一种五味子的炮制方法与流程

本发明涉及中药的炮制方法，具体涉及五味子的炮制方法。
背景技术：
：五味子为木兰科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实。习称“北五味子”。秋季果实成熟时采摘，晒干或蒸后晒干，除去果梗和杂质。具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的功效。用于治疗久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗盗汗，津伤口渴，内热消渴，心悸失眠等症状。五味子为中医临床上的常用中药，药用价值高。五味子常见炮制品种有醋五味子、酒五味子、蜜五味子。传统理论认为五味子“入补药熟用,入嗽药生用”,即五味子是“生熟异用”的。五味子现代常见的炮制方法为醋蒸、酒蒸、蜜炙,炮制程度一般要求根据蒸制的颜色(紫黑色或黑褐色)。在《本草从新》和《医家四要》中提出：“酒蜜拌蒸，晒干，焙”。酒性行散，用以制五味子可防其敛邪，蜂蜜甘润，用以炮制五味子可使其具有润肺止咳作用。用酒蜜制五味子，能使五味子敛肺气而无留邪之虑，温肺气兼有润肺之功。因此，蜜酒合制通过黄酒和炼蜜两种辅料合用，体现两者共用的优势。但是，采用传统的酒蜜制方法，炮制时间太长，质量也不能得到保证，需要改进。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种五味子的炮制方法。一种酒蜜五味子的炮制方法，包括如下步骤：(1)取五味子，加入酒蜜混合物，密闭闷润；(2)在105℃～115℃下炖制1～2h后，放凉，干燥，即可。步骤(1)中，五味子为木兰科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实。步骤(1)中，酒蜜混合物中，酒与蜜的比例为1:1。步骤(1)中，酒蜜混合物的加入量为五味子重量的20～30％；优选酒蜜混合物的加入量为五味子重量的20％。步骤(1)中，密闭闷润的时间为20h。步骤(2)中，炖制的温度是110℃。步骤(2)中，炖制的时间为2小时。步骤(2)中，干燥是50～70℃下干燥6～9h。优选地，干燥是70℃下干燥6h。本发明还提供了前述方法制备得到的酒蜜五味子。综上，本发明方法制备得到酒蜜五味子，黑润度好，有效成分含量高，药效优且工艺步骤简单，处理时间短，成本低，工业应用前景优良。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。附图说明图1工艺1制备的五味子的外观图片图2工艺2制备的五味子的外观图片图3工艺3制备的五味子的外观图片图4工艺4制备的五味子的外观图片图5工艺5制备的五味子的外观图片图6工艺6制备的五味子的外观图片图7工艺7制备的五味子的外观图片图8工艺8制备的五味子的外观图片图9工艺9制备的五味子的外观图片图10工艺10制备的五味子的外观图片具体实施方式实施例1本发明酒蜜五味子的炮制方法取五味子，加五味子重量30％的酒蜜混合物(酒与蜜的比例为1:1)，密闭闷润20小时，于110℃用流通蒸汽加热炖制2小时，取出，放凉，70℃下干燥6h。实施例2本发明酒蜜五味子的炮制方法取五味子，加五味子重量20％的酒蜜混合物(酒与蜜的比例为1:1)，密闭闷润，于105℃用流通蒸汽加热炖制1小时，取出，放凉，50℃下干燥9h。实施例3本发明酒蜜五味子的炮制方法取五味子，加五味子重量25％的酒蜜混合物(酒与蜜的比例为1:1)，密闭闷润，于115℃用流通蒸汽加热炖制1.5小时，取出，放凉，60℃下干燥8h。以下通过实验例的方式来说明本发明的有益效果：实验例1五味子炮制方法1.实验材料1.1实验仪器DSX-280B型手提式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)；CG-1.0纯蒸汽灭菌柜(张家港市神农药机有限公司)；卧式圆形压力蒸汽灭菌器(江阴滨江医疗设备有限公司)；PS-80超声波清洗机(深圳市洁康洗净电器有限公司)；JP-350A-8型高速多功能粉碎机(上海冰都电器有限公司)；RJ-TGL-16C型高速离心机(无锡瑞江分析仪器有限公司)；UPH-I-10T优普超纯水器(成都超纯科技有限公司)；RE2000B旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；BS200S电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)；SHB-Ⅲ循环水真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)；岛津LC-20A系列高效液相色谱仪；YP30002电子天平(上海越平科学仪器有限公司)。1.2试剂试药Fisher色谱级乙腈，水(UP水)，氨水等为分析纯。五味子药材购于成都荷花池中药材专业市场，经成都中医药大学药学院中药标本中心卢先明教授鉴定，为木兰科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实。习称“北五味子”。同时按照《中国药典》2015年版一部五味子项下进行全检，符合相关规定。五味子醇甲对照品购买于成都普菲德生物技术有限公司(HPLC≥98.0％，批号：150130)。小试用黄酒(绍兴雕花酒)，购于会稽山绍兴酒股份有限公司，符合GB/T17946的规定；中试用黄酒，购于四川省仪陇银明黄酒有限责任公司；蜂蜜(已炼制)，购于成都市若康蜂业有限公司，符合“GB14963-2011食品安全国家标准蜂蜜”的规定。止咳丸(昆明中药厂有限公司，国药准字Z53021162，批号：521335，有效期至2020年11月)。1.3实验动物KM小鼠，SPF级，体重18～22g，雌雄各半，由成都达硕生物科技有限公司提供。质量合格证：SCXK(川)2013-24号。2.实验场所小试工艺研究及动物试验在成都中医药大学药学院中药炮制实验室(国家中医药管理局科研三级实验室)完成，中试(加压炖制)工艺研究在成都信立邦生物制药有限公司(2批)及成都合迅医药技术有限公司(3批)完成。3.方法与结果3.1五味子酒蜜润制工艺研究称取黄酒、炼蜜适当，分别配制成质量比1:1、2:1、1:2的混合液体，称取净五味子约20g，3份，置500ml烧杯中，分别加入上述3种混合液体约50g浸泡，密闭，置阴凉处。因为炼蜜比较黏稠，不宜渗透进入药物内部，故润制时间相对较长，一般在15～17小时以上。不同时间倒出多余的液体辅料，将五味子表面用滤纸擦干，精密称重。结果见表1。表1五味子酒蜜润制工艺测定结果注：在20小时后，五味子重量出现一定的波动，可能与温度、表面覆盖的辅料量有关，具体原因有待进一步考察。从表1可见，五味子酒蜜润制时饱和率为18.8％～24.1％，炼蜜比例越多，浸润越难，润制的饱和时间约为20小时。3.2五味子加压酒蜜炖工艺研究考查五味子加压酒炖工艺的温度、时间、辅料比例、辅料用量等因素，关于因素水平选择与实验安排分析如下：3.2.1因素水平的选择选取炖制温度、炖制时间、酒蜜比例、酒蜜用量作为筛选因素。在密闭的蒸制压力容器内，炖制温度与压力直接相关，考虑到大生产时压力容器的选择，炖制温度选择为105～115℃。加压炖制时间可比常压炖制时间显著缩短，设定为1～3小时。白酒和炼蜜的比例为2:1、1:1、1:2。设定酒蜜的用量为五味子重量的为20％～40％。此外，润制时间不作为筛选因素，考虑到大生产可行性和药物充分吸收润透，结合前期进行的润制工艺筛选参数，确定润制时间为20小时。见表2。表2因素水平表3.2.2试验安排表10次试验安排见表3，每次投料100g。表3五味子加压酒蜜炖试验安排表3.2.3评价指标的确定选择饮片外观性状、内在成分含量和对氨水刺激性咳嗽小鼠的保护作用3项综合加权评分作为评价指标。3.2.3.1外观性状五味子的外观性状为：本品呈不规则的球形或扁球形，直径5～8mm。表面红色、紫红色或暗红色，皱缩，显油润；有的表面呈黑红色或出现“白霜”。果肉柔软，种子1～2，肾形，表面棕黄色，有光泽，种皮薄而脆。果肉气微，味酸；种子破碎后，有香气，味辛、微苦。五味子加压炖制时，表面颜色变成黑褐色，可根据整体色泽的黑润程度设计外观性状评分，整体加权评分满分为10分。3.2.3.2内在成分的含量《中国药典》2015年版规定了五味子含量限度控制，含五味子醇甲(C24H32O7)不得少于0.40％，整体加权评分满分为30分。3.2.3.3对氨水刺激性咳嗽小鼠的保护作用考虑到中药炮制加热过程中，药物的内在成分可能存在着含量下降或转化的现象，而本品炮制的目的主要是用于增强敛肺润肺止咳的功效，故在整体加权评分考虑更多的是为药效学指标的评价，以对氨水刺激性咳嗽小鼠的保护作用为评价指标，整体加权评分满分为60分。3.2.4试验方法和结果3.2.4.1外观性状采用是五味子加压炖制后(未干燥)的外观性状评价，可以直接评价不同参数下五味子加压炖制后的基本情况，进行评分。详见表4。表4五味子加压炖制试验样品性状评分注：以颜色最黑的2号试验样品定为满分10分，其余为相对评分。3.2.4.2内在成分含量测定按照《中国药典》2015年版第一部五味子项下含量测定进行。(1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(65：35)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。(2)对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲0.3mg的溶液，即得。(3)供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.25g，精密称定，置20ml量瓶中，加甲醇约18ml，超声处理(功率250W，频率20kHz)20分钟，取出，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。(5)结果含量测定结果见表5。表5五味子加压炖制试验样品含量测定及评分结果注：五味子醇甲含量评分以试验2、试验6的样品含量最高定为30分。反映五味子以木质素类为主的内在成分含量控制指标，整体加权评分满分为30分。以10次试验样品中，含量最高样品为满分，其他样品为相对分值。3.2.4.3对氨水刺激性咳嗽小鼠的保护作用(1)氨水刺激性致咳嗽小鼠模型的原理小鼠吸入刺激性化学物质(如氨水等)的气雾后，刺激呼吸道感受器，反射性地引起咳嗽。凡有止咳化痰功能，能抑制咳嗽中枢或降低呼吸道感受器敏感性的药物，均有止咳作用。(2)给药剂量计算《中国药典》2015年版规定成人1日服用五味子为2～6g，最大为6g，成人体重按50kg计算。小鼠等效剂量为成人10倍，高剂量组为成人20倍，本实验五味子给药统一按高剂量给予。即0.12g生药/kg×20＝2.4g生药/kg,小鼠给药体积按0.4ml/20g计算，需要0.12g生药/ml的药液。制备方法：取五味子饮片12g，第一次加水100ml，煎煮(电热套加热回流)1小时；第二次加水100ml，煎煮(电热套加热回流)1小时。200目滤布滤过，合并滤液，减压浓缩到100ml，即得。阳性药物止咳丸，按照成人1日最大剂量的等效剂量配制，即取6丸，研磨成非常细粉末，用纯化水50ml溶解，配制成稳定的混悬液(0.02g/ml)。(3)动物分组实验一：取健康SPF级KM小鼠108只，称重，按体重、性别随机分为11组(按照上述分组方案)，每组10只。①模型对照组；②酒蜜炖五味子1号样品组；③酒蜜炖五味子2号样品组；④酒蜜炖五味子3号样品组；⑤酒蜜炖五味子4号样品组；⑥酒蜜炖五味子5号样品组；⑦酒蜜炖五味子6号样品组；⑧酒蜜炖五味子7号样品组；⑨酒蜜炖五味子8号样品组；⑩酒蜜炖五味子9号样品组；止咳丸组。实验二：取健康SPF级KM小鼠20只，称重，按体重、性别随机分为2组，每组10只。①模型对照组；②酒蜜炖五味子10号样品组。(4)给药方案和检测实验一：动物常规饲养3天后，其中第①组给予纯化水，第②～⑩组给予相应的五味子药液(0.1g生药/ml)，第组给予止咳丸药液(0.02g/ml)，各组给药容量均为0.4ml/20g体重，连续灌胃7天。实验二：动物常规饲养3天后，其中第①组给予纯化水，第②组给予相应的五味子药液(0.1g生药/ml)，各组给药容量均为0.4ml/20g体重，连续灌胃7天。将500ml的烧杯倒置在桌上，将小鼠放入。用移液枪吸取0.2ml浓氨水注入50mg棉球中，将棉球放入烧杯中，2分钟后取出棉球。观察小鼠：自棉球放入后，第一次出现咳嗽的时间；记录棉球取出后2分钟内小鼠的咳嗽次数。(5)统计学方法数据用表示，用SPSS20.0软件统计，进行完全随机设计资料的方差分析和多重比较的统计分析，满足正态性和方差齐性采用Dunnett检验，否则采用TamhaneˊsT2或数据变换后检验。(6)试验结果加压酒蜜炖五味子试验样品对氨水刺激性咳嗽小鼠的影响，结果见表6。表6-1加压酒蜜炖五味子试验样品对氨水刺激性咳嗽小鼠模型的影响注：(1)各给药组与模型对照组对比，*P<0.05，**P<0.01。(2)括号中数值是各给药组与模型对照组比较的变化率。从表6-1可见，酒蜜炖五味子1～9号样品组，与模型对照组比较，其首次咳嗽时间(秒钟)有延长的趋势，P均>0.05，分别增加25.9％、8.7％、20.4％、20.1％、10.2％、22.1％、16.8％、23.2％、11.4％。酒蜜炖五味子1～9号样品组，与模型对照组比较，2分钟内咳嗽次数(次)，其中2号、4号样品显著性减少，P均<0.01，分别减少29.7％和30.9％；其中5号、6号、9号样品显著性减少，P均<0.05，分别减少25.7％、22.9％和27.3％；其中1号、3号、7号、8号样品有减少的趋势，P均>0.05，分别减少12.1％、11.2％、8.0％和15.7％。止咳丸组，与模型对照组比较，其首次咳嗽时间(秒钟)有延长的趋势，P>0.05，增加29.7％；2分钟内咳嗽次数(次)，显著性减少，P<0.01，减少31.7％。表6-2最佳工艺A2B2C2D1制备的酒蜜蒸五味子对氨水刺激性咳嗽小鼠模型的影响注：(1)给药组与模型对照组对比，*P<0.05，**P<0.01。(2)括号中数值是给药组与模型对照组比较的变化率。反映五味子止咳作用的指标，整体加权评分满分为60分。以6-1和6-2次试验样品中，即酒蜜炖五味子10号样品组2分钟内咳嗽次数降低率最好的样品为满分，其他样品为相对分值。结果见表7。表7加压酒蜜炖五味子试验样品止咳作用评分试验号2分钟内咳嗽次数降低率(％)评分112.121.7229.753.4311.220.1430.955.5525.746.2622.941.178.014.4815.728.2927.349.1133.460注：以止咳作用最好的试验4样品，评分最高定为60分。3.2.4.4试验总体评分将外观性状、内在成分含量、止咳作用三者的评分，进行综合，得到试验总体评分，结果见表8和表9。表8加压酒蜜炖五味子试验结果结果分析：在本发明工艺条件(炖制温度为105～110℃，炖制时间为1～2h，酒蜜的比例为1:1，酒蜜的用量为20～30％)下，可以制备得到性质优良的五味子；优选地的工艺为：取净五味子，加30％的酒蜜(1:1)辅料，密闭闷润20小时，待液体辅料基本被吸净，置加压蒸制容器内，于110℃用流通蒸汽加热炖制2小时，取出，放凉。而采用本发明工艺参数之外的条件，则难以制备得到性质优良的五味子。3.3干燥工艺3.3.1方法、取净五味子300g，按照加压酒蜜炖五味子优化工艺制备，样品平均分成3份，置烘箱中，分别考察在50℃、60℃、70℃，干燥不同时间(1、2、3、4、5、6、7、8、9小时)的样品情况，评价指标为水分含量及有效成分的含量。3.3.2结果结果见表9。表9加压酒蜜炖五味子干燥工艺性状评价结果取外观性状符合要求的干燥样品，即50℃干燥9小时样品(编号50-1、50-2)、60℃干燥7小时样品(编号60-1、60-2)、70℃干燥6小时样品(编号70-1、70-2)进行水分、含量测定研究，结果见表10。表10加压酒蜜炖五味子干燥工艺水分、含量测定评价结果从表11可见，50℃干燥9小时样品、60℃干燥7小时样品、70℃干燥6小时样品，3者在水分、五味子醇甲含量上无显著的区别，从节约生产时间看，将加压酒蜜炖五味子干燥工艺确定为70℃干燥6小时。3.4加压酒蜜炖五味子中试工艺研究在成都信立邦生物制药有限公司完成加压酒蜜炖五味子中试2批，每批约15kg，炖制设备为CG-1.0纯蒸汽灭菌柜(张家港市神农药机有限公司)，于110℃用流通蒸汽加热炖制2.5小时；干燥设备为多功能烘焙机，干燥参数为：铺料厚度1～2cm，70℃干燥8小时。在成都合迅医药技术有限公司完成加压酒蜜炖五味子中试3批，每批约15kg，炖制设备为卧式圆形压力蒸汽灭菌器(江阴滨江医疗设备有限公司)，于110℃用流通蒸汽加热炖制2小时；干燥设备为多功能烘焙机，干燥参数为：铺料厚度1～2cm，70℃干燥8小时。结果见表11。表11加压酒蜜炖五味子中试工艺研究从表11可见，完成的11批加压酒蜜炖五味子中试表明，本工艺合理、稳定可行。实验结果说明，采用本发明炮制工艺可以制备得到外观优良、有效成分含量高、降糖功效好的五味子，而采用本发明范围以外的工艺则无法制备得到性质优良的五味子。综上，本发明方法可以制备得到性质优良的五味子，且工艺步骤简单，处理时间短，成本低，工业应用前景优良。当前第1页1 2 3