述偏心轮为中心对称设置，在使用时通过偏心轮的抵压使盛放板上升，当偏心轮的凹部抵压盛放板时，盛放板在拉簧的作用下复位，在下落过程中使物材脱离盛放板之后再跌落在盛放板上实现物料的震动。

在所述箱体1内设有温度传感器16，在所述箱体的侧壁内设有与所述温度传感器相连接的驱动器17，所述驱动器与所述电加热块的控制端相连接。温度传干器和驱动器为市场上已有的现有技术，其在使用连接时只需要按照对应的连接说明连接即可。

在所述箱体上还设有箱门18。

实施例2

取金钗股20份、红三七18份、小鱼仙草15份、滇苦菜28份、白蜡树叶14份、文冠果20份，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60℃相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分比达75％，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使用硅胶精制，预先将选定的硅胶装入树脂柱中，同时将所述浓缩液经纯化水稀释后，通过反相硅胶柱，去掉液体中的杂质，收集全部流出液，至出水无色止，所述硅胶比表面为500m2/g，孔容为0.70ml/g，继续浓缩，将浓缩液进行干燥；另取卡波姆加适量蒸馏水充分溶胀，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺调节pH值在5.5，搅拌均匀，加入中药提取后的干燥物，即得。

浓缩和干燥设备同上。

实施例3

取金钗股20份、红三七18份、小鱼仙草15份、滇苦菜28份、白蜡树叶14份、文冠果20份，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60℃相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分比达75％，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使用硅胶精制，预先将选定的硅胶装入树脂柱中，同时将所述浓缩液经纯化水稀释后，通过反相硅胶柱，去掉液体中的杂质，收集全部流出液，至出水无色止，所述硅胶比表面为400m2/g，孔容为0.70ml/g，继续浓缩，将浓缩液进行干燥；另取卡波姆加适量蒸馏水充分溶胀，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺调节pH值在5，搅拌均匀，加入中药提取后的干燥物，即得。

浓缩和干燥设备同上。

实施例4：临床观察资料

样品制备：按上述实施例1制备临床试验样品，规格为10g/支，含生药量为1.37g/支，南京医科大学提供。

临床资料：50例患者均为2012年4月～2014年8月在我院妇科门诊就诊病人。年龄45岁以上，参照《中药新药治疗阴道炎的临床指导原则》,具备以下条件:1.绝经妇女，有明确的阴道炎病史；2.符合阴道炎的中、西医诊断标准。绝经后阴道分泌物增多，水样或脓性，偶带血，外阴瘙痒或有灼热感。3.阴道粘膜多平滑充血，有散在小出血点，或表面溃疡，甚至出现粘连。4.宫颈刮片及阴道后穹窿涂片检查以底层上皮细胞居多，未见肿瘤细胞。5.符合阴道炎诊断标准和纳入标准的知情志愿患者。

治疗方法：阴道炎患者的治疗：每晚睡前用1:5000高锰酸钾冲洗阴道，无菌干棉球擦干阴道，用无菌棉签蘸取本发明凝胶剂，凝胶剂涂抹整个阴道,每日1次，2g/次，每周随访一次，4周为1疗程。记录每1例患者的自觉症状,阴道检查情况及白带清洁度的检查。

疗效观察：疗效标准参照《中药新药治疗阴道炎的临床指导原则》。①综合疗效评定：痊愈：治疗后症状体征全部消失，下腹及阴道坠胀、阴道皮肤瘙痒灼热感完全消失，疗效指数≥95％。显效：症状明显减轻，下腹及阴道坠胀、阴道皮肤瘙痒灼热感减轻，阴道粘膜充血或溃疡治疗后比治疗前明显消退，95％＞疗效指数≥70％。有效：症状减轻，下腹及阴道坠胀、阴道皮肤瘙痒灼热感好转，阴道粘膜充血或溃疡治疗后比治疗前消退，70％＞疗效指数≥30％。无效：治疗后无改善，疗效指数＜30％。②中医症候疗效评定：痊愈：治疗后临床症状基本消失，疗效指数≥95％。显效：治疗后临床症状明显减轻，95％＞疗效指数≥70％。有效：治疗后临床症状减轻，70％＞疗效指数≥30％。无效：治疗后临床症状无变化，疗效指数＜30％。③主观症状疗效评定痊愈：疗效指数≥95％。显效：95％＞疗效指数≥70％。有效：70％＞疗效指数≥30％。无效：疗效指数＜30％。

治疗结果：50例均于1个疗程结束后立即进行复查。结果如下：

治疗前后症状评分比较

带下量评分比较(表1)

注：经x2检验，P＜0.05，有统计学意义，用药前后差异有显著性。

阴道灼热感评分比较(表2)

注：经x2检验，P＜0.05，有统计学意义，用药前后差异有显著性。

2.2综合疗效评定(表3)

实施例5：本发明治疗阴道炎的凝胶剂抑制人纤维肉瘤HT-1080细胞增殖的实验研究资料

1实验材料

1.1实验用细胞株

人纤维肉瘤HT-1080细胞，南京医科大学实验室细胞库，DMEM+10％FBS常规培养。

1.2实验药物

研究药物：本发明治疗阴道炎的凝胶剂：按实施例1方法制备。

药液储液：称取100mg治疗阴道炎的凝胶剂，溶于5ml无水乙醇中，0.2μm滤器过滤，500μl doff管分装，-20℃存储，同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。

1.3实验试剂

DMEM(GIBCO公司Cat.No.12100-061 Lot.No.758137)；胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419)；NaHCO3(上海久亿化学试剂有限公司Cat.No.11810-033 Lot.No.1088387)；Trypsin(AMRESCO公司批号：2010/04)；EDTA(AMRESCO公司批号：2009/10)；Penicillin G Sodium Salt(AMRESCO公司批号：2010242)；Streptomycin Sulfate(AMRESCO公司批号：2010382)；无水乙醇(南京化学试剂有限公司批号：080310182)；MTT(Biosharp批号：0793)；PBS(实验室自配)；

1.4实验器材

莱卡倒置显微镜(德国Leica型号：DM1L)；可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司型号：SPECTRA MAX 190)；CO2培养箱(FORMA型号：3111)；超净台(苏净集团安泰公司制造型号：SW-CJ-ZFD)；纯水仪(美国Spring公司型号：S/N 020579)；精密移液器(法国吉尔森公司型号：P2)；电子天平(德国赛多利斯有限公司型号：BT323S)；全自动高压灭菌锅(日本SANYO公司型号：MLS-3020)；台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号：DHG9123A)；冰箱(西门子公司型号：KG18V21TI)；液氮罐(CBS型号：2001)；低速离心机(上海安亭科学仪器厂型号：KA-1000)；0.2μm滤器(MILLIPORE型号：SLGP033RB)；10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板(NEST公司)；细胞计数板；离心管、移液管、Tips若干。

2实验方法

1)人纤维肉瘤HT-1080细胞用DMEM+10％FBS于37℃、5％CO2进行常规培养(10cm培养皿)，当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml 0.25％胰蛋白酶-0.04％EDTA，37℃消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，1000rpm离心5min，调整细胞悬液浓度3×104个/ml。

2)将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180μl，培养板放入细胞培养箱中(37℃，5％CO2)常规培养。

3)根据细胞生长情况，一般长至50％-70％，加入治疗阴道炎的凝胶剂溶液，继续培养24h。

4)24h后加入20μl MTT溶液(5mg/ml，即0.5％MTT)，继续培养4h。

5)4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。

6)同时设置本底(不加细胞，只加培养液)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)，每组设定6个复孔。

7)结果以药物对细胞的抑制率表示：

细胞增值抑制率(％)＝(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值×100％。实验重复3次。

3统计处理

采用Microsoft Excel 2003软件中的相关分析和Student t检验，数据以mean±S.D.表示。

4实验结果

MTT法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对人纤维肉瘤HT-1080细胞增殖抑制有差异(P<0.05)，剂量在10mg/ml时该差异具有显著性(P<0.01)，当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(P<0.001)。

表4治疗阴道炎的凝胶剂对人纤维肉瘤HT-1080细胞增殖抑制影响研究

注：与对照组比较，*P<0.01；**P<0.001

5实验结论

治疗阴道炎的凝胶剂可以抑制人纤维肉瘤HT-1080细胞增殖，减少人纤维肉瘤HT-1080细胞的细胞生长数目，该作用呈剂量依赖性。