本发明属于眼科技术领域，涉及一种眼用保健和治疗制剂，更具体地，涉及一种用于缓解干眼症和视疲劳的组合物及其制备方法和用途。此外，本发明还涉及一种施用该组合物的走珠施用器。
背景技术：
干眼症是指由各种原因引起的与眼部不适相关的泪膜和眼表面异常的一种疾病。此类患者常主诉眼部干燥、有异物感、烧灼感、瘙痒、畏光、视物模糊、视疲劳等不适。干眼症诱因很多。其中，生活中蓝光的刺激最为常见。蓝光是波长为400-500nm的高能量可见光，普遍存在于我们日常生活和工作的所有光源当中，如各类现代平板显示器、TFT薄膜屏幕、LED、荧光灯、液晶显示器等各种新型人造光源发出的可见光中都含有大量的不规则频率的短波蓝光，这些短波蓝光的能量极高，能够穿透晶状体直达视网膜，对其造成光化学损害，加速黄斑区细胞的氧化，导致视网膜黄斑部病变。除蓝光之外，随着社会的发展，电脑、手机、空调使用的增多，空气污染的加重，干眼症的患病率和就诊率正在逐渐增加，对人们的生活带来了不可忽视的负面影响。流行病学调查显示，70岁以上人群中，患病率高达36.1％，其中男性的发病率为14.9％，女性为22.8％。年龄在30-40岁人群中，超过20％患有干眼症。随着智能手机的使用，干眼症患者日益增多，并有年轻化的倾向。
干眼症治疗的总目标是保护患者的视功能，抑制眼表的炎性反应，恢复眼表面的正常结构及功能。根据不同的病情，可采用不同的治疗方法。随着对干眼症发病机制认识的不断深入，其治疗会不断的完善。干眼症的治疗主要是使用人工泪液，人工泪液主要成分有纤维素类、黏多糖类、聚乙烯醇类、聚丙烯酸类、某些细胞因子和一些营养物质(如维生素A)等。应用人工泪液治疗可相对改善眼表润滑和增加眼表湿度，营养眼表和视神经。
随着对干眼症病理机制的研究，许多对因治疗渐渐的开始应用，抗炎治疗可抑制炎症因子，减轻干眼的症状。局部应用糖皮质类激素对中度、重度干眼症患者的主客观临床症状其明显的改善作用，适于短期治疗，以减少其副作用。如环孢素是一种免疫调节剂，通过阻滞眼表细胞内信号传导，抑制细胞凋亡而发挥其治疗作用。体积分数为0.1％环孢素眼用乳浊液Ⅲ期临床试验报道显示，受试者使用环孢素，泪液分泌量会明显增加，并且具有良好的安全性和耐受性。此外，FK506和雷帕霉素都能通过不同途径抑制眼表炎性反应和上皮细胞凋亡，与环孢素相比其抑制眼表炎症作用更强，副作用更小，有可能成为新的临床治疗干眼症的有效药物。
然而，人工泪液作为一种眼用无菌制剂，需要添加防腐剂，只能暂时缓解眼部症状，不适于长期使用。而干眼症的药物治疗都存在不同程度的副作用，如干眼症药物治疗中因药物毒性作用造成眼表损害或加重干眼的情况屡屡发生。直到现在，我国尚无适合国情的干眼症规范化治疗方案。
针对上述缺点，迫切需要寻找一种能够满足实际应用要求的用于缓解干眼症和视疲劳的组合物及其施用方法。
技术实现要素：
发明人发现，使用天然的植物提取物、植物精油和人体必需的维生素作为活性成分，制成均相乳液形式，并且通过走珠施用器的方式施用于眼周，可以起到按摩眼周、刺激泪腺分泌、缓解视疲劳、补水保湿、抗氧化、活血化瘀、明目等作用；同时无毒无副作用，具有携带方便、可随时随地使用等特点。
本发明目的之一是克服现有技术的不足，提供一种用于缓解干眼症和视疲劳的组合物。
本发明目的之二是提供一种制备上述用于缓解干眼症和视疲劳的组合物的方法。
本发明目的之三是提供上述用于缓解干眼症和视疲劳的组合物的用途。
本发明目的之四是提供一种走珠施用器，包含上述用于缓解干眼症和视疲劳的组合物。
为实现上述目的，一方面，本发明提供了一种用于缓解干眼症和视疲劳的组合物，所述组合物包括油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂和任选的其它助剂。
在本发明的组合物中，所述油相包括维生素A、维生素E、叶黄素酯和植物精油；其中，植物精油由葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油组成。
基于所述组合物的总重量，所述维生素A、维生素E和叶黄素酯的含量分别为0.01-5％。优选地，所述维生素A、维生素E和叶黄素酯的含量分别为0.02-3％；更优选地，所述维生素A、维生素E和叶黄素酯的含量分别为0.03-1％；最优选地，所述维生素A、维生素E和叶黄素酯的含量分别为0.05-0.5％。
基于所述组合物的总重量，所述植物精油的总含量为0.01-10％。优选地，所述植物精油的总含量为0.02-8％；更优选地，所述植物精油的总含量为0.05-5％；最优选地，所述植物精油的总含量为0.1-4％。
在本发明的组合物中，所述水相包括维生素C和植物提取物；其中，所述植物提取物由菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物组成。
基于所述组合物的总重量，所述维生素C的含量为0.1-5％。优选地，所述维生素C的含量为0.2-3％；更优选地，所述维生素C的含量为0.3-2％；最优选地，所述维生素C的含量为0.5-1％。
基于所述组合物的总重量，所述植物提取物的总含量为0.1-10％。优选地，所述植物提取物的总含量为0.3-8％；更优选地，所述植物提取物的总含量为0.5-7％；最优选地，所述植物提取物的总含量为0.6-6％。
基于所述组合物的总重量，所述透明质酸钠的含量为0.02-5％。优选地，所述透明质酸钠的含量为0.05-2％；更优选地，所述透明质酸钠的含量为0.1-1％；最优选地，所述透明质酸钠的含量为0.2-0.5％。
以上有效成分均为赋予组合物缓解干眼症、视疲劳、补水保湿、抗氧化、活血化瘀、明目等性质的成分。
在本发明的组合物中，所述助溶剂选自十二烷基苯磺酸钠、卵磷脂、甘油、丙二醇、单硬脂酸甘油酯、蔗糖酯、聚山梨酯、三乙醇胺中的任意一种或多种。优选地，所述助溶剂选自十二烷基苯磺酸钠、甘油、丙二醇、聚山梨酯、三乙醇胺中的任意一种或多种；更优选地，所述助溶剂选自甘油、丙二醇、聚山梨酯、三乙醇胺中的任意一种或多种；最优选地，所述助溶剂选自甘油、丙二醇、聚山梨酯中的任意一种或多种。
基于所述组合物的总重量，所述助溶剂的含量为1-20％。优选地，所述助溶剂的含量为1.5-15％；最优选地，所述助溶剂的含量为2-10％。
在本发明的组合物中，所述其它助剂包括增稠剂、抗菌剂和其它添加剂。
在本发明的组合物中，所述增稠剂选自甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、卡波姆940、海藻酸钠、黄原胶、羊毛脂、聚乙烯醇中的任意一种或多种。优选地，所述增稠剂选自卡波姆940、海藻酸钠、黄原胶、羊毛脂中的任意一种或多种；更优选地，所述增稠剂选自卡波姆940、黄原胶、羊毛脂中的任意一种或多种；最优选地，所述增稠剂选自黄原胶、羊毛脂中的任意一种或多种。
基于所述组合物的总重量，所述增稠剂的含量为0.05-5％。优选地，所述增稠剂的含量为0.08-4％；最优选地，所述增稠剂的含量为0.1-3％。
在本发明的组合物中，所述抗菌剂选自尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯甲酸钠、山梨酸钾、苯氧乙醇中的任意一种或多种。优选地，所述抗菌剂选自尼泊金甲酯、苯甲酸钠、山梨酸钾、苯氧乙醇中的任意一种或多种；更优选地，所述抗菌剂选自苯甲酸钠、山梨酸钾、苯氧乙醇中的任意一种或多种；最优选地，所述抗菌剂选自山梨酸钾、苯氧乙醇中的任意一种或多种。
基于所述组合物的总重量，所述抗菌剂的含量为0.05-5。优选地，所述抗菌剂的含量为0.1-2％；最优选地，所述抗菌剂的含量为0.2-1％。
除上文列举的成分以外，本发明的组合物还可进一步包括其它添加剂。其它添加剂包括抗氧化剂、保湿剂、天然脂肪，等等。
在一个具体的实施方式中，基于所述组合物的总重量，本发明的组合物包括：
在一个更具体的实施方式中，基于所述组合物的总重量，本发明的组合物包括：
在本发明的组合物中，水选自纯净水。
另一方面，本发明还提供了一种制备上述用于缓解干眼症和视疲劳的组合物的方法，包括以下步骤：
a)称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸钠溶液；
b)将维生素A、维生素E、叶黄素酯和植物精油混合均匀得油相；
c)将植物提取物用水溶解并混合均匀，再加入维生素C，混合均匀得水相；
d)将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂和任选的其它助剂加入均相混合器进行混合，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物。
其中，在步骤d)中，所述均相混合器的温度设置为50-70℃。优选地，所述均相混合器的温度设置为60-70℃；最优选地，所述均相混合器的温度设置为65-70℃。
其中，在步骤d)中，所述混合时间为1-60min。优选地，所述混合时间为3-30min；最优选地，所述混合时间为5-15min。
又一方面，本发明还提供了上述用于缓解干眼症和视疲劳的组合物的用途。
最后，本发明提供了一种走珠施用器，包括走珠和走珠瓶，其特征在于，所述走珠瓶含有上述用于缓解干眼症和视疲劳的组合物。
与现有技术相比，本发明具有下列优势：
1)本发明用于缓解干眼症和视疲劳的组合物使用了特定的植物精油替代常规的油相，不仅改善了组合物的贮存稳定性，同时能够起到进一步改善干眼症和视疲劳的效果。
2)本发明用于缓解干眼症和视疲劳的组合物可以显著提高哺乳动物的基础泪液分泌量(SIT)和泪膜稳定性(BUT)。
3)本发明用于缓解干眼症和视疲劳的组合物配合走珠使用，还可以起到按摩眼周、缓解视疲劳、补水保湿、抗氧化、活血化瘀、明目等作用；同时无毒无副作用，具有携带方便、可随时随地使用等特点。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
实施例1组合物的处方、组分和重量百分比如下表1所示：
表1
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在60℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例2
实施例2组合物的处方、组分和重量百分比如下表2所示：
表2
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在50℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合15min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例3
实施例3组合物的处方、组分和重量百分比如下表3所示：
表3
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例4
实施例4组合物的处方、组分和重量百分比如下表4所示：
表4
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在70℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合6min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例5
实施例5组合物的处方、组分和重量百分比如下表5所示：
表5
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例6
实施例6组合物的处方、组分和重量百分比如下表6所示：
表6
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例7
实施例7组合物的处方、组分和重量百分比如下表7所示：
表7
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例8
实施例8组合物的处方、组分和重量百分比如下表8所示：
表8
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例9
实施例9组合物的处方、组分和重量百分比如下表9所示：
表9
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例10
实施例10组合物的处方、组分和重量百分比如下表10所示：
表10
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例11
实施例11组合物的处方、组分和重量百分比如下表11所示：
表11
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在65℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
实施例12
实施例12组合物的处方、组分和重量百分比如下表12所示：
表12
缓解干眼症和视疲劳的精华走珠的制备方法为：
a)按照处方量称取透明质酸钠单独溶解于水得透明质酸水溶液；
b)按照处方量将维生素A、维生素E、叶黄素酯、葡萄籽油、薰衣草精油、薄荷精油、胡萝卜籽油、红花籽油、茶树精油、洋甘菊精油混合均匀得油相；
c)按照处方量将菊花提取物、决明子提取物、栀子提取物、金银花提取物、红花提取物、蓝莓提取物用水溶解并混合均匀，再加入处方量维生素C，混合均匀得水相；
d)按照处方量，在70℃下，将油相、水相、透明质酸钠溶液、助溶剂、抗菌剂加入均相混合器，混合10min，即得用于缓解干眼症和视疲劳的组合物；
e)将组合物分装入走珠瓶中，即得缓解干眼症和视疲劳的精华走珠。
测量组合物在40℃的温度下贮存8周的粘度变化。结果表明，与初始粘度相比，8周后的最终粘度变化不超过10％。
药理实验
发明人研究了本发明实施例1所制备的走珠样品对去势所致干眼症雄鼠基础泪液分泌量、泪膜稳定性的影响。本发明选取健康1月龄Wistar雄性大鼠45只，体质量0.2kg作用。裂隙灯显微镜、眼底镜检查眼前节及眼底无异常，SchirmeierI实验(SIT)≥10mm/5min和泪膜破裂时间(BUT)≥10s的动物方可使用。实验方法方法如下：
(1)动物分组将Wistar雄性大鼠45只(90眼)，采用随机数字法分为A1、B1、C1、A2、B2、C2、A3、B3、C3共9组，每组5只(10眼)。分别为：A代表假手术空白组(以下简称空白组)；B代表干眼症模型组(以下简称模型组)；C代表干眼症模型走珠样品施用组(以下简称样品组)；1、2、3分别代表给药时间为1月、2月、3月。
(2)雄激素水平下降导致干眼症动物模型的制备
制作动物模型：行双侧睾丸切除术(ORX)：将B1、B2、B3、C1、C2、C3组实验鼠术前12h禁食水，后肢大腿外侧肌肉碘伏消毒，盐酸氯胺酮注射液30mg/kg体质量腹腔注射麻醉，雄鼠取仰卧位，四肢张开并固定，下腹部褪毛剂褪毛，阴囊皮下加用2％利多卡因局部麻醉，碘伏消毒，铺无菌巾单，将一侧睾丸由腹腔挤入阴囊并捏紧，勿使其滑动。用消毒刀片将阴囊切一小口，用力挤出睾丸，结扎精索静脉及输精管，切除睾丸及附睾，连续缝合阴囊皮肤后局部涂碘酊预防感染。另侧睾丸及附睾同法切除。A1、A2、A3组只切开阴囊，不切除睾丸，术后连续缝合阴囊皮肤。术前肌肉注射青霉素针剂20万U，术后连续3d肌肉注射青霉素针20万U，预防感染。
(3)给药方法及用量大鼠用药前剔除眼周的毛，露出眼周皮肤。A组、B以蒸馏水擦涂眼周，C组以走珠样品擦涂眼周。擦涂为双眼，每天3次，每次擦涂3下。A1、B1、C1组持续给药1个月后处死，A2、B2、C2组持续给药2个月后处死、A3、B3、C3组持续给药3个月后处死。
(4)基础泪液分泌量、泪膜稳定性测定分别于分组前、末次给药完成后取材前对各组雄鼠分别进行SchirmerI试验(SIT)和泪膜破裂时间(BUT)检查。
实验结果如下所示：
(1)走珠样品对大鼠基础泪液分泌量(SIT)的影响
从表13可见：空白组(A1、A2、A3)SIT测量值比较：经方差分析，A1、A2、A3各组之间差异均无统计学意义(P>0.01)，经自身前后配对t检验，各组蒸馏水擦眼前后，大鼠SIT差异均无统计学意义(均P>0.05)。给阳性对照组与空白组SIT测量值比较：经t检验，A1与B1，A2与B2，A3与C3之间差异均有统计学意义(均P<0.04)。模型组(B1、B2、B3)SIT测量值比较：经自身前后配对t检验，雄鼠模型组去势后1、2、3月后基础泪液分泌量明显减少，滤纸湿长缩短，与去势前比较差异有统计学意义(均P<0.01)；另经方差分析，与B1组去势1月后基础泪液分泌量比较，去势2月和去势3月的B2、B3组泪腺分泌量要更低(P<0.05)，可见去势后，泪腺的基础分泌量随着时间的增长而降低。样品组(C1、C2、C3)SIT测量值比较：走珠施用组与模型组(C1与B1、C2与B2、C3与B3)SIT测量值比较：以试纸湿长为协变量，经协方差分析，C1、C2、C3组去势后经走珠施用样品后，基础泪液分泌量增加，滤纸湿长与相应的模型组B1、B2、B3组比较增长明显(均P<0.05)。
表13走珠施用样品对大鼠各组给药后不同时间段
SIT测量值的影响(n＝10，x±s，mm)
注：模型组与空白组比较**P<0.01；样品组与模型组比较P<0.05
(2)走珠样品对大鼠泪膜稳定性(BUT)的影响
从表14可见：空白组(A1、A2、A3)BUT测量值比较：经方差分析，A1、A2、A3各组之间差异均无统计学意义(P>0.05)，以及经自身前后配对t检验，各组手术前后，大鼠BUT差异均无统计学意义(均P>0.05)。模型组与空白组BUT测量值比较，经t检验，A1与B1，A2与B2，A3与B3之间差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组(B1、B2、B3)BUT测量值比较：经自身前后配对t检验，雄鼠模型组去势后1、2、3个月后泪膜稳定性明显下降，泪膜破裂时间明显缩短，与去势前比较差异有统计学意义(均P<0.01)，另外经方差分析，与B1组去势1个月后泪膜稳定性比较，去势3个月的B3组的泪膜破裂时间要更低(P<0.05)，可见去势后，泪膜稳定性随着时间的增长而逐渐呈现降低的趋势。样品组(C1、C2、C3)BUT测量值比较：雄鼠去势后经走珠施用，经方差分析，C1、C2、C3各组之间BUT测量值差异均无统计学意义(P>0.05)，以及经自身前后配对t检验，各组手术前后，大鼠BUT差异显著(均P>0.05)。样品组与模型组(C1与B1、C2与B2、C3与B3)BUT测量值比较：泪膜破裂时间为协变量，经协方差分析，C1、C2、C3组去势后经走珠施用样品后，泪膜稳定性增加，泪膜破裂时间与相应的模型组B1、B2、B3组比较增长明显(均P<0.05)，另外经方差分析，与C1组去势走珠施用样品1个月后泪膜稳定性比较，去势治疗3个月的C3组的泪膜破裂时间要相对较高(P<0.05)，可见去势后，走珠样品对维持泪膜稳定性的能力，随着时间的增长而逐渐呈现增加的趋势。药理实验研究证明本发明所提供的走珠样品对干眼症具有良好的缓解作用。
表14走珠施用样品对大鼠各组给药后不同时间段
BUT测量值的影响(n＝10，x±s，s)
注：模型组与空白组比较**P<0.01；样品组与模型组比较P<0.05
以上结果表明，本发明用于缓解干眼症和视疲劳的组合物可以显著提高哺乳动物的基础泪液分泌量(SIT)和泪膜稳定性(BUT)。
此外，本发明用于缓解干眼症和视疲劳的组合物配合走珠使用，还可以起到按摩眼周、缓解视疲劳、补水保湿、抗氧化、活血化瘀、明目等作用；同时无毒无副作用，具有携带方便、可随时随地使用等特点。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围之内。